海洛因成瘾易感性与腹侧被盖区多巴胺D2受体及多巴胺转运体的关系

目的建立大鼠海洛因成瘾易感性差异模型,探讨其可能的腹侧被盖区(VTA)D2受体(D2R)及多巴胺转运体(DAT)机制。方法 130只雄性SD大鼠随机分为海洛因成瘾组(n=100)和对照组(n=30)接受7d的条件性位置偏爱(CPP)训练和2d的测评,期间两组分别给予海洛因和生理盐水注射处理。此后,成瘾组根据海洛因诱导的CPP强度挑选出高CPP组(n=30)和低CPP组(n=30)。各组大鼠再随机分为5组,在接受末次处理后分别于成瘾期、戒断第1、3、7、14天检测VTA区D2R和DAT的蛋白表达,蛋白检测采用免疫组织化学法。结果与对照组相比,高CPP组和低CPP组大鼠在成瘾期VTA区D2R和DAT蛋白表达均下降(P0.05);戒断后第1、3、7、14天D2R及戒断第1、3天DAT仍低于对照组(P0.05),而戒断第7、14天高、低CPP组分别与对照组的DAT差异均已无统计学意义(P0.05);在所有检测时点,高CPP组VTA区D2R下调均比低CPP组大鼠更为明显(P0.05),而两组的DAT表达差异均无统计学意义(P0.05)。结论海洛因慢性处理可诱导大鼠VTA区D2R和DAT下调;而海洛因成瘾易感性可能与VTA区低D2R有关,但未见与DAT相关。     

四氢原小檗碱对吗啡依赖大鼠脑内相关核团多巴胺D1、D2受体基因表达的影响

目的 研究吗啡依赖对大鼠中脑边缘多巴胺(DA)系统内相关核团DA受体的影响及四氢原小檗碱(THPB)对其的效应。方法 将30只SD大鼠随机分为5组,每组6只。正常对照组始终给予等量生理盐水腹腔注射,4组建立吗啡依赖模型。以5 mg/kg开始腹腔注射,2次/d,每次递增5 mg,一直增至第10天每次50 mg/kg;第11天起对其中的两组分别注射生理盐水12 d(Mor NS12组)和30 d(Mor NS30组),另两组分别注射30 mg/kg THPB 12 d(Mor THPB 12组)和30 d(Mor THPB 30组)。分别测定中脑腹侧被盖区(VTA)等脑结构酪氨酸单氧化酶(TM)免疫阳性神经元的平均吸光度(A)值、D1R mRNA和D2R mRNA水平。结果 与正常对照组相比,Mor NS组大鼠VTA的TM表达持续增高(P<0.01)。治疗12 d时,Mor NS12组D1R mRNA在伏隔核、杏仁核、尾壳核、前额叶皮质的含量和D3R mRNA在VTA、尾壳核、伏隔核的含量均低于正常对照组(P<0.01),而Mor THPB12组在伏隔核、杏仁核、尾壳核的D1R mRNA含量和VTA、尾壳核的D2R mRNA的含量与正常对照组的差异无显著性。治疗30 d时,Mor NS30组D1R mRNA(除杏仁核外)和D2R mRNA在各脑区的含量仍低于正常对照组(P<0.01);而Mor THPB30组D1R mRNA除前额叶皮质外的含量和D2R mRNA的含量已至正常水平。结论 THPB能抑制阿片依赖状态下VTA的TM免疫     

伏隔核毁损对药物和应激诱导大鼠吗啡觅药行为重建的影响

目的 分析伏隔核(nucleus accumbens，NAc)在药物和应激诱导大鼠吗啡觅药行为中的作用，研究定向毁损NAc对大鼠成瘾行为重建的影响。方法 雄性SD大鼠通过吗啡强化形成条件性位置偏爱(conditioned place preference，CPP)后，使用直流电毁损NAc。15天后给予皮下注射吗啡或间断足击应激诱导CPP，测量并比较毁损组与对照组的CPP得分。结果 无论在注射吗啡诱导还是在间断足击应激诱导中，NAc毁损组的CPP得分均显著低于对照组。结论 NAc毁损能阻断注射吗啡和间断足击应激诱导戒断大鼠重建觅药行为。     

深部电刺激伏隔核对吗啡成瘾大鼠复吸后伏隔核内γ-氨基丁酸含量变化的影响

目的研究深部电刺激(deep brain stimulation,DBS)双侧伏隔核对吗啡成瘾大鼠复吸后伏隔核内γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric Acid,GABA)含量的影响。方法手术前使用条件性位置偏爱试验(conditionedplace preference,CPP)筛选无自然偏爱大鼠,随机分组后DBS组行电极植入术,术后10天采用固定剂量吗啡皮下注射(10mg.Kg-1)建立吗啡成瘾大鼠模型(使用CPP证实)。通过改进的DBS电路进行电刺激(频率130Hz,电流300uA,电压1V,1h.d-1),在不同的时间点使用CPP证实DBS组大鼠戒断成功后再皮下给予小剂量吗啡(3mg.Kg-1),24h后使用CPP验证吗啡成瘾大鼠复吸模型建立成功。CPP试验结束后于冰台上按大鼠脑立体定位图谱取伏隔核行高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定GABA含量。结果①皮下注射固定剂量吗啡能够使大鼠成瘾,DBS能够有效抑制吗啡复吸行为;②morphine+DBS组大鼠伏隔核内GABA含量与吗啡组,morphine+sham组差异明显。结论 DBS双侧伏隔核使吗啡成瘾大鼠复吸后伏隔核内GABA含量增加。     

高频电刺激伏隔核对吗啡诱导大鼠条件性位置偏爱行为的影响

目的研究高频电刺激伏隔核(nucleus accumbens,NAc)对吗啡诱导戒断大鼠觅药行为的影响,分析NAc在大鼠成瘾行为中的作用。方法26只雄性SD大鼠通过吗啡强化形成条件性位置偏爱后,13只予以120Hz高频电刺激伏隔核(吗啡刺激组),另13只予以假刺激(吗啡假刺激组)。15d后给予注射吗啡,诱导大鼠恢复位置偏爱行为,测量并比较两组的位置偏爱得分。结果吗啡电刺激组大鼠在注射吗啡诱导下不易恢复对吗啡的条件性位置偏爱,位置偏爱得分为(237.59±79.89)s,吗啡假刺激组为(441.29±212.68)s,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论电刺激NAc能阻断注射吗啡诱导戒断大鼠恢复觅药行为。在成瘾药物诱导戒断动物觅药行为的过程中,NAc起重要作用。     

阻断ERK通路的再激活对吗啡依赖大鼠已建立的条件性位置偏爱的影响

目的 研究阻断细胞外信号调节激酶(ERK)通路的再激活对吗啡依赖大鼠已建立的条件性位置偏爱(CPP)的影响.方法 将80只大鼠随机分成8组每组各10只,Ⅱ-Ⅷ组为实验组,I组为对照组.在建立吗啡的CPP后,分别给予腹腔注射细胞外信号调节激酶抑制剂SL327或生理盐水后再次注射吗啡,对照组仅注射生理盐水,并与给药环境建立联系,观察对已建立的CPP的影响.并采用western blotting法测定伏隔核中磷酸化ERK1/2(P-ERK1/2)的表达水平.结果 [1]CPP测试前各组在白箱内(伴药侧)停留的时间差异无统计学意义(P>0.05).[2]经过6d条件反射训练,各实验组大鼠在白箱内停留的时间明显比对照组长,差异均有统计学意义(P<0.01),表明实验组大鼠均已建立起对白盒的CPP.[3]给予已建立CPP的各实验组大鼠不同处置,结果表明,只有给予腹腔注射SL327后再次注射吗啡的Ⅳ组大鼠的CPP已消除,该组在白箱内的停留时间较其它实验组有显著性差异(P<0.01),而与对照组的差异无统计学意义(P>0.05).同时,Ⅳ组大鼠伏隔核中P-ERK1/2的表达水平显著低于其它实验组(P<0.01),但其与对照组间的差异无统计学意义(P>0.05).结论 阻断ERK通路的再激活可以消除吗啡依赖大鼠已建立的条件性位置偏爱.     

毁损双侧伏隔核对大鼠吗啡条件性位置偏爱复燃的影响

目的探讨毁损双侧伏隔核对小剂量吗啡诱导大鼠条件性位置偏爱复燃的影响。方法设置毁损组、假毁损组及空白对照组(n=10),建立大鼠吗啡条件性位置偏爱模型,消退后采用立体定向下直流电(10mA,30s)毁损双侧伏隔核,分别在术后3d、10d、30d给予小剂量吗啡(2.5mg/kg)诱导复燃,观察记录各组大鼠条件性位置偏爱得分,采用方差分析及均数间多重比较进行统计学分析。结果条件性位置偏爱模型建立成功后,经消退各组位置偏爱得分间差异无统计学意义(P>0.05);毁损术后各时间点吗啡诱导复燃时,毁损组均较假毁损组的位置偏爱得分低(P<0.05),而毁损组各时间点间位置偏爱得分差异无统计学意义(P>0.05)。结论毁损双侧伏隔核可以抑制小剂量吗啡诱导的复燃,且此作用至少可维持30d。     

烟碱上调大鼠脑纹状体多巴胺D1受体mRNA表达诱导其行为改变

目的　 通过观察烟碱对大鼠脑纹状体D1,D2 受体mRNA表达的影响 ,研究烟碱诱导大鼠行为改变的可能机制 ,以进一步探讨烟碱对帕金森病具有保护效应的作用机理。 方法 SD大鼠 2 4只 ,随机分为生理盐水组(12只 )、烟碱组 (12只 )。分别给予生理盐水、烟碱 4mg/kg·d,2次 /d ,共 14d。每次注射药物后 0 .5h观察大鼠行为活动 ,并于末次注射药物后 0 .5h处死动物 ,快速分离纹状体 ,采用RT PCR方法检测大鼠纹状体D1,D2 受体mRNA的表达。结果 烟碱组大鼠于用药后第 3天 ,出现走动增多 ,易激惹 ,定型活动明显 ,并于第 714天达到高峰。在大鼠纹状体内 ,烟碱组D1受体mRNA表达比对照组上升 2 3% (分别为 98.6 3± 1.13,6 5 .2 9± 1.4 5 ,P <0 .0 1) ,两组D2 受体mRNA的表达无显著性差异 (P >0 .0 1)。 结论 烟碱可能通过上调大鼠纹状体D1受体mRNA的表达而诱导大鼠理毛、张口等行为改变 ;烟碱可能有部分D1受体激动样作用。     

Lactacystin对大鼠纹状体DAT和VMAT2蛋白表达的影响

目的:探讨蛋白酶体抑制剂lactacystin对大鼠纹状体多巴胺转运体(DAT)和囊泡单胺转运体2(VMAT2)蛋白表达的影响。方法:在大鼠单侧黑质致密部立体定向分别注射lactacystin0.2、2、8μg,对照组注射等量的生理盐水。观察大鼠自主行为和阿扑吗啡诱导旋转行为的变化;应用免疫组化观察黑质细胞α-synuclein和纹状体DAT和VMAT2蛋白表达。结果:注射lactacystin0.2μg组未见明显异常;2μg组和8μg组出现进行性的运动迟缓、少动、震颤、头向健侧倾斜;注射阿扑吗啡后,8μg组大鼠出现向健侧旋转运动。随着lactacystin剂量的增加,2μg组和8μg组黑质细胞α-synuclein的表达分别较对照组高出57%(P<0.01)和122%(P<0.001);纹状体DAT和VMAT2的表达分别较对照组减少了40%(P<0.01)、85%(P<0.001)和50%(P<0.01)和88%(P<0.001);DAT和VMAT2的比值分别较对照组高出了18%和32%。结论:Lactacystin可能通过抑制DAT和VMAT2的表达导致黑质细胞变性坏死及帕金森病的发生。     

间歇性酒精暴露对青少年期小鼠酒精犒赏及焦虑行为的影响

目的探讨间歇性酒精暴露(adolescent intermittent ethanol exposure,AIE)对青少年期小鼠酒精条件性位置偏爱(conditioned place preference,CPP)及焦虑行为的影响。方法 4周龄C57BL/6小鼠随机分为2组,每组10只,AIE组接受间歇性酒精腹腔注射(3 g/kg,25%酒精,共8次),NS组接受生理盐水腹腔注射;随后2组行酒精CPP实验(2 g/kg,20%酒精)。另取一批小鼠经高架十字迷宫(elevated plus maze,EPM)测试后,根据开放臂时间比分为高、低焦虑组,各组中再分别随机分为AIE组、NS组,每组8～10只,分别接受间歇性酒精或生理盐水腹腔注射。之后,4组小鼠再次行EPM测试。结果第1项实验中,与NS组相比,AIE组小鼠的CPP值较高[(116.1±12.9)s vs.(70.8±14.8)s,P=0.035]。第2项实验,高、低焦虑小鼠经AIE处理后,分别与高、低焦虑NS组相比,开放臂时间比差异无统计学意义(均P0.05)。结论 AIE促进青少年期小鼠酒精CPP的形成,但不改变其焦虑水平,AIE对小鼠酒精CPP的促进作用与焦虑无关。     

吗啡精神依赖大鼠VTA-NAc-PFC神经环路谷氨酸含量和NR2B表达的变化

目的 观察吗啡诱导条件性位置偏爱大鼠中脑腹侧被盖区-伏核-前额叶皮质(VTA-NAc-PFC)神经环路各核团谷氨酸递质含量和N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基NR2B表达的变化,从受体前和受体层面探讨该环路中通过谷氨酸能系统的阿片类精神依赖机制.方法 筛选出合格大鼠32只并按随机数字表法分为生理盐水对照组和吗啡条件性位置偏爱模型组(模型组),模型组采用吗啡剂量递增法建立大鼠条件性位置偏爱模型,分别用比色法和免疫组化染色检测中脑腹侧被盖区、伏核和前额叶皮质内谷氨酸含量和NR2B的表达.结果 与生理盐水对照组比较,模型组大鼠在白箱的停留时间明显延长,VTA-NAc-PFC神经环路各核团谷氨酸含量明显增高,NR2B平均吸光度值明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 VTA-NAc-PFC神经环路谷氨酸递质含量及其受体亚基NR2B表达水平上调在吗啡精神依赖形成中发挥重要作用.     

吗啡精神依赖大鼠VTA-NAc-PFC神经环路谷氨酸含量和NR2B表达的变化

目的 观察吗啡诱导条件性位置偏爱大鼠中脑腹侧被盖区-伏核-前额叶皮质(VTA-NAc-PFC)神经环路各核团谷氨酸递质含量和N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基NR2B表达的变化,从受体前和受体层面探讨该环路中通过谷氨酸能系统的阿片类精神依赖机制.方法 筛选出合格大鼠32只并按随机数字表法分为生理盐水对照组和吗啡条件性位置偏爱模型组(模型组),模型组采用吗啡剂量递增法建立大鼠条件性位置偏爱模型,分别用比色法和免疫组化染色检测中脑腹侧被盖区、伏核和前额叶皮质内谷氨酸含量和NR2B的表达.结果 与生理盐水对照组比较,模型组大鼠在白箱的停留时间明显延长,VTA-NAc-PFC神经环路各核团谷氨酸含量明显增高,NR2B平均吸光度值明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 VTA-NAc-PFC神经环路谷氨酸递质含量及其受体亚基NR2B表达水平上调在吗啡精神依赖形成中发挥重要作用.     

吗啡精神依赖大鼠VTA-NAc-PFC神经环路谷氨酸含量和NR2B表达的变化

目的 观察吗啡诱导条件性位置偏爱大鼠中脑腹侧被盖区-伏核-前额叶皮质(VTA-NAc-PFC)神经环路各核团谷氨酸递质含量和N-甲基-D-天冬氨酸受体亚基NR2B表达的变化,从受体前和受体层面探讨该环路中通过谷氨酸能系统的阿片类精神依赖机制.方法 筛选出合格大鼠32只并按随机数字表法分为生理盐水对照组和吗啡条件性位置偏爱模型组(模型组),模型组采用吗啡剂量递增法建立大鼠条件性位置偏爱模型,分别用比色法和免疫组化染色检测中脑腹侧被盖区、伏核和前额叶皮质内谷氨酸含量和NR2B的表达.结果 与生理盐水对照组比较,模型组大鼠在白箱的停留时间明显延长,VTA-NAc-PFC神经环路各核团谷氨酸含量明显增高,NR2B平均吸光度值明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 VTA-NAc-PFC神经环路谷氨酸递质含量及其受体亚基NR2B表达水平上调在吗啡精神依赖形成中发挥重要作用.

Abstract：

Objective To explore the mechanism of opioid-psychic dependence involving the aspects of pre-receptor and receptor by observing the changeable expressions of glutamate neurotransmitter and NR2B of N-methyl-D-aspartic acid (NMDA) receptor in the neuroanatomical circuit of ventral temental area, nucleus accumbens and prefrontal cortex (VTA-Nac-PFC) of rats subjected to morphine-induced conditioned place preference (CPP). Methods The models of CPP were validated by escalating doses of morphine in rats (n=16). The colorimetry and immunohistochemistry ways were applied to detect the contents of glutamic acid and the expression level of NR2B in VTA, Nac and PFC. Results As compared with those in the control group physiological saline), the prolonged detention time of white compartment in the model group was notably observed (P<0.05), and increased content of glutamic acid and expression level of NR2B in fields of VTA, Nac and PFC in the model group were significantly detected (P<0.05). Conclusion Increased level of giutamic acid and expression level of NR2B in nuroanatomieal circuit of VTA, Nac and PFC could play key roles in inducing morphine-psychic dependent rats.     

大鼠局灶性脑缺血预处理后蛋白激酶样内质网激酶及葡萄糖调节蛋白78表达的变化

目的 观察缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注后蛋白激酶样内质网激酶(PERK)和葡萄糖调节蛋白( GRP78) mRNA及其蛋白表达和神经元凋亡的影响.方法 SD大鼠120只,随机分为假手术组、脑缺血再灌注组(MCAO)、腩缺血预处理组(BIP),每组按照再缺血后12h,1、2、3d4个时间点分为4个亚组.采用二次线栓法制备大鼠局灶性脑缺血预处理模型,分别用原位杂交法和Western blot法观察再缺血后各个时间点PERK和GRP78 mRNA及其蛋白的表达变化,用流式细胞术检测神经细胞凋亡率.结果 ①MCAO组12 h PERK mRNA表达达高峰,随再灌注时间延长其表达逐渐下降;BIP组缺血各时间点其表达水平均明显下降.MCAO组PERK蛋白表达于缺血再灌注后12 h开始明显上升,24 h达高峰,2d后表达开始减弱;BIP组较MCAO组PERK表达明显降低.②MCAO组12 h GRP78 mRNA及其蛋白表达均达高峰,随再灌注时间延长其表达逐渐下降;BIP组较MCA0组GRP78 mRNA及其蛋白各时间点表达均明显升高(mRNA:12 h:136.70±9.53,F=32.265;24h:147.54±9.97,F=54.920;2 d:158.16±9.44,F=45.374;3 d:165.85±10.26,F=16.493,均P＜0.05;蛋白:12 h:1.319±0.116,F=5.619,P＜0.05;24 h:1.226±0.108,F=33.742,P＜0.01;2 d:1.183±0.112,F=46.556,P＜0.01;3 d:1.115±0.098,F=11.730,P＜0.05).③MCAO组12 h细胞凋亡发牛率明显增加,24h时达到高峰,以后逐渐下降;BIP组各个时间点神经元凋亡发牛率较MCAO组明显降低.结论 脑缺血预处理可能通过抑制内质网应激后PERK表达和诱导GRP78表达发挥其神经保护作用.     

吗啡精神依赖大鼠相关脑区细胞外氨基酸类神经递质的变化

目的 研究吗啡精神依赖大鼠伏隔核(NAc)、苍白球腹侧核(VP)以及中脑腹侧被盖区(VTA)中细胞外谷氨酸(Glu)和γ-氨基丁酸(GABA)含量的变化. 方法 18只Wisar大鼠按照随机数字表法分为对照组(8只)和吗啡组(10只).吗啡组大鼠每日皮下注射盐酸吗啡,并进行位置偏爱(CPP)训练,10 d后停药,戒断躯体依赖后行CPP评分;对照组大鼠在相同时间给予同体积的生理盐水皮下注射10d.停药一周后用微透析探针对大鼠NAc、VP和VTA行微透析,用高效液相色谱法(HPLC)测定透析液中的Glu和GABA的含量. 结果 吗啡组NAc中细胞外Glu含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05),两组VP和VTA中细胞外Glu和GABA含量比较差异有统计学意义. 结论 Glu在维持精神依赖的过程中发挥重要作用.     

度洛西汀和氟西汀对抑郁模型大鼠 S100B、ERK1/2－NF－κB 表达的影响

目的：比较度洛西汀和氟西汀对抑郁模型大鼠海马 S100B、ERK1/2－NF－κB 表达的影响.方法慢性轻度不可预知应激刺激法制备54只抑郁症模型大鼠,随机分为非干预组(B 组)、度洛西汀干预组(C 组)、氟西汀干预组(D 组),各18只.另外选取18只大鼠为对照组(A 组).各组灌胃[A组和 B 组(生理盐水),C 组(度洛西汀)、D 组(氟西汀)]28 d 后,应用糖水偏爱试验和旷场试验检测大鼠行为学改变.Western blot 检测各组海马 S100B、ERK1/2和 NF－κB 的表达.结果灌胃28 d 后 B 组糖水消耗率(43±15)％显著较 A、C、D 组低[(63±11)％,(67±6)％,(61±10)％](P ＜0．05). C 和 D组大鼠干预28 d 后旷场试验水平评分、垂直运动评分与潜伏期分别为(70．66±11．53)分和(67．54±10.08)分,(20．32±8．85)分和(21．34±7．46)分,(1．0±0．4)s 和(1．1±0．3)s,与 A 组(71．19±12．08)分,(20．42±8．76)分,(1．01±0．3)s 比较,差异均无统计学意义(P ＞0．05);C、D 组与 B 组比较,水平运动评分和垂直运动评分升高,潜伏期降低.A、C、D 组大鼠海马 S100B、ERK1/2、NF－κB 表达显著高于 B组(P ＜0．05),C 和 D 组差异无统计学意义.结论度洛西汀和氟西汀均能够改善抑郁模型大鼠的行为能力及上调海马 S100B、p－ERK1/2－NFκB 表达水平,但度洛西汀和氟西汀对相关因子表达的影响无差异.     

鼠源性乙酰胆碱受体α亚基97-116肽段(V108A)鼻黏膜耐受对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的影响

目的 研究鼠源性乙酰胆碱受体α亚基97-116肽段丙氨酸替代108缬氨酸[Rα97-116(V108A)]鼻黏膜耐受对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠肌无力表现及免疫功能的影响.方法 将采用Rα97-116强化免疫接种方法 成模的22只EAMG大鼠随机分成耐受组和对照组,分别经鼻黏膜给予Rα97-116(V108A)和PBS缓冲液免疫耐受处理10 d后,观察不同时间点两组大鼠体质量、Lennon肌无力评分、血清AChR-ab(ELISA法)及CD28、CTLA4、B7共刺激分子(流式细胞仪)变化.结果 耐受组EAMG大鼠体质量[(228.1±5.8)g]较对照组[(215.0±16.2)g]增加(t=2.395,P＜0.05);肌无力临床评分[耐受组(1.55±0.44)分,对照组(2.10士0.66)分]下降(t=-2.20,P＜0.05);血清AChR-ab(耐受组0.97±0.20,对照组1.27±0.26,t=-2.857,P＜0.05)和外周血CD28、B7-1、B7-2、CTLA4分子的表达(%)耐受组(分别为27.35±7.05、4.73±0.58、2.71±0.35、1.72±0.44)较对照组(分别为40.02±8.81、9.52±1.25、5.88±1.09、2.64±0.47)明显下调(t=3.479、10.861、8.755、4.403,均P＜0.01).结论 Rα97-116(V108A)鼻黏膜耐受能明显减轻EAMG的肌无力症状,并能引起特异性T细胞活化和B细胞免疫功能抑制.     

母爱剥夺对成年大鼠行为及多巴胺受体2基因表达的影响

目的 研究母爱剥夺对大鼠脑伏隔核多巴胺受体2(DRD2)基因表达的影响,探索DNA甲基化是否参与调控DRD2基因的表达.方法 20只新牛大鼠被随机分为母爱剥夺组(8只)和对照组(12只),母爱剥夺组大鼠于哺乳期每天接受6 h母爱剥夺;12周龄时,采用旷场试验评估大鼠的焦虑水平和探索能力,并采用逆转录聚合酶链反应检测伏隔核DRD2受体mRNA表达水平,用亚硫酸测序法检测DRD2基因启动子区DNA甲基化水平.结果 (1)母爱剥夺组爬行总格数[(24 ±8)个]和直立次数[(10.1±2.0)次]少于对照组[分别为(44±8)个,(15.8±1.8)次;t=-5.12和-2.11,P<0.01～0.05].(2)母爱剥夺组大鼠脑内伏隔核DRD2 mRNA表达(0.224±0.064)低于对照组(0.587 ±0.099;t=-7.50,P<0.05);两组DRD2基因启动子区的DNA甲基化水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 母爱剥夺大鼠成年以后在新奇环境中的焦虑水平增加,探索能力下降;母爱剥夺影响大鼠多巴胺系统DRD2基因表达,而DNA甲基化不参与调控基因表达.     

颈动脉粥样硬化斑块CD147、MMP-9表达及阿托伐他汀干预的影响

目的 探讨兔颈动脉粥样硬化斑块中CD147、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达情况以及阿托伐他汀对其表达的影响.方法 24只新西兰大白兔按随机数字表法分为3组:正常对照组8只,普通饲料喂养16周;余16只给予球囊损伤颈总动脉+高胆固醇喂养,12周后分成模型对照组和阿托伐他汀组(每天2.5 mg/kg阿托伐他汀灌胃),继续喂养4周后给予鲁塞尔氏蛙蛇毒和组胺触发斑块破裂.对斑块进行病理分析,免疫组织化学法检测斑块内巨噬细胞及CD147、MMP-9蛋白表达,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测斑块内CD147、MMP-9mRNA表达.结果 药物触发后模型对照组存活的6只兔中有4只发生斑块破裂及血栓形成,阿托伐他汀组存活的7只兔中有1只发生斑块破裂及血栓形成,正常对照组中未见斑块破裂及血栓形成.与模型对照组比较,阿托伐他汀组斑块内巨噬细胞含量明显减少(33.62±3.82vs16.22±2.61),CD147蛋白表达的阳性染色面积比明显降低(29.54±3.03vs14.22±1.63),MMP-9蛋白表达的阳性染色面积比明显降低(21.18±4.75 vs 11.11±1.87),差异有统计学意义(P＜0.05＝.模型对照组和阿托伐他汀组斑块内CD147 mRNA表达水平分别为0.939±0.105和0.426±0.112,MMP-9 mRNA表达水平分别为0.335±0.069和0.135±0.067,比较差异有统计学意义(P＜0.05＝.Pearson相关检验显示斑块中MMP-9蛋白与CD147蛋白表达呈正相关(r=0.669,P=0.001),MMP-9 mRNA与CD147 mRNA表达呈强正相关(r=0.783,P=0.000).结论 CD147、MMP-9表达上调可能参与斑块不稳定的发生机制,阿托伐他汀可能通过下调CD147、MMP-9的表达发挥稳定斑块的作用.     

变构促红细胞生成素对小鼠脑缺血后神经新生和血管新生的影响

目的 探讨一种氨基酸突变后无促红细胞生成能力的变构促红细胞生成素(mEPO)对大脑中动脉闭塞小鼠神经新生和血管新生的作用.方法 将30只成年雄性C57BL/B6小鼠随机分为Sham组、I/R+ Veh组和I/R+ mEPO组,每组10只.制作小鼠大脑中动脉闭塞缺血(MCAO)模型,I/R+mEPO组小鼠在再灌注即刻腹腔注入mEPO(5 000 IU/kg),I/R+ Veh组小鼠在制模后注入等体积的生理盐水.通过BrdU检测细胞增殖情况,采用转棒试验对小鼠神经功能进行评估.在脑缺血后第14天,检测3组小鼠脑组织丢失比例、神经新生及血管新生情况.结果 用mEPO处理后,I/R+mEPO组小鼠脑组织丢失比例(14.62±5.80)％显著低于I/R+ Veh组小鼠(29.81±7.75)％,差异有统计学意义(P＜0.05);I/R+mEPO组小鼠脑缺血后第3,7天神经功能均有明显改善,第7天即恢复到正常水平,差异有统计学意义(P＜0.05);I/R+mEPO组小鼠脑缺血后第14天BrdU+/NeuN+双阳性细胞数量(36.25±10.53)和BrdU+/Laminin+双阳性细胞数量(25.25±6.34)显著高于Sham组小鼠和I/R+ Veh组小鼠,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 mEPO促进了小鼠脑缺血周边区神经新生及血管新生,从而减轻脑组织的损伤程度并提高神经功能.这种无促红细胞生成作用的mEPO可能会成为临床脑血管病的治疗药物.