阿米福汀对大鼠肺放射性肺损伤保护作用的实验研究

背景与目的:放射性肺损伤是胸部肿瘤放射治疗后的常见并发症,在放射治疗中如何保护肺组织免受或少受放射性损伤显得非常重要。本研究采用阿米福汀作为放射保护剂,探讨其对采用胸壁切线放射治疗技术照射大鼠肺组织放射性损伤的保护作用。方法:将35只雌性Fish-344大白鼠编号后按随机数字法分为常规照射部分和单次照射部分。常规照射部分:20只给予照射5周,总剂量为50 Gy,共25次。随机分为2组,用药照射组10只(随机照射左侧、右侧各5只);对照照射组10只(随机照射左侧、右侧各5只)。单次照射部分:15只右侧胸部切线单次照射20 Gy,随机分为用药照射组5只,对照照射组5只,空白对照组5只。用药照射组照射前30 min内腹腔注射阿米福汀(140 mg/kg),对照照射组用相同剂量照射。采用60Co治疗机,前后野半野对穿照射。照射结束后记录呼吸频率、体质量,尾静脉取血测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β,TGF-β),取大鼠照射侧肺及对照组同侧肺进行TGF-β1免疫组织化学染色。结果:常规照射部分用药照射组在放射后4周呼吸频率达到最高,对照照射组在放射后2周达到最高,差异有统计学意义(P<0.05)。单次照射部分对照照射组升高较用药照射组差异有统计学意义(P<0.05)。常规照射部分及单次照射部分中用药照射组与单纯照射组各段时间内的血清TGF-β1差异无统计学意义(P>0.05)。在常规照射部分,肺组织HE染色和马松染色显示,与正常肺泡壁比较,单纯照射组的肺泡壁明显增厚,其肺泡间质大部分为增生纤维组织和弹力纤维组织。而在照射加药组虽也有肺泡壁增厚和纤维化,但与单纯照射组相比较不甚明显,可见大部分肺泡结构存在,肺泡壁的纤维化增生较单纯照射组减轻。免疫组织化学TGF-β1染色显示正常组织为阴性或弱阳性的表达,单纯照射组的肺组织TGF-β1染色表达多为阳性或中强阳性,照射加药组表达为弱阳性或阳性。在常规照射期间,用药照射组在放疗开始后体质量明显下降,而对照照射组体质量下降不明显,差异有统计学意义(P<0.05),在放疗结束后两组之间的体质量平均值逐渐接近。单次照射部分3组之间体质量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究显示,在单次大剂量照射部分和常规照射部分,阿米福汀可以改善大鼠受到照射后引起的肺部症状,改善了照射后肺部肺泡增生和纤维化程度。但是常规照射中连续应用阿米福汀会带来一定的不良反应,在实际应用中造成了大鼠体质量减轻。     

四氢卟啉锰的放射性肺损伤保护作用的实验研究

目的用大鼠放射性肺损伤模型评价仿SOD化合物四氢卟啉锰(MnTE-2-PyP)的放射性肺损伤保护作用.方法 150～160 g Fish-344雌性大鼠随机进入实验组,用4 MV X射线、单次照射右全肺28 Gy,照射前15～30 min腹腔内注射MnTE-2-PyP 6 mg/kg.治疗后每两周观测呼吸频率和转化生长因子(TGF-β1)水平,在出现明显呼吸困难伴有明显体重下降时终止观察,否则6个月后终止观察.肺组织进行羟脯胺酸含量、TGF-β1蛋白表达和肺纤维化评分等检测.结果在加MnTE-2-PyP者能明显延迟呼吸频率发生改变的时间(延迟3周)和降低呼吸频率改变的幅度(低30%)(P<0.01).在单纯照射组,有3只大鼠在第12～14周出现明显呼吸困难给予终止观察,而在放射加MnTE-2-PyP者仅为1只(14周以后).单纯照射组较之照射加MnTE-2-PyP组,每克湿肺和干肺的羟脯胺酸含量分别为(6.76±0.38) mg/g与(5.20±0.55) mg/g(t=2.35,P<0.05)和(28.80±2.04) mg/g与(24.12±2.40) mg/g(t=2.26,P<0.05);肺组织纤维化评分分别为5.82±0.34与3.60±0.15(P<0.05);在12周的血浆TGF-β1相对含量分别为(3.10±0.50) ng/ml和(1.34±0.63) ng/ml(t=2.41,P=0.029).另外,放射加MnTE-2-PyP组的肺组织TGF-β1蛋白表达也比单纯照射组明显减少.结论 MnTE-2-PyP能增加肺组织对放射性损伤的耐受,可能是一潜在的放射性损伤保护剂.     

阿米福汀对放射性肺损伤保护作用的实验研究

目的用荷瘤和无瘤大鼠的放射性肺损伤模式评价阿米福汀(Amifostine,WR-2721)的放射性肺损伤保护作用.方法选150～160 g的Fisher-344雌性大鼠,在右后胸壁种植R3230AC人乳腺癌细胞株,肿瘤长至直径为1.0～1.5 cm时和无肿瘤大鼠随机进入实验组.用4 MVX射线、剂量DT35 Gy 5分次5 d照射右全肺,每次照射前30 min腹腔内注射Amifostine(150 mg/kg).照射后观测呼吸频率、肿瘤大小和转化生长因子(TGF-β1)水平.当出现呼吸困难伴体重下降时,终止观察,否则在6个月后终止观察.肺组织进行羟脯胺酸和TGF-β1表达等生物学检测.结果治疗后第3 d体重下降明显,照射加Amifostine(15%)和单用Amifostine(11%)与单纯放射(7%)间有明显的差别.肿瘤生长延迟和肿瘤生长情况及因肿瘤肺转移死亡贡献生存率,用药与未用药者相似.无瘤大鼠单纯照射组的平均呼吸频率增加早(第9周开始)、幅度高(125～127次/min),照射加药组在第12周开始,115～118次/min(P<0.001).单纯照射组羟脯胺酸含量明显高于照射加amifostine组(P=0.042)、单用药组和对照组(P<0.01).血浆TGF-β1含量在照射后1～3个月增加、2个月达高峰,单放组的TGF-β1含量[(5.32±1.21) ng/mL]明显高于用药组[(2.80±0.23)     

槲皮素对放射性肺损伤小鼠影响研究

目的：建立放射性肺损伤小鼠模型,研究槲皮素防治小鼠放射性肺损伤的疗效及机制。方法：80只雌性BALB／C小鼠随机分为6组,1）正常对照组8只,虚拟照射前小鼠尾静脉注射100μL生理盐水,30min后虚拟照射,照射后按每周2次经小鼠尾静脉注射生理盐水,每次100μL;2）单纯给药组8只,虚拟照射（加速器不出射束）前小鼠尾静脉注射100μL槲皮素溶液,30min后虚拟照射,照射后按每周（6周内）2次经小鼠尾静脉注射槲皮素溶液,每次100μL;3）单纯照射组16只,单次全胸部照射10Gy;4）照射＋高剂量给药组16只,单次全胸部照射10Gy＋小鼠尾静脉注射槲皮素溶液（4mg／mL）,给药体积为100μL;5）照射＋低剂量给药组16只,单次全胸部照射10Gy＋小鼠尾静脉注射槲皮素溶液（2mg／mL）,给药体积为100ML;6）阿米福汀对照组16只,单次全胸部照射10Gy＋小鼠尾静脉注射阿米福汀（4mg／mL）,给药体积为100μL。分别于照射后1～8周每周取各实验组小鼠双侧肺组织,HE染色观察实验小鼠肺组织炎性病理变化,确定肺泡炎程度。采用免疫组织化学法和蛋白质印迹法观察槲皮素对NF-xB表达的影响。结果：HE染色结果显示,单纯照射组小鼠肺组织出现明显炎症反应,表现为肺出血和充血,大量的慢性炎细胞浸润。小鼠肺泡炎分级,与单纯照射组相比,照射＋高剂量给药组和照射＋低剂量给药组肺泡炎程度明显减轻,P〈0．05;而高低剂量给药组之间,肺泡炎程度差异无统计学意义,P〉0．05,且与阳性对照组（阿米福汀）相比,差异无统计学意义,P〉0．05。免疫组化检测肺组织发现,照射＋高剂量给药组和照射＋低剂量给药组的小鼠肺组织胞核NFxB蛋白表达降低,分别为1．38±0．8和1．32±0．74;胞质Ixb—a蛋白表达升高,分别为1．6±0．14和2．06±0．12,较单纯照射组差异有统计学意义,P〈0．05。蛋白质印迹法检测发现,照射＋高剂量给药组和照射＋低剂量给药组的小鼠肺组织NFxB蛋白水平降低,分别为2．04±0．16和1．89±0．13;Ikb-a蛋白水平升高,分别为0．80±0．15和0．81±0．13,较单纯照射组差异有统计学意义,P〈0．05。结论：槲皮素能够明显改善小鼠放射性肺损伤肺组织的炎性渗出,对放射性肺损伤具有一定的防治作用。这一作用可能与槲皮素抑制了NF—kB蛋白的表达有关。     

双氢青蒿素对早期放射性肺损伤大鼠TNF-α表达的影响

目的:探讨双氢青篙素对早期放射性肺损伤大鼠肺组织及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的动态影响.方法:采用γ射线单次全肺照射15 Gy,建立SD大鼠放射性肺损伤模型.108只同体质量雄性SD大鼠,随机分为1)正常对照组:灌服等体积溶媒;2)单纯照射组:灌服等体积溶媒+全肺单次照射15 Gy;3)照射用药组:灌服双氢青蒿素+全肺单次照射15 Gy.双氢青蒿素和溶媒皆于照前3 d开始灌服持续至照射后15 d.ELSIA法及免疫组化方法检测照射后60 d内血清及肺组织TNF-α表达情况.结果:单纯照射组肺组织炎症渗出及纤维化征象严重.照射15 d,单纯照射组、照射用药组肺组织及血清TNF-α表达依次递增,单纯照射组肺组织TNF-α表达最强,照射用药组介于正常对照组和单纯照射组之间(P＜0.05),照射后30 d,两组差异无统计学意义(P＞0.05).血清TNF-α两组表现为从照射后3 d开始增加,到15 d达到高峰,30 d与正常对照组无差别,照射用药组较单纯照射组明显减少(P＜0.05).结论:双氢青蒿素具有降低早期放射性肺损伤大鼠血清、肺组织TNF-α表达的作用.     

益气活血中药对放射损伤大鼠肺组织TGF-β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

目的:观察小剂量重复照射下不同时相大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的动态变化,以及益气活血中药干预的影响,探讨益气活血中药防治放射性肺损伤的作用及机理.方法:96只Wistar种雌性大鼠随机分为照射加中药组(A组)30只、照射加氨溴索组(B组)30只、单纯照射组(C组)30只、正常对照组(D组)6只.用直线加速器对前3组大鼠右肺进行分次照射(5Gy/次,1次/w,累积剂量为30Gy),于照射开始后第4、6、8、12、26w 5个时间点分别处死3组大鼠各6只,取肺组织切片行TGF-β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维免疫组化检测,观察各组大鼠肺组织不同时相TGF-β1的表达和胶原纤维含量的改变.结果:单纯照射组大鼠肺组织TGF-β1于照射第4w增高,第12w达到高峰;胶原纤维合成在第4w开始,第12w明显增快,至26w达到高峰.中药干预组各时相大鼠肺组织TGF-β1表达及Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维增生程度均明显低于单纯照射组(P<0.05);各时相值与照射加氨溴索组近似,相比无统计学差异(P>0.05).结论:在小剂量重复照射过程中,组织TGF-β1表达与组织胶原纤维合成有明显的同步性,而早期应用益气活血中药可抑制TGF-β1的表达,并减轻早期放射性肺炎的炎症反应和后期放射性肺纤维化的程度,因而对放射性肺损伤具有防治作用.     

当归对小鼠放射性肺损伤过程中TNF-α水平的影响

目的阐明当归对放射性肺损伤过程中TNFα水平的动态影响,寻求预防或治疗放射性肺损伤的有效途径。方法成年雌性C57BL/6小鼠72只,随机分为4个组⑴空白对照组(9只)腹腔注射生理盐水20ml/(kg·d);⑵单纯当归组(9只)腹腔注射25%当归注射液20ml/(kg·d);⑶单纯照射组(27只)全肺单次照射12Gy+腹腔注射生理盐水20ml/(kg·d);⑷照射+当归组(27只)全肺单次照射12Gy+腹腔注射25%当归注射液20ml/(kg·d)。生理盐水和25%当归注射液于照前1周开始注射,直至照射后2周结束。左肺做组织学与免疫组化分析,右肺做总RNA提取及实时定量RTPCR分析。结果空白对照组和单纯当归组免疫组化阳性细胞数相对较低,仅波动在8～17个之间。单纯照射组阳性细胞数较上述两组明显增高(P<0.01),尤以1周后为甚。照射+当归组阳性细胞数则介于两者之间,但仍然显著低于单纯照射组(P<0.01)。单纯照射组TNFαmRNA相对含量与单纯当归组和空白对照组差异均有统计学意义(P<0.01)。照射+当归组TNFαmRNA相对含量较单纯照射组差异无统计学意义(P=0.078),可能与样本数较少有关。结论TNFα在放射性肺损伤发生、发展过程中起重要作用,当归能明显降低该过程中TNFα表达水平,其可能通过调控该细胞因子起辐射防护作用。     

卡托普利通过抑制CCL-2表达缓解大鼠急性放射性肺损伤的机制研究

目的 研究卡托普利对大鼠急性放射性肺损伤的抑制作用及可能机制。方法 将64只雌性Wistar大鼠随机分为对照组、照射组和照射+卡托普利低/高剂量组。除对照组外,其余各组均给予右肺单次20 Gy照射建立大鼠急性放射性肺损伤模型。于第1、2、4、8周处死大鼠HE染色观察大鼠肺组织变化,RT-qPCR、蛋白印迹法分别检测肺组织中CCL-2mRNA水平及蛋白含量,免疫组化检测各组大鼠肺组织中巨噬细胞(CD₆₈)数量。采用单因素方差分析。结果 卡托普利能够减轻急性放射性肺损伤大鼠肺组织炎症反应(P<0.05),抑制单核细胞在损伤肺组织中聚集(P<0.05),降低CCL-2在大鼠肺组织中的含量(P<0.05)。结论 卡托普利可能通过降低CCL-2的表达,从而抑制单核细胞在急性放射性肺损伤大鼠肺组织中的聚集,进而减轻炎症反应。     

放射性肺损伤形成过程中一氧化氮与转化生长因子-β1的协同作用研究

目的:观察一氧化氮(NO)与转化生长因子-β1(TGF-β1)在放射性肺损伤形成过程中的协同作用。方法:实验兔分为对照组和L-NAME组,采用6MVX线对左全肺进行照射,25Gy,1次。将2组动物再各自随机分为3组,分别于照射后1、3和6个月各自处死一组动物,照射前及处死前进行双肺血流同位素扫描及左肺肺泡灌洗。进行灌洗液NO及TGF-β1测定及肺组织病理分期。结果:在照射后1个月,对照组及L-NAME组的NO含量分别为(0.48±0.26)和(0.30±0.11)μmol/L,均明显高于放疗前水平,L-NAME组的升高幅度低于对照组。在照射后1、3和6个月,对照组的TGF-β1含量分别为(0.58±0.15)、(0.30±0.10)和(0.59±0.28)ng/mL,均明显高于放疗前水平,L-NAME组TGF-β1的升高幅度低于对照组。放疗后肺血流呈持续下降趋势。对照组放射性肺炎发生率(5/5)高于L-NAME组(2/5)。结论:NO在放疗早期的明显升高放疗后肺血流的持续下降是放射性肺损伤的发病机制之一;NO与TGF-β1在放射性肺损伤的形成过程中具有协同作用。     

放射性肺损伤小鼠动物模型的建立与鉴定

目的:建立放射性肺损伤小鼠动物模型和有效的定量评价方法.方法:雄性昆明种小鼠36只,随机分作2组,对照组(12只)不做任何处理,照射组(24只)全肺单次照射18 Gy.于照射后2、6和12周,进行小鼠肺部螺旋CT扫描及图像分析,获得小鼠全肺的平均灰度值;采用HE染色法观察肺组织的变化.结果:照射后2、6和12周的CT图像分析表明,与正常对照组相比,照射组CT平均灰度值均上升,照射后2和6周差异有统计学意义,P值分别为0.003、0.006.与对照组相比,照射组小鼠的肺组织在照射后存在明显的病理组织学上的改变,早期以急性炎症为主,表现为肺充血、水肿、肺间质增厚,后期损伤以肺泡间隔的进行性纤维化为特征.结论:小鼠全肺单次照射18 Gy X射线可建立放射性肺损伤小鼠动物模型,用螺旋CT扫描,计算机软件UTHSCSA Image Tool 3.0灰度分析方法可以有效地定量评价早期放射性肺损伤程度.     

视黄酸对急性放射性肺损伤保护作用的实验研究

目的:探讨急性放射性肺损伤大鼠不同时段病理、肺泡灌洗液的变化及视黄酸对其调节作用.方法:健康雄性Wistar大鼠80只随机分为4组:正常对照组(A组)、单纯给药组(B组)、单纯照射组(C组)和照射加给药组(D组),每组20只.C、D两组大鼠行6MV-X线15Gy全胸野照射,B、D两组大鼠给予20mg/(kg*d)视黄酸制剂灌服,于照射后第1、2、4、8周取肺组织作HE和Masson染色、肺泡灌洗液进行细胞计数.结果:HE和Masson染色提示照射后的第1周始肺泡腔有炎性细胞渗出,继之间质水肿,第4及8周出现肺泡腔变小甚至结构破坏,局部实变,肺间质出现胶原纤维.B 组与A组各时间段的病理无明显差别,但D组与C组相比大鼠肺炎和肺水肿减轻,肺组织胶原纤维量减少;肺泡灌洗液的细胞总数C组与A组比各时间段都明显增高(P<0.01),D组与C组比,肺泡灌洗液总数降低,第4、8周差别显著(P<0.05).结论: 大鼠全胸单次15Gy照射后可以建立急性放射性肺损伤动物模型.视黄酸通过减轻放射引起的肺炎、肺水肿及减少胶原纤维而对放射性肺损伤有保护作用,为临床应用其防治放射性肺损伤提供了理论基础.     

MnTBAP对大鼠急性放射性肺损伤保护作用的实验研究

目的:观察锰四(4-苯甲酸)卟啉[MnTBAP]对大鼠急性放射性肺损伤的保护作用。方法:200～230g SD雄性大鼠分为正常对照组、照射损伤组和MnTBAP治疗组。用6 MV X射线、单次照射全肺28Gy,建立大鼠肺损伤模型。损伤组腹腔注射生理盐水(1.5mL/kg),MnTBAP组腹腔注射MnTBAP(10mg/kg)。经1、4、8和12周,采用ELISA法检测血清转化生长因子β1(TGF-β1)水平;肺组织作病理检查和生化检测超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、羟脯氨酸(Hyp)、抗超氧阴离子自由基(ASAR)。结果:病理检查显示,MnTBAP组肺组织损伤程度较损伤组明显减轻;生化检测结果显示,经1～12周,与照射损伤组相比较,MnTBAP治疗后SOD含量显著增加(P值均<0.001),ASAR含量显著增加(P值均<0.001),MDA含量显著减少(1周,P<0.001;4～12周,P值均<0.05),TGF-β1含量显著减少(P值均<0.001),Hyp含量1～4周没有变化,8～12周明显降低(8周,P<0.05;12周,P<0.01)。结论:MnTBAP具有抗氧化清除自由基功能,对放射性肺损伤具有保护作用,可能是潜在的放射性损伤保护剂。     

蛋珍油对家兔放射性食管损伤防治作用的实验研究

目的:用家兔放射性食管损伤的模型来评价中药制剂蛋珍油对放射性食管炎的防治作用.方法:24只雄性家兔按随机抽签法分为单纯照射(R)组、蛋珍油给药(D)组、思密达给药(S)组和正常对照(C)组,每组6只.家兔清醒状态下,用直线加速器对R组、D组和S组家兔全胸部照射,照射剂量单次15Gy,源皮距(SSD)为100cm,照射面积7cm×3cm,照射剂量率200cGy/min.C组未行照射.蛋珍油给药量,7ml/次,思密达药量3g/次.每天分3次经口腔缓慢地给药,连续给药5天后立即统一处死家兔.取材切片,行苏木精一伊红(HE)染色,在光镜下观察食管组织病理学改变,用Western-bloting和RT-PCR技术分别检测IL-8和TGF-β1蛋白及mRNA表达水平.结果:D组家兔食管组织于照射后第5天放射性食管损伤比照射组明显减轻.D组IL-8和TGF-β1蛋白相对含量(0.589±0.053,0.511±0.022)较R组(0.744±0.026,0.686±0.091)明显减弱(P<0.01),与S组(0.547±0.062,0.496±0.066)差异无统计学意义(P>0.05).RT-PCR结果显示,R组的IL-8和TGF-β1mRNA相对含量(0.697±0.076,0.626±0.071)较D组(0.149±0.056,0.162±0.022),S组(0.332±0.081,0.396±0.018)和C组(0.126±0.092,0.108±0.058)差异均有统计学意义(P<0.01),D组IL-8和TGF-β1mRNA相对含量低于S组(P<0.05).结论:成功地复制了放射性食管损伤急性期动物模型,并发现蛋珍油能明显减轻辐射所引起食管损伤的病理改变,抑制放射性食管损伤中IL-8和TGFβ1蛋白表达及mRNA表达,对家兔急性放射性食管炎具有一定防治作用.     

益气活血中药对放射损伤大鼠肺组织TGF-β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

目的：观察小剂量重复照射下不同时相大鼠肺组织转化生长因子-β1（TGF-β1）的表达和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维的动态变化,以及益气活血中药干预的影响,探讨益气活血中药防治放射性肺损伤的作用及机理。方法：96只Wistar种雌性大鼠随机分为照射加中药组（A组）30只、照射加氨溴索组（B组）30只、单纯照射组（C组）30只、正常对照组（D组）6只。用直线加速器对前3组大鼠右肺进行分次照射（5Gy/次,1次/w,累积剂量为30Gy）,于照射开始后第4、6、8、12、26w5个时间点分别处死3组大鼠各6只,取肺组织切片行TGF-β1和Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维免疫组化检测,观察各组大鼠肺组织不同时相TGF-β1的表达和胶原纤维含量的改变。结果：单纯照射组大鼠肺组织TGF-β1于照射第4w增高,第12w达到高峰;胶原纤维合成在第4w开始,第12w明显增快,至26w达到高峰。中药干预组各时相大鼠肺组织TGF-β1表达及Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维增生程度均明显低于单纯照射组（P〈0.05）;各时相值与照射加氨溴索组近似,相比无统计学差异（P〉0.05）。结论：在小剂量重复照射过程中,组织TGF-β1表达与组织胶原纤维合成有明显的同步性,而早期应用益气活血中药可抑制TGF-β1的表达,并减轻早期放射性肺炎的炎症反应和后期放射性肺纤维化的程度,因而对放射性肺损伤具有防治作用。     

热疗对放射性肺损伤保护作用的实验研究

目的:研究热疗对新西兰白兔放射性肺损伤的保护作用.方法:16只雄性实验兔随机分为单纯照射组(对照组)和热疗+照射组(实验组),所有实验兔右肺照射40 GY,实验组照射后1周行热疗,每周2次,共4次热疗.照射后6周和12周分别行胸部CT和SPECT肺灌注显像,12周后进行放射性肺损伤的病理学比较.结果:两组6周和12周时胸部CT比较差异无统计学意义,P>0.05;6周时肺灌注显像两组均未见放射性稀疏;12周时肺灌注显像,两组均见右肺放射性稀疏缺损,实验组右肺与全肺放射性计数比值较对照组高,差异有统计学意义,P<0.05;两组病理学改变差异无统计学意义.结论:热疗可减轻放射性肺损伤的发生程度.     

痰热清注射液经口给药对放射性肺炎大鼠血清细胞因子变化影响的实验研究

目的 观察痰热清和地塞米松联合头孢氨苄经口给药对放射性肺炎大鼠血清细胞因子变化的影响.方法 60只雌性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、痰热清中药治疗组(中药组)和地塞米松联合头孢氨苄西药治疗组(西药组),每组均为15只.用6MV-X线直线加速器对大鼠双肺进行单次照射25 Gy.分别于照射后2、4、6周三个时间点,每组各随机取5只大鼠活体观察和取材.取大鼠腹主动脉血检测细胞因子.取大鼠右上肺组织切片,行HE染色进行光镜观察病理改变. 结果模型组大鼠肺组织于照射后2周出现放射性肺炎改变,第6周时肺间质增厚明显,肺泡腔纤维素渗出.中药组大鼠肺组织放射性肺炎反应相对较轻.模型组大鼠于照射后2周出现血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和白细胞介素-6(IL-6)较空白组明显升高(P＜0.01).中药组大鼠血清TNF-α、TGF -β1和IL-6均较模型组低(P＜0.05),在照射后第6周时较西药组低(P＜0.01) .而血清白细胞介素-1(IL-1)浓度各组间差异无统计学意义(P＞0.05). 结论痰热清可抑制致炎因子和致纤维化因子的表达,作用较地塞米松联合头孢氨苄更为显著,是减轻大鼠放射性肺炎反应的内在基础.     

视黄酸调节EGFR和SP-A表达阻抑放射诱导肺损伤的探讨

目的:探讨视黄酸(RA)对放射性肺损伤模型大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞数和EGFR及肺泡表面活性蛋白A(SP-A)表达的影响.方法:80只Wister大鼠随机分为正常对照组(A组)、单纯给药组(B组)、单纯照射组(C组)和照射加给药组(D组),C、D组大鼠行6 MV X射线15 Gy全胸野照射,B、D组给予20 mg/(kg·d)RA制荆灌服,于照射后第1、2、4和8周行支气管肺泡灌洗及留取肺组织行HE、Masson染色及免疫组化法检测EGFR表达,蛋白质印迹法检测肺组织中SP-A蛋白表达.结果:放射组大鼠全胸单次15 Gy照射后可以建立急性放射性肺损伤动物模型.与D组相比,C组BALF总数升高,肺内炎性渗出增多,胶原纤维增加,EGFR表达增强,以第4、8周最显著(P<0.01),C组各时间段SP-A蛋白表达均明显下降(P<0.001),以第1、8周最明显,第2、4周出现回升.B与C组各时间段相比SP-A蛋白表达差异无统计学意义.D组SP-A蛋白表达与C组比第1、8周差异无统计学意义,第2、4周均高于照射组(P<0.05),但仍低于正常组.结论:RA通过降低炎性细胞渗出,削弱EGFR和促进SP-A表达,预防放射性肺损伤的发生、发展.     

参芎注射液防治胸部肿瘤放疗导致放射性肺损伤的实验研究

  目的   本文利用慢病毒介导的RNA干扰，在结直肠癌裸鼠皮下移植瘤模型中研究信号素4D（Sema4D）对血管新生的影响。   方法   选取体重200±14g成年雄性大鼠105只，分为7组，即正常对照组（N），单独给药组（D），单独照射组（Z），照射10 Gy+给药组（Z10），照射15 Gy+给药组（Z15），照射20 Gy+晚期给药组（照射后4周给药，Z20a），照射20 Gy+早期给药组（照射同时给药，Z20b）。所有药物均经腹腔注射。分别于照射后2、4、6、8、10 W处死大鼠，取血清，应用ELISA法检测TNF-α和TGF-β1，取肺组织制成石蜡切片，HE染色观察病理变化。   结果   单纯照射组血清TNF-α和TGF-β1值明显高于其他各组（P＜0.01），照射加给药组血浆TNF-α和TGF-β1值高于对照组及单独给药组（P>0.05）；各照射加给药组之间TNF-α和TGF-β 1值差异无统计学意义（P>0.05）；大鼠单独照射组，照射2 W后，可见肺脏体积增大，充血水肿，照射后4周，肉眼见肺表面较多点状出血；而给药组肺表面出血点明显减少；参芎组肺组织炎症变化明显好于单独照射组；照射20 Gy大鼠4周后开始给药略好于单独照射组，但差异无统计学意义（P>0.05）；照射4~6周时单纯照射组有大鼠死亡；照射8~10周部分大鼠出现胸腔积液。   结论   参芎注射液能预防放射性肺损伤的发生，机理可能与该药物能降低血浆TNF-α和TGF-β1值有关；发生放射性肺炎后给药能减缓症状，但不能逆转放射性肺炎的病理变化。      

大鼠放射性肺损伤模型的动态病理学观察

目的:建立放射性肺损伤大鼠模型,动态观察放射性肺损伤的病理学变化.方法:采用6 MV X射线单次30 Gy照射,建立大鼠半胸放射性肺损伤动物模型,完全随机分为正常对照组1组、照射组5组(每组5只).在照射后第1、7、14、28和56天处死1只正常对照组大鼠和1组照射组大鼠,行电镜、HE染色比较观察各组肺组织病理学变化.正常对照组及照射后第1天组大鼠部分肺组织行凋亡指数测定.结果:放射性肺损伤的病理变化过程大致经过急性炎症、增生和纤维化3个时期.电镜观察各个时间点均可见凋亡的Ⅱ型肺泡上皮细胞.照射后第1天的细胞凋亡指数明显高于正常对照组,差异有统计学意义,P<0.001.结论:放射性肺损伤的病理改变是一个动态发展的过程,Ⅱ型肺泡上皮细胞凋亡在放射性肺损伤的发生、发展中可能发挥了重要的作用.     

α1胸腺肽减轻放射性肺损伤

背景与目的放射性肺损伤是限制肺癌放疗疗效提高的主要因素之一,胸腺肽与放疗同时使用是否会加重放射性肺损伤尚不明确。本研究旨在用小鼠的放射性肺损伤模式评价α1胸腺肽对放射性肺损伤的影响。方法 33只雌性C57BL/6J鼠,体重19g左右,分为正常空白对照(C)组、单纯照射(RT)组、α1胸腺肽加照射(T+RT)组。用小鼠死亡比例、体重、胸水、肺系数、肺泡灌洗液蛋白含量和细胞计数、肺泡壁肿胀和细胞浸润及肺纤维化积分作为观察指标来评价三组间的差异。结果 T+RT组与RT组小鼠死亡比例分别为3/14、2/10,死亡时间均为23周-24周。第24周时解剖发现RT组有一侧大量胸腔积液,一侧中等量积液,T+RT组未见明显胸腔积液。T+RT组肺系数、肺泡灌洗液蛋白含量和细胞总数、中性粒细胞计数均在第8周低于RT组,但巨噬细胞数第8周时T+RT组高于RT组。第24周T+RT组肺系数、肺泡灌洗液蛋白含量和细胞总数、中性粒细胞数、肺泡壁肿胀和细胞浸润及肺纤维化积分均明显低于RT组。C组肺泡灌洗液蛋白含量和细胞总数、肺泡壁肿胀与炎性细胞浸润均较低,未发生明显肺纤维化。结论α1胸腺肽可能具有一定的防治放射性肺损伤的作用。