155例肺癌中P53基因突变的研究

目的 探讨Ｐ５３基因突变与人肺癌临床病理特征及预后、复发转移之间的关系。方法 应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检测１５５例原发肺癌手术标本中Ｐ５３基因５－８外显子的突变。结果 非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）中Ｐ５３基因突变率为５３．８％（７８／１４５），小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）为８０％（８／１０）。近一半的临床早期ＮＳＣＬＣ患者有Ｐ５３基因突变（４２．５％），晚期Ｐ５３基因突变率     

肝素酶基因表达与食管癌转移的关系

目的　探讨肝素酶基因表达与食管癌转移的关系。方法　采用逆转录聚合酶链反应技术 ( RT-PCR)检测 5 4例食管癌组织、癌旁组织及正常粘膜中肝素酶基因的表达。结果　有淋巴结转移的食管癌癌组织中肝素酶基因阳性表达率为 90 .5 % ( 19/ 2 1) ,癌旁组织为 6 1.9% ( 13/ 2 1) ,正常粘膜为 0 ( 0 / 2 1)。无淋巴结转移的食管癌癌组织中肝素酶基因阳性表达率为 15 .2 % ( 5 / 33) ,癌旁组织为 6 % ( 2 / 33) ,正常粘膜为 0 ( 0 / 33)。有淋巴结转移的食管癌组织及癌旁组织中肝素酶基因阳性表达率均高于无淋巴结转移者 ,二者相比差异均有显著性 (癌组织 P<0 .0 0 1,癌旁组织 P<0 .0 5 )。结论　肝素酶基因表达可能与食管癌发生转移有关 ,其可能成为预测食管癌转移的指标     

河南食管癌高发区老年与青年食管癌患者P53蛋白和Rb蛋白表达变化

目的　探讨食管癌高发区林州市 (原林县 )老年食管癌患者的分子学变化特征及其意义。　方法　采用免疫组化卵白素 生物素 过氧化物酶复合物 (ABC)法和组织病理学方法 ,分析食管鳞癌组织中P5 3和Rb蛋白的表达状况与病变程度和年龄差异之间的关系。　结果　老年食管癌患者食管癌组织P5 3变化阳性率 (2 7/ 33,82 % )明显高于同一地区青年患者 (10 / 4 3,2 3% ) (P <0 0 0 1)。老年患者Rb变化阳性率亦高于老年组 ,但差异无统计学意义。此外 ,老年患者P5 3和Rb在食管癌组织中的表达具有较高的一致性 (P <0 0 1)。　结论　本研究结果为进一步探讨食管癌高发区河南林州市老年患者食管癌分子发病机制提供了资料。     

河南食管癌高发区食管癌患者iNOS及p53表达的研究

河南省林州市是我国、也是世界上食管癌发病率最高的地区之一 ,有研究认为其发病与亚硝胺及其前体、真菌、某些微量元素缺乏等有关[1] 。ＮＯ可影响肿瘤的生长、分化、转移以及对放化疗的敏感性[2 ] 。诱导型ＮＯＳ(ｉＮＯＳ)是ＮＯ合成的关键酶。ｐ5 3是人类肿瘤中突变率最高的抑癌基因。目前 ,国内外对高发区食管癌的ｉＮＯＳ的表达和ｐ5 3突变关系的研究较少。本文采用免疫组织化学 (ＡＢＣ)法研究了高发区食管癌组织ｉＮＯＳ及ｐ5 3蛋白的表达情况 ,以探讨高发区食管癌的发生、发展的机制。材料和方法一、材料　 73例原发性食管癌手术切…     

P53基因过度表达与食管癌,贲门癌关系的研究

用免疫组化ABC法检测了60例食管癌、贲门癌患者肿瘤组织中的P_(53)基因表达。结果显示,随着肿瘤分化程度降低,P_(53)基因过度表达阳性率增高。故认为P_(53)蛋白可作为判断食管癌、贲门癌恶性程度的敏感、实用指标之一。食管癌、贲门癌中P_(53)基因过度表达与肿瘤TNM分期之间无显著性差异(P>0.05),提示P_(53)基因突变及过度表达不仅可出现在食管癌、贲门癌的晚期,实际上在早期阶段就存在并起作用。     

食管癌患者同步放化疗敏感性与p53基因表达关系研究

目的探究食管癌同步放化疗敏感性与p53基因表达的关系,为预测食管癌的疗效提供一定参考。方法检测选取的63例食管癌患者的外周血白细胞中p53基因m RNA的表达情况。对每位患者给予总量为60~70 Gy的三维适形调强放疗以及2周期同步氟尿嘧啶+顺铂(DF)方案化疗,观察、分析p53基因表达和同步放化疗疗效间的关系。结果p53阳性组24例中CR为7例,PR为12例,SD为3例,PD为2例。p53阴性组39例中CR为20例,PR为16例,SD为3例,PD为0例,阳性组的治疗有效率为76%,明显低于阴性组的92.31%。两组间的疗效差异有统计学意义(P0.05)。结论食管癌患者放、化疗敏感性可将p53基因表达量的检测作为一个参考指标。食管癌外周血的p53基因表达,可反映出癌瘤组织的某些生物学特性,结合p53的表达量,可指导放、化疗方案的科学制定。     

食管癌P21WAF1表达与P53突变的关系

目的探讨P21WAF1和P53基因蛋白表达在食管癌发生发展的作用机制以及它们与食管癌临床病理等特征的关系.方法应用S-P免疫组化方法对144例食管癌病变组织进行了P21WAF1和P53蛋白的定位观察.结果食管癌P21WAF1基因蛋白阳性率仅为39%,且与肿瘤细胞分化及淋巴转移有关;P53蛋白阳性率为65%,也与肿瘤细胞分化及淋巴节转移相关.另外,P21WAF1和P53蛋白的表达在不典型增生组存在明显的相关性.结论p21WAF1和p53基因在食管磷癌发生发展机制中起着重要作用,并且,在食管癌癌前病变之中,p21WAF1基因依赖与p53基因通路.     

河南安阳地区p53基因第72密码子多态性与HPV相关食管癌的研究

目的探讨河南安阳地区p53基因第72密码子多态性与人乳头瘤病毒(HPV)相关食管癌的关系.方法收集安阳肿瘤医院食管癌病例110例,用PCR方法检测HPV,PCR-RFLP方法分析p53基因第72密码子多态性,病例对比研究方法分析在食管癌病例中HPV感染与p53基因第72密码子多态性的关系.结果 PCR检测结果表明,河南安阳地区食管癌组织中HPV检出率为59.1%;HPV阳性者中,Arg/Arg基因型的频率是60.0%,HPV阴性者中仅为17.8%,两者有统计学显著性(P＜0.05).结论 p53基因第72密码子多态性可能是安阳地区HPV相关食管癌的易感因素之一,携带p53Arg/Arg基因型的个体更容易发生HPV相关的食管癌.     

卢戈液染色与P53蛋白检测诊断早期食管癌和癌前病变

目的 探讨内镜下卢戈液染色和活检组织P53检测诊断食管早期癌和癌前病变的可行性。方法 78例可疑早期食管癌患者行内镜下卢戈液染色,对粘膜不染色区活检结果为重度不典型增生细胞者行P53蛋白免疫组化染色,对P53蛋白阳性的病灶行内镜粘膜切除术。结果 在78例患者,共发现25例患者存在31处粘膜不染色区,其中单纯增生上皮1处,轻度异型增生2处,中度异型增生9处,重度异型增生16处,鳞状细胞癌3处。7例P53蛋白表达阳性的重度不典型增生粘膜行内镜粘膜切除术后,1例被证实为粘膜内癌。结论 卢戈液染色和活组织P53蛋白检测不仅对诊断早期食管癌有帮助,而且对选择治疗重度不典型增生病灶行内镜粘膜切除术有指导意义。     

PCNA，P53蛋白与肝癌预后

目的探讨肝癌的个体特异性，影响其预后的因素．方法用抗Ｐ５３和抗ＰＣＮＡ单克隆抗体对２００例手术切除的肝癌标本作免疫组化检测，其中部分标本还进行Ｐ５３ＰＣＲ／ＳＳＣＰ检测，显示５８外显子突变情况．结果ＰＣＮＡ指数与Ｐ５３的表达呈正相关系；术后复发的肿瘤多数表现有ＰＣＮＡ高指数和Ｐ５３表达强阳性．结果还表明：ＰＣＮＡ高指数和Ｐ５３表达强阳性的肿瘤复发后倾向生长快；低指数或低表达者，肿瘤发展也慢，患者能带瘤生存时间长．结论ＰＣＮＡ和Ｐ５３的免疫组化检测方法简单实用，其检出率与ＰＣＲ／ＳＳＣＰ方法相符，能为肝癌患者预后提供有用的参考指标．     

肝细胞癌mdm2基因表达及其与p53基因突变的关系

目的研究ｍｄｍ２基因在原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）中的表达并探讨其与ｐ５３基因突变的关系．方法用银染ＰＣＲＳＳＣＰ法检测ｐ５３基因第５～８外显子的突变,原位杂交检测ｍｄｍ２基因ｍＲＮＡ的表达,ＳＡＢＣ法检测ｍｄｍ２蛋白的表达．结果３９３％（１１／２８）的病例有异常的电泳迁移率．ｐ５３基因突变与肿瘤的大小、分化及转移无关．原位杂交显示９例ＨＣＣ出现ｍｄｍ２基因ｍＲＮＡ增加,７例ＨＣＣ可检测到ｍｄｍ２蛋白表达,ｍｄｍ２基因表达与ＨＣＣ的大小、分化及是否转移无关．Ⅰ～Ⅱ级ＨＣＣ中ｍｄｍ２阳性表达率（１３３％）明显低于Ⅲ～Ⅳ级ＨＣＣ中的阳性表达率（５３８％）．１１例有ｐ５３基因突变的ＨＣＣ中,只有３例出现ｍｄｍ２基因表达,另外６例有ｍｄｍ２过表达的ＨＣＣ未见ｐ５３基因突变．ｐ５３基因突变的ＨＣＣ与ｐ５３基因无突变的ＨＣＣ相比,ｍｄｍ２基因表达阳性率无显著差别．结论ｐ５３基因突变和ｍｄｍ２基因表达在原发性ＨＣＣ的发病中起重要作用．ｍｄｍ２基因表达与ＨＣＣ的恶性程度相关．ｍｄｍ２基因表达与ｐ５３基因是否突变无关．     

人乳头状瘤病毒HPV-E6及P53蛋白与食管鳞癌关系

目的研究人乳头状瘤病毒HPV-E6和p53在食管鳞癌中的表达,以探讨它们在食管鳞癌中发生发展的生物学意义.方法应用LSAB免疫组化方法对16例正常食管粘膜,18例慢性炎症,22例不典型增生以及60例食管鳞癌组织进行HPV-E6和P53蛋白表达的研究.结果在正常食管粘膜、慢性炎症、不典型增生及食管鳞癌中HPV-E6蛋白阳性率分别为37%,39%,50%及73%,P53蛋白阳性率在上述四组中则为0%,6%,41%及63%.四组比较,HPV-E6和P53蛋白表达均有显著差别(P＜0.05).在60例食管鳞癌Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ级分组中,HPV-E6阳性率分别为59%,78%和85%,p53阳性率则分别为45%,67%,80%.三个分级组比较,HPV-E6和P53蛋白表达均有显著差别(P＜0.05). 结论HPV-E6及p53与食管鳞癌的发生发展有着一定相关性,且HPV-E6及p53共同作用很可能更为食管鳞癌发生发展的重要因素.     

p53基因和血清P53抗体表达与原发性肝癌分化程度的关系

约50%人肿瘤有肿瘤抑制基因p53的突变,并且表达异常的P53蛋白,刺激机体产生自身体液免疫,故在血清中可检测到P53抗体.     

食管癌、癌旁组织中P53、MDR-1基因的表达

目的探讨食管癌、癌旁组织中P53、MDR-1基因的表达及相关性。方法选择接受手术治疗的50例食管癌患者的癌组织蜡块,均采用免疫组化ABC法及逆转录酶-聚合酶链反应的方法对食管癌、癌旁组织中P53、MDR-1基因进行检测。结果 P53阳性率在食管鳞癌为68%(34/50),癌旁正常黏膜为54%(27/50),癌旁非典型增生为70%(35/50);食管癌组织中P53的表达与MDR-1的表达有高度相关性;高度分化食管癌组织中MDR-1的表达与中度分化比较差异有统计学意义(P<0.01);中度分化组织中MDR-1的表达与低度分化比较差异有统计学意义(P<0.01);低度分化组织中MDR-1的表达与正常组织比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 MDR-1基因及突变型P53在食管癌、癌旁组织中均呈高水平表达,癌旁组织中MDR有表达,P53基因突变早于组织形态学改变。     

外周血液CEAmRNA基因表达与食管癌微转移关系的研究

目的探讨靶基因CEAmRNA在食管癌患者外周血中的表达及与肿瘤微转移的关系.方法应用巢式-反转录聚合酶链反应(Nested-RT-PCR)检测50例无远处转移、10例有远处转移的食管癌患者,10例食管良性病变和10例健康成人外周血中癌胚抗原CEAmRNA基因的表达.结果食管癌良性病变者和健康成人的外周血中均未检测出CEAmRNA阳性细胞.50例无远处转移、10例有远处转移的食管癌患者外周血中CEAmRNA阳性率分别为30.2%(16/50)、80.0%(8/10),P＜0.01;食管癌Ⅳ期与Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ期者阳性率比较差异有显著性(P均＜0.01),而其他各期之间阳性率比较差异无显著性(P＞0.05);不同程度病理分化者间阳性率比较差异无显著性(P＞0.05).结论食管癌患者临床早期已有癌细胞微转移.应用Nested-RT-PCR检测外周血中CEAmRNA靶基因有助于早期诊断.     

结肠肿瘤PTHrP的表达及其与P53蛋白表达关系的研究

目的 研究ＰＴＨｒＰ在肿瘤发生过程中的作用以及ＰＴＨｒＰ和Ｐ５３在结肠腺中表达的关系。方法 用免疫组织化学ＡＢＣ法对６８例结肠组织（３０例结肠腺癌,２０例腺瘤性息肉,１８例正常结肠组织）进行ＰＴＨｒＰ检测,并对其中３０例结肠腺癌进行Ｐ５３检测。结果 结肠癌组ＰＴＨｒＰ的阳性率明显高于腺瘤组（Ｐ〈０．０５）和正常组（Ｐ〈０．０５）。绫 ＰＴＨｒＰ的过度表达与细胞的恶性 经有关,与肿瘤分化程度无明显关     

Nedaplatin concurrent with three-dimensional conformal radiotherapy for treatment of locally advanced esophageal carcinoma

AIM:To evaluate the efficacy and toxicity of nedaplatin(NDP)concurrent with radiotherapy in the treatment of locally advanced esophageal carcinoma.METHODS:Sixty-eight patients with locally advanced esophageal carcinoma were randomized into either a NDP group(n=34)or a cisplatin(DDP)group(n=34).The NDP group received NDP 80-100 mg/m2iv on day 1+leucovorin(CF)100 mg/m2iv on days 1-5+5-fluorouracil(5-FU)500 mg/m2iv on days 1-5.The DDP group received DDP 30 mg/m2iv on days 1-3+CF 100 mg/m2on days 1-5+5-FU 500 mg/m2iv on days 1-5.The treatment was repeated every 4 wk in both groups.Concurrent radiotherapy[60-66 Gy/(30-33f)/(6-7 wk)]was given during chemotherapy.RESULTS:There was no significant difference in the short-term response rate between the NDP group and DDP group(90.9%vs 81.3%,P=0.528).Although the 1-and 2-year survival rates were higher in the NDP group than in the DDP group(75.8%vs 68.8%,57.6%vs 50.0%),the difference in the overall survival rate was not statistically significant between the two groups(P=0.540).The incidences of nausea,vomiting and nephrotoxicity were significantly lower in the NDP group than in the DDP group(17.6%vs 50.0%,P=0.031;11.8%vs 47.1%,P=0.016;8.8%vs 38.2%,P=0.039).There was no significant difference in the incidence of myelosuppression,radiation-induced esophagitis or radiation-induced pneumonia between the two groups.CONCLUSION:NDP-based concurrent chemoradiotherapy is effective and well-tolerated in patients with locally advanced esophageal carcinoma.NDP-based regimen has comparable efficacy to DDP-based regimen but is associated with lower incidences of gastrointestinal and renal toxicity.     

Difference of gene expression profiles between esophageal carcinoma and its pericancerous epithelium by gene chip

AIM: To study the difference of gene expression between esophageal carcinoma and its pericancerous epithelium and to screen novel associated genes in the early stage of esophageal carcinogenesis by cDNA microarray. METHODS: Total RNA was extracted with the original single step way from esophageal carcinoma, its pericancerous epithelial tissue and normal esophageal epithelium far from the tumor. The cDNA retro-transcribed from equal quantity of mRNA was labeled with Cy5 and Cy3 fluorescence functioning as probes. The mixed probes were hybridized with two pieces of BioDoor 4 096 double dot human whole gene chip. Fluorescence signals were scanned by ScanArray 3 000 laser scanner and farther analyzed by ImaGene 3.0 software with the digital computer. RESULTS: (1) A total of 135 genes were screened out, in which 85 and 50 genes whose the gene expression levels (fluorescence intensity) in esophageal carcinoma were more than 2 times and less than 0.5 times respectively compared with the normal esophageal epithelium. (2) There were also total 31 genes, among then 27 and 4 whose expressions in pericancerous tissue were 2-fold up-regulated and 0.5-fold down-regulated respectively compared with normal esophageal epithelium. (3) There were 13 genes appeared simultaneously in both pericancerous epithelium and esophageal carcinoma, while another 18 genes existed in pericancerous epithelium only. CONCLUSION: With the parallel comparison among these three gene profiles, it was shown that (1). A total of 135 genes, Whose expression difference manifested as fluorescence intensity were more than 2 times between esophageal carcinoma and normal esophageal epithelium, were probably related to the occurrence and development of the esophageal carcinoma. (2). The 31 genes showing expression difference more than 2 times between pericancerous and normal esophageal epithelium might be relate to the promotion of esophageal pericancerosis and its progress. The present study illustrated that by using the gene chip to detect the difference of gene expression profiles might be of benefit to the gene diagnosis, treatment and prevention of esophageal carcinoma.     

胃癌组织中livin与caspase-9、p53的表达及相互关系

目的 研究凋亡蛋白livin和 caspase-9、p53在胃癌组织中的表达及与胃癌生物学行为关系.方法采用免疫组化S-P检测58例胃癌组织及正常胃黏膜中livin和caspase-9、p53的蛋白表达.结果胃癌组织中 livin和caspase-9的、p53蛋白表达阳性率分别为65.5%、20.7%、58.6%,与正常胃黏膜蛋白表达阳性率(分别为3.5%、62.1%、5.2%)比较差异有统计学意义(P＜0.05);livin在组织分化差、淋巴结转移者、临床分期高表达率均增高差异有显著性(P＜0.05);livin表达与caspase-9蛋白表达呈负相关性(rs=-0.195,P＜0.05).livin与p53蛋白表达呈正相关性(rs= 0.851,P＜0.05).结论 livin和caspase-9参与胃癌的发生、发展,可能成为胃癌治疗的新分子靶点.抑癌基因p53的失活与凋亡抑制基因livin在胃癌的发生方面可能有相互促进作用.