碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞和牙周膜成纤维细胞迁移、增殖的影响

目的　明确碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外成骨细胞和牙周膜成纤维细胞迁移、增殖的影响,以 探讨在牙种植体组织界面局部应用bFGF诱导类牙周膜形成的可行性。方法　同一只SD大鼠来源的成骨细胞和 牙周膜成纤维细胞经传代培养至第4代,建立体外创伤模型,分别在普通培养基和含bFGF的培养基中培养,观察 细胞迁移情况,四唑盐比色实验(MTT)测定细胞的增殖速度。结果　普通培养基中,成骨细胞迁移速度快于成纤维 细胞。加bFGF培养基中牙周膜成纤维细胞迁移速度明显快于其他各组,同时MTT结果显示加入bFGF能明显促进 两种细胞的增殖。结论　bFGF能明显促进牙周膜成纤维细胞的增殖、移行。     

体外培养碱性成纤维细胞因子对人牙周膜成纤维细胞生物学特性的影响

目的：探讨体外培养过程中,碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对人牙周膜成纤维细胞（hPDLFs）生物学特性的影响。方法：体外分离培养人牙周膜成纤维细胞并鉴定,加入不同浓度bFGF（1ng／ml、10ng／ml、50ng／ml、100ng／ml）培养,MTT方法检测细胞增殖情况;并对细胞进行矿化诱导,检测细胞的碱性磷酸酶活性。结果：hPDLFs呈星形或长梭形,免疫组化波丝蛋白阳性,角蛋白阴性,证实该细胞来源可靠。bFGF在一定浓度范围内,与细胞增殖成正比,而在本实验培养条件下（10％FBS）bFGF最大效应浓度为10ng／ml。矿化诱导条件下,碱性磷酸酶活性明显增加,在联合应用bFGF的情况下,100ng／ml组碱性磷酸酶活性明显高于其他组。结论：不同浓度bFGF对人牙周膜成纤维细胞生物学行为的影响不同,在一定浓度条件下,低浓度bFGF促进人牙周膜成纤维细胞的增殖,而高浓度bFGF作用于人牙周膜成纤维细胞可能更易于分化。     

碱性成纤维细胞生长因子对牙周细胞生物学活性的影响

目的：观察基因重组入碱性成纤维细胞生长因子（rh-bFGF)牙龈成纤维细胞（GF）、人牙周韧带成纤维细胞（PDLF）及人牙槽骨细胞（ABC）的增殖、碱性磷酸酶活性、总蛋白含量及对3种细胞矿化结节形成能力的影响。方法：采用细胞培养、MTT比色测定、碱性磷酸酶测定法、考马宙蓝法及茜素红染色法。结果bFGF能促进3种细胞的增殖,但对PDLF和ABC的ALP活性,蛋白含量及矿化结节的形成有抑制作用。结论bFGF可促进细胞的增殖,抑制细胞的分化成熟,从而促进牙周再生。     

bFGF和壳聚糖对人牙周膜成纤维细胞的作用

目的:探讨水溶性壳聚糖和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)二者联合应用,对人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)的生长增殖和成骨性能的影响。方法:原代培养HPDLFs,观察bFGF和壳聚糖联合作用于HPDLFs后,细胞的增殖情况(MTT比色测定法)、碱性磷酸酶(ALP)活性及骨钙素(OC,放免法检测)的变化情况,并进行统计学分析。结果:bFGF(10ng/ml)和低剂量壳聚糖(0.2mg/ml)组促进细胞增殖,不降低碱性磷酸酶活性,且提高骨钙素合成量。相对bFGF单独作用组,bFGF和壳聚糖联合作用组可上调ALP活性,bFGF(10ng/ml)和高剂量壳聚糖(2mg/ml)组抑制细胞增殖,不降低碱性磷酸酶活性,且有较高的骨钙素合成量。结论:bFGF和低剂量壳聚糖联合作用既可促进细胞增殖,又可促进HPDLFs向成骨细胞转化。bFGF和壳聚糖联合应用可能是一种新型的牙周组织再生的诱导材料。     

成纤维细胞生长因子对兔下颌牵张成骨的影响

目的 研究局部应用碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)对兔下颌牵引张成骨的影响。方法 成年大耳白兔8只，随机分为A、B两组，每组4只。用自行研制的牵张器延长双侧下颌骨6mm，用bFGF（20ng/ml）注入A组动物的牵张区，不注射bFGF的B组动物作为对照。在牵张结束后4周处死所有动物，取双侧下颌骨标本进行X线和组织学检查。结果 组织学分析结果显示，局部给予bFGF的A组动物下颌牵张后新骨生成速度和数量优于B组动物。结论 外源性导入碱性成纤维细胞生长因了可能有促进下颌牵引张成骨的作用。     

人牙龈和牙周韧带成纤维细胞的体外培养及生物学特性研究—细胞形态，生长曲线及碱性磷酸酶活性测定

目的：建立人牙龈和牙周韧带成纤维细胞体外培养模型并对其生物学特性作初步探讨。方法．；采用组织块法常规条件下分别进行牙龈和牙周韧带成纤维细胞的培养，通过光镜，透射电镜，生长曲线及碱性磷酸酶测定等手段对其部分生物学特性进行研究。结果：两种培养的原代及传代细胞在光镜下细胞排列及结构无明显判别，传代培养时牙龄纤维细胞有接触抑制现象，而牙周韧带成纤维细胞则可呈复层生长，牙周韧带成纤维细胞排列方向性较明显，生长曲线表明牙周韧带成纤维细胞增殖活性高于牙龄成纤维细胞；碱性磷酸酶活性测定及染色法显示两者有明显的判别。结论：体外培养的两种细胞在形态及排列上相似，但百细胞亚型的组成上存在差异。     

碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜成纤维细胞整合素β1亚单位mRNA表达的影响

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人牙周膜成纤维细胞整合素β1亚单位mRNA表达的影响,探讨bFGF在牙周组织再生中的意义.方法 体外培养人牙周膜成纤维细胞,分别用质量浓度0.1、1.0、10.0ng·mL-1的bFGF刺激细胞,培养24、48、72 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测牙周膜成纤维细胞内整合素β1亚单位mRNA表达的变化.结果 bFGF可促进入牙周膜成纤维细胞内整合素β1亚单位mRNA的合成,在培养24、48、72 h时,1.0 ng·mL-1组整合素β1亚单位表达均明显高于对照组;培养72 h时各实验组整合素β1亚单位表达均明显高于培养24、48 h时..结论 bFGF通过提高整合素β1亚单位mRNA的表达,促进牙周膜成纤维细胞的黏附,在牙周组织修复再生中起作用.     

胶原膜复合碱性成纤维细胞生长因子修复皮肤缺损的实验研究

目的：观察胶原膜复合碱性成纤维细胞生长因子（bFGF-CM）促进兔颅顶部皮肤创面愈合的作用。方法：建立兔颅顶部全层皮肤缺损模型（2cm×2cm）。将54只新西兰兔随机分为3组：胶原复合bFGF组（bFGFCM）、胶原组（CM）和空白对照组（Control）。分别于术后1、2、4周处死实验动物,采用大体观察、石蜡切片HE染色和Masson染色评价创面愈合状况。结果：术后1周,胶原复合bFGF组创面显著缩小（P〈0.05）,肉芽组织增生及胶原合成明显;胶原组次之;空白对照组无明显肉芽增生及胶原合成。术后2周,胶原复合bFGF组创面愈合率仍较另外两组显著（P〈0.05）,肉芽组织成熟程度较高,胶原合成量大;胶原组次之;空白对照组最小。术后4周,各组实验动物创面基本愈合,胶原复合bFGF组瘢痕挛缩较另两组轻。镜下观,胶原复合bFGF组表皮及真皮层发育较另两组成熟,空白对照组胶原纤维的状态和排列似瘢痕组织。结论：胶原复合bFGF膜比单纯胶原膜能更有效的促进兔皮肤缺损后的再生并减少瘢痕形成。     

bFGF对成骨细胞和成纤维细胞生物学特性的影响

目的：明确bFGF埘体外成骨细胞和牙周膜成纤维细胞迁移、矿化相关蛋白合成的影响，以探讨bFGF促进牙周组织再生的内任机制以及在牙种植体组织界面局部应用bFGF诱导类牙周膜形成的可行性。方法：同一只SD大鼠米源的两种细胞经传代培养至第四代，建立细胞迁移模型，分别在普通培养基和含bFGF的培养基中培养，观察测量细胞迁移速度，并分别测试两种细胞在普通培养基和含bFGF的培养基中的碱性磷酸酶（ALP）活性歧Ⅰ型胶原的含量。结果：普通培养基培养时，成骨细胞迁移速度快于成纤维细胞；但牙周膜成纤维细胞加bFGF培养辽移速度明显高于其他各组；bFGF抑制成骨细胞的Ⅰ型胶原的合成和ALP的活性。结论：bFGF能日月硅促进牙周膜成纤维细胞的移行；bFGF能抑制成骨细胞的碱性磷酸酶活性。     

骨形态发生蛋白-2与碱性成纤维细胞生长因子在异位和原位成骨中的作用

目的通过骨髓基质细胞（BMSCs）的体外增殖和分化、异位成骨和原位成骨实验来观察骨形态发生蛋白-2（BMP-2）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）在成骨过程中的作用。方法分别用含BMP-2、bFGF和BMP-2+bFGF的培养液体外培养Beagle犬的BMSCs,通过甲基噻唑基四唑（MTT）比色法测定细胞增殖水平,通过测定碱性磷酸酶（ALP）活性观察细胞的分化情况。将BMSCs与多孔磷酸钙（CPC）分别在含BMP-2、bFGF和BMP-2+bFGF的培养液中复合培养,制成复合材料,一部分植入裸鼠皮下,观察异位成骨情况,另一部分植入Beagle犬的种植体周围骨缺损区,经过荧光标记观察原位成骨情况。结果含有BMP-2+bFGF的培养液促进BMSCs增殖和分化的能力最强。异位成骨情况：BMP-2+bFGF组的成骨量较其他组明显增加,其新骨形成百分比为48.79%±11.31%,高于单一BMP-2组（30.71%±10.85%）和bFGF组（27.33%±9.67%）以及对照组（10.65%±6.05%）。原位成骨术后12周,BMP-2+bFGF组的矿化沉积率高于其他组,其差异有统计学意义（P<0.01）。结论在促进成骨方面,BMP-2和bFGF共同作用优于单一因子。     

Enhanced cementum formation in experimentally induced cementum defects of the root surface with the application of recombinant basic fibroblast growth factor in collagen gel in vivo

BACKGROUND: Therapies using biologically active, soluble factors such as growth factors or cytokines have been investigated for potential clinical use in regenerating lost periodontal tissue due to periodontitis. Basic fibroblast growth factor (bFGF, FGF-2) is a multifunctional growth factor that has a variety of effects including induction of proliferation and morphogenesis in a wide range of cells and tissues including periodontal ligament tissue. METHODS: In this study, we examined the effects of bFGF on the regeneration of cementum and periodontal ligament in experimentally induced partial defects in a beagle dog model. bFGF in a collagen gel was applied to the defects and root surfaces, and the teeth were replanted. RESULTS: Eight weeks post-surgery, formation of cementum on denuded dentin was enhanced by application of 0.1, 1, or 5 microg of bFGF in a collagen gel compared to collagen gel containing vehicle. Histological analyses revealed that at 4 weeks post-surgery, random periodontal ligament fibers had bound to dentin, but were attached only to denuded dentin to which 0.1, 1, or 5 microg of bFGF in collagen gel had been applied. At 8 weeks post-surgery, we observed the formation of dense fibers bound to alveolar bone and newly synthesized cementum in teeth treated with 1 microg of bFGF. CONCLUSION: These results suggest that basic fibroblast growth factor in a collagen gel is a suitable therapy for damaged periodontal ligament and could lead to readily achievable methods of treatment for periodontal disease.     

骨形成蛋白—2和成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞增殖的联合效应

目的：探讨重组人骨形成蛋白－2（rhBMP-2)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 单独或联合作用对人牙周膜细胞（PDLCs)增殖的影响。方法：体外培养人PDLCs,分别用不同浓度的rhBMP-2和bFGF单独或联合作用,用四唑盐比色法（MTT法）进行观察。结果：rhBMP-2和bFGF单独作用后PDLCs的增殖较对照组有明显的升高;而rhBMP-2与bFGF联合作用后PDLCs的增殖较各自单独作用有更明显的升高（P＜0．05）。结论：rhBMP-2与bFGF联合应用对于促进人PDLCs的增殖具有协同作用。     

纳米羟基磷灰石材料复合碱性成纤维细胞因子促进牙周组织再生的实验研究

目的:探讨新型纳米羟基磷灰石材料—纳米羟晶/胶原仿生骨材料(nHAC)作为生长因子载体和牙周组织工程支架材料应用的可行性,观察评价其对牙周组织再生修复的影响和意义。方法:将人牙周膜细胞(HPDLCs)接种于nHAC三维支架上复合培养,体外扫描电镜观察HPDLCs在nHAC支架上的附着、生长情况,并将碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与nHAC复合植入动物人工牙周组织缺损,表面覆盖聚四氟乙烯(e-PTFE)膜,以空白对照组和单纯置膜组作为对照。术后8周进行组织学观察和测量,分析评价其牙周组织的再生情况。结果:扫描电镜可见nHAC具有良好的多孔网状结构,PDLCs在nHAC支架上贴附紧密,生长旺盛,伸展充分,动物实验结果显示nHAC/bFGF/膜复合植入组较空白对照组和单纯置膜组有更多新生的牙槽骨、牙周膜和牙骨质生成,结果具有显著性差异。结论:nHAC具有良好的三维空间结构和细胞相容性,与bFGF复合植入牙周缺损后可显著促进牙周组织再生,提示nHAC有望成为理想的生长因子载体和牙周组织工程支架材料。     

Immunolocalization growth factor (bFGF) in human periodontal ligament (PDL) tissue

The distribution of basic fibroblast growth factor (bFGF) in periodontal ligament (PDL) tissue was investigated in samples which were obtained from freshly extracted human teeth. The PDL tissue was collected by scraping, and bFGF was identified and localized by immunohistochemistry. Fibroblasts. endothelial cells, some fibrocytes and extracellular matrix (ECM) stained positively for bFGF It was observed that cells from healthy PDL stained more intensely than those from PDL of teeth associated with chronic periodontitis; histological cell counts revealed that the numbers of fibroblasts was greater (p<0.0005) in healthy PDL than in diseased PDL tissue. The results of this study show that bFGF is produced primarily by PDL fibroblasts and endothelial cells in the PDL and that bFGF levels may be decreased in tissue associated with chronic periodontal lesions.     

动态观察bFGF和rhBMP对牙周膜细胞增殖的影响

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和重组人骨形成蛋白(rhBMP)分别及联合作用对人牙周膜细胞(PDLCs)增殖的影响；优选其最佳显效浓度。方法 选取因正畸治疗需要拔除的第一前磨牙，刮取根中1／3牙周膜组织作为标本，采用牙周膜细胞的体外培养技术，用四唑盐比色法(MTT)和酶动力学方法，动态观察bFGF、rhBMP梯度含量分别及联合作用对人PDLCs增殖的影响。结果 bFGF、rhBMP分别作用均能促进PDLCs的增殖；bFGF(10) rhBMP(200)(最佳浓度之和)促PDLCs增殖作用均较其分别作用更加显著；动态观察bFGF(10) rhBMP(200)作用于PDLCs 1～7d，显示出连续递增的促增殖趋势。结论 bFGF、rhBMP分别作用均能促进人PDLCs的增殖，联合应用则更具有协同作用；其中bFGF(10) rhBMP(200)为最佳显效浓度     

碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞增殖和细胞周期的影响

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)对体外培养的人牙周膜细胞（PDLC）增殖和细胞周期的影响，且呈剂量依赖性；FCM对细胞周期时相分析结果显示，经bFGF作用后，人PDLC的DNA合成量（S%）显著升高，G1%降低，反映细胞增殖活力的增殖指数PrI值（S G2M）%增高。结论：bFGF能促进人PDLC的增殖和DNA合成，这一作用可能是通过促使处于G1期的PDLC进入S期来实现的。     

Distribution and quantity of label-retaining cells in rat oral epithelia

Background:  Label-retaining cells (LRCs), the presumptive stem cells, have been detected in the mouse and hamster oral epithelia, but the data on LRCs in rat oral epithelia have not been available yet. The aim of this study was to identify LRCs in oral squamous epithelia of rat.
Methods:  Fifty-four two-week-old Sprague-Dawley rats were injected intraperitoneally with BrdU twice daily for four consecutive days. The BrdU-labeled rats were sacrificed at 2 h, week 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 and 16 after the last BrdU injection. The tissues of cheek, tongue and palate were analyzed by techniques of fluorescence-activated cell sorting (FACS) and immunohistochemistry.
Results:  The number of BrdU-labeled cells quantified by FACS increased within 2 weeks after labeling, then, decreased gradually until week 10. After week 10, the BrdU-labeled cells were found to locate mainly in basal layer and their number kept consistent at 3–7% of total oral epithelial cells. The number of BrdU-labeled epithelial cells in palate was statistically higher than that in cheek or tongue at the same time point.
Conclusions:  This study showed that the number and the distribution of BrdU-labeled epithelial cells stabilized from 10 weeks after labeling. Therefore, these BrdU-labeled cells after a 10-week chase were considered oral epithelial LRCs.     

碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜细胞生长的影响

目的 探讨在碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)作用下,人牙周膜细胞（PDLC）的增殖、DNA合成状况的变化。方法 以常规体外组织块细胞培养法获得PDLC,采用MTTI地和^3H-TdR掺入法测定bFGF对PDLC的影响,实验结果A值和CPM值经方差分析。结果 各实验组与对照组之间均有显著性差异,bFGF能显著提高PDLC的增殖活性及DNA合成,其效应随bFGF浓度增大而增大,1000ng/ml范围内未见抑制现象,最大效应一半的浓度约为100ng/ml。结论 bFGF能促进PDLC增殖及DNA合成,可望在牙周再生治疗中起到重要作用。