钙粘附蛋白与子宫内膜

钙粘附蛋白全称钙依赖的粘附分子家族(cadherin),是一种单链跨膜糖蛋白,主要参与介导特定器官和组织同型细胞间的粘附.在月经周期不同阶段,钙粘附蛋白的表达量和类型不同,且受类固醇激素的调节.在胚泡着床过程中,不同类型的钙粘附蛋白分别在内膜上皮、间质及滋养细胞的表达,提示其在着床调节方面的重要作用.E-钙粘附蛋白结构、功能的缺陷与子宫内膜异位症发病的关系密切.     

整合素与胚胎着床

整合素是一类细胞粘附分子受体，有粘附和信号传递两大基本功能。现已发现，整合素在子宫内膜和胚胎上均有表达，并受雌、孕激素等多种因素的调节。它参与细胞的增殖、分化、粘附和迁移等过程，在胚胎着床中起着重要的作用。其中，整合素亚单位αvβ3和α4β1可作为子宫内膜容受性的标志，并参与着床过程。此外，整合素在输卵管粘膜也有表达，可能为研究胚胎异位着床的分子机制提供一定的理论依据。     

整合素与胚胎着床

整合素是一类细胞粘附分子受体，有粘附和信号传递两大基本功能。现已发现，整合素在子宫内膜和胚胎上均有表达，并受雌、孕激素等多种因素的调节。它参与细胞的增殖、分化、粘附和迁移等过程，在胚胎着床中起着重要的作用。其中，整合素亚单位α_vβ_3和α_4β_1可作为子宫内膜容受性的标志，并参与着床过程。此外，整合素在输卵管粘膜也有表达，可能为研究胚胎异位着床的分子机制提供一定的理论依据。     

降钙素是孕激素调节的子宫内膜容受性标志

降钙素是含有 32个氨基酸残基的肽类激素 ,分子量为 350 0。主要生理功能是调节细胞外 Ca2 + 生成。近年来发现子宫内膜降钙素表达与子宫内膜容受性密切相关 ,并受孕激素调节 ,着床结束后 ,表达下降 ,阻断其表达 ,导致着床失败。通过对假孕小鼠子宫降钙素m RNA水平的检测 ,发现子宫内膜降钙素的表达不需要胚胎存在 ,只受母体因素调控。提示 :降钙素在子宫可能是子宫内膜容受性的标志 ,在胚胎着床过程中起重要作用     

TRAIL在小鼠胚胎着床过程中子宫内膜的表达

目的:检测TRAIL在小鼠胚胎着床过程中子宫内膜的表达,探讨它在蜕膜细胞凋亡中的作 用。方法:采用RT-PCR及免疫组化技术检测妊娠d 1-8小鼠子宫组织TRAILmRNA及蛋白的表 达情况。结果:妊娠d 1-8的小鼠子宫组织均有TRAIL mRNA的表达,且着床期间的表达较着床前 明显增加(P<0．05)。妊娠d 1-3,小鼠子宫内膜无TRAIL蛋白表达;妊娠d 4,TRAIL表达在小鼠胚 胎定位、黏附点的子宫内膜腔上皮细胞;妊娠d 5-6,TRAIL定位于胚胎着床点附近的蜕膜细胞中; 妊娠d 7-8,TRAIL表达在与子宫蜕膜邻近的胚胎滋养层细胞中。结论:在小鼠胚胎着床过程中, TRAIL诱导子宫内膜腔上皮细胞凋亡可能是胚胎跨越上皮屏障的重要机制之一,且TRAIL诱导的 蜕膜细胞和胚胎滋养层细胞的凋亡在滋养层细胞对子宫内膜的适度侵入过程中起重要作用。     

子宫内膜整合素蛋白β_3亚基在妊娠中的变化

为探讨整合素蛋白 β3亚基在胚胎着床期的作用 ,本实验应用特异性抗整合素蛋白 β3抗体 ,采用免疫和 Western印迹法 ,二氨基联苯胺显色 ,VDS扫描等技术 ,检测妊娠 d3、5、7、1 5小鼠子宫内膜及人分泌期子宫内膜和妊娠早期中整合素β3亚基的表达量。结果 :小鼠子宫内膜整合素蛋白 β3亚基表达量在妊娠 d5明显上升 ,至 d7时达高峰 (与对照组比较 ,P<0 .0 1 )。此后下降 ,d1 5时 ,整合素蛋白 β3的表达量与对照组相比 ,无明显差异。人蜕膜组织和分泌期子宫内膜均有整合素蛋白β3的表达。蜕膜整合素蛋白β3的表达量与胚囊大小无关 ,但比分泌期子宫内膜高 4～ 5倍 (P<0 .0 0 0 1 )。这些结果提示 :整合蛋白 β3亚基在子宫内膜中的特异性变化 ,可能启动、促进胚胎的粘附和着床 ,在着床过程中起重要作用。     

穿孔素蛋白及基因在子宫内膜中的表达

目的探讨穿孔素蛋白及基因在不同时期子宫内膜中表达的规律,及其在生殖系统中的作用。方法采用免疫组化与原位杂交技术,观察１０例增殖期、６８例分泌各期、２０例早孕期及４例绝经后子宫内膜中穿孔素蛋白的表达及基因阳性细胞的分布特点、表型特征和数量变化规律。结果在各期子宫内膜中,产生穿孔素蛋白的细胞位于子宫内膜间质,此细胞表型特征为ＣＤ５６＋淋巴细胞（自然杀伤样细胞）。在各期子宫内膜中表达穿孔素蛋白的阳性细胞数量不同,从增殖期、分泌期至早孕期,此阳性细胞数量逐渐增多,各组间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）,绝经后子宫内膜中无穿孔素蛋白表达。在增殖期,穿孔素基因阳性细胞大多呈局灶状分布,与同期表达穿孔素蛋白的阳性细胞呈少量单细胞不一致分布,分泌期与早孕期子宫内膜中表达穿孔素基因的阳性细胞呈弥散状分布,并且早孕期此阳性细胞数量增多。结论子宫内膜中穿孔素蛋白和基因表达,可能参与月经来潮的调节,利于胚胎着床和妊娠的顺利进行。     

肿瘤坏死因子α对子宫内膜细胞基质金属蛋白酶9及其组织抑制物3蛋白表达的调控

基质金属蛋白酶（MMP）及其组织抑制物（TIMP）,是调控细胞外基质降解的主要酶类之一,可能是参与胚胎着床过程中细胞外基质降解的重要调节因素.有研究表明,肿瘤坏死因子α（TNF-α）对胚胎着床有重要的调节作用,但是否能调控子宫内膜细胞MMP及TIMP蛋白的表达,目前尚不明确.本研究通过检测不同浓度TNF-α作用于离体的子宫内膜后,子宫内膜细胞MMP-9及TIMP-3蛋白表达的变化,探讨在胚胎着床过程中,TNF-α调控MMP及TIMP蛋白作用的可能因素.     

降钙素对人类胚胎着床的影响

目的 探讨降钙素（calcitonin,CT)对人类胚胎着床调节的影响。方法 用不同浓度（2、5、10nmol/L)的CT,刺激体外培养的人子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞,应用粘附细胞仪观察细胞内钙离子（Ca^2 ）浓度变化;再用不同浓度（2、5、10nmol/L)的CT分别作用于人种植前2细胞期、4细胞期、8细胞期胚胎,通过粘附细胞仪检测种植前胚胎荧光相对强度,观察细胞内Ca^2 浓度的动态变化。结果 各种浓度CT对子宫内膜腺上皮细胞内Ca^2 浓度均无影响,而CT可以快速增加间质细胞和种植前胚胎细胞内Ca^2 浓度,并且呈剂量依赖性,CT浓度为10nmol/L时,作用3min,细胞内Ca^2 浓度开始增加,6min达到高峰,4细胞期胚胎开始出现对CT刺激的反应,8细胞期胚胎效应最强,CT对细胞内Ca^2 浓度的影响可以持续2h。结论 种植前胚胎表面和子宫内膜间质细胞上,可能存在CT功能性受体,CT可能通过加速子宫内膜蜕膜化、促进胚胎生长、分化,而促进胚胎着床。     

核因子-κB在小鼠胚泡着床前后子宫表达的初步研究

探讨核因子-κB(NF-κB)在小鼠胚泡着床过程中是否存在的短暂激活。方法:采用免疫组织化学检测小鼠子宫内膜NF-κB的亚基p65蛋白的定位和表达,Western印迹法检测子宫内膜NF-κB的抑制性蛋白IκBα的降解。结果:p65在小鼠胚胎着床前后子宫内膜均有表达,其部位主要在腔上皮细胞和腺上皮细胞的胞浆部分,基质细胞和子宫肌层也有微弱表达。妊娠后子宫内膜p65的表达增加,妊娠d5达最高值,d8仍然维持较高水平;而d5IκBα的降解最明显。结论:NF-κB可能通过其短暂激活来参与调节小鼠胚泡着床。     

子宫内膜细胞的凋亡

凋亡是一种选择性的细胞清除过程，有维持再生组织自身稳定性的作用。在月经周期的子宫内膜及胚泡着床后由其转化的蜕膜都有细胞凋亡，许多刺激因素可诱导细胞凋亡，基因的表达调节着细胞的敏感性。本文不子宫同膜细胞凋亡的分子生物学机制及其作用进行综述。     

Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中的表达

目的:探讨Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中的作用。方法:采用免疫组织化学定位检测Meis1在小鼠子宫内膜中的表达;采用Real-time RT-PCR和免疫印迹方法,分别在mRNA和蛋白水平定量检测Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中的表达水平。结果:免疫组织化学结果显示,Meis1蛋白主要表达于小鼠子宫内膜腺上皮细胞的细胞膜和胞质以及基质细胞和蜕膜细胞的细胞核中,在围着床期小鼠子宫内膜中的表达随妊娠天数的增加而增加,着床后在基质和蜕膜中的表达增强;在孕第4日显著增加,孕第5日达高峰,孕第6日表达下降。Real-time RT-PCR和免疫印迹结果显示,Meis1的表达随妊娠天数的增加逐渐增强,孕第4日明显增强,孕第5日达高峰,孕第6日开始下降。结论:Meis1在围着床期小鼠子宫内膜中呈规律表达,与小鼠着床窗吻合,提示Meis1是调控围着床期子宫内膜容受性的重要因子。     

上皮型钙粘附因子在子宫内膜的表达及其与不孕的关系

子宫内膜对胚泡的容受性 ,在胚泡着床中起关键作用。有关研究发现 ,属于钙依赖性粘附分子家族的钙粘附因子(ｃａｄｈｅｒｉｎ) ,在子宫内膜月经周期各阶段都有表达[1 4 ] 。本研究旨在探讨上皮型钙粘附因子 (Ｅ ｃａｄｈｅｒｉｎ)在子宫内膜的表达及其与不孕的关系。一、资料与方法1.研究对象 :本研究病例为第一军医大学南方医院妇产科 1999年门诊病例 ,共 72例 :(1)正常妇女 37例 (正常组 ) ,2 2～ 35岁 ,月经周期规律 ,近 3个月内未服用任何激素类药物。 (2 )不孕妇女 35例 (不孕组 ) ,2 5～ 35岁。按不孕原因分为输卵管性不孕 9例 ,黄体…     

Survivin在早孕小鼠子宫内膜中的表达

目的:探讨Survivin在早孕小鼠子宫内膜中的动态表达及在胚胎着床中的作用。方法:用FQ-PCR及免疫组化方法分别检测未孕及妊娠d2-7各组小鼠子宫内膜Survivin基因和蛋白的表达。结果:FQ-PCR检测妊娠组Survivin mRNA的表达明显高于未孕组(P<0.01),并且随着妊娠天数的增加子宫内膜Survivin mRNA的表达逐渐增加,到孕d6达到高峰,随后下降,但孕d7仍明显高于未孕组(P<0.01)。免疫组化检测Survivin蛋白在子宫内膜的表达规律与FQ-PCR结果一致。结论:早孕小鼠子宫内膜着床期Survivin mRNA和蛋白均高表达,然后下降,提示Survivin可能通过抗细胞凋亡,促细胞增殖和血管形成的作用,参与胚胎着床。     

粘附分子与子宫内膜

总结细胞粘附分子在子宫内膜／蜕膜中的表达、功能及影响因素，探讨细胞粘附分子与不育症、子宫内膜异位症等的关系。发现，一些在多种细胞上表达、本质上属糖蛋白的细胞粘附分子参与子宫内膜细胞分布、细胞间信息交流和相互作用及与内膜网状组织（包括胶原、纤溶酶、基质蛋白等）间相互作用。根据结构与功能，细菌粘附分子分5大类：整合素、钙粘蛋白、免疫球蛋白超家族、CD44、选择素等。其与子宫内膜细胞间信息传递、细菌移行；与细胞外基质粘附及受精、植入、胎盘形成有密切关系。     

穿孔素蛋白及其因在子宫内膜中的表达

探讨穿孔穿孔素蛋白及基因在不同时期子宫内膜中表达的规律，及其在生系统中的作用。方法采用免疫组化与原位杂交技术，观察１０例增殖期、６８例分泌各期、２０例早孕期及４例经经后子宫内膜中穿孔素蛋白的表达及基因阳性细胞的分布特点，表型特征和数量变化规律。结果在各期子宫内膜中，产生穿孔素蛋白细胞位于子 膜间质，此细胞表型特征为ＣＤ５６＾＋淋巴细胞。在各期子宫内膜中表达穿孔素蛋白的阳性细胞数量不同，从增殖期、分     

HOXA10对围着床期子宫内膜接受性的调节

同源框基因(HOX)是属于多基因家族的转录调节基因,其重要功能是调节胚胎发育,近年研究表明,HOXA10与胚胎着床密切相关。正常月经周期中,HOXA10在人类子宫腺细胞和基质细胞均有表达,并且在着床窗口期表达增加。母体HOXA10的正常表达是胚胎着床的条件。HOXA10可能通过直接调节整合素β3的表达、调节前列腺素(PG)系统功能及刺激基质细胞增生等机制,调节子宫内膜接受性。HOXA10受卵巢激素和松弛素调节,HB-EGF和LIF对HOXA10的表达也有调节作用。     

人子宫内膜细胞外基质在月经周期中变化的研究

本实验对人正常子宫内膜细胞外基质随月经周期的变动状况进行了观察，目的是进一步探讨为接受胚泡着床，子宫内膜的准备状态。子宫内膜标本利用ＬＳＡＢ免疫组织化学方法对细胞外基质的Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型胶原蛋白、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白在月经周期中的变化进行了观察。结果显示胶原蛋白、纤维粘连蛋白、层粘连蛋白主要分布在上皮组织的基膜中。胶原蛋白和纤维粘连蛋白总量在分泌早期明显减少。而层粘连蛋白总量在分泌期，特别在分泌中期明显增多。结果表明，细胞外基质随月经周期变化而明显变化。提示子宫内膜细胞外基质的周期变化对胚泡着床可能有着重要的作用。我们认为，细胞外基质是否能伴随月经周期而进行周期性变化是检查是否有正常月经周期的指标之一。本研究对着床、抗着床机理及某些不孕症的治疗将提供新方向。     

细胞间粘附分子-1在小鼠早孕期子宫内膜的表达规律及调节的研究

为研究细胞间粘附分子 1 (ICAM 1 )在孕早期的作用 ,本文观察了孕早期小鼠子宫内膜 ICAM 1蛋白水平的表达规律及细胞因子 L IF、IL 1、GM CSF和 IL 6对孕 d 4子宫内膜 ICAM 1表达的调节。方法 :1 .收集孕 1～ 8d小鼠子宫内膜 ;2 .将孕鼠随机分为实验组和对照组 ,在孕 d2～ 4分别腹腔注射不同的细胞因子或 PBS,d4收集子宫内膜。采用 Western blot方法测定子宫内膜 ICAM 1的蛋白表达水平。结果显示 :ICAM1呈时序性表达 ,孕 d1表达量较低 ,d2开始升高 ,到 d4达高峰 ,此后缓慢下降。L IF、IL1 β、IL 6、GM CSF对子宫内膜 ICAM 1的表达有促进作用。结论 :ICAM 1在围着床期表达水平较高 ,可能参与了胚胎着床。细胞因子 L IF、IL 1、IL 6和 GM CSF对其表达有促进作用。     

mmu-miR-141在早孕小鼠胚胎着床前、后子宫内膜中的表达及作用

目的:探讨mmu-miR-141在早孕小鼠胚胎着床前、后子宫内膜组织中的表达及作用。方法:荧光定量PCR(FQ-PCR)及原位杂交检测早孕小鼠胚胎着床前、后子宫内膜mmu-miR-141的表达;MTT和流式细胞术检测孕第4日(d 4)子宫内膜基质细胞被mmu-miR-141抑制剂作用72 h后其细胞活力和细胞凋亡情况。结果:mmu-miR-141在小鼠胚胎着床后(d 6)子宫内膜组织中的表达明显低于着床前(d 4)(P<0.05),且表达于基质细胞;其表达下调能使基质细胞增殖活力下降(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.01)。结论:mmu-miR-141通过调控子宫内膜基质细胞的增殖或凋亡,在早孕小鼠胚胎着床前、后的子宫内膜组织中发挥重要的作用。