肿瘤细胞裂解物致敏树突状细胞对小鼠乳腺癌作用的研究

目的观察肿瘤细胞裂解物致敏树突状细胞 (DC)对小鼠乳腺癌的治疗作用。方法无菌取小鼠骨髓细胞 ,在体外培养条件下经细胞因子作用诱导为树突状细胞 (DC) ,用EMT6肿瘤抗原裂解物冲击致敏DC细胞 ,检测DC体外刺激活化淋巴细胞作用 ,以及经DC免疫产生的细胞毒T淋巴细胞 (CTL)体外杀伤肿瘤细胞的活性 ,观察致敏DC免疫对小鼠乳腺癌模型的治疗作用。结果镜下可见抗原致敏后的DC可吸引淋巴细胞聚集成团 ;致敏DC诱导生成的特异性CTL在体外对肿瘤细胞可产生杀伤作用 (与PBS对照组比较 ,P =0 .0 2 7) ,而未成熟DC细胞组和肿瘤抗原组与PBS对照组间无显著性差异 (P =0 .17,P =0 .0 72 ) ;经致敏DC注射免疫后 ,小鼠负荷肿瘤得到抑制 (与PBS对照组比较 ,P =0 .0 3 5 ) ,而单纯肿瘤抗原及未致敏DC免疫组与PBS对照组间无显著性差异 (P =0 .2 6,P =0 .11)。结论肿瘤抗原裂解物致敏的DC可有效递呈抗原并诱导淋巴细胞杀伤肿瘤细胞。     

自体肿瘤组织致敏的树突状细胞瘤苗治疗肝癌的临床观察

目的 探讨自体肿瘤组织致敏的树突状细胞瘤苗治疗肝癌的可行性和安全性.方法 培养12例肝细胞癌患者外周血单核细胞来源的树突状细胞,以自体肿瘤组织裂解物致敏并诱导成熟制备成树突状细胞瘤苗用于肝癌患者的治疗并进行临床观察.12例患者共进行了41次瘤苗治疗.结果 90ml外周血诱导出树突状细胞的数量为1.69×107(1.69×107 ±9.44×106),63.41%(26/41)人次瘤苗注射后出现迟发性超敏反应,未发生严重的不良反应.平均随访9个月,在已有肝癌复发转移的4例患者中,1例稳定时间已达17个月,3例肝癌仍有进展,8例行肝癌根治切除术后应用瘤苗进行治疗的患者6例无复发转移征象,2例在治疗期间发现肝内复发进展.结论 自体肿瘤组织致敏的树突状细胞瘤苗可激发肝癌患者的免疫反应,安全可行,无不良反应,可应用于肝癌患者的临床治疗.     

MAGE-1多肽负载树突状细胞对人肝癌细胞的体外杀伤作用

目的:应用黑色素瘤基因(MAGE-1)多肽负载的树突状细胞(DC)在体外诱导出高度特异性的抗肝癌免疫应答。方法:分离肝细胞肝癌患者外周血单个核细胞;GM-CSF、IL-4、TNF-α联合培养获得DC;MAGE-1多肽负载DC激活自体T淋巴细胞,使之增殖、分化为细胞毒T细胞(CTL);用MTT法检测CTL对BEL-7402HCC细胞的杀伤作用。结果:MAGE-1多肽负载DC激活的T淋巴细胞对BEL-7402HCC细胞有明显的体外杀伤作用,而无关抗原和无抗原负载的DC活化的淋巴细胞无明显杀伤作用(P<0.01)。结论:MAGE-1多肽负载的HCC患者外周血DC在体外可诱导出高度特异性的抗肿瘤免疫应答,提示MAGE-1基因可作为免疫治疗HCC的攻击靶点,MAGE-1多肽负载的DC疫苗在HCC的治疗中起重要作用。     

负载肝癌抗原的树突状细胞瘤苗抑制肿瘤作用研究

树突状细胞(dendritic cell,DC)是具有最强抗原提呈功能的专职细胞(antigen-presenting cell,APC),其在体内的数量较少,但抗原提呈能力远强于巨噬细胞、β细胞等其他APC.     

负载肝癌抗原的树突状细胞瘤苗抑制肿瘤作用研究

树突状细胞(dendritic cell,DC)是具有最强抗原提呈功能的专职细胞(antigen-presenting cell,APC),其在体内的数量较少,但抗原提呈能力远强于巨噬细胞、β细胞等其他APC.     

负载肝癌抗原的树突状细胞瘤苗抑制肿瘤作用研究

树突状细胞(dendritic cell,DC)是具有最强抗原提呈功能的专职细胞(antigen-presenting cell,APC),其在体内的数量较少,但抗原提呈能力远强于巨噬细胞、β细胞等其他APC.     

负载肝癌抗原的树突状细胞瘤苗抑制肿瘤作用研究

树突状细胞(dendritic cell,DC)是具有最强抗原提呈功能的专职细胞(antigen-presenting cell,APC),其在体内的数量较少,但抗原提呈能力远强于巨噬细胞、β细胞等其他APC.     

负载肝癌抗原的树突状细胞瘤苗抑制肿瘤作用研究

树突状细胞(dendritic cell,DC)是具有最强抗原提呈功能的专职细胞(antigen-presenting cell,APC),其在体内的数量较少,但抗原提呈能力远强于巨噬细胞、β细胞等其他APC.     

负载肝癌抗原的树突状细胞瘤苗抑制肿瘤作用研究

树突状细胞(dendritic cell,DC)是具有最强抗原提呈功能的专职细胞(antigen-presenting cell,APC),其在体内的数量较少,但抗原提呈能力远强于巨噬细胞、β细胞等其他APC.     

负载肝癌抗原的树突状细胞瘤苗抑制肿瘤作用研究

树突状细胞(dendritic cell,DC)是具有最强抗原提呈功能的专职细胞(antigen-presenting cell,APC),其在体内的数量较少,但抗原提呈能力远强于巨噬细胞、β细胞等其他APC.     

白血病树突状细胞体外培养影响因素的研究

白血病来源的树突状细胞（dendritic cell,DC）与正常的树突状细胞相比,其表面分子表达相似,但是抗原呈递功能相对较弱。接种于人体后尚不能产生足够的免疫反应,因此如何让DC具有其应有的成熟功能而让其更好的在临床治疗中发挥作用,是临床治疗前首要解决的问题。这也是目前免疫治疗领域研究的热点之一。本文就白血病树突状细胞新近研究的体外培养方法,影响因素以及存在的问题做一综述。     

Dendritic cell fusion vaccines for cancer immunotherapy

The use of tumour vaccines is being explored as a means of generating effective antitumour immune responses in patients with cancer. Dendritic cells (DCs) are the most potent antigen-presenting cells that are essential for initiating primary immune responses. As such, DCs are being studied as a p-latform for the design of cancer vaccines. DCs loaded with tumour antigens or whole tumour cell derivatives stimulate tumour-specific immunity. A p-romising vaccine strategy involves the fusion of DCs with whole tumour cells. DC/tumour fusions express a broad array of tumour antigens, including those yet to be identified, in the context of DC-mediated costimulation. An-imal models have demonstrated that vaccination with fusion cells is p-rotective against tumour challenge and results in the regression of es-tablished metastatic disease. In vitro human studies have demonstrated that DC/tumour fusions potently stimulate antitumour immunity and lysis of autologous tumour cells. Vaccination of cancer patients with DC/tumour fusions is being studied in Phase I/II clinical trials. Preliminary results demonstrate that generation of a vaccine is feasible and that vaccination is associated with minimal toxicity. Immunological and clinical responses have been found in a subset of patients.     

60例小细胞肺癌的CT表现

目的：分析小细胞肺癌（small cell lung cancer,SCLC）的CT表现特点,以提高对该病的认识。方法：收集有CT和临床资料并经病理证实的SCLC 60例,回顾性总结分析CT影像特征。结果：中央型肺癌47例,CT表现为肺门分叶状结节或肿块,伴阻塞性肺炎11例（23.4%）,阻塞性肺不张5例（10.6%）,42例（89.4%）伴有纵隔淋巴结肿大,36例行CT增强,其中32例肿块和淋巴结均匀强化。13周围型SCLC中,9例肿大的肺门、纵隔淋巴结较肺内肿瘤大。结论：SCLC CT主要征象以肺门区实性肿块为主,多伴有肺门、纵隔淋巴结转移,支气管阻塞征象出现较晚。     

用携有存活蛋白基因的重组腺病毒载体转染树突状细胞诱导细胞毒T细胞抗淋巴瘤免疫效应

本研究探讨转染survivin（SVV）基因的树突状细胞（DC）体外诱导特异性抗淋巴瘤的免疫效应。对人外周血DC进行诱导培养,以Ad-SVV转染DC,用Westernblot鉴定Survivin的表达,用乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测细胞毒性T淋巴细胞（CTL）反应,用混合淋巴细胞反应（MLR）测定DC刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力,以ELISA法检测上清中的细胞因子IL-12含量。结果表明：在MLR中,刺激应答比（S/R）为1∶5、1∶10、1∶50和1∶100时,转染Ad-SVV的DC有较强刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力;转染Ad-SVV的DC组所诱发的CTL活性明显高于对照DC组;转染病毒后第2天,转染Ad-SVV的DC组的IL-12分泌水平高于对照DC组。结论：含存活蛋白基因的DC能够在体外诱导特异性CTL效应,对CA46细胞有明显的杀伤作用。     

树突状细胞外泌体免疫作用机制的初步研究

为了研究外泌体（exosome）作为肿瘤疫苗刺激免疫应答作用的机制，从正常人外周血单个核细胞诱导树突状细胞（DC）制备负载肿瘤抗原的DC外泌体（Dex），研究其在DC有无或DC成熟状态不同的情况下刺激T细胞增殖的能力；通过实验阻断DC外泌体上一些分子（CD11a、CD11b、CD11c、CD54、MFG-E8及CD83）后检测外泌体免疫学功能的改变；采用共聚焦显微镜检测DC对外泌体的吞噬作用，用流式细胞仪检测阻断外泌体表面分子对DC吞噬外泌体作用的影响。结果表明：在无DC存在或未成熟DC存在的情况下未成熟DC外泌体（imDex）和成熟DC外泌体（mDex）均不能有效地激活T细胞；不同的促成熟因子（LPS、TNF-α、CpG、CD40L）诱导成熟的DC所分泌的外泌体在数量上无明显差别，但在功能上有显著差异；Dex表面分子CD11a、CD11b、CD11c、CD54、MFG-E8及CD83与其功能有关，阻断这些分子均能不同程度地抑制Dex对T细胞刺激的作用；共聚焦显微镜和流式细胞仪检测表明阻断CD11a、cD54抑制了Dex靶向DC及被DC吞噬。结论：外泌体可以通过其表面分子靶向DC进而引起T细胞免疫应答。     

Cytokine Adjuvanation of Therapeutic Anti‐tumor Immunity Targeted to Cancer Mucosa Antigens

Colorectal cancer immunotherapy is limited by the paucity of available target antigens fulfilling the necessary criteria of tumor‐specificity, sufficient immunogenicity and universal association with disease. A novel class of immune targets, cancer mucosa antigens (CMAs), whose expression normally is confined to mucosae but maintained during neoplastic transformation, promises to overcome these imitations, enjoying the advantage of immune compartmentalization, preventing autoimmune disease, while permitting therapeutic anti‐tumor responses. Indeed, therapeutic immunization against the model CMA guanylyl cyclase c (GCC) extends survival in mouse models of established parenchymal colorectal cancer metastases with antitumor efficacy superior to currently available antigens. Here adjuvanation of therapeutic antitumor immunity to GCC was explored employing the cytokines IL‐2 and GM‐CSF in a mouse model of metastatic colorectal cancer. Combining plasmids expressing murine IL‐2 or GM‐CSF with recombinant viral vector immunization to GCC enhanced antitumor efficacy beyond viral vector immunization alone. These studies support the incorporation of IL‐2 and GM‐CSF in CMA‐targeted immunization regimens for established colorectal cancer metastases.     

宫颈永生化细胞和癌细胞的亚细胞蛋白质组学初步研究

目的通过蛋白质双向凝胶电泳方法（2-DE）建立人类乳头状瘤病毒．16阳性的宫颈上皮永生化细胞（H8细胞株）和宫颈癌细胞（Caski细胞株）亚细胞（细胞质、细胞膜、细胞核）蛋白电泳图谱,进行差异蛋白质组学研究筛选差异蛋白点。方法分别对H8和Caski细胞提取细胞质、细胞膜和细胞核蛋白,通过2-DE筛选出差异点进行基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱（MALDI-TOF-MS／MS）分析。结果对H8细胞和Caski细胞亚细胞蛋白双向电泳图谱比较,初步比较筛选了6种细胞质差异蛋白点、3种细胞膜差异蛋白点和9种细胞核差异蛋白点。结论通过对HPV-16阳性的宫颈癌前和癌变的亚细胞结构差异蛋白进行分析,为寻找宫颈癌特异性肿瘤标志物和靶向治疗提供实验依据。     

Ⅲ期非小细胞肺癌放化疗综合治疗的疗效分析

目的:分析比较放化疗综合治疗Ⅲ期非小细胞肺癌的临床疗效。材料与方法:52例Ⅲ期非小细胞肺癌纳入分析,治疗分综合放化疗组29例和放疗组23例,放疗采用常规方式,综合治疗采用以顺铂为主联合化疗方案。结果:化放疗组有效率(CR PR)为76.4%显著优于单放组52.1%(P=0.02),放化疗组中位生存期17个月较单放组10个月有提高,化放疗1、2、3年生存率分别为65.9%、28.5%、25.6%,较显著优于单放组46.0%、20.5%、8.7%(P<0.05)化放疗骨髓抑制显著高于单放组(P<0.05)。结论:放化疗综合治疗对Ⅲ期非小细胞肺癌有效,可提高生存率,不良反应可耐受。