“长寿灵”对小鼠巨噬细胞免疫功能影响的实验研究

据李蓉氏等报道:为进一步探讨“长寿灵”(黑龙江中医学院附属医院药厂制,其药物组成为黄芪、黄精、何首乌、玉竹等)是否有增强非特异性免疫作用,选用由氢化可的松琥珀酸纳(HCSS)造成的巨噬细胞严重受抑的小鼠模型,观察“长寿灵”对巨噬细胞的作用。经氢化可的松琥珀酸纳造成巨噬细胞严重受抑的小鼠在灌胃“长寿灵”后,腹腔巨噬细胞的廓清能力     

长寿回春灵的免疫调节作用

本文采用ALS所致细胞免疫活性低下模型,观察了长寿回春灵对免疫系统的调节作用。结果表明,长寿回春灵可使“ALS”模型脾脏T细胞总数显著提高,恢复至正常水平;也可提高B细胞数;对单核——巨噬细胞系统的清除功能无明显影响。长寿回春灵可以纠正“ALS”模型鼠血清IgG的紊乱,使其恢复正常水平。     

"免增灵"对小鼠免疫功能的影响

观察中药“免增灵”对小鼠单核细胞吞噬功能、体液免疫功能和细胞免疫功能的影响。结果表明：“免增灵”能明显提高正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的功能,拮抗环磷酰胺的免疫抑制作用;明显提高正常小鼠和腹腔注射环磷酰胺小鼠的空斑形成测定值,提示可以促进抗体形成细胞B淋巴细胞的功能;能明显提高正常和腹腔注射环磷酰胺小鼠的淋巴细胞转化率,提示可以促进T淋巴细胞的功能,应能减轻癌症病人放、化疗的免疫抑制作用,提高其抗病能力。     

长寿灵冲剂对动脉粥样硬化患者免疫功能的影响

本文对50例动脉粥样硬化患者进行了中药长寿灵冲剂治疗前后免疫功能的观察,发现患者治疗前血清循环免疫复合物含量明显高于健康人,其中与健康人比 IgG和 IgA 含量,P<0.001,IgM 含量 P<0.05,C_3含量、K 细胞的抗体依赖细胞介导的细胞毒活力,T 淋巴细胞转化率及 E 花环形成率均明显低于健康人(P<0.001)。长寿灵治疗后患者上述紊乱的免疫指标均恢复至正常水平,说明长寿灵对动脉粥样硬化患者的免疫功能紊乱有良好的调节作用。     

三合饮对AS模型小鼠主动脉斑块形成的影响及其作用机制的实验研究

目的:探究三合饮调控巨噬细胞稳定动脉粥样硬化(AS)斑块机制。方法:取ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-),高脂饲料喂养建立AS模型,随机分为AS组,三合饮低、中、高剂量组(7.5、15、30 g/kg)和阿托伐他汀组(3 mg/kg),取C57BL/6J小鼠作正常组;各组连续给药4周。采用油红O染色评估小鼠主动脉斑块面积,双抗夹心ELISA检测小鼠血清白细胞介素18(IL-18)和白细胞介素1β(IL-1β),免疫荧光检测主动脉NOD样受体蛋白3(NLRP3)和巨噬细胞抗体2(MOMA-2)表达和共定位情况。结果:与正常组比较,AS组小鼠主动脉斑块面积占比明显增加,血清IL-18、IL-1β、主动脉NLRP3、MOMA-2及共表达荧光活性明显升高(P<0.05);与AS组比较,三合饮中、高剂量组和阿托伐他汀组斑块面积占比明显减少,IL-18、IL-1β、NLRP3、MOMA-2及共表达荧光活性明显降低(P<0.05),上述指标变化以三合饮高剂量组效果最显著。结论:三合饮可能通过调节NLRP3表达、减少巨噬细胞稳定AS斑块。     

中药穴位敷贴疗法对哮喘大鼠肺组织中白细胞介素-4、γ干扰素表达的影响

目的:探索穴位敷贴疗法对哮喘的治疗效果及可能的作用机制。方法:将大鼠随机分为正常组(n=6)、模型组(n=9)、地塞米松组(n=9)及穴位贴药组(n=9)。以卵蛋白致敏并诱发哮喘模型。地塞米松组在哮喘大鼠雾化后予以腹腔注射1 mg/kg地塞米松,同时在背部备皮予以空白药物敷贴;穴位贴药组在哮喘大鼠雾化后予以腹腔注射1 mg/kg的生理盐水,同时在背部备皮予以治疗药物敷贴。穴位取“大椎”“肺俞”“脾俞”“肾俞”穴。疗程结束24 h内取各组大鼠肺组织固定、HE染色,观察其炎症情况,并用免疫组化方法比较各组中白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)在肺组织中的表达。结果:模型组大鼠肺组织中可见嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞浸润且较正常组明显增加(P<0.01);地塞米松组大鼠肺组织中嗜酸性粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞浸润与模型组比较均明显降低(P<0.01,0.05);穴位贴药组对嗜酸性粒细胞浸润有明显抑制作用(P<0.01),但对于淋巴细胞及巨噬细胞浸润无明显作用(P>0.05)。模型组大鼠肺组织中IL-4表达较正常组明显增加(P<0.01),而IFN-γ表达较正常组明显降低(P<0.01);地塞米松组及穴位贴药组大鼠肺组织中IL-4表达较模型组明显降低(P<0.01);地塞米松组IFN-γ表达与模型组比较无明显差异(P>0.05),且明显低于正常组(P<0.01);穴位贴药组IFN-γ表达明显高于模型组(P<0.05),且与正常组无明显差异(P>0.05)。结论:中药穴位敷贴疗法对IL-4、IFN-γ在哮喘大鼠肺组织中的表达具有明确的影响,并对哮喘大鼠肺组织中嗜酸性粒细胞的浸润有明显的抑制作用。以上影响对大鼠体内Th1/Th2的平衡可能起到了良性的调整作用,从而对哮喘的治疗产生效果。     

电针预处理对动脉粥样硬化兔腹腔巨噬细胞CD36及SR-A1表达的影响

目的:探究电针预处理对动脉粥样硬化型兔腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的基因和蛋白表达的影响。方法:将32只雄性新西兰兔随机分为3组,即空白对照组(7只)、造模组(19只)、电针预处理组(6只)。兔动脉粥样硬化的模型通过高脂饲料喂养加行颈总动脉球囊损伤术。造模组再随机分为模型对照组、阳性药物组、电针治疗组,每组6只。造模组经8周造模成功后,进行4周的干预治疗。电针预处理组适应性喂养1周后,进行电针预处理,针刺双侧的内关穴、足三里穴以及关元穴,双侧内关穴、足三里穴连接电针仪20 min,采用疏密波(4 Hz/20 Hz,1 m A),每日1次,针刺6 d,休息1日,针刺3周后,再经8周造模,造模成功后,再给与电针治疗组相同的干预治疗。采用免疫组化法检测各组兔腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的蛋白表达情况;采用RT-PCR检测各组兔腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的基因表达情况。结果:与正常组比较:模型组的腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的基因和蛋白的表达均明显升高(P0.05);与模型组比较:电针治疗组、阳性药物组的腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的基因和蛋白的表达均明显降低(P0.05),电针治疗组与阳性药物组比较差异无统计学意义(均P0.05);与电针治疗组、阳性药物组相比:电针预处理组的腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的基因和蛋白的表达均明显降低(P0.05)。结论:电针预处理组能明显降低动脉粥样硬化兔腹腔巨噬细胞受体CD36及SR-A1的表达,这可能是针刺预防动脉粥样硬化疾病的机制之一。     

溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜Toll样受体2、4基因表达的影响

目的:观察溃结灵对溃疡性结肠炎(UC)大鼠模型结肠粘膜Toll样受体(TLR)2、4基因表达的作用。方法:用三硝基苯磺酸(TNBS)法制备UC大鼠模型,将48只大鼠分为正常组、模型组、溃结灵低、中、高三个剂量组和柳氮磺胺吡啶(SASP)组,分别检测肠粘膜TLR2、TLR4基因表达水平。结果:模型组TLR2、TLR4基因相对表达量均明显高于正常组(P<0.01);溃结灵中、高剂量组TLR2相对表达量明显低于模型组(P<0.05);溃结灵高剂量组TLR4相对表达量明显低于模型组(P<0.05)。结论:UC大鼠结肠粘膜TLR2、TLR4基因高表达,溃结灵对TLR2、TLR4基因表达有抑制作用,这可能是其抗UC作用的机理之一。     

强壮灵合剂对小鼠免疫功能的影响

目的研究强壮灵合剂对小鼠免疫功能的影响。方法采用氢化可的松制备小鼠免疫抑制模型,连续灌胃给予不同剂量的强壮灵合剂30 d,测定免疫抑制小鼠单核巨噬细胞吞噬指数,胸腺、脾脏指数及迟发型过敏反应水平,观察强壮灵合剂对免疫抑制小鼠免疫功能的影响;给正常小鼠连续灌胃给予不同剂量的强壮灵合剂15 d,测定小鼠胸腺、脾脏指数、血清溶血素水平,观察强壮灵合剂对正常小鼠免疫功能的影响。结果与模型组相比,强壮灵合剂能显著提高免疫抑制小鼠的单核巨噬细胞吞噬功能、迟发型超敏反应水平;显著提高正常小鼠的溶血素抗体生成能力;能提高免疫抑制小鼠和正常小鼠的免疫器官指数。结论强壮灵合剂具有调节增强免疫功能,对小鼠特异性免疫和非特异性免疫均有一定的增强作用。     

逍遥散降低情志应激诱导的乳腺癌“易感性”的作用机制研究

目的：从巨噬细胞吞噬功能角度探讨逍遥散缓解情志应激诱导的乳腺癌“易感性”的作用机制。方法：将20只小鼠采用完全随机方法分为对照组、模型组、低剂量逍遥散组、高剂量逍遥散组,每组5只。小鼠连续28 d给予拘束应激或低、高剂量的逍遥散(3.25 g/kg, 6.50 g/kg),在第7天皮下接种4T1小鼠乳腺癌细胞建立小鼠荷瘤模型,记录小鼠的瘤径、瘤重以及肿瘤拍照。小鼠取材后通过高效液相-紫外分光法检测血浆中皮质酮的含量;免疫组织化学方法观察肿瘤组织中巨噬细胞吞噬现象;采用蛋白质印迹法、实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、免疫荧光技术检测肿瘤组织中“吃我”信号受体低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP1)、“不吃我”信号受体信号调节蛋白α(SIRPα)和微RNA(miRNA)的表达情况。结果：与模型组比较,低、高剂量逍遥散组显著缓解应激诱导的乳腺癌“易感性”,抑制肿瘤组织中巨噬细胞的吞噬功能,其作用与促进巨噬细胞LRP1的蛋白和基因表达水平,抑制SIRPα蛋白表达有关(P<0.05);逍遥散对巨噬细胞的调节作用,与增加miRNA-4259/6680-5p/7847-3p表达有关...     

灰树花提取物对脾虚小鼠腹腔巨噬细胞和脾细胞的影响

目的:探讨灰树花提取物对脾虚小鼠的免疫调节机制。方法:健康雄性清洁级昆明小鼠30只随机分为6组,即空白对照组、脾虚组、阳性对照组(香菇多糖,2 mg·kg-1)、灰树花提取物低剂量组(5 mg·kg-1),灰树花提取物中剂量组(10 mg·kg-1)、灰树花提取物高剂量组(20 mg·kg-1),每组5只,滤菌后ip 10 d,第11天处死动物。检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红、产生一氧化氮(NO)能力(Griess法),以及MTT法检测淋巴细胞转化率、自然杀伤细胞(NK细胞)杀伤活性。结果:高剂量灰树花提取物可明显提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力(P<0.05)和产生NO能力(P<0.01);高剂量灰树花提取物能明显提高小鼠脾脏B细胞增殖能力(P<0.01);中、高剂量灰树花提取物能明显提高小鼠脾脏T细胞增殖能力(P<0.05和P<0.01)灰树花提取物中、高剂量组小鼠脾脏NK细胞杀伤能力均明显高于脾虚组(P<0.01)。结论:灰树花提取物可以通过提高巨噬细胞吞噬能力和产生NO能力、以及淋巴细胞转化率、NK细胞杀伤活性的途径提高脾虚小鼠的免疫功能。     

清解活血灵体外对巨噬细胞产生TNFα的影响

[目的]观察清解活血灵对体外培养的腹腔巨噬细胞(MΦ)分泌肿瘤坏死因子α(TNFα)的影响。[方法]用预先确定的浓度的细菌脂多糖 (LPS)刺激腹腔巨噬细胞分泌TNFα,然后加入中药清解活血灵观察其对TNFα产生的影响 ,TNFα活性用四甲基偶氮唑 (MTT)法检测。[结果]不同浓度的中药清解活血灵对LPS刺激MΦ分泌TNFα有明显得抑制作用 ,在给药后不同时间点 ,与单纯LPS组相比中药组TNFα活性明显下降 (P<0.05),[结论]中药清解活血灵能有效抑制LPS刺激MΦ对TNFα的分泌     

电针“足三里”穴对免疫抑制大鼠细胞免疫的影响

目的 :研究电针“足三里”穴对大鼠T细胞亚群和红细胞免疫粘附能力的影响。方法 :应用流式细胞仪技术 ,通过微量全血直接免疫荧光染色法测定各组大鼠的外周血T淋巴细胞亚群以反映细胞免疫功能 ,应用红细胞C3b受体 酵母菌花环试验和红细胞 IC花环试验检测红细胞免疫功能。结果 :电针“足三里”穴组大鼠T4细胞百分率、RBC C3bRR、RBC ICR明显高于正常对照组 (P <0 .0 1 ) ,CD8+无明显变化 (P >0 .0 5) ;免疫抑制模型组的大鼠T4细胞百分率、RBC C3bRR明显低于正常对照组 (P <0 .0 5) ,T8细胞百分率、RBC ICR与正常对照组相比无明显变化(P >0 .0 5) ;免疫抑制 +“足三里”组大鼠T4细胞百分率、RBC C3bRR、RBC ICR与免疫抑制组相比有明显改善和提高 (P <0 .0 1 )。结论 :电针“足三里”穴可提高正常大鼠与免疫抑制模型大鼠的T细胞免疫功能及红细胞免疫粘附能力。     

肾衰灵对5/6肾切除大鼠肾脏TGF-β1 mRNA表达的影响

目的:观察肾衰灵对慢性肾衰(CRF)大鼠肾组织层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(C-Ⅲ)及转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达的影响。方法:采用5/6肾切除法建立慢性肾衰肾小球硬化大鼠模型,随机分为正常组、模型组、赖诺普利组、肾衰灵组,8周后测定各组大鼠肾组织LN,C-Ⅲ及TGF-β1mRNA表达及肾脏病理变化。结果:模型组大鼠肾组织LN,C-Ⅲ及TGF-β1mRNA表达与正常组相比均明显增加(P<0.05),肾衰灵、赖诺普利组明显低于模型组(P<0.05),肾衰灵组明显低于赖诺普利组(P<0.05)。肾衰灵组肾脏病理变化明显减轻。结论:肾衰灵对5/6肾切除大鼠肾脏有明显保护作用,肾衰灵可显著降低大鼠肾组织TGF-β1相对mRNA表达,使LN,C-Ⅲ型胶原的合成减少,减轻肾组织中细胞外基质的沉积和肾小球的硬化,进而达到延缓肾功能衰竭的目的。     

电针对佐剂性关节炎大鼠炎症局部δ阿片受体mRNA表达的影响

目的:从阿片受体角度观察电针(EA)对佐剂性关节炎(AA)大鼠产生镇痛的外周机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、EA组和单针组。于实验第1天在模型组、EA组大鼠右后足垫部向踝关节方向注入弗氏(Freund s)完全佐剂0.1 mL造模。以“悬钟”“昆仑”为EA穴位,刺激参数为2~4 V,20~100 Hz,每天1次,每次20 min,连续6 d。以原位杂交等为检测方法,在EA治疗后观测大鼠痛阈、炎症局部δ阿片受体(DOR)mRNA的表达。结果:①EA可明显提高炎症痛大鼠的痛阈,EA组与模型组比较有显著性差异(P<0.01),而与正常组无显著性差异(P>0.05);②EA组炎症局部DOR mRNA的表达明显高于模型组(P<0.01)。结论:EA对AA大鼠有明显镇痛效应,且镇痛效应的产生与大鼠炎症局部的DOR mRNA表达增强有关。     

健乳灵对乳腺增生大鼠GnRH及其受体mRNA表达的影响

目的观察乳腺增生大鼠下丘脑促性腺激素释放激素(GnRH)及垂体促性腺激素释放激素受体(GnRHR)mRNA表达与正常大鼠的差异,并观察治疗乳腺增生症的中药制剂健乳灵对其的影响,探寻乳腺增生症的内分泌机制及健乳灵治疗乳腺增生症的内分泌环节。方法将SD大鼠分为空白组、模型组、治疗组,后两组制成乳腺增生大鼠模型,空白组和模型组大鼠予生理盐水灌胃,治疗组大鼠予健乳灵药液灌胃;治疗60d,采用RT-PCR法检测GnRH及GnRHR基因表达。结果模型组与空白组比较,GnRH及GnRHRmRNA表达水平均明显上调;治疗组与模型组比较,GnRHRmRNA表达水平均明显下调;治疗组与空白组比较,GnRHmRNA表达水平明显上调,GnRHRmRNA表达水平无明显差异。结论乳腺增生症的内分泌发生机制可能与下丘脑GnRH及垂体GnRH受体表达增加有关;健乳灵对乳腺增生的治疗机理可能与调节下丘脑GnRH及垂体GnRH受体表达减少有关。     

麦粒灸对佐剂性关节炎大鼠细胞免疫功能的影响

目的　探讨麦粒灸对佐剂性关节炎 ( A A)大鼠细胞免疫功能的影响。方法　以佐剂性关节炎作为类风湿关节炎大鼠模型 ,分为正常对照组、模型组、麦粒灸治疗组、麦粒灸加去肾上腺组、麦粒灸加假手术组。麦粒灸“肾俞”、“足三里”,检测IL-1、IL-2、IL-6含量变化。结果　模型组大鼠腹腔巨噬细胞 IL-1、IL-6的活性比正常大鼠明显升高 ( P<0 .0 1)。麦粒灸组大鼠 IL-1、IL-6活性较模型组比明显下降 ( P<0 .0 5 )。麦粒灸加去肾上腺组 IL-1、IL-6活性未见明显变化 ( P>0 .0 5 ) ,假手术组IL-1活性极显著降低 ( P<0 .0 1) ,IL-6比模型组明显为低 ( P<0 .0 5 )。模型组大鼠脾脏 IL-2活性降低 ( P<0 .0 5 ) ,麦粒灸治疗后可使 IL-2活性极显著升高 ( P<0 .0 1) ,麦粒灸加去肾上腺组 IL-2活性与麦粒灸组及假手术组比 ( P<0 .0 5 ) ,但与模型组比无显著性差异 ( P>0 .0 5 )。假手术组 IL-2活性亦明显提高 ( P<0 .0 1) ,而与正常组无差异。结论　麦粒灸可抑制 AA大鼠 IL-1、IL -6活性。摘除肾上腺后则麦粒灸不能降低 IL -1、IL -6活性 ;麦粒灸可明显提高 IL -2活性 ,摘除肾上腺后麦粒灸则对 IL -2活性无明显影响 ;麦粒灸对 A A细胞免疫功能的调整与下丘脑 -垂体 -肾上腺的完整有关     

慢性肾功能不全穴位注射对机体红细胞免疫功能影响的研究

目的观察鱼腥草、板蓝根注射液穴位注射治疗慢性肾功能不全(简称CRF)及对红细胞免疫功能的影响。方法选择慢性肾功能不全伴轻度氮质血病人、正常人组各30例,分别做红细胞免疫功能检测及免疫球蛋白检测。结果治疗前CRF患者红细胞免疫C3b受体花环及促进因子明显低于正常对照组(P<0.01),免疫复合物花环及抑制因子较正常对照组高(P<0.05)。免疫球蛋白IgG均低于正常对照组(P<0.01),IgA、IgM与对照组相比无差异(P>0.05)。经治疗4个疗程后,CRF患者红细胞免疫C3b受体花环及促进因子明显增强,与治疗前相比差异显著(P<0.05),免疫复合物花环及抑制因子比治疗前有明显调整,两者相比有显著差异(P<0.05),免疫球蛋白IgG比治疗前有显著提高(P<0.05)。结论CRF患者经过穴位注射治疗4个疗程后,对机体红细胞免疫黏附功能和体液免疫功能有明显增强及调节作用,并使机体抗病能力增强,临床检验肾功能各项指标有所纠正。     

电针对坐骨神经损伤模型大鼠行为学及脊髓中TrkC表达的影响

目的:观察电针对坐骨神经损伤大鼠行为学、神经生长因子受体TrkC的影响,探讨电针治疗坐骨神经损伤的生物学机制。方法:采用神经夹持损伤的方式建立大鼠坐骨神经损伤模型,通过SFI指数、BBB评分观察正常组、假手术组、模型组、模型对照组与电针组大鼠的行为学变化;通过免疫组织化学染色观察各组大鼠脊髓内TrkC表达情况,进而统计分析各组间的差异。结果:(1)模型组、模型对照组、电针组大鼠SFI指数与正常组相比明显降低(P<0.05),电针组与模型组相比,无统计学意义(P>0.05);(2)模型组、模型对照组、电针组大鼠BBB评分与正常组相比明显降低(P<0.05),电针组与模型组相比明显升高(P<0.05),但与正常组相比仍有显著性差异(P<0.05);(3)模型组和模型对照组TrkC平均光密度与正常组相比明显升高(P<0.05),电针组与模型组相比明显升高(P<0.05)。结论:电针治疗可以通过提高神经生长因子高亲和力受体TrkC的释放,促进神经元生长、分化和成熟,最终改善坐骨神经损伤大鼠的运动功能。     

冠心病患者外周血单核细胞源性巨噬细胞清道夫受体活性变化及银杏叶提取物的干预作用

目的观察冠心病患者外周血单核细胞(peripheral blood monocyte,PBMs)转化为巨噬细胞清道夫受体活性及血清炎性因子的变化及银杏叶提取物(Gingko biloba extract,(jBE)对清道夫受体活性的影响,探讨炎性因子水平与清道夫受体活性关系及GBE稳定粥样硬化斑块的可能机制、方法97例血脂正常的冠心病患者分为稳定性心绞痛组、不稳定性心绞痛组、急性心肌梗死组,29名健康人作为对照组、测定所有观察对象血清C反应蛋白(CRP)、可溶性细胞间黏附分子-1(soluble intercellular adhesion molecule-1 sICAM-1)、可溶性血管细胞黏附分子-1(soluble vascular cell adhesion molecule-1,sVCAM-1)水平;并在体外分离培养PBMs转化为巨噬细胞,观察GBE对其表达清道夫受体的影响．结果巨噬细胞清道夫受体活性及血清CRP、slCAM-1、sVCAM-1水平,急性心肌梗死组＞不稳定性心绞痛组＞稳定性心绞痛组＞对照组、GBE能下调冠心病患者PBMs源性巨噬细胞清道夫受体活性．结论冠心病患者PBMs源性巨噬细胞清道夫受体活性与CRP、sICAM-1、sVCAM-1呈正相关,PBMs源性巨噬细胞清道夫受体活性可作为易损斑块活动程度的监测指标;GBE可抑制冠心病患者血PBMs源性巨噬细胞清道夫受体活性。