赤道几内亚比奥科岛G6PD缺乏症分子流行病学研究

目的探讨非州西部赤道几内亚比奥科岛(Bioko Island)人群的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的发生率及基因型。方法在2012年1月至5月期间,用荧光斑点法对2 187名比奥科岛当地居民进行G6PD缺乏症筛查。采用高分辨熔解曲线(High-resolution melting,HRM)分析G6PD缺乏的标本的c.202 G>A与c.376 A>G。对HRM筛选不出突变的G6PD酶学缺乏的样本,针对非洲的其他突变类型:c.542 A>T(rs5030872)、c.680 G>A(rs137852328)、c.968 T>C(rs76723693)进行PCR-DNA测序。结果赤道几内亚比奥科岛人群的G6PD缺乏症总发生率为8.54%(189/2 187),其中男性84例(9.04%,84/929),女性105例(8.34%,105/1 258),男女检出率比为1.08:1。在189例G6PD缺乏标本中共检出两种基因类型,其中包括G6PD A-变异体(c.376 A>G/c.202 G>A)186例(98.41%,186/189G6PD Betica(c.376 A>G/c.968T>C)3例(1.59%3/189)。结论赤道几内亚比奥科岛是G6PD缺乏症高发区,基因型比较单一。HRM技术可用于非洲地区G6PD缺乏症的临床诊断和流行病学研究。     

SYBR GreenⅠ染料法定量PCR检测疟原虫感染及

目的评价一种可以快速定量检测疟原虫及虫种鉴别的荧光定量PCR法。方法将SYBR Green Ⅰ法与TaqMan探针法检测疟原虫进行比对,评价定量的准确性及方法的敏感度。以PCR-DNA测序法为金标准,评价SYBR Green Ⅰ法分型的准确性。结果两个方法的定量拷贝检测数无显著性差异(P>0.05)。SYBR Green Ⅰ法检测疟原虫的最低检测下限为1×102copy/mL至5×102copy/mL之间。与PCR-DNA测序法比较,SYBR Green Ⅰ法能准确的对感染的疟原虫虫种做准确的鉴定。结论 SYBR Green I染料法定量可同时进行人体疟原虫的定量检测和虫种鉴别,且成本低廉,操作简便快速,可以在疟疾的高发地区推广使用。     

赤道几内亚Bioko岛的恶性疟原虫多药抗性基因(pfMDR-1)的研究

目的对赤道几内亚Bioko岛上恶性疟原虫多药抗性基因(pfMDR-1)进行分析,为Bioko岛的疟疾防控和治疗提供依据。方法2012年雨季期间采集的恶性疟原虫感染患者样本151份,用巢式PCR技术特异性扩增N86Y、E130K、Y184F、S1034C、N1042D、V1109I、D1246Y耐药分子标记的pfMDR-1基因片段,然后进行测序分析。结果虫株中共发现了4种不同的单倍型:YEY/SNVD、NEF/SNVD、YEF/SNVD和NEY/SNVD。91.39%(138/151)的样本发现了耐药性位点突变,包括3.31%(5/151)的86Y,29.80%的184F,和58.29%(88/151)的双重突变86Y/184F。结论结果表明赤道几内亚Bioko岛上的恶性疟原虫株存在较高比例耐药基因突变和耐药复合基因突变,为当地的抗疟疾选用药物提供指导。     

云南省西双版纳州傣族G6PD缺陷症发生率及突变谱研究

目的了解云南省西双版纳州傣族人群的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症的发生率及基因型。方法在2012年8月至2013年9月期间,用荧光斑点定性法对812例傣族居民进行G6PD缺乏筛查。用反向斑点杂交芯片和PCR-DNA测序法分析G6PD缺乏症的标本的基因型。结果云南西双版纳州傣族人群的G6PD缺乏症总发生率为9.73%(79/812),其中男性32例(9.07%,32/353),女性47例(10.24%,47/459)。79例初筛G6PD缺乏标本65例检测出有突变,共检出8种基因突变类型,含16例1376 G>T(24.24%)、10例1311C>T(15.15%)、9例1388 G>A(13.63%)、7例392 G>T(10.60%)、6例95 A>G(9.09%)、5例1360C>T(7.57%)、2例871 G>A(3.03%)、1例1024C>T(1.52%),和6种复合突变包括2例G871A/C1311T(3.03%)、2例G392T/G1376T(3.03%)、2例G392T/G1388A(3.03%)、1例C1024T/C1311T(1.52%)、1例C1311T/G1376T(1.52%)、1例C1311T/G1388(1.52%)。结论云南西双版纳州傣族G6PD缺乏症检出率高,最常见的三种基因型是G6PD1376 G>T、1311C>T和G6PD1388 G>A。在西双版纳地区当地开展G6PD缺乏症的新生儿筛查、产前筛查和遗传咨询是非常有必要的。     

无锡市社区老年人群主观认知下降患者门诊就诊率调查及其影响因素分析

目的 了解无锡市社区老年人群主观认知下降（SCD）患者的门诊就诊率及其影响因素,为阿尔茨海默病（AD）超早期精准干预提供参考依据。方法 2021年2—8月,以居民健康档案为线索,采用分层整群随机抽样方法,在无锡市社区招募60岁及以上老年人1 500名,采用一般情况调查表、简易老年人认知筛查问卷（BECSI）、老年快速认知筛查量表（QCSS-E）、成套核心神经心理测验(CNT)及相关实验室检查进行SCD筛查和临床诊断,分析SCD患者的门诊就诊率及影响因素。结果 共获得有效样本1 314名,检出SCD患者379例,占比28.84%,其中因主观认知下降在门诊就诊的仅91例,门诊就诊率为24.01%。多因素logistic回归分析结果显示,经常参加社区老年健康讲座（OR=8.323,95%CI:2.955～23.442）、对痴呆早期预防持积极态度（OR=3.852,95%CI:1.152～12.883）、了解SCD相关知识（OR=2.762,95%CI:1.258～6.061）、病程3年（OR=4.072,95%CI:1.282～12.935）是影响SCD患者就诊的积极因素;而受教育程度为小学...     

江门市新生儿疾病筛查结果分析

目的:了解江门市新生儿先天性甲状腺功能低下(CH)、苯丙酮尿症(PKU)和红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏3种先天性疾病发病率。方法:CH、PKU筛查采用荧光酶免疫法分别定量测定血促甲状腺素(TSH)和苯丙氨酸(Phe)浓度;G-6-PD缺乏采用荧光斑点法进行筛查。结果:江门市CH、PKU发病率分别为1/2509、1/55205,红细胞G-6-PD缺乏阳性率为6.74%。结论:新生儿疾病筛查的数量、覆盖率和地区差异是影响新生儿疾病筛查发病率准确性的重要因素。     

DNA微阵列芯片与质谱技术快速鉴定非结核分枝杆菌的差异性分析

目的 比较基因芯片技术与基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在非结核分枝杆菌(NTM)菌种鉴定上的差异,为临床快速诊断NTM病提供帮助。方法 应用BACTEC^TM MGIT 960仪器对保存的NTM菌株进行液体培养法复苏;分别使用基因芯片法、质谱法与16s rRNA测序对74株NTM进行菌种鉴定;以16s rRNA测序作为参考方法分析比较基因芯片法与质谱法两种方法鉴定结果的差异与优劣势。结果 通过测序,74株NTM鉴定结果为胞内分枝杆菌37株,脓肿分枝杆菌19株,M.marseillense/M.yongonense 7株,鸟分枝杆菌5株,堪萨斯/胃分枝杆菌2株,M.chimaera、哥伦比亚分枝杆菌、海分枝杆菌、猪分枝杆菌均1株。基因芯片法与测序法相比有12株结果不同,准确率为83.8%,鉴定到复合群准确率为95.9%; MALDI-TOF MS有2株无结果,与测序相比有7株结果不同,准确率为87.8%,鉴定到复合群准确率为97.3%。检测时间上,基因芯片法鉴定1个样本需要6 h,质谱法则仅需1 h。结论 与16s rRNA测序金标准相比...     

精子DNA碎片化指数2种方法的相关性研究

目的研究精子DNA完整性不同检测方法的区别,探讨使用精子染色质结构分析法(SCSA)和精子染色质扩散实验法(SCD)分析精子DNA碎片化率(DFI)结果的一致性。方法分别用SCSA法和SCD法检测119例不育症患者精液的DFI值,采用SPSS 22.0软件进行相关性分析和配对t检验。结果 SCD法检测119例精液标本DFI均值为(15.4±8.9)%,SCSA法DFI均值为(14.2±7.3)%SCD法DFI值高于SCSA法,差异有统计学意义(P0.05)。SCSA法和SCD法相关性分析呈明显的线性正相关(r=0.816,P0.01)。结论 SCSA法与SCD法比较,其检测精子DFI结果具有一致性;但SCD法检测值普遍比SCSA法高。     

高分辨率熔解曲线分析技术在非缺失型α-地中海贫血新生儿筛查中的前瞻性应用

目的:验证高分辨率熔解曲线分析技术(HRM技术)用于筛查非缺失型α-地中海贫血的可行性。方法:应用全自动毛细管电泳技术对6 525例新生儿脐血进行血红蛋白定量分析,将Hb Bart's含量在0.1%～2.5%的样本挑出,排除3种常见缺失型α-地贫基因(--SEA、-α3.7、-α4.2)后剩下的样本,用HRM技术分别对α-基因的3个外显子进行扫描后对这些样本进行基因确诊。结果:所有28例非缺失型α-地中海贫血全部被检出。结论:HRM技术可作为非缺失型α-地中海贫血的一种筛查方法,且具有准确、高效、低成本的优点。     

建立高分辨率熔解曲线法检测白癜风患者TNF-α rs1800629基因多态性

目的探讨高分辨率熔解曲线法用于检测新疆维吾尔族白癜风患者肿瘤坏死因子alpha rs1800629基因多态性的可行性。方法应用高分辨率熔解曲线法检测100例新疆维吾尔族白癜风患者肿瘤坏死因子alpha基因启动子区rs1800629位点多态性,并与PCR产物直接测序法得到的结果进行比较分析。结果 HRM法检测rs1800629位点多态性的灵敏度可以达到5%,HRM分型结果与PCR产物直接测序法结果相同,二者符合率100%。结论 HRM法具有比较好的灵敏度与准确性,是一种快速、简便、高通量检测白癜风患者TNF-α基因多态性的优选方法。