人衰老成纤维细胞c-myc原癌基因的损伤修复

目的：观察人衰老成纤维细胞特异因基c-myc的损伤修复。方法；采用Southern杂交法。结果：衰老细胞能有效地修复c－myc基因。结论：衰老细胞能有效地修复对细胞存亡至关重要的基因。     

人衰老成纤维细胞c—fos基因对DNasiⅠ的敏感性分析

研究人衰老成纤维细胞ｃ－ｆｏｓ基因染色质结构状态。ＤＮａｓｅⅠ敏感性分析法。结果衰老胞胞ｃ－ｆｏｓ基因在表皮生长因子诱导后对ＤＮａｓｅⅠ的敏感性无明显变化，而年轻细胞对ＤＮａｓｅⅠ的敏感性显著升高。结论：衰老细胞的ｃ－ｆｏｓ基因可能在异染色质上，和于半闭状态，因而不易为ＥＧＦ所诱导。     

人衰老成纤维细胞c—myc原癌基因的损伤修复

目的；观察人衰老成纤维细胞特异因基ｃ－ｍｙｃ的损伤修复，方法采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交法。结果；衰老细胞能有效地修复ｃ－ｍｙｃ基因。结论；衰老细胞有效地修复对细胞存亡至关重要的基因。     

DNA去甲基化药物研究现状

在肿瘤形成过程中,启动子区异常高甲基化的抑癌基因始终保持沉默、功能丧失,而启动子区去甲基化后抑癌基因则可以重新激活。因此,DNA去甲基化药物可治疗肿瘤。本文阐述了DNA甲基化与肿瘤的关系,以及DNA去甲基化药物的研究现状。     

EGTA,A23187对人成纤维细胞DNA合成的影响

ＥＧＴＡ、Ａ_（２３１８７）对人成纤维细胞ＤＮＡ合成的影响上海第二医科大学附属新华医院（２０００９２）齐凤，刘海林，蒋祖明，李定国，陆汉明钙离子（Ｃａ２＋）在细胞功能活动调控中的重要作用正日益引起广泛重视。迄今为止，大多数研究集中在Ｃａ２＋对神经细胞...     

人衰老成纤维细胞c-fos基因对DNaseⅠ的敏感性分析

目的：研究人衰老成纤维细胞c-fos基因染色质结构状态。方法：DNaseⅠ敏感性分析法。结果：衰老细胞c-fos基因在表皮生长因子（EGF）诱导后对DNaseⅠ的敏感性无明显变化，而年轻细胞对DNaseⅠ的敏感性显著升高。结论：衰老细胞的c-fos基因可能在异染色质上，处于关闭状态，因而不易为EGF所诱导。     

心室成纤维细胞促进新生大鼠心肌细胞肥大的作用

【目的】研究新生大鼠心室成纤维细胞条件培养液促进心肌细胞肥大的作用。【方法】成纤维细胞和心肌细胞培养。【结果】成纤维细胞条件培养液能明显增大心肌细胞的表面积 ,增加心肌细胞的蛋白含量和 [3 H] 亮氨酸 ([3 H] Leu)的掺入 ,上述作用以第 3天的条件培养液作用最强 ,具有剂量依赖性。内皮素A受体 (ETAR)拮抗剂BQ12 3 能部分阻断成纤维细胞条件培养液促进心肌细胞肥大作用 ,而血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )的Ⅰ型受体拮抗剂CV11974和α 肾上腺素受体拮抗剂酚胺唑啉(regitin)却无此效果。百日咳毒素 (PTX)和蛋白激酶C(PKC)抑制剂staurosporine(ST)也能部分阻断成纤维细胞条件培养液促进心肌细胞肥大作用。【结论】成纤维细胞条件培养液 (FCGM)中含有促使心肌细胞肥大的物质 ,这些物质可能是内皮素 1(ET 1)等 ,培养液的促肥大作用可能与PTX敏感的G蛋白及PKC有关。     

Octreotide对人眼球后和皮肤成纤维细胞DNA合成的影响

应用细胞培养技术，观察Ｏｃｔｒｅｏｉｄｅ对人眼球后和皮肤成细胞细胞ＤＮＡ合成功能的影响。结果发现它对两种成纤维细胞的作用表现为双向性：低浓度抑制ＤＮＡ含成，但对球后成纤维细胞的作用无统计学意义；高浓度则促进细胞生长。     

β—胡萝卜素对氧化镍致人肺成纤维细胞DNA损伤作用的影响

目的 探讨β—胡萝卜素对氧化镍致人肺成纤维细胞DNA损伤作用的影响。方法 应用单细胞凝肢电泳技术(single cell gel electrophoresis,SCGE)或称彗星电泳技术(comet assay)比较研究。结果 氧化镍(Ni2O3)可引起人肺成纤维细胞DNA双链断裂损伤，Ni203与β—胡萝卜素共同处理的人肺成纤维细胞的DNA双链损伤较之Ni2O3单独处理组降低(P＜0．01)。结论 氧化镍可引起人肺成纤维细胞DNA双链损伤。β—胡萝卜素可明显降低Ni2O3对人肺成纤维细胞DNA链的损伤作用。SGGE是一种简便、快速、敏感及经济的细胞基因毒性检测方法，可应用于各级水平的环境与人类疾病(镍污染)检测与研究。     

二苯乙烯苷可抑制中波紫外线诱导的人皮肤成纤维细胞光老化

目的: 研究二苯乙烯苷（TSG）对紫外线B（UVB）诱导的人皮肤成纤维细胞（HSF）应激性提早衰老的作用及可能的机制。方法: UVB小剂量、多次照射HSF,每次照射完毕后分别用0.02、0.10、0.50 mmol/L浓度的TSG处理。实验分为6组：空白对照组、模型对照组、UVB+0.02 mmol/L TSG组、UVB+0.10 mmol/L TSG组、UVB+0.50 mmol/L TSG组、TSG对照组。采用细胞计数法（CCK-8）检测细胞增殖活性;细胞化学染色法检测衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）表达;TBA法、WST-1法测定细胞丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性;ELISA法测定细胞上清液中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）的含量变化。结果: 与空白对照组比较,模型对照组细胞增殖活性减弱（P < 0.05）,SA-β-gal染色呈强阳性,细胞裂解液中SOD活性减弱、MDA含量增加,MMP-1浓度升高（P < 0.05或P < 0.01）。与模型对照组比较,UVB+各浓度TSG组细胞增殖活性改善（均P < 0.05）,SA-β-gal染色阳性率下降,细胞裂解液中SOD活性增强、MDA含量减少,MMP-1浓度减小（P < 0.05或P < 0.01）。结论: TSG可以在一定程度上抑制UVB诱导的HSF应激性提早衰老,该作用可能与改善氧化应激、抑制MMP-1高表达有关。     

维拉帕米抑制培养细胞DNA、RNA和蛋白质合成的作用

为探讨钙拮抗剂对细胞大分子物质的代谢影响,本文观察了维拉帕米对人成纤维细胞(2BS)和猴内皮细胞(RF/6A)DNA,RNA和蛋白质合成的作用.维拉帕米抑制2BS细胞DNA和RNA合成的作用为浓度依赖性,ID_(50)分别为12.3和22μg/ml.抑制RF细胞DNA和蛋白质合成的ID_(50)分别为34.4和49.6μg/ml.     

二甲胂酸对人皮肤成纤维细胞DNA的损伤作用及缝隙连接通讯的影响

目的:研究二甲胂酸对人皮肤成纤维细胞DNA的损伤作用及细胞缝隙连接通讯的影响.方法:分别采用单细胞凝胶电泳技术和细胞划痕染料标记示踪技术检测二甲胂酸对人皮肤成纤维细胞DNA的损伤作用及细胞缝隙连接通讯的影响.结果:浓度为0.01～1.0 mmol·L-1的二甲胂酸对人皮肤成纤维细胞的DNA损伤作用较强,出现较多的DNA断裂.1.0 mmol·L-1的二甲胂酸还可明显抑制细胞缝隙连接通讯,提示二甲胂酸可能有促癌活性.结论: 二甲胂酸的遗传毒性较强,同时二甲胂酸可能有促癌活性.     

人线粒体DNA与衰老和退行性疾病的研究进展

人线粒体基因组包括1 500多个基因,分属于线粒体DNA(m tDNA)和核基因组DNA(nDNA)两个部分。除m tDNA自身编码的37个基因外,其余与线粒体结构和功能相关的基因均由nDNA编码。线粒体产生的大量活性氧类(ROS)可致m tDNA突变,继而诱发衰老及许多与衰老相关的疾病,包括神经退行性疾病、心肌病、糖尿病和恶性肿瘤等。     

RR-福莫特罗和rac-福莫特罗对人支气管舒张作用的比较

目的 :比较 RR-福莫特罗和 rac-福莫特罗对人支气管舒张作用。方法 :将内径 2～ 4 mm、长 15 mm的人支气管螺旋条置入持续供氧的浴槽内 ,静息张力为 1g,以蓄积给药法测定 RR-福莫特罗 (10 pmol·L-1～ 3.2 μmol·L-1)和 rac-福莫特罗 (10 pmol·L-1～ 3.2 μmol·L-1)在静息情况下 ,及氨甲酰胆碱 (10 μmol· L-1)或组胺 (10 0μmol·L-1)引起收缩情况下的张力改变。结果 :RR-福莫特罗在静息状况下支气管舒张作用强于 rac-福莫特罗 (P<0 .0 5 )。 RR-福莫特罗和 rac-福莫特罗对抗由氨甲酰胆碱和组胺引起的收缩 ,且 RR-福莫特罗的对抗作用强于rac-福莫特罗 (P<0 .0 5 )。结论 :RR-福莫特罗对人支气管的舒张作用强于 rac-福莫特罗。     

淫羊藿、枸杞子对老年大鼠线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体和ATP合成的影响

目的:研究淫羊藿、枸杞子对老年大鼠线粒体DNA缺失、线粒体呼吸链酶复合体及ATP合成的影响.方法:Wistar系雄性大鼠,幼年大鼠(1月龄)、青年大鼠(4月龄)每组均为12只;老年大鼠(22月龄,31只),随机分为对照组(10只)、淫羊藿组(10只)和枸杞子组(11只).用聚合酶链反应(PCR)、酶动力学和生物发光技术进行检测.结果:淫羊藿、枸杞子可减少老年大鼠心、脑、骨骼肌组织线粒体DNA缺失,提高心、脑线粒体三磷酸腺苷(ATP)的合成和心、骨骼肌线粒体呼吸链复合酶Ⅳ活力及脑线粒体呼吸链复合酶Ⅰ活力;淫羊藿还可提高脑线粒体呼吸链复合酶Ⅳ活力和骨骼肌线粒体ATP的合成.结论:淫羊藿、枸杞子对老年大鼠线粒体DNA的氧化损伤有保护作用.     

氟马西尼逆转惊厥易感大鼠氟西泮耐受性的分子机制

目的:探讨苯二氮类的抗耐受性和用氟马西尼逆转耐受性的受体分子机制.方法:腹腔注射氟西泮2周,产生有氟西泮耐受性而无依赖性的听源性惊厥大鼠模型.一组大鼠于用药第8天,腹腔注射一次氟马西尼(4 mg*kg-1),观察其对耐受性的影响.用竞争性定量RT-PCR测定大鼠脑皮质运动区和海马区的GABAA受体α1、α3、α5、γ2L 和γ2S亚单位mRNA的含量.结果:氟西泮耐受组大鼠皮质运动区的α1亚单位下降24%,α 3下降17%,α5上升33%, γ2L下降35%,γ2S下降45%;海马区的α1下降33%,γ2L下降35%, γ2S下降27%,与对照组比较差异均有显著性.合用氟马西尼组大鼠皮质运动区γ2L亚单位下降33%,γ2S 下降40%,海马区γ 2L下降31%,γ2S下降29%,与对照组比较差异均有显著性;皮质运动区α1、α 3、α5和海马区α1亚单位与氟西泮耐受组不同,差异均无显著性.结论:听源性惊厥大鼠的氟西泮耐受机制与中枢GABAA受体α1、α3、α5、γ2L和γ2S亚单位mRNA含量的适应性改变有关.氟马西尼可逆转氟西泮耐受性,并影响上述亚单位的含量.     

高效抗逆转录病毒治疗的HIV/HBV重叠感染者耐药HBV毒株C区和P区基因序列分析

目的：进一步研究乙肝病毒(HBV)耐高效抗逆转录疗法(HAART)的耐药机制。方法：用HBV—DNA荧光定量试剂盒，定量检测36例HAART治疗的HIV／HBV重叠感染者中HBV—DNA，用HBV—DNAC区和P区引物常规扩增HBV—DNAC区和P区产物，PCR产物纯化后测序，用BLAST软件分析序列，与国际HBV基因库对比。结果：36例HAART治疗的HIV／HBV重叠感染者中，HBV—DNA阳性4例(11．1％)，血清中HBV—DNA拷贝数3例在10^4copies／ml级，1例在10^7copies／ml级。对1例HBV—DNA在10^7copies／ml级标本进行HBVDNAC区和P区序列测定，用BLAST软件与国际基因库对比，结果，C区nt2412位T→C，nt2413位T→C，P区nt741位A→G(YMDD→YVDD)。结论：HAART治疗的HIV／HBV重叠感染者，HBV耐药可能与HBV—DNAC区和P区联合变异有关。