BRCA1、hENT1和Topo1 mRNA水平与新鲜胃癌组织三维培养药物敏感性关系

目的：分析胃癌石蜡组织BRCA1、hENT1、Topo1 mRNA水平与新鲜胃癌组织多西紫杉醇、吉西他滨、伊立替康体外药物敏感性的关系。方法：收集36例经病理确诊的新鲜胃癌标本,采用三维微组织块培养法（HDRA）行三种药物的体外药物敏感试验。实时荧光定量PCR检测对应胃癌石蜡组织中BRCA1、hENT1、To-po1 mRNA水平。结果：新鲜胃癌组织对三种药物的敏感性均与临床特征无明显相关性。对应胃癌石蜡组织中BRCA1、hENT1、Topo1 mRNA水平与临床特征无明显相关性。在胃癌组织中,hENT1 mRNA水平最高,BRCA1 mRNA水平最低。胃癌石蜡组织BRCA1 mRNA水平与新鲜胃癌组织的多西紫杉醇敏感性正相关（7.927 vs 3.464,P=0.001）;hENT1 mRNA水平在吉西他滨敏感组高于耐药组（15.710 vs 10.145,P=0.243）,Topo1 mRNA水平在伊立替康敏感组高于耐药组（10.024 vs 6.038,P=0.124）,但均未达统计学差异。结论：胃癌石蜡组织BRCA1mRNA水平与新鲜胃癌组织对多西紫杉醇的敏感性呈正相关。     

胃癌组织和循环miR-21与胃癌伊立替康敏感性关系的初步研究

背景与目的：肿瘤组织和细胞中的miR-21先后被证实与肿瘤对化疗药物的敏感性有关,高表达miR-21提示肿瘤对多种化疗药物不敏感。外周血蕴含丰富的肿瘤信息,为个体化药物治疗提供了新的检测来源。本研究初步探讨胃癌组织和血浆循环miR-21表达水平与胃癌铂类药物和伊立替康敏感性之间的关系。方法：系统收集35例经病理确诊的新鲜人胃癌标本,采用三维微组织块培养法行两种药物的体外敏感试验;实时荧光定量PCR检测血浆和对应胃癌石蜡组织中miR-21表达水平。结果：血浆miR-21与对应肿瘤组织miR-21呈正相关(rho=0.736, P＜0.001)。血浆miR-21水平与性别、年龄、病理类型、分化程度、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤部位无统计学相关性,但是Ⅱ期和Ⅲ期的miR-21水平较Ⅰ期有偏高的趋势。铂类药物敏感组与耐药组肿瘤组织miR-21相对表达量分别为1.32(95%CI：0.73～1.90)和4.06(95%CI：1.71～6.41),差异无统计学意义(P=0.004);铂类药物敏感组与耐药组血浆miR-21相对表达量分别为5.25(95%CI：0.14～10.64)和5.82(95%,差异无统计学意义CI：2.27～9.37),差异无统计学意义(P=0.19)。伊立替康敏感组与耐药组肿瘤组织miR-21相对表达量分别为1.09(95%CI：0.65～1.54)和4.94(95%CI：2.44～7.44),差异无统计学意义(P<0.001);伊立替康敏感组与耐药组血浆miR-21相对表达量分别为1.86(95%CI：1.08～2.64)和12.42(95%CI：3.14～21.70)差异无统计学意义(P=0.001)。结论：血浆循环miR-21与对应肿瘤组织miR-21水平呈显著正相关,在一定程度上能反映肿瘤组织miR-21的水平。血浆miR-21水平与新鲜胃癌组织对伊立替康的敏感性呈负相关,肿瘤组织miR-21水平与新鲜胃癌组织对伊立替康和铂类药物的敏感性呈负相关。     

胃癌中胸苷酸合成酶与培美曲塞／雷替曲塞敏感性的初步研究

目的 探讨胃癌组织中胸苷酸合成酶（TS）mRNA表达与培美曲塞或雷替曲塞药物敏感性之间的关系。方法 收集50例经病理确诊的新鲜人胃癌标本,采用三维微组织块培养法（HDRA）进行两种药物的体外敏感试验;实时荧光定量PCR检测对应胃癌石蜡组织中TS mRNA水平。结果 新鲜胃癌组织对培美曲塞或雷替曲塞的敏感性以及胃癌石蜡组织中TS mRNA水平均与临床病理特征无明显相关性。培美曲塞敏感组与耐药组的TS mRNA相对表达量分别为6.72 ±1.34和15.39 ± 2.43（P=0.002）;雷替曲塞敏感组与耐药组的TS mRNA相对表达量分别为7.96 ± 1.70和14.14 ± 2.37（P=0.028）。结论 胃癌石蜡组织TS mRNA水平与新鲜胃癌组织对培美曲塞或雷替曲塞的敏感性呈负相关,TS在胃癌应用新型抗叶酸代谢类药物个体化治疗中具有潜在的指导价值。     

抑癌基因高甲基化与胃癌化疗药物敏感相关性的探讨

目的:研究抑癌基因p16、MG-MT、DAPK启动子甲基化与胃癌患者临床病理参数及对化疗药物敏感性的关系。方法:MSP检测38例胃癌组织及相应20例正常胃黏膜组织p16、MGMT、DAPK基因启动子甲基化状况。MTT法检测5-氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)、多柔比星(ADM)、吉西他滨(GEM)、丝裂霉素(MMC)等化疗药物单用及联用对38例原代胃癌细胞的抑制率。并比较p16、MGMT、DAPK甲基化与非甲基化组胃癌对化疗药物的敏感性差异。结果:三基因在胃癌组织中甲基化率均明显高于正常胃黏膜组织,P<0.05。p16甲基化与Lauren分型相关,DAPK甲基化与胃癌TNM分期相关,P值均<0.05。p16甲基化组5-FU、5-FU+DDP+ADM及5-FU+DDP+GEM抑制率高于非甲基化组;DAPK甲基化组MMC抑制率低于非甲基化组,P值均<0.05。结论:抑癌基因启动子高甲基化可能是胃癌发生发展过程中的重要事件。不同抑癌基因发生甲基化对胃癌化疗敏感性影响可能不同。     

三维培养药敏实验测定的胃癌药物敏感性与多药耐药基因蛋白表达的关系

背景与目的：目前胃癌化疗疗效尚不理想,通过预测个体肿瘤对药物的敏感性来指导临床治疗,以提高疗效,早已成为化疗界瞩目的问题。本研究通过三维培养药敏实验测定胃癌的药物敏感性,并通过测定多药耐药基因表达产物水平,分析两者之间的关系。方法：应用三维培养体外药敏实验技术,测定表阿霉素、顺铂、草酸铂、5-FU、泰素帝、伊立替康6种单药和5-FU＋表阿霉素＋顺铂、5-FU＋伊立替康、5-FU＋草酸铂、5-FU＋泰素帝＋顺铂4组联合用药对22例胃癌组织的抑制率,并计算敏感率;应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组化法检测胃癌组织中MDR1、MRP1、ABCG2基因蛋白的表达。结果：单药组中5-FU对胃癌组织的抑制率和敏感率最高,分别为29．8％和50．0％：联合用药组抑制率最高为5-FU＋泰素帝＋顺铂（59．8％）,敏感率最高为5-FU＋表阿霉素＋顺铂（77．3％）;联合用药组抑制率和敏感率均高于单药组（P〈0．05）。胃癌组织中MDR1、MRP1、ABCG2 mRNA的阳性率分别为90．9％、54．5％、77．3％,MDR1、MRP1、ABCG2蛋白的阳性率分别为36．4％、54．5％、36．4％;多药耐药蛋白高表达与胃癌对表阿霉素的耐药有相关性（P〈0．05）。结论：胃癌组织中多药耐药基因MDR1、MRP1、ABCG2蛋白高表达与胃癌组织对表阿霉素的耐药有关。提示这三种耐药基因可能参与介导表阿霉素的耐药。     

c-fos、bcl-2基因表达与肠型、弥漫型胃癌的关系

目的：探讨c-fos、bcl-2基因蛋白表达与肠型、弥漫型胃癌的发生的关系，为胃癌分型、早期诊断提供分子病理学依据。方法：用免疫组织化学方法，检测54例胃癌切除标本c-fos、bcl-2基因蛋白的表达，所有结果均用EXCEL录入计算机、SAS统计软件包分析。结果；在肠型胃癌中c-fos、bcl-2基因蛋白表达高于弥漫型胃癌（P＜0.01）；c-fos、bcl-2基因表达淋巴结转移组高于非转移组（c-fos为63.64%、54.55%；bcl-2为50.00%，27.27％），但无统计学意义；c-fos、bcl-2在癌旁组织、异型增生组织和高分化腺癌中呈强阳性表达。结论：c-fos、bcl-2在肠型和弥漫型胃癌中的不同表达表明两型胃癌的发生机制有所不同，可为胃癌分型提供分子病理学依据；c-fos、bcl-2基因蛋白表达变化发生在肿瘤细胞形态变化之前，可作为胃癌早期诊断的分子病理学指标。     

Survivin、CTNNB1和 hTERT mRNA 水平与胃癌药物敏感度的关系

目的：初步探讨 Survivin、CTNNB1、hTERT 表达与胃癌药物敏感度的关系。方法：采用三维立体组织培养药物反应性试验检测20例胃癌组织多西紫杉醇、异长春花碱、伊立替康和奥沙利铂四种药物的敏感度, RT －PCR 方法检测胃癌组织 Survivin、CTNNB1和 hTERT mRNA 表达水平。结果：异长春花碱、伊立替康和奥沙利铂三种药物最佳检测浓度分别为20μg／ml、80μg／ml 和40μg／ml。CTNNB1 mRNA 表达用于判断多西紫杉醇和异长春花碱敏感度的准确率为70％、Survivin mRNA 表达用于判断奥沙利铂敏感度的准确率为70％。结论：CTNNB1表达水平和多西紫杉醇与异长春花碱敏感度相关,Survivin 表达水平与奥沙利铂敏感度有关。     

XPD基因与胃癌易感性的相关性

背景与目的：DNA修复系统的变异与肿瘤发生密切相关。本研究拟探讨XPD多态性及单倍型与胃癌易感性的关联。方法：提取华北地区207例胃癌患者及212例健康献血者外周血基因组DNA,用扩增阻滞突变系统-聚合酶链反应（amplification refractory mutation system-polymerase chain reaction．ARMS-PCR）和聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP）检测codon3 12和codon 751位点的基因型。结果：codon 312基因型GA、AA病例组分布频率显著高于对照组（P〈0．01．OR=3．41,95％CI：2．06～4．79;P〈0．01,OR=3．47,95％CI：1．39 ～8．68）。codon751多态性在两组间分布差异无统计学意义（P〉0．05）。在单倍型AA（codon 312A-codon 751A）的分析中,病例组中杂合型（-／AA）及纯合型（AA／AA）的分布频率均较对照组明显增高（P〈0．01,OR=2．81,95％CI：1．82～4．34;P=0．02,OR=3．92,95％CI：1．31～11．70）。但其他三种单倍型在两组间的分布差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：XPD基因codon312位点多态性与胃癌易感性明显相关．而单倍型AA（eodon 312A-codon 751A）也是胃癌发生的易感因素。     

食管癌细胞体外培养药敏试验与P-gp、LRP表达的相关性研究

目的 研究不同食管癌患者对药物的敏感性及其与P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药相关蛋白(LRP)的关系,为食管癌的临床化疗提供个体化用药的实验室依据.方法 选取手术切除的新鲜食管癌组织标本,选用食管癌化疗常用的药物及化疗方案进行食管癌原代培养细胞MTT药物敏感试验,同时应用免疫组织化学方法检测食管癌细胞P-gp及LRP的表达情况.结果 单一用药对食管癌细胞的敏感性不同或不完全相同(P＜0.05).联合用药以紫杉醇联合顺铂效果最好,其次为顺铂联合长春瑞滨、顺铂联合5-氟尿嘧啶.顺铂的敏感性与P-gp表达程度无关(P＞0.05),与LRP表达的强弱有关(P＜0.05),长春瑞滨、紫杉醇的敏感性均与P-gp和LRP表达的程度有关(P＜0.05),5-氟尿嘧啶与P-gp、LRP的表达程度无关(P＞0.05).结论 采用食管癌体外药敏试验能筛选出对每个患者的敏感药物,指导肿瘤患者的个体化用药,P-gp和LRP表达与部分化疗药物的耐药存在相关性,可为指导临床个体化用药的选择提供依据.     

增殖细胞核抗原与卵巢癌细胞系化学敏感性的关系

目的探讨增殖细胞核抗原(PCNA)与上皮性卵巢癌细胞系化学敏感性的关系.方法使用顺为铂作用于A2780及AD60细胞株.在MTT法测定耐药倍数基础上,用ABC检测PCNA表达.结果MTT测定MD60的耐药倍数为2.4.A2780 PCNA的表达低于AD60,且随药物浓度的递增染色较耐药组明显变浅.A2780、AD60相同药物浓度作用后PCNA的表达有显著性差异(P＜0.01);同一细胞株不同药物浓度作用后PCNA表达有显著性差异(P＜0.01).结论增殖细胞核抗原表达与上皮性卵巢癌细胞对细胞毒性药物的化学敏感性呈负相关.