2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷测定α-L-岩藻糖苷酶及性能评价

目的 应用2-氯-4-硝基苯-α-L-岩藻糖苷(CNP-AFU)建立检测α-L-岩藻糖苷酶(AFU)活力的动力学法,用于血清中AFU活性测定.方法 基于动力学反应特点,对缓冲液离子强度、pH值、底物浓度等最佳反应条件及各种实验参数进行研究.用该法在AU400全自动生化分析仪上进行相应的性能分析研究.结果 该法最低检出限为2.5 U/L,线性范围可达250 U/L(r=0.999 4),批内CV＜3%,批间CV＜5%,回收率为101.3%.结论 本法灵敏度高,线性、精密度好,结果准确,且操作简便快速,适用于全自动生化分析仪操作.     

血清α—L—岩藻糖苷酶对肝癌的临床诊断价值

采用比色法对121例原发性肝癌，60例正常献血员，66例脐血，23例正常孕妇和141例其它疾病的患者的血清α-L-岩藻糖香酶水平进行检测。结果脐血、孕妇及肝癌患者血清α-L-岩藻糖鲁酶水平明显高于对照组（P＜0．01）。在121例肝癌血清中，AFP阳性和阴性者血清α-L-岩藻糖普酶分别有75．86％和76．47％阳性。两者联合应用时阳性率为93．4／。认为α-L-岩藻糖苷酶对原发性肝癌有诊断价值，与AFP联用能提高诊断率。     

血清乳酸全自动测定方法的建立

目的建立一种测定血清乳酸的全自动分析方法。方法采用氧化酶法在贝克曼LX20全自动生化分析仪上进行血清乳酸测定结果所建立的氧化酶法全自动血清乳酸测定方法其血清乳酸回收率为98．49％,线性范围可达16．0mmol／L．批内变异系数（CV）1．83％、批间CV2．25％,轻、中度黄疸和溶血标本对血清乳酸的测定无显著干扰,210例健康儿童血清乳酸值为0．56～2．60mmol／L（x^-±2s）。结论采用氧化酶法测定血清乳酸快速、准确、简便、可靠,线性范围宽,适合临床应用。     

等电聚焦电泳检测血清α—L—岩藻糖苷酶同工酶

本文首次应用琼脂糖凝胶等电聚焦电泳检测血清α-L-岩藻糖苷酶同工酶。正常人血清中存在着8条同工酶带,等电点的pH范围在3.6～6.5之间,其表现型可分为低值型和Ⅳ主带型二种。本法的建立为临床开展血清α-L-岩藻苷糖苷酶同工酶研究创造条件。     

新色原底物的合成及α—L岩藻糖苷酶速率检测法

目的 合成α－Ｌ岩藻糖苷酶新色原底物２－氯－４－硝基苯－α－Ｌ－岩藻糖苷，并以此底物为基础建立α－Ｌ－岩藻糖苷酶的速率检测法，方法 以Ｌ－岩藻糖为原料，采用Ｗｅｓｔｐｈａｌ－Ｆｅｉｅｒ合成法制备底物２－氧－４－硝基苯－α－Ｌ岩藻糖苷，研究α－Ｌ－岩藻糖苷酶的新底物２－氯－４－硝基苯－α－Ｌ－岩藻糖苷，首次建立了α－Ｌ岩藻糖苷酶速率检测法。血清α－Ｌ岩藻糖苷酶作用于此底物的最适ｐＨ为４．８，米氏常数     

血清和胸腹水腺苷脱氨酶测定

利用2，4-二氯酚参与的Trinder反应检测体液中腺着脱氨酶（ADA）。该法简便、快速、重复性好、特异性高。酶促反应时间短（10min），线性范围宽（0～100U／L）。批内CV3．0％、批间CV4．3％。127例健康人血清ADA活性X±s为20．5±46U／L。11例结核性胸腹水ADA为77．9±16．6U／L，而11例非结核性胸腹水ADA为23．1±17．0U／L，两组有显著性差异（P＜0．01）。     

新色原底物的合成及α-L岩藻糖苷酶速率检测法

目的合成αＬ岩藻糖苷酶新色原底物２氯４硝基苯αＬ岩藻糖苷,并以此底物为基础建立αＬ岩藻糖苷酶的速率检测法。方法以Ｌ岩藻糖为原料,采用ＷｅｓｔｐｈａｌＦｅｉｅｒ合成法制备底物２氯４硝基苯αＬ岩藻糖苷;研究αＬ岩藻糖苷酶作用于此底物的动力学性质,建立αＬ岩藻糖苷酶速率检测法。结果成功地制备了αＬ岩藻糖苷酶的新底物２氯４硝基苯αＬ岩藻糖苷,首次建立了αＬ岩藻糖苷酶速率检测法。血清αＬ岩藻糖苷酶作用于此底物的最适ｐＨ为４．８,米氏常数为０．２３ｍｍｏｌ／Ｌ,至少在６分钟观测时间内吸光度变化与时间成比例,相当高浓度的抗坏血酸、血红蛋白、胆红素对酶活性测定不产生干扰,与对硝基苯αＬ岩藻糖苷终点法的相关系数为ｒ＝０．９５０１（ｎ＝３２）,批内精密度相对标准差≤２．６％,正常参考值为（２７．１±１２．８）Ｕ／Ｌ（ｘ±２ｓ）。结论以新底物为基础建立的αＬ岩藻糖苷酶速率检测法克服了以往检测法的缺陷,操作简便,适用于各种类型的自动生化分析仪,便于临床应用。     

荧光分光光度法测定血清5—羟色胺的实验研究及临床应用

报告用荧光分光光度法测定血清5-羟色胺（5-HT）含量，并对其影响因素进行了实验探讨。5－HT含量在1702．6nmol／L以下时，标准曲线线性良好（r=0．9991），最低检出限为30．6nmol／L，回收率为98．61％，批内CV为1．92％，批间CV为3．88％．36例健康成人血清5－HT含量为819．0±146．4nmol／L（x±s）。临床应用表明，血清5－HT水平可作为急、慢性精神分裂症鉴别的一个生物学指标，该法较现行的荧光法简便、快速、准确、灵敏、适用于批量作品测定。     

血清α—L— 藻糖苷酶对肝癌的临床诊断价值

采用比色法对１２１例原发性肝癌，６０例正常献血员，６６例脐血，２３例正常孕妇和１４１例其它疾病的患者的血清α－Ｌ－岩藻糖苷酶水平进行检测。结果脐血、孕妇及肝癌患者血清α－Ｌ－岩藻糖苷酶水平明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）。在１２１例肝癌血清中，ＡＦＰ阳性和阴性者血清α－Ｌ－岩藻糖苷酶分别有７５．８６％和７６．４７％阳性。两者联合应用时阳性率为９３．４％。认为α－Ｌ－岩藻糖苷酶对原发性肝癌有诊断价值，     

血清乙醇脱氢酶活性测定及其临床意义

本文建立一种用自动生化分析仪双试剂法检测血清乙醇脱氢酶（ADH）活性的方法。同时对100例肝功正常者与9例原发性肝癌、10例肝硬化、40例肝炎患者测定血清该酶活性。在反应体系中，NAD 和乙醇浓度分别为10．0mmol／L和25．0mmol／L，缓冲液为pH9．00的0．1mol／L甘氨酸-NaOH溶液。ADH对NAD 和乙醇的Km值分别为1．67mmol／L和3．03mmol／L。批内CV为0．7％～5.4％。肝功正常者血清ADH活性为1．4±1．2U／L。原发性肝癌为11．4±2．5U／L，肝硬化为4．6±1．5U／L和肝炎为5．5±1．6U／L。这些患者血清ADH活性显著高于肝功正常者。原发性肝癌患者血清ADH活性显著高于肝硬化和肝炎患者。这种简便、准确、灵敏的测定ADH活性方法可用于临床常规分析。     

108例肝癌患者血清α—L—岩藻糖苷酶检测分析

目的：探讨检测血清α－Ｌ－岩藻糖苷酶对原发性肝癌的诊断意义，方法：应用于ＥＬＩＳＡ法检测了１０８例原发性肝癌和其它肝癌患者血清α－Ｌ－岩藻糖苷酶（ＡＦＵ）水平，结果：原发性肝癌患者血清ＡＦＵ浓度显著高于其它疾病组和对照组（Ｐ〈０．０１）。ＡＦＵ对原发性肝癌的诊断敏感度为７４．１％，特异性为９８．８％，准确度为８８．９％，且ＡＦＵ水平与甲胎蛋白（ＡＦＰ）及肝癌直径大小之间的无相关性，结论：血清ＡＦＵ     

血清芳香基酰胺酶连续监测法测定

报道了血清芳香基酰胺酶的连续监测法。酶促反应最适pH为7．6，用0．1mol／LTris—HCl缓冲液可发挥酶的最大催化活性。线性范围0～400U／L。批内CV1．9％～2．5％，批间CV3．1％～3．8％。121例健康成人血清酶活性为23.8±6．0U/L（x±s），男女性别间无差异（P＞0．05）。临床初步应用表明肝胆疾病时明显升高，特别是肝内外胆道阻塞时升高幅度较大。     

血清α-L-岩藻糖苷酶在妊娠期的活性探讨

目的了解血清α—L-岩藻糖苷酶（AFU）在妊娠中的活性。方法对不同孕期（3月内，3～7月，7月后）孕妇356例、对照组育龄女性87例采集静脉血，快速分离血清，用速率法检测血清AFU值。结果组间比较采用t检验，数据以x^-±s表示。早孕组（3月内）AFU为（20．6±10．1）U／L，与健康对照组比较，差异无统计学意义；中孕组（3～7月）结果为（28．5±12．8）U／L，晚孕组（7月后）结果为（41．8±25．3）U／L，二者与健康对照组比较差异均有统计学意义。结论随着妊娠时间的增加，血清AFU活性也随之升高。     

血清肌红蛋白比浊法测定试剂的评价及其初步临床应用

目的 通过评价肌红蛋白测定试剂的性能,建立一种用全自动生化分析仪检测肌红蛋白的免疫比浊法。 方法 利用标记抗体检测抗原的比浊法原理,进行精密度、线性、回收率、干扰试验。 结果 本法标准曲线y＝7．3635＋0．9739x,r＝0．9997。正常人血清肌红蛋白浓度的批内CV％为0．25％,批CV％为1．49％。心肌梗塞病者的则分别人1．3％与2．23％,回收率为97．1％～104．7％。血清TG＞5．0mmol／L或Hb＞500mg／L对肌红蛋白的检测才有干扰。测定100例健康体检者血清肌红蛋白（SMb）含量为20．7～58．9μg／L。33例急性心肌梗塞（AMI）患者的SMb的含量为542±178μg／L。 结论 该法具有快速、灵敏、简便、准确的优点,对AMI的诊断有较高的应用价值。     

EIA定量检测甲状腺球蛋白抗体和甲状腺微粒体抗体在临床中的应用

目的 探讨酶免疫法定量检测血清抗甲状腺球蛋白抗体（TG—Ab）和抗甲状腺微粒体抗体（TM—Ab）在临床应用价值。方法 采用酶免疫法（EtA）定量检测血清TG—Ab和TM—Ab．并对检测条件、干扰因素、精密度和准确度进行试验探讨。结果 EIA定量测定血清TG—Ab和TM—Ab分别在880IU／ml和665IU／ml以下线性良好．TG—Ab批内和批间CV分别为3．2％和7．1％，TM—Ab批内和批间CV分别为3．9％和7．6％。测得平均回收率为TG—Ab：92．4％、TM—Ab：101．2％．血清标本4℃存放一周内．对测定结果无影响。胆红素、血红蛋白在0．5g／L对测定无干扰．Hb浓度〉0．5g／L对TM-Ab产生正干扰．结论 EIA定量检测能较准确检测血清甲状腺自身抗体水平，操作简便．结果准确．符台临床常规使用要求．对自身免疫性甲状腺疾病的诊断、疗效观察及预后具有临床应用价值。     

血清肿瘤标志物联合检测对原发性肝癌的诊断价值

目的:探讨血清甲胎蛋白、α-L-岩藻糖苷酶、糖类抗原19-9、恶性肿瘤相关物质群对原发性肝癌的诊断价值.方法:对116例原发性肝癌、82例良性肝病和40例正常体检者进行血清甲胎蛋白、α-L岩藻糖苷酶、糖类抗原19-9、恶性肿瘤相关物质群同步测定,并时照.结果:原发性肝癌患者血清甲胎蛋白、α-L-岩藻糖苷酶、糖类抗原19-9、恶性肿瘤相关物质群水平和阳性率均明显高于正常对照组及良性肝病组(P<0.01);联合检测的敏感性和诊断准确性均高于单项检测.结论:联合检测血清甲胎蛋白、α-L-岩藻糖苷酶、糖类抗原19-9、恶性肿瘤相关物质群对原发性肝癌诊断具有重要价值.     

ELISA测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C

目的建立ELISA方法测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C。方法以双抗体夹心ELISA方法测定血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C。结果该方法的线性范围可达100mg／L。参考值范围为：男,1．81±0．73mg／L。女,1．72±0．69mg／L。回收率为：99．1±3．1％。批内和批间分别为：5．8±0．5％、7．3±O．7％。结论该方法操作简便,快速,准确,适于临床常规应用。     

血清α-L-岩藻糖苷酶测定在2型糖尿病合并微血管损伤中的临床意义

目的探讨2型糖尿病患者血清α-L-岩藻糖苷酶与微血管病变的关系。方法将135例2型糖尿病患者分为A、B两组:A组为合并微血管病变者70例;B组为无微血管病变者65例;同时选取80例健康对照者,分别检测各组人群的α-L-岩藻糖苷酶,分析它们在正常人和糖尿病患者之间有何不同。结果糖尿病合并微血管病变组的α-L-岩藻糖苷酶明显高于无微血管病变组(P<0.05);无微血管病变组与健康对照组之间无统计学差异(P>0.05)。结论α-L-岩藻糖苷酶的检测对2型糖尿病患者合并微血管病变的诊疗具有一定价值,可作为2型糖尿病患者微循环障碍的临床观察指标。     

速率法检测血清α-L-岩藻糖苷酶（AFU）改良试剂中添加烷基糖苷的实验性能评价

目的 探讨添加烷基糖苷(alkyl glycosides,APG)改良试剂速率法检测血清α-L-岩藻糖苷酶(α-L-fucosidase,AFU)的实验性能评价。方法 通过优化反应体系,对速率法检测AFU改良试剂的精密度、线性范围、干扰性、结果比对及稳定性进行实验。结果 改良试剂精密度为批内CV低中高值分别为2.10%,1.19%和0.67%;批间CV低中高分别为2.62%,1.90%和1.20%,且两组试剂结果表明差异均有统计学意义(均P<0.01)。线性实验显示方程为Y=1.0045X-0.548 5,相关系数r²=0.999 7,线性范围0～300U/L。干扰实验表明样本中抗坏血酸≤12g/L,胆红素≤550μmol/L,脂血指数≤0.5mg/L,血红蛋白≤3g/L,对改良试剂无干扰。同时与进口试剂比对实验回归方程为Y=0.9978 X+0.085 3,相关性良好(r²=0.999 8)。稳定性实验结果显示改良试剂在2～8℃存放12个月测定结果稳定,CV_低值=1.04%,CV_高值=1.1...     

对吡喃糖氧化酶法测定血清中葡萄糖的评价

目的对毗喃糖氧化酶法测定血清中的葡萄糖进行评价。方法进行方法学评价试验和方法间比较试验。结果检测限为0．039mmol／L,反应进程检测低值血清498s时吸光度趋于稳定,反应吸光度为0．35A;检测高值血清10min时吸光度趋于稳定,反应吸光度为2．0A,批内CV低、中、高值分别为0．70％、0．58％、0．70％,日间CV低、高值分别为2．32％、0．63％,线性范围36．61mmol／L,平均回收率102．7％,血红蛋白14．2g／L以下、总胆红素546．65μmol／L以下、甘油三酯25．78mmol／L以下、维生素C（Vc）100mg／dL以下无显著性干扰,与己糖激酶法相关,Y=0．9906X-0．0412,r=0．9998;与葡萄糖氧化酶法相关,Y=0．9980X-0．0379,r=0．9998,相关良好。结论该法简单、稳定,与己糖激酶法和葡萄糖氧化酶法相关性良好,能较好地抗溶血、黄疸、乳糜、Vc的干扰。