大鼠胚胎脑组织冰冻保存与同种异体移植

大鼠胚胎脑组织冰冻保存与同种异体移植杨利孙，吴声伶，易声禹，暴连喜我们用台盼蓝染色方法观察大鼠胎脑组织在液氮中保存的细胞存活率，然后将保存的组织及新鲜组织植入同种大鼠脑内，进行组织学对比研究，现报告如下。材料与方法一、胎脑组织取材正常妊娠１５～２１天...     

4℃储存条件下不同组织保存液对皮片活力影响的研究

目的探讨不同组织器官保存液在４℃条件下储存对皮片活力的影响。方法在４℃储存条件下,采用普通培养液（ＭＥＭ）、肝肾等组织保存液（ＵＷ）和ＭＥＭ加硫酸软骨素（ＣＳ）,以及ＵＷ换液（ＵＷＲ）、ＭＥＭ换液（ＭＥＭＲ）５个实验组,储存猪皮片,在储存１天、３天、５天、７天、１０天和１４天共６个时间点内分别采用新型四氮唑盐法测定皮片活力值。结果３种保存液对皮片活力均具有保护作用,尤以ＵＷ组优于ＭＥＭ组,定期换液的ＵＷＲ组及ＭＥＭＲ组效果更优于相同条件的不换液组ＵＷ组及ＭＥＭ组。结论定期更换保存液的ＵＷＲ法是在４℃条件下首选的皮片保存的方法     

成年大鼠脑内5—羟色胺能神经纤维向胎脑皮层移植物内投射的 …

目的 探讨胎脑组织移植后的存活情况及移植物与受体脑组织之间的神经纤维联系。方法 以成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠为受体,胎龄为１５￣１７天的Ｗｉｓｔａｒ胎鼠为供体。将胎鼠的脑皮层组织块移植对受体鼠的损鼠脑腔内。术后应用环孢素Ａ预防排斥反应,术后１、３、５个月处死动物,应用免疫组织化学技术（ＡＢＣ法）进行脑组织切片染色,光镜及电镜下观察。结果 同种胚脑皮层组织移植后存活率为３０％,５－羟色胺能神经纤维从受     

成年大鼠脑内5-羟色胺能神经纤维向胎脑皮层移植物内投射的研究

目的探讨胎脑组织移植后的存活情况及移植物与受体脑组织之间的神经纤维联系。方法以成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠为受体,胎龄为１５～１７天的Ｗｉｓｔａｒ胎鼠为供体。将胎鼠的脑皮层组织块移植至受体鼠的损毁脑腔内。术后应用环孢素Ａ预防排斥反应。术后１、３、５个月处死动物,应用免疫组织化学技术（ＡＢＣ法）进行脑组织切片染色,光镜及电镜下观察。结果同种胎脑皮层组织移植后存活率为３０％,５羟色胺能神经纤维从受体脑组织内长入移植物中,证明二者之间已建立神经纤维联系。结论胎脑移植物与受体脑组织之间可建立神经纤维联系。     

Iloprost液4℃保存的胎鼠皮层组织移植修复脑损伤的实验研究

为探讨脑组织移植治疗脑损伤及供体组织的保存，作者在制造大鼠运动区皮层损伤的基础上，分别以新鲜及Ｉｌｏｐｒｏｓｔ液或生理盐水保存３小时的胎鼠歧层组织为供体，将其移植到损的大鼠中，观察移植后的神经行为变化及形态学改变。     

动物NECM的稳定性评价

“动物ＮＥＣＭ的制作”文章发表近半年，已制作好的动物皮肤、肌腱、软骨和骨的ＮＥＣＭ已在保存液中保存了１３个月。为了观察ＮＥＣＭ和保存液的稳定性，本文做了如下几个方面的研究：①保存液：未放置ＮＥＣＭ新配制的和已放置１年的保存液；放置ＮＥＣＭ的保存液（１９９７年２月）。上述保存液均做细菌培养、镜下观察和成分分析。②电镜和组织学光镜观察：１９９７年２月制作的ＮＥＣＭ的光镜观察；放置１３个月后的ＮＥＣＭ电镜和光镜观察（包括偏光显微镜）；新鲜的正常相应组织的电镜和光镜观察。实验结果证明：猪皮肤和牛肌腱的ＮＥＣＭ已无细胞成分，基质为平行排列的胶原纤维丝或松散的胶原纤维网。而正常组织中细胞完整，胶原纤维呈致密交叉的网状编织结构。保存液清晰，无细菌生长，成分未变。     

成年大鼠破骨细胞体外增减及细胞凋亡的观察

目的 为研究骨重建过程中破骨细胞的关键作用，建立成年大鼠（１２～５０周龄）破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。方法 大鼠处死后，在无菌条件下取出股骨，剪去两骺端，以αＭＥＭ将骨髓细胞冲洗出。并离心洗细胞２次，置于αＭＥＭ培养液，内含αＭＥＭ，体积分数为１０％的胎牛血清（ＦＣＳ）和１α，２５－（ＯＨ）２ＶｉｔＤ３ １０＾－８ｍｏｌ／Ｌ，在２４孔板内，以体积分数为５％的ＣＯ２、３７℃，培养８天。     

糖尿病性阴茎勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体一氧化氮合酶 …

目的 探讨糖尿病（ＤＭ）性阴茎勃起功能障碍（ＥＤ）的发病机理。方法 ＳＤ大鼠注射链脲佐菌素建立ＤＭ动物模型后,注射阿朴吗啡观察６周,８周及１２周大鼠阴茎勃起情况,筛选ＤＭ性ＥＤ大鼠模型,测定其阴茎海绵体组织一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的活性。结果ＤＭ性ＥＤ大鼠阴茎海绵体组织ＮＯＳ活性与对照组相比显著降低,随ＤＭ病程延长,ＮＯＳ活性明显下降。     

大鼠胎脑组织冻存与同种异体移植

目的 探讨冻存大鼠胎脑细胞体外培养的活性及其移植后的存活情况。方法 对经冷冻保存1－24周的WK大鼠胎脑细胞进行体外培养,观察其存活情况,并将保存24h后培养14d的胎脑细胞行脑内定位移植。结果 冻存1－24周的胎脑组织其活细胞率在90％以上,复苏后培养14d的胎离细胞活性最强;胎脑细胞移植后可在受者体内存活至少30d以上。结论 冷冻保存后培养的胎脑细胞级够存活,并可用于移植。     

糖尿病性阴茎勃起功能障碍大鼠模型海绵体超微结构的研究

目的　探讨糖尿病（ＤＭ） 性阴茎勃起功能障碍（ＥＤ） 的发病机理。　方法　ＳＤ 大鼠注射链脲佐菌素制造ＤＭ 动物模型后,注射阿朴吗啡观察６ 周、８ 周及１２ 周大鼠阴茎勃起情况,筛选ＤＭ 性ＥＤ 大鼠模型,观察其阴茎海绵体组织超微结构的改变。　结果　ＤＭ 性ＥＤ 大鼠模型阴茎海绵体内皮细胞及平滑肌细胞超微结构均有明显的病理改变：线粒体退变、内质网扩张,糖原颗粒、吞饮小泡及微丝减少。此外,还可见大量间质组织增生及微血管腔闭塞。随ＤＭ 病程不同,其改变程度不同,８ 周时以内皮细胞损害为明显,１２ 周时以平滑肌细胞损害为明显。　结论　ＤＭ 严重影响阴茎勃起功能,海绵体组织超微结构的病理改变可能是ＤＭ 性ＥＤ 发病机理之一。     

糖尿病性阴茎勃起功能障碍动物模型血清雄激素测定

ＳＤ大鼠注射链脲佐菌素制造溏尿病（ＤＭ）动物模型后,注射阿朴吗啡观察不同时期大鼠阴茎勃起情况,筛选ＤＭ性阴茎勃起功能障碍（ＥＤ）大鼠模型,测定其血清ＬＨ、ＦＳＨ及睾酮的浓度,并观察睾丸组织的显微结构,研究ＤＭ性ＥＤ的发病机理。结果ＤＭ性ＥＤ大鼠血清睾酮浓度显著降低,睾丸组织显微结构发生明显病理性改变,且上述变化与ＤＭ病程密切相关;ＬＨ在ＤＭ早期无改变、晚期明显降低;ＦＳＨ无明显改变。提示ＤＭ严重影阴茎勃起功能及雄激素的合成分泌,雄激素降低可能是其主要发病机理之一。     

前列腺素E1改善离体离心保存效果的研究

目的 探讨在冷缺血期供者心脏保存液中前列腺素Ｅ１对改善鼠心的保存效果。方法 将１４只大白鼠随机分为对照组和实验组，每组７只。对照组用ＳｔＴｈｏｍａｓ停搏液停搏并保存大鼠心脏６小时，实验组在ＳｔＴｈｏｍａｓ液中加入前列腺素Ｅ１（５μｇ／Ｌ）停搏并冷保存６小时，利用离体鼠心非循环式Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌流功能测定模型，测定左心室舒张期末压（ＬＶＥＤＰ）、左心室发展压（ＬＶＤＰ）和左心室压力变化率（｜     

抗内毒素单克隆抗体在脓毒症治疗中的评价

制做并判定抗内毒素单克隆抗体对脓毒症治疗是否有效。方法 以Ｅｃｏｌｉ Ｊ５，Ｓ，ｍｉｎｎｅｓｏｔａ Ｒａ，Ｒｅ之ＬＰＳ制备单抗Ｍ２Ｂ，ＣＬＰ大鼠或大肠杆菌一次不射小鼠伤前给于Ｍ２Ｂ。结果 Ｍ２Ｂ未能改善基细菌攻击小鼠的存活。Ｍ２Ｂ有效提高ＣＬＰ大鼠存活并减低血内毒素水平，炎性细胞因子水平，保持较高组织ＡＴＰ与ＧＳＨ。     

动物NECM的稳定性评价

“动物ＮＥＣＭ的制作”文章发表近半年，已制作好的动物皮肤、肌腱、软骨和骨的ＮＥＣＭ已在保存液中保存了１３个月，为了观察ＮＥＣＭ和保存液的稳定性，本文做了如下几个方面的研究：（１）保存液：未放置ＮＥＣＭ新配制的和已放置１年的保存液；放置ＮＥＣＭ的保存液（１９９７年２月）。上述保存液均细菌培养，镜下观察和成分分析。（２）电镜和组织学光镜观察；１９９７年和２月制作的ＮＥＣＭ的光镜观察；放置１３个月后的Ｎ     

自制HYD液对大鼠肝脏低温保存后生化功能影响的研究

目的 研制自制ＨＹＤ液对大鼠肝脏低温保存后生化功能的影响。方法 采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型，比较ＨＹＤ液，ＵＷ液和乳酸林格液（ＬＲ液）对大鼠肝脏６，１２，２４，３０，３６ｈ保存后生化功能的影响。结果 保存１２ｈ的肝脏，其各项生化功能ＨＹＤ组明显优于ＬＲ组。三磷酸腺苷，磷酸腺苷含量及Ａｔｋｉｎｓｏｎ能荷（ＡＥＣ），ＨＹＤ组略高于ＵＷ组，且保存３６ｈ差异有显著性。     

胎脑黑质细胞悬液脑实质内移植与脑室内移植的效果比较

为了比较胎脑黑质细胞悬液脑裨移植与脑室内移植的效果，作者观察了接受了上述移植处理后的ＰＤ大鼠旋转行为的变化和移植部位组织学及免疫组化行征，结果发现胎脑黑质细胞悬液脑实质内移植有利于移植和的对宿主脑组织成神经再技配，其远期效果比脑室内移植的效果更，更持久。     

大鼠离体卵泡释放卵子的动态过程

用２４孔培养板进行多个大鼠卵泡单孔培养，分别采用ＰＭＳＧ（孕马血清）或ＤＥＳ（乙烯雌酚）刺激幼大鼠卵泡成熟，同时可获得多个同步发育卵泡，分别培养在ＤＭＥＭ／Ｆｌ２或ＭｃＣｏｙ５Ａ培养液中。通过单孔多卵泡培养系统，在７～１４天的培养过程，能够观察到卵的体外释放动态过程。卵的释放率为３５％～５０％。。通过测量培养液的雌二醇和孕酮产值，证明卵泡内颗粒细胞分泌的雌二醇随培养天数的增加而升高，ＰＭｓＧ和ＤＥＳ刺激组分别从５．１增加到２８．６ｎｍｏｌ／Ｌ和从４．２增加到１９．６ｎｍｏｌ／Ｌ。但是，两种刺激卵泡成熟方案所得的孕酮的产量有所差异，在用ＰＭＳＧ刺激组孕酮产值随培养天数增加而减少（３３．６～１５．５ｎｍｏｌ／Ｌ），而用ＤＥＳ刺激组孕酮产值一直在高于ＰＭＳＧ刺激组水平下波动。另外，本实验也证明体外培养卵泡是消耗外源性葡萄糖。卵的释放过程同时增加了组织型纤维蛋白酶原激活因子（ＴＰＡ）的活性。因此，用多个大鼠卵泡单孔体外培养技术研究卵的释放动态过程以及卵的释放原理是一个简单而方便的模型。     

成年大鼠破骨细胞体外培养及细胞凋亡的观察

目的　为研究骨重建过程中破骨细胞的关键作用,建立成年大鼠（１２ ～５０ 周龄） 破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。方法　大鼠处死后,在无菌条件下取出股骨,剪去两骺端,以αＭＥＭ 将骨髓细胞冲洗出, 并离心洗细胞２ 次,置于αＭＥＭ 培养液,内含αＭＥＭ,体积分数为１０％ 的胎牛血清（ＦＣＳ） 和１α,２５（ＯＨ）２ Ｖｉｔ Ｄ３ １０ －８ ｍｏｌ／Ｌ,在２４ 孔板内,以体积分数为５ ％ 的ＣＯ２ ,３７ ℃,培养８ 天。按原位ＤＮＡ 末端标记（ＴＵＮＥＬ）检测试剂盒方法染色细胞,以荧光显微镜观察细胞凋亡。结果　经活体观察、ＨＥ染色、抗酒石酸酸性磷酸酶（ＴＲＡＰ） 染色,光学显微镜、扫描电镜观察骨片之陷窝的形成,证实培养的细胞为破骨细胞;ＴＵＮＥＬ 检测,荧光显微镜下可见破骨细胞核染色质浓缩、裂解等凋亡细胞的典型变化与未凋亡的破骨细胞。结论　本实验建立了成年大鼠破骨细胞的体外培养方法并进行细胞凋亡观察。     

前列腺素E1改善离体鼠心保存效果的研究

目的　探讨在冷缺血期供者心脏保存液中前列腺素 Ｅ１（ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ１）对改善鼠心的保存效果。　方法　将１４ 只大白鼠随机分为对照组和实验组，每组７ 只。对照组用 Ｓｔ Ｔｈｏｍ ａｓ停搏液停搏并保存大鼠心脏６ 小时；实验组在 Ｓｔ Ｔｈｏｍ ａｓ液中加入前列腺素 Ｅ１（５ μｇ／ Ｌ）停搏并冷保存６ 小时，利用离体鼠心非循环式 Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ 灌流功能测定模型，测定左心室舒张期末压（ Ｌ Ｖ Ｅ Ｄ Ｐ）、左心室发展压（ Ｌ Ｖ Ｄ Ｐ）和左心室压力变化率（＋ ｄｐ／ｄｔ），并检测心肌细胞线粒体三磷酸腺苷（ Ａ Ｔ Ｐ）、腺嘌呤核苷酸总量（ Ｔ Ａ Ｎ）。　结果　实验组保存后的左心功能恢复明显优于对照组（ Ｐ＜ ０．０５），实验组保存后心肌细胞三磷酸腺苷和腺嘌呤核苷酸总量的浓度明显高于对照组（ Ｐ＜ ０．０５）。　结论　供者心脏停搏液和保存液中的前列腺素 Ｅ１ 能改善供心的保护效果。     

前列腺素E1防治大鼠急性坏死性胰腺炎的作用及机理

目的：研究前列腺素Ｅ１防治大鼠急性坏死性胰腺炎的作用及其机理。方法：向大鼠胰管内注射５％的牛磺胆酸钠溶液制成急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）模型。结果：ＡＮＰ时，且腺毛细血管通透性（ＰＣＰ）明显增高，胰腺组织中性粒细胞过氧化酶（ＭＰＯ）活性及脂质过氧化物（ＬＰＯ）水平明显增高。病理示组织内大量ＰＭＮ浸润、片状出血、坏死。ＰＧＥ１使ＰＣＰ明显下降，ＭＰＯ、ＬＰＯ显著降低，动物存活明显改善结论：ＰＧＥ１通过