免疫荧光试验诊断阿米巴病

免疫荧光试验(Immunofluores—cent test)又叫免疫荧光抗体试验(I—mmunofluorescent antibody test,IFA),是一种把免疫学的特异性和敏感性与显微镜形态学的精确性结合起来的血清学诊断技术。就是将荧光色素与特异性抗体(或抗原但少用)以化学方法相结合,制成荧光标记抗体,而抗体的免疫特异性不受影响。然后将此荧光标记抗体,在一定条件下染色标本,用荧光显微镜观察。如标本中的抗原能与荧光标记抗体发     

吖啶橙染色荧光显微镜观察对鼻咽癌细胞学诊断的研究

在防治鼻咽癌的工作中,需要积极研究和开展细胞学的诊断技术.本文用改进的尼龙丝取材器作鼻咽部涂片,以吖啶橙染色后在荧光显微镜下观察鼻咽癌细胞荧光形态特征,并探讨其在诊断上的应用和价值.     

荧光原位杂交技术在实体瘤诊断中的应用

作为一种新型的细胞分子遗传学技术, 荧光原位杂交(FISH)是利用荧光标记DNA探针来检测细胞内染色体异常的非放射性原位杂交技术,可检测基因缺失、扩增、异位等异常,并结合组织形态学,提高病理诊断的准确性.文中主要综述其在实体瘤诊断方面的一些应用.     

大肠肿瘤诊断新技术

本文介绍两种大肠癌早期诊断的新技术。粪便脱落细胞检测技术:收集粪便脱落细胞,检测其红外吸收谱,可快速、精确地辨别细胞的良、恶性质。这项技术判断结果客观、标准,突破了常规病理学检查方法。激光诱发荧光技术(LIF)可以作为引导工具,在内镜下实时地反映粘膜病变性质,被称为“光学活检”。     

同步多色荧光原位杂交技术的建立及临床应用

目的:建立同步多色荧光原位杂交技术在外周血、羊水及单个胚胎细胞及骨髓细胞等样本中的实验方法,探索其在细胞遗传学、产前诊断、胚胎种植前诊断以及在血液病中的应用. 方法: 取外周血淋巴细胞、羊水细胞和不适于胚胎移植及冷藏的受精胚胎细胞、骨髓细胞分别制片,用相应的荧光标记的探针进行原位杂交,荧光显微镜取图分析. 结果:建立获得稳定可行的各类标本的实验方法. 结论:应用多色荧光原位杂交技术可对染色体进行快速准确的诊断,并可应用于产前诊断和胚胎种植前诊断及血液病的诊断.     

抗核抗体萤光测定血清纸片法在临床上的应用

抗核抗体荧光测定法——应用免疫荧光技术来测定患者血清中的抗核抗体,是一种较新的简便的免疫诊断方法,对诊断自身免疫病,特别是对诊断系统性红斑狼疮(SLE),有一定的价值。此法在国外已作为一种常规检验广泛应用于临床,在国内也已有报道。由于在检验过程中需要有荧光显微镜及荧光标记抗体、细胞印片等,因而此法在国内目前仅能在有条件     

恶性疟快速诊断新技术-Dipstick方法

目前许多诊断技术已经产生,大体可分为两类,一类仍以显微镜为基础,通过浓集血样中的原虫或采用荧光染色法或二者综合的技术,以提高诊断的准确性和敏感性,如QBS法和改良荧光镜检技术;另一类主要采用PCR技术测定疟原虫特定的抗原和核酸,该类方法诊断疟疾具有较高的敏感     

落射式荧光显微镜在系统性红斑狼疮实验室诊断中的应用

自 195 7年Friou等首先将间接免疫荧光技术用于检测抗核抗体 (ANA)以来〔1〕,ANA检测已成为系统性红斑狼疮 (SLE)实验室诊断指标之一。目前 ,随着抗核基质的改进及荧光显微镜技术的提高 ,ANA核型分辨率均有所提高 ,本文就我们应用落射式荧光显微镜对HEp - 2、灵长类肝组织切片及绿蝇短膜虫为实验基质对ANA及抗双链DNA (dsDNA)抗体检测结果报告如下。1　材料与方法1 1　病例来源72例SLE患者均符合美国风湿病协会 1982年修订的SLE诊断标准及 1987年我国对SLE修订的诊断标准 ,所有病例均来自山东大学临床医学院住院和门诊患者。1…     

荧光抗体快速诊断流感的实验室研究

在病毒分离与鉴定工作中,为力求迅速、敏感和具有特异性,采用荧光抗体技术是有价值的。关于应用荧光抗体技术快速诊断流感的实验室研究,已有许多报道,均证实特异荧光出现于血球吸附阳性和细胞病变之前。早期主要在细胞核内,随后胞核、胞浆均有,或仅在胞浆内有特异荧光颗粒出现;认为经此技术鉴定后,无须再作进一步试验(如血球凝集抑制试验、补体结合、中和等),以免耗时过长。     

双色双融合荧光原位杂交技术在慢性粒细胞白血病诊断中的应用

目的:探讨双色双融合荧光原位杂交技术(dual-color and dual-fusion fluorescence in-situ hybridization,D-FISH)在慢性粒细胞白血病(CML)诊断中的应用价值。方法:同时应用常规细胞遗传学R显带(RHG)核型分析和双色双融合荧光原位杂交2种方法,对24例CML患者进行检测。结果:24例CML中,常规细胞遗传学检出Ph(+)21例(87.5%),D-FISH检测均为bcr/abl(+)(100%);3例Ph(-)者经D-FISH检测均为(+)。结论:与常规细胞遗传学方法相比,D-FISH检测bcr/abl融合基因具有简便、快速、灵敏、特异性强等优点,可以作为诊断CML的一种重要检测方法。     

四种显微技术观测大鼠颌下腺细胞与丝素-壳聚糖体外共培养的形态学特点

目的 采用倒置显微镜、扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)、荧光显微镜和激光共聚焦显微镜(( laser scanning confocal microscopy,LSCM))技术对大鼠颌下腺细胞(rat submandibular gland cells,RSMGs)与丝素-壳聚糖( silk fibroin-chitosan,SFCs)的体外复合培养进行形态学观察.为观测、评估种子细胞在三维支架的内部生长情况提供技术支持.方法 取0～8d龄SD大鼠的颌下腺,对大鼠颌下腺细胞进行原代培养、分离纯化并传代;用抗细胞角蛋白单克隆抗体( CK8)及淀粉酶抗体的免疫细胞化学染色鉴定细胞来源.选取传至第二代的对数生长期的RSMGs作为种子细胞,选取SFCs共混膜(5×5×2)mm作为支架材料构建组织工程化涎腺样结构.将种子细胞与支架材料复合培养并分别于倒置显微镜、SEM、荧光显微镜和LSCM下观察二者复合生长情况.结果 倒置显微镜可以直接观察活细胞与支架复合生长情况,方法简单易行.SEM可以较精确的展示细胞支架复合生长的表面超微结构.经过荧光染料的着色,荧光显微镜和LSCM都可以观察到支架上锚定的种子细胞.荧光显微镜可见细胞核的荧光信号均匀的分布在支架孔隙内.LSCM通过层扫描及三维重建技术对较厚的标本获取图像;并可以通过旋转图像,从不同角度观察细胞支架复合物的三维剖面或整体结构,得到更为准确的定位信息.结论 四种显微技术均可应用于RSMGs与SFCs体外共培养的形态学观测.LSCM的三维重建技术结合荧光染料标记可以较好地获得RSMGs与SFCs复合生长的情况,有着较广泛的应用价值.     

环介导等温扩增技术用于结核病诊断的价值评估

目的 评估环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)在诊断结核病中的应用价值.方法 以疑似活动性结核患者为研究对象.前瞻性收集患者临床标本,分装后进行荧光涂片显微镜镜检、BACTEC MGIT 960液体培养、MTB GeneXpert(Xpert)和L...     

纳秒级陡脉冲对人卵巢癌细胞SKOV3生长抑制及诱导凋亡作用

目的 探讨纳秒级陡脉冲对人卵巢癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用.方法 采用人卵巢癌细胞SKOV3,应用MTT比色法,倒置显微镜,荧光显微镜及Annexin-FITC技术等方法进行检测和观察.结果 中(8.5 kV/cm)、高(10 kV/cm)场强处理组对SKOV3细胞活性具有明显抑制作用,呈剂量依赖性,在处理后2～4 h内呈时间依赖性;倒置显微镜和荧光显微镜下观察到典型的凋亡细胞形态;流式细胞仪示,中、高场强处理组早期凋亡率分别为(22.21±2.71)%、(57.30±6.51)%,与对照组(3.04±0.44)%比较均有显著性差异.结论 一定范围内的纳秒级陡脉冲能明显抑制SKOV3细胞增殖,亦诱导SKOV3细胞凋亡.     

DNA荧光原位杂交(FISH)技术在血液肿瘤诊断中的运用

荧光原位杂交技术是一种非常有用的分子细胞遗传学工具,特别是对一些染色体数目异常和复杂染色体异常的诊断,架起了染色体显带技术和分子遗传学之间的桥梁。DNA荧光原位杂交（FISH）技术是一种应用非放射性荧光物质依靠核酸探针杂交原理在核中或染色体上显示DNA序列位置的方法[1]。该技术具有快速、安全、灵敏度高以及探针可长期保存等特点,目前已广泛应用于各种细胞遗传学、肿瘤生物学及基因定位、基因作图、基因扩增,包括产前诊断及哺乳动物染色体进化研究等领域血液肿瘤检测,血液肿瘤是我国十大高发肿瘤之一,细胞遗传学对肿瘤分型、诊断、治疗和预测预后都具有重要的意义。     

ERCP在诊断困难的胆管胰腺疾病中的应用

<正> 逆行胰胆管造影(ERCP)作为一种用于胆道和胰脲疾病特殊的检查方法、已日益受到普外临床医师的重视。这一技术的应用为某些不易确定诊断的疾病,如缩窄性乳头炎、硬化性胆管炎、慢性胰腺炎等提供了可靠的诊断依据,尤其对胰、胆管的先天性解剖变异、胆管结石、胆道损伤及狭窄等复杂病变的诊断更具独到之处。     

激光共聚焦扫描显微镜与多光子激光扫描显微镜之比较

激光共聚焦显微镜是 80年代随着光学、视频、计算机等技术的飞速发展而诞生的新一代显微镜。自从 195 7年马文·闵斯基在他的美国专利上首次阐明扫描共聚焦显微镜技术的某些基本原理 ,激光显微镜技术得到逐步发展。 1970年牛津和阿姆斯特丹同时向科学界推荐了一种新型的扫描共聚焦显微镜[1 ] ,它是在荧光显微镜成像的基础上加装了激光扫描装置 ,利用计算机进行图像处理 ,使用紫外或激光激发荧光探针。能够得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像 ,由于它采用激光作光源 ,发射角小 ,方向性好 ,在发射光检测光路上放置了一个与入射光针孔共轭的…     

激光荧光光谱诊断恶性肿瘤的研究进展

激光是本世纪60年代最重大的科学技术成就之一,以其高亮度、高方向性、高单色性等突出特点,广泛运用于农业、通讯、医疗、军事等各个方而,并在科学技术的许多重大领域里,引起了革命性的变化。 激光荧光光谱技术用于诊断疾病具有灵敏、快速等优点,患者易于接受。所以近年来国内外应用荧光光谱诊断肿瘤的研究相当活跃,特别是早期诊断肿瘤方面已获得了一定进展,成为医学应用中的一个重要方面。荧光分为原子荧光、分子荧光、自发荧光、外源性荧光。 1 激光荧光光谱在诊断上的应用 1.1 激光荧光光谱仪 随着激光技术的发展,氙离子激光、氮分子激光、氪离子激光、可调染料激光等均作为激励光源,可观察并记录肿瘤组织的特征荧光,激光荧光光谱仪由激励光源、专输光纤及荧光检测记录系统三部分组成。 1.2 使用荧光药物诊断肿瘤 用激光荧光谱技术诊断肿瘤的方法早在70年代初期就引起了人们的关注。近年来获得新发展,肿瘤荧光辐射有两种类型：是由肿瘤组织本身经紫外光激发的,称自体荧光;另一种是聚集在肿瘤组织上荧光物质作光敏剂经激发后发出,然后根据荧光光谱对肿瘤进行鉴别诊断。使用荧光药物诊断肿瘤为其中的一种,在生物医学研究中常用的荧光物质主要有荧光素钠盐,血卟啉衍生物,即HPD(Hematoporphy rin Dirivative)。     

过氧化氢抑制三氧化二砷诱导的伯基特氏淋巴瘤细胞凋亡

目的 探讨过氧化氢(H2O2)对三氧化二砷(As2O3)诱导人类伯基特氏淋巴瘤细胞凋亡的影响及双染法荧光显微技术在检测细胞凋亡中的作用。方法 应用As2O3诱导人类伯基特氏淋巴瘤细胞株BJAB细胞凋亡，采用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)核染料双染法荧光显微镜和透射电镜对细胞死亡进行观察及定量分析．结果 BJAB细胞经As2O3处理后，荧光显微镜下可见大多数细胞出现细胞染色质凝集、核边集、核碎裂等凋亡的特征性改变；在低剂量(200μmol／L)H2O2的影响下，抑制了As2O3诱导的细胞凋亡，降低细胞的死亡率；细胞的死亡方式由凋亡转变为核固缩性坏死，表现为既无凋亡的特征性改变，又非典型的细胞坏死，死亡细胞的细胞核呈固缩状态而非肿胀。结论低浓度(200μmol／L)H2O2可抑制临床治疗浓度的As2O3诱导的人类伯基特氏淋巴瘤BJAB细胞凋亡；双染法荧光显微镜技术不但可明确区分细胞凋亡及坏死．还可判断早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞，并可进行定量分析．是一种良好的细胞凋亡检测方法。     

荧光原位杂交技术临床应用与作用

荧光原位杂交(FISH)是原位杂交技术的一种，即不需要预先分离核酸，在杂交的过程中不改变核酸的位置，不仅可以检测靶序列存在与否，还可以显示其存在的位置。FISH技术是将组织或细胞标本固定于玻片上后，将荧光标记的探针与待测标本的核酸进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织标本进行检测和诊断。荧光原位杂交常用的荧光标记物有AMCA(蓝色荧光)、FITC(绿色荧光)、罗丹明(红色荧光)、德州红(深红色荧光)、Cy3(不可见红外光)及Cy5(同前)，其中Cy3和Cy5的荧光强度最高且稳定，适用于检测低丰度标本的检测。     

绿色荧光蛋白及其在神经科学研究中的应用

长期以来以固定的死细胞为来源进行细胞、亚细胞和分子水平的结构和功能研究方法已不能满足研究需要,1994年绿色荧光蛋白(GFP)的发现使人们找到了一种操作方便、不用外源底物就能在活细胞中检测的分子探针。GFP与目的基因连接后,转染进细胞,结合荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪等设备就可在活细胞中进行观察和检测。该文就其概况及其在神经科学研究中的应用作一综述。