PD-1/PD-L1抑制剂在晚期尿路上皮癌中的研究进展

摘 要：含顺铂方案的化疗是晚期尿路上皮癌的一线治疗方式,不耐受顺铂化疗的及一线标准化疗后发生疾病进展的患者可选择的有效治疗有限,平均生存期约5~10个月。程序性死亡受体1（programmed death 1,PD-1）/程序性死亡配体1（programmed death ligand 1,PD-L1）抑制剂在大型临床试验中显示出持久的抗肿瘤效应和可耐受的安全性,为改善晚期尿路上皮癌患者预后带来了希望。PD-1抑制剂Pembrolizumab是第一个获得美国食品药品管理局（Food and Drug Administration,FDA）批准的治疗晚期尿路上皮癌的一线免疫治疗药物。2种PD-1抑制剂Pembrolizumab和Nivolumab,3种PD-L1抑制剂Atezolizumab、Durvalumab和Avelumab,先后获得美国FDA批准作为含铂方案化疗进展的晚期尿路上皮癌患者的二线治疗药物。全文就PD-1/PD-L1抑制剂在晚期尿路上皮癌中的研究进展作一综述。     

XRCC1基因多态性与膀胱癌关系的病例对照研究

[目的]探讨人类DNA修复基因XRCC1 Arg194Trp单核苷酸多态性与膀胱癌危险性的关系。[方法]采用PCR-RFLP分析技术检测242例膀胱癌患者及225例人群对照XRCC1基因194位点的多态性。应用非条件Logistic回归模型，调整混杂因素后，分析各基因型与膀胱癌发生的关系以及是否与吸烟因素存在着交互作用。[结果]膀胱癌病例组的194Trp／Trp突变基因型频率（11.2％）显著高于对照组（4．0％）。调整年龄、性别、吸炯、高危职业史、膀胱感染和体质指数等因素后，携带194Trp/Trp基因型个体患膀胱癌的风险是194Arg／Arg基因型个体的3．64倍（95％CI：1．60～8．30）。此基因型与吸娴对增加膀胱癌发病风险无明显交互作用。去除了吸烟的混杂效应后，194Trp／Trp基因型个体患膀胱癌的危险性是其它基因型个体的3．16倍（95％CI：1．45～6．88）。[结论]XRCC1基因194Trp／Trp突变基因型增加膀胱癌发病风险，与吸烟无交互作用。     

SNP芯片联合质谱筛检胃癌相关基因3'UTR区SNPs的病例-对照研究

目的：探讨胃癌发生相关基因3'非翻译区（3'UTR）单核苷酸多态性位点（SNPs）,为寻找有价值的胃癌分子标志物提供新的依据。方法：采用1：1配对病例-对照研究的方法。应用SNP芯片对福建省胃癌高发区96例胃腺癌患者与96例健康对照人群基因组中消化道肿瘤相关基因3'UTR区SNPs位点进行检测,应用飞行时间质谱分析质谱技术对芯片筛检出来的SNPs位点在622例胃癌患者和622例正常健康基因组中进行验证。结果：SNP芯片及生物信息学分析选取EGFR rs884225、EGFR rs10277413、FAS rs1468063、MSH2 rs17502941和MSH2 rs11125144为候选基因位点。对622对病例-对照组样本的上述候选基因位点进行SNP分型,均未发现上述5个位点与胃癌易感性相关。进一步分层分析结果发现EGFR rs884225中含有T等位基因的基因型（CT+TT）与贲门癌相关（OR=0.67,95% CI：0.46~0.99）,而其他位点与贲门癌、非贲门癌的风险关联无统计学意义（P > 0.05）。结论：EGFR基因3'非翻译区的rs884225多态性位点与福建省仙游县的贲门癌发生存在关联,T等位基因可能是贲门癌发生的一个遗传保护因素。     

APE1单核苷酸多态性与卵巢癌易感性关系的研究

目的：探讨中国西北地区汉族妇女脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1（APE1）单核苷酸多态性与卵巢癌易感性的关系.方法：采用病例对照研究,应用PCR及直接测序法检测116例卵巢癌患者及141例健康妇女APE1位点rs1760944和rs1130409的单核苷酸多态性（SNP）.结果：rs1130409位点的TG和GG基因型相对于TT基因型,降低了患卵巢癌的风险.进一步分析发现等位基因G相对于等位基因T,显著降低患卵巢癌的风险.按年龄、初潮年龄、孕次、产次、是否绝经进行分层分析,发现rs 1130409的TG/GG基因型比TT基因型在年龄≥50岁、初潮年龄≥15岁、孕次≥3次、产次≥3次和已绝经的女性中的保护作用更加显著.但是,未发现rs1760944的多态性与卵巢癌易感性相关.单倍体分析中,APE1T/G和G/G单倍体相对于T/T单倍体降低患卵巢癌风险.结论：APE1基因单核苷酸多态性与中国西北地区汉族妇女卵巢癌易感性密切相关.     

CLOCK基因单核苷酸多态性与乳腺癌易感性的病例对照研究

目的：探讨生物钟CLOCK基因的单核苷酸多态性与乳腺癌易感性的关系。方法：采用应用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）技术检测1 499例中国汉族女性乳腺癌患者和1 592例正常女性对照者CLOCK基因rs3805151位点的基因型,采用SPSS 16.0软件进行数据处理。结果：CLOCK基因CC型、CT型和TT型在病例组和对照组间的分布差异有统计学意义（χ2=9.712,P=0.008）,与CC型相比,杂合型CT可以显著增加乳腺癌的发病风险 （OR=1.41,95% CI：1.07～1.87）,携带T等位基因（CT/TT）的个体乳腺癌风险增加35%（OR=1.35,95% CI：1.04～1.76）。分层分析显示,携带T等位基因绝经后、无肿瘤家族史者、无乳腺良性病史的个体患乳腺癌风险增加。结论：CLOCK基因rs3805151 C>T可增加乳腺癌发病风险,这一结论有待于进一步通过不同种族人群的关联研究以及功能学研究的证实。     

PD-L1的表达与妇科恶性肿瘤预后关系的研究进展

程序性死亡蛋白1(Programmed death protein 1,PD-1)是T细胞上主要存在的一种抑制性受体。程序性死亡配体-1(Programmed death ligand-1,PD-L1,又称B7-H1)在心、肝、肾、肺等多个器官上皮细胞和内皮细胞中广泛表达。肿瘤发生时机体内的肿瘤微环境会使浸润性T细胞高表达PD-1,同时肿瘤细胞中PD-L1的表达上调,与PD-1受体相结合,导致肿瘤微环境中PD-1通路持续开放,进而导致T细胞凋亡,肿瘤细胞则逃脱机体的免疫监视,发生肿瘤免疫逃逸。本文就PD-L1表达与妇科恶性肿瘤预后关系的研究进展进行综述。     

非小细胞肺癌组织PD-L1的表达及其与临床因素的关系

目的:探索程序性死亡配体1 (programmed death-ligand 1,PD-L1)在中国非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)患者肿瘤组织中的表达水平及影响因素.方法:免疫组织化学法检测2008年4月至2014年8月天津医科大学肿瘤医院122例NSCLC初治患者肿瘤组织中PD-L1、PD-1和CD3+T细胞表达情况,采用x2和kruskal-wallis检验分析PD-L1表达在临床因素中分布差异性,用Person检验和Spearman检验分析PD-L1表达与EGFR基因型、CD3+T细胞数量及淋巴细胞PD-1表达的相关性,以及原发灶与淋巴结PD-L1表达相关性.结果:所有患者原发灶肿瘤细胞PD-L1表达百分比中位值1.5％(0～93.2％),PD-L1表达在TNM分期分布上有统计学差异(P =0.003),与TNM分期呈显著正相关(r=0.273,P=0.002),与性别、年龄、有无吸烟史、肿瘤最大径、病理类型、CEA水平分布无显著相关(P ＞0.05);PD-L1表达水平与CD3+T细胞数量、淋巴细胞PD-1表达水平无相关性,PD-L1表达阴性、低表达和高表达与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变亦无显著相关(P ＞0.05);48例有淋巴结转移的NSCLC患者原发灶与相应转移淋巴结肿瘤细胞PD-L1表达水平无统计学相关性(P＞0.05).结论:NSCLC患者原发灶肿瘤细胞PD-L1表达在TNM分期分布上有差异,与CD3+T细胞数量、淋巴细胞PD-1表达水平、EGFR基因突变情况无相关性;原发灶与相应转移淋巴结之间肿瘤细胞PD-L1的表达亦没有相关性.     

非小细胞肺癌PD-1/PD-L1的表达与EGFR突变相关性研究

背景与目的 肺癌的治疗模式以表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptortyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)作为EGFR突变的非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者一线治疗;同时以程...     

循环外泌体PD-L1表达水平与PD-1/PD-L1抑制剂治疗恶性肿瘤疗效的相关性研究现状

外泌体作为具有生物学功能的小囊泡,是近年肿瘤研究领域关注的热点。研究发现,肿瘤细胞分泌的外泌体表达的程序性死亡受体配体1(programmed death ligand 1,PD-L1),可在肿瘤患者外周血液中检测到,可能参与并抑制机体免疫反应。近年来,一些研究发现,外泌体PD-L1可能影响程序性死亡受体1（programmed death 1,PD-1）/PD-L1抑制剂的抑制效应。反之,亦然。应用PD-1/PD-L1抑制剂治疗,可影响外泌体PD-L1的表达水平。二者有怎样的联系和相关性？本文就循环外泌体PD-L1在不同肿瘤免疫反应及抗PD-1/PD-L1免疫治疗中的研究进展作一综述。     

肺癌驱动基因与PD-1/PD-L1信号通路相互作用在非小细胞肺癌发生发展中的研究进展

程序性死亡分子1(programmed death 1,PD-1)/程序性死亡分子1配体(programmed death 1 ligand,PD-L1)通路是免疫调节的重要通路,而这一通路在肿瘤组织中存在着异常激活,提示PD-1/PD-L1通路可能参与了肿瘤的免疫逃逸过程.肿瘤驱动基因在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的发生发展中发挥着重要的作用,而对于肿瘤免疫逃逸的建立同样具有潜在的作用,这提示肿瘤驱动基因通路与PD-1/PD-L1通路可能存在相互作用.本文将对目前关于PD-L1与主要的肺癌驱动基因表皮生长因子受体基因(epidermal growth factor receptor,EGFR)、鼠类肉瘤病毒癌基因(Kirsten rate sarcoma viral oncogene homolog,KRAS)及棘皮微管样蛋白4-间变性淋巴瘤激酶融合基因(echinoderm microtubuleassociated protein-like 4-anaplastic lymphoma kinase,EML4-ALK)之间的关系及调控进行综述,总结肺癌驱动基因及PD-1/PD-L1通路相互作用在非小细胞肺癌发生发展中的作用.     

PD-L1 在三阴性乳腺癌组织中表达及其与脉管生成的关系

目的：探讨程序性死亡配体-1（PD-L1）在三阴性乳腺癌（TNBC）组织中的表达及其与脉管生成的相关性。方法：采用组织芯片结合免疫组织化学法检测120 例TNBC组织（收集自河北医科大学第四医院2011 年3 月1 日至2012 年6 月1 日手术切除并经病理证实的TNBC组织标本）中PD-L1 蛋白表达,并分析其与患者各项临床指标关系,同时用CD34 和D2-40 标记血管和淋巴管后检测TNBC中微血管密度（MVD）和淋巴管密度（LVD）。结果：PD-L1 蛋白在TNBC肿瘤细胞及间质浸润淋巴细胞中阳性表达率为56.7%（68/120）,PD-L1 的表达与TNBC患者的性别、年龄、临床分期、组织学分级及肿瘤大小均无相关性（P>0.05）,但与淋巴结转移情况（P<0.05）及脉管癌栓形成相关（P<0.05）;PD-L1 高表达的TNBC淋巴结转移率高及脉管癌栓形成高,PD-L1的表达与MVD呈正相关关系（r=0.500,P=0.02）,PD-L1 的表达与LVD呈正相关（r=0.662,P=0.01）。Log-Rank检验结果显示,PDL1蛋白表达阳性TNBC患者的生存期均显著低于表达阴性的患者（P<0.05)。Cox 多因素分析提示,PD-L1 蛋白表达可作为TNBC整体生存的独立预后因素。结论：PD-L1 在TNBC血管生成及淋巴管生成中起重要作用,其与TNBC的侵袭、转移关系密切,阻断PD1/PD-L1 信号通路有望成为治疗TNBC的有效新策略。     

食管鳞状细胞癌患者外周血PD-1和PD-L1的表达及其临床意义

目的:检测食管鳞癌患者外周血中程序性死亡分子1 (programmed cell death 1,PD-1)、程序性死亡分子1配体(pro-grammed cell death ligand 1,PD-L1)及IFN-γ表达情况,并分析其临床意义.方法选取2016年6月至2017年4月河北医科大学第四医院胸外科90例食管鳞状细胞癌患者(其中50例患者行手术治疗)和40例健康对照者为研究对象,收集研究其外周血液标本,采用酶联免疫吸附方法检测血清中可溶性PD-1 (sPD-1)、可溶性PD-L1 (sPD-L1)及IFN-γ的表达水平.采用SPSS 24.0软件对数据进行检验和相关性分析.结果:食管鳞癌组血清中sPD-l、sPD-L1及IFN-γ水平均明显高于正常对照组(P＜0.05);食管鳞癌组手术前血清sPD-L1、IFN-γ水平均明显高于术后(P＜0.05),而sPD-1水平两组比较无明显差异(P＞0.05).sPD-1、sPD-L1的表达水平与临床病理特征无明显相关(P＞0.05),IFN-γ的表达水平与淋巴结转移情况相关(P＜0.05),与T分期、TNM分期、肿瘤体积大小、肿瘤部位、组织分化程度、性别、年龄无明显相关(P＞0.05).血清中sPD-L1表达水平与IFN-γ无明显相关(P＞0.05).结论:食管鳞癌患者血清中sPD-L1较正常人表达升高,且术后表达较术前减少,说明血清中sPD-L1表达水平与病情发展变化有一定相关性.     

CMTM6 和PD-L1 蛋白在脑胶质瘤组织中的表达及其与患者临床病理特征的相关性

[摘要] 目的：探讨趋化素样因子超家族6（CMTM6）、程序性死亡受体-配体1（PD-L1）在脑胶质瘤组织中的表达及其与患者临床病理特征的相关性。方法：选用2012 年1 月至2015 年12 月于郑州大学第五附属医院神经外科手术切除的86 例脑胶质瘤标本及30 例头颅外伤去骨瓣减压患者的脑组织标本（对照组）,用免疫组化法、WB法检测脑胶质瘤组织中CMTM6 和PD-L1 蛋白的分布与表达,用两独立样本t 检验分析CMTM6 与PD-L1 的表达差异,用单因素χ2检验分析CMTM6 和PD-L1 表达与患者临床病理特征之间的关系。结果：胶质瘤组织中CMTM6 的表达水平明显高于对照组织（P<0.01）, 高病理级别（WHO Ⅲ-Ⅳ）胶质瘤组织中CMTM6 和PD-L1 的表达水平均明显高于低病理级别（WHO Ⅰ-Ⅱ）胶质瘤组织（均P<0.01）。CMTM6 表达与患者脑胶质瘤病理级别、头晕病史、癫痫发作、PD-L1 表达有关（均P<0.05）,PD-L1 表达与脑胶质瘤病理级别、癫痫发作、CMTM6 表达有关（均P<0.05）。结论：CMTM6 和PD-L1在脑胶质瘤组织中均高表达且两者间有一定相关性,有望用于研究脑胶质瘤信号通路。     

PD-L1表达调控机制及其对抗肿瘤免疫反应的影响

肿瘤的发生是一个多因素、多步骤的过程.肿瘤细胞通过抑制机体的抗肿瘤免疫应答,实现免疫逃逸,促进肿瘤生长.肿瘤免疫逃逸的分子机制是肿瘤免疫研究的核心问题之一.在T细胞介导的免疫反应中,程序性死亡受体-1(programmed death receptor-1,PD-1)是关键的抑制性免疫检查点.肿瘤通过表达程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1,PD-L1),可以增强PD-1抑制信号,促进肿瘤免疫逃逸.研究肿瘤细胞如何调节PD-L1表达,有助于阐明肿瘤发生免疫逃逸的分子机制.近年来的研究发现,肿瘤细胞在基因转录、转录后调节以及蛋白翻译后修饰等多个环节对PD-L1表达进行调节,并且通过调控PD-L1的表达影响抗肿瘤免疫反应.这些研究为肿瘤免疫治疗提供了新的靶点.     

Laptm53′UTR对小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞增殖与凋亡的影响

目的:通过建立稳定过表达溶酶体相关穿膜蛋白5(lysosomal associated protein transmembrane 5,Laptm5)3'不翻译区(3'UTR)的B细胞淋巴瘤38B9细胞株,探讨Laptm5 3'UTR对小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞株增殖、凋亡的影响.方法:荧光定量PCR及Western blotting检测小鼠B细胞及38B9细胞中Laptm5 miRNA及其蛋白质的表达水平;将小鼠Laptm5 3'UTR及其含有的microRNA结合位点突变的突变型基因片段构建入逆转录病毒表达载体pMSCV-PIG,包装成逆转录病毒,感染小鼠B细胞淋巴瘤细胞38B9,流式细胞术检测逆转录病毒感染率,细胞计数法及流式细胞术观察Laptm53'UTR或其突变型过表达后389B9细胞的增殖、凋亡情况.结果:相比小鼠B细胞,B细胞淋巴瘤细胞中Laptm5的miRNA及蛋白均显著降低(P＜0.01).成功获得稳定过表达Laptm5 3'UTR(突变型)的38B9细胞株.Laptm5 3'UTR细胞株比Laptm5 3'UTR突变型过表达细胞株的增殖能力显著减慢,凋亡率显著增加[(7.87±1.08)％vs(0.45±0.07)％,P＜0.01].结论:小鼠Laptm5 3'UTR具有抑制B细胞淋巴瘤增殖、促进其凋亡的作用,该作用可能与其影响相关microRNA的调控有关.     

免疫检查点PD-1／PD-L1通路在小细胞肺癌中的作用

小细胞肺癌（SCLC）主要的特点为生长迅速且早期易发生广泛转移。尽管SCLC对于化疗和放疗敏感,但几乎所有的患者均在治疗后发生复发转移,预后差。免疫检测点抑制剂,尤其程序化细胞死亡受体-1（PD-1）／程序化细胞死亡配体-1（PD-L1）拮抗剂在SCLC的临床前和临床研究中均获得了良好效果,并且能够延长患者生存。免疫检测点疗法作为一种新兴的方法在未来可能会改变SCLC治疗模式。此外,有限的数据显示出PD-L1表达可能成为筛选获益人群一个有效的生物标记物。本文总结PD-L1作为标记物的发展历程,并同时阐述PD-1／PD-L1抑制剂在SCLC治疗中的进展。     

PD-L1和PD-1作为治疗结直肠癌的免疫检查新靶点的研究进展

免疫抗癌疗法是一种新的治疗实体肿瘤的方法。在这个新的领域,免疫系统里作为负向调节因子的免疫检查位点,在抗肿瘤免疫反应领域中起着重要的作用。因此,诸如抗细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、程序性细胞死亡蛋白（PD-1）、程序性细胞死亡蛋白配体1（PD-L1）,现在已经研发出了针对前述这三者免疫检查位点的阻断因子,用于抗肿瘤的药物,在临床前期研究和临床研究中有着可喜的成果。本文综述关于在结直肠癌中免疫检查位点阻断剂的生物背景和临床研发最新进展。关于阻断PD-1和PD-L1的临床前期试验结果的前景令人充满希望,尤其是在带有微卫星不稳定性（MSI）的结直肠癌患者中更加明显。接下来进一步深入开展的临床试验将证实这些初步结果,并且评估这二者联合治疗方法的可行性和确认这两个生物标记物作为免疫检查位点阻断剂的效应在哪些人群中更有可能受益或更加抵抗。