反义技术展望

反义技术是根据碱基互补原理,利用与靶ＤＮＡ或靶ＲＮＡ互补的短链寡聚核苷酸片段抑制基因表达的方法。反义技术,在理论上作一种完善的、特异性的方法阻断基因的表达,在短短的二十年野取得了迅速发展。本文将对反义技术、反义技术存在的问题及可能的解决方法、以及当前的义技术在医学中的应用进行阐述,本文将对反义技术未来的发展趋势进行讨论。     

反义核酸抑制miR-20、miR-106表达对293T细胞增殖的影响

目的:通过反义核酸技术抑制miR-20、miR-106的表达,检测对293T细胞增殖的影响。方法:应用特异性针对miR-20、miR-106的反义核酸转染293T细胞,用形态学、流式细胞技术研究反义核酸对细胞增殖的抑制作用,用定量PCR和ELISA研究miRNA和相关靶基因的表达。结果:研究发现反义核酸可有效抑制miR-20和miR-106的表达,并明显抑制293T细胞的增殖;研究还表明反义miR-106可明显上调抑癌基因Rb的表达。结论:反义核酸通过抑制miRNA表达,上调抑癌基因Rb的表达,能明显抑制293T细胞增殖。     

反义技术与神经生物学

反义技术即用人工合成或生物合成的特定互补的ＤＮＡ或ＲＮＡ片段阻断从基因到蛋白的信息流，以达到抑制或阻断基因的表达。利用这一技术可以从分子水平进一步阐明许多神经生物学现象的机理。近年来反义技术及其在神经生物学中的应用发展较快。如对用常规手段很难研究的脑内神经肽Ｙ，利用反义技术可以更深入地了解它的功能特点，其他如在神经系统中ＮＭＤＡ受体、阿片受体以及ｃ－ｆｏｓ功能的研究中，反义技术都有广泛的应用。     

反义治疗与白血病靶基因研究进展

反义技术是根据碱基互补原理 ,利用与目标靶ＤＮＡ或ＲＮＡ互补的短链片断封闭基因表达。反义技术用于抗白血病的理论基础 ,是用反义核酸中止原癌基因或癌基因的表达 ,使白血病细胞分化或凋亡 ,达到治疗的目的。其特点是 ,特异性强 ,对正常细胞无明显影响。反义核酸能在核酸水平上抗白血病 ,优于在蛋白水平的作用。基本内容包括 :反义ＲＮＡ、反义ＤＮＡ、核酶 (ｒｉｂｏｚｙｍｅ)和三股螺旋ＤＮＡ(ＤＮＡ -Ｔｒｉｐｌｅｘ)。主要通过下列作用之一或联合作用抑制靶基因表达 :1 与双链ＤＮＡ形成三链结构 ,使ＤＮＡ转录受阻。 2 结合靶ｍＲ…     

反义CⅡTA基因转移对MHCⅡ类分子表达的抑制作用

主要组织相容性复合体 (ＭＨＣ)Ⅱ类分子可将外源性抗原提呈给Ｔ辅助细胞。ＭＨＣⅡ类的组成型表达仅限于“专职性”抗原提呈细胞 ,但细胞因子如ＩＦＮ γ可引起诱导型Ⅱ类分子表达。无论是组成型还是诱导型Ⅱ类分子表达 ,ＭＨＣⅡ类分子转录活化因子 (ＣⅡＴＡ)都是绝对必需的。近年的研究提示ＣⅡＴＡ是控制ＭＨＣⅡ类基因表达的主宰调节者 ,决定着ＭＨＣⅡ类分子的存在与否及表达程度。因此 ,ＣⅡＴＡ是干预ＭＨＣⅡ类分子抗原提呈作用的理想靶点。反义技术是基因治疗中很有前途的策略 ,用反义核酸抑制靶基因的转录或翻译 ,从而阻断或减…     

反义核酸技术及其在恶性黑素瘤中的应用进展

恶性黑素瘤对化疗等多种通过凋亡途径杀伤肿瘤细胞的治疗方法疗效均不理想。近年来利用反义核酸技术选择性地封闭与细胞增殖、凋亡及耐药密切相关的靶基因,在恶性黑素瘤研究中取得了较大进展,为恶性黑素瘤的治疗提供了新的途径。体内外研究结果显示反义核酸治疗可有效抑制黑素瘤细胞增殖、促进细胞凋亡及逆转细胞耐药性。特别是针对抗凋亡基因BCL-2的反义核酸已作为一种最有希望的反义核酸药物同化疗药物联合用于恶性黑素瘤Ⅲ期临床试验。     

反义寡核苷酸技术及其在NMDA受体亚单位研究中的应用

反义寡核苷酸技术是利用碱基互补配对的原则 ,设计一段寡脱氧核苷酸 ,与靶序列特异结合 ,从而抑制基因表达 ,降低mRNA和 /或蛋白质水平 ,影响动物的后续生物效应。反义寡核苷酸技术作为一种快速、特异性阻断基因表达的方法 ,近二十年来取得迅速发展 ,其潜在应用价值巨大。特别是近年来在对NM DA受体领域的反义研究 ,越来越得到人们的重视。本文就反义寡核苷酸技术及当前反义寡核苷酸技术在NMDA受体亚单位研究中的应用进行阐述。     

反义锁核酸在转基因小鼠体内阻断乙肝病毒C基因表达

目的 探讨针对乙肝病毒C基因反义锁核酸在转基因小鼠体内阻断病毒基因表达的效果.方法 各实验组经尾静脉给药后,采用real-time PCR、时间分辨免疫荧光技术、免疫组织化学法等技术分别检测血清HBV DNA、HBeAg含量及肝细胞内HBcAg的表达情况.结果 注射锁核酸后,对乙肝病毒核酸的复制和乙肝病毒e抗原的合成均有较强的抑制作用,注射后1、3 和5 d,HBV DNA的平均抑制率分别19.24％、39.20％和44.47％;HBeAg的平均抑制分别为30.71％、51.14％和63.46％;小鼠肝细胞的HBcAg阳性细胞数也较对照组明显减少.结论 针对乙肝病毒C基因的反义锁核酸在转基因小鼠体内能有效抑制病毒基因的复制和表达,提示C基因可作核酸药物治疗的有效靶位.     

反义RNA应用于抗HBV、HCV肝炎病毒的研究进展

HBV、HCV是引起慢性肝炎以及肝硬化、肝细胞肝癌等相关疾病的重要病原体,而有效防治此类肝病的关键在于抗病毒,反义核酸技术自发现以来不断发展,其在分子水平抑制肝炎病毒有着巨大潜力,本文就近年来反义RNA在抗HBV、HCV方面的研究应用作一综述.     

寻求反义分子

合理的设计和特异性使反义分子抓住了人们的想象力，不过，它们比最初预测的难生产得多，至今尚无任何语气表明它们具有去除单一基因的功能，而且同学 存在许多未预测的非反义效应。本旨在综述反义策略中产生或破坏特异性的一些因素，讨论通过不同的判断治疗的复杂性及研究制剂的必要性。