基于网络药理学研究杜仲叶提取物改善非酒精性脂肪肝的作用及机制

  目的  基于网络药理学探讨杜仲叶提取物(Eucommia ulmoides leaf extracts, ELE)改善非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)的有效成分、作用靶点及可能的作用机制。  方法  使用CNKI、万方、TCMSP、Pubmed等数据库、获取并筛选杜仲叶活性成分; 使用TCMSP数据库和SwissTargetPrediction数据库检索并预测ELE活性成分的靶点; 使用Genecard数据库和Drugbank数据库收集NAFLD疾病的靶点; 使用String 11.0构建蛋白互作(Protein-protein interaction)网络图, 分析蛋白靶点之间的关系; 使用Cytoscape 3.7.1软件构建化合物-疾病靶点-通路网络图, 分析三者之间相互作用的关系; 使用DAVID数据库, 对靶点进行GO分析和KEGG通路富集分析, 并对关键靶点进行实验验证。  结果  ELE改善NAFLD疾病靶点网络主要包含9个化合物和35个靶点, 与脂质代谢相关的靶点有PPARα和CPT-1A, 与NAFLD相关的通路主要有胰岛素抵抗、AMPK信号通路。体内、体外实验发现ELE能通过激活AMPKα及增强靶点PPARα和CPT-1A的表达, 增强脂质氧化, 改善NAFLD。  结论  ELE能增强脂质代谢, 改善NAFLD, 其机制主要与AMPK信号通路相关。      

杜仲叶提取物对MC3T3-E1细胞增殖作用的实验研究

目的研究杜仲叶提取物（Euec）对小鼠成骨样细胞株MC3T3-E1细胞生长、增殖的影响及其分子机制。方法采用Euec与MC3T3-E1细胞体外共同培养,MTT法检测不同浓度Euec处理MC3T3-E1细胞24、48、72h后的细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果4．0～125．0μg／ml的Euec能促进MC3T3-E1细胞增殖,其中7.8μg／ml的Euec对MC3T3-E1细胞增殖的促进作用最强。流式细胞仪检测显示,6.25μg／ml的Euec作用MC3T3-E1细胞48h后,G0/G1期成骨样细胞显著减少,S期成骨样细胞增多,G2/M期成骨样细胞显著增多。结论Euec可促进MC3T3-E1细胞向G2／M期转换,使G1期的成骨样细胞减少,G2期的成骨样细胞显著增加,从而促进细胞的有丝分裂和细胞的增殖。     

杜仲叶乙醇提取物对小鼠免疫功能的影响

用淋巴细胞转化试验，抗体分泌细胞功能测定试验及吞噬试验分别研究用２０％和５０％乙醇提取的杜仲叶药理成分对小鼠免疫功能的影响。结果表明：杜仲叶的乙醇提取成分能明显增强小鼠脾细胞对ＣｏｎＡ刺激的增殖反应及腹腔巨噬细胞的吞噬功能，而对脾抗体形成细胞未见明显影响。     

杜仲叶中黄酮类化合物的研究

杜仲是我国特产。近年来，杜仲树已广泛栽培。为了开发利用杜仲叶，对其有效成分进行分析是很必要的。目前各国科学工作者的研究着重于木脂素类、环烯酸钙类、苯丙素类、萜类、多糖以及杜仲胶等有机化合物，杜仲叶中黄酮类化合物的研究尚未见报道。我们通过RP－HPLC法对杜仲叶中黄酮类化合物的含量及吉元的种类进行了研究。1仪器、试剂和材料杜仲叶来自华中农业大学校园，干燥备用，岛津SLC－6AHPLC仪，X-型树脂，芦了标准品购自中国药品生物制品检定所；其它均为AR级试剂。2实验方法与结果2．1杜仲叶中黄酮昔元的HPLC分析法：取适…     

微胶囊化方法

总结了各种制备微胶囊的方法和原理，结合国内外最近几年对微胶囊的研究进展，介绍了一些常用的微胶囊制备方法。     

杜仲叶水提取物对糖尿病大鼠糖脂代谢及氧化应激的影响

目的 探讨杜仲叶水提取物对糖尿病大鼠血糖、血脂及氧化应激状态的影响。 方法 采用高脂饲料喂养4周联合链脲佐菌素腹腔注射的方法复制糖尿病大鼠模型,随机分为正常对照组、模型对照组、药物对照组、杜仲叶水提取物低、高剂量(2.5、5.0g/kg)组。灌胃给药,每日1次,连续30天。检测大鼠空腹血糖(FBG)、血脂(TG、TC、LDL-C、HDL-C)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、血清丙二醛(MDA)含量,进行统计学分析。 结果 与正常对照组比较,模型对照组大鼠FBG、TG、TC、LDL-C、MDA水平升高,HDL-C、SOD水平降低(P<0.01),提示模型复制成功。与模型对照组比较,杜仲叶水提取物(2.5、5.0g/kg)组FBG、TG、TC、LDL-C、MDA水平降低,HDL-C、SOD水平升高(P<0.01或P<0.05)。 结论 杜仲叶水提取物对糖尿病大鼠血糖、血脂有一定调节作用,推测降低氧化应激水平是其机制之一。     

杜仲叶提取物对清醒大鼠血压的影响

目的观察杜仲叶提取物急慢性降压作用。方法以间接测压法测量清醒大鼠尾动脉血压：①测量自发性高血压大鼠（SHR）多次灌胃杜仲叶提取物的血压变化，观察其慢性降压作用；②测量肾性高血压大鼠1次灌胃杜仲提取物后1、2、4、6、8、h血压，以观察提取物急性降压作用。结果①连续18d灌胃杜仲叶提取物4．2g／kg或6．3g／kg均明显降低SHR血压；②1次性灌杜仲叶提取物4．2g／kg或6．3g／kg均明显降低肾性高血压大鼠血压。结论杜仲叶提取物有明显的降低急慢性血压作用。     

中药杜仲叶致突变试验研究

中药杜仲叶致突变试验结果，其对标准测试菌ＴＡ９７ａ、ＴＡ９８、ＴＡ１００和ＴＡ１０２无诱变作用，小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验均为阴性。表明杜仲叶作为食用是安全的。     

杜仲叶有效成分的地理学研究(Ⅰ)

通过测定七个产区杜仲叶中５种有效成分（次生代谢物）的含量,得出生态因素是调控药用植物有效成分合成与积累的重要因素。并对各种生态因素进行了逐步回归和通径分析,结果表明：影响杜仲叶有效成分合成与积累的主要因素是土壤中的微量元素,而气象因素影响不大。     

贵州不同产地杜仲叶的化学成分比较研究

对采自贵州省贵阳，遵义，安顺三地区杜仲叶的绿原酸，总黄酮，微量元素成分分别用薄层－分光度法，紫外分光光度法，原子吸收光谱法进行了含量测定，对贵州不同产地的杜仲叶质量提供了参考依据。     

差示分光光度法测定杜仲叶提取液中绿原酸的含量

目的对杜仲叶提取液中的绿原酸进行含量测定。方法采用差示分光光度法。结果该试验所建立的分析方法有较好的重现性和稳定性,测定方法的平均回收率为100.41%,RSD=1.5%。结论该方法简便、快速、准确、重现性好。     

杜仲叶的化学、药理及临床应用分析

杜仲叶中含有环烯醚萜类、杜仲胶、木脂素类及苯丙素类、酚类、黄酮类等活性成分,以及有机酸类、维生素和微量元素等营养物质,具有补肝肾、强筋骨、降血压等功效,临床主要用于治疗高血压病、眩晕症、脑血管意外后遗症、慢性肾脏疾病、脊髓灰质炎、慢性关节疾病等。目前,对杜仲叶的研究存在一些不足:1临床应用范围较窄,并没有真正完全将杜仲叶纳入临床应用,只是将其作为辅助治疗药;2临床试验观察的有关指标还不够完善,患者案例过少,缺乏科学理论依据;3当前已生产出的杜仲叶中成药品种较少,未开发出更理想的药品,这些终究归结于对杜仲叶的药理作用机制及具体作用靶点的研究还不够透彻,不够深入,后期应该更加全面化、系统化、有条理地对杜仲叶进行相关研究使其得到最大化的利用。     

杜仲叶中杜仲醇含量的季节变化研究

目的：考察杜仲叶中杜仲醇含量在不同季节的动态变化,为确定杜仲叶的最佳采收期提供理论依据。方法：采用高效液相色谱法对同一种植区域,不同采收期的杜仲叶中杜仲醇的含量进行测定,并采用方差分析方法对结果进行分析。结果：在1%显著水平上,不同采收期杜仲叶中杜仲醇的含量存在极显著差异。结论：杜仲叶中杜仲醇的含量在9月中旬最高（1.450%）,5月最低（0.173%）,以杜仲醇为指标的杜仲叶最佳采收期应为9月中旬前后。     

盐炒杜仲和杜仲炭的药理对比实验研究

目的:观察盐炒杜仲和杜仲炭对小鼠单核-巨噬细胞、血压、中枢镇静作用的影响,以区别两种炮制品药理作用,为临床应用作为参考。方法:选取100只小鼠随机分为空白对照组、2.0g·kg-1盐炒杜仲醇煎液组、8.0 g·kg-1盐炒杜仲醇煎液组、2.0g·kg-1杜仲炭醇煎液组、8.0 g·kg-1杜仲炭醇煎液组,观察不同剂量的盐炒杜仲和杜仲炭对小鼠单核-巨噬细胞的影响。选取100只小鼠随机分为空白对照组、3.0 g·kg-1盐炒杜仲醇煎液组、9.0 g·kg-1盐炒杜仲醇煎液组、3.0 g·kg-1杜仲炭醇煎液组、9.0 g·kg-1杜仲炭醇煎液组,观察不同剂量的盐炒杜仲和杜仲炭对小鼠血压的影响。选取100只小鼠随机分为空白对照组、5.0g·kg-1盐炒杜仲醇煎液组、10.0 g·kg-1盐炒杜仲醇煎液组、5.0 g·kg-1杜仲炭醇煎液组、10.0 g·kg-1杜仲炭醇煎液组,观察不同剂量的盐炒杜仲和杜仲炭对小鼠中枢镇静作用的影响。结果:与空白对照组比较,高剂量的盐炒杜仲醇煎液组和杜仲炭醇煎液组均显著升高(P<0.05),但杜仲炭醇煎液组的免疫效果更加明显。与空白对照组比较,高剂量的盐炒杜仲醇煎液组和杜仲炭醇煎液组均显著降低小鼠的收缩压和舒张压(P<0.05),但杜仲炭醇煎液组降压效果更加明显。与空白对照组比较,高剂量的盐炒杜仲醇煎液组和杜仲炭醇煎液组均显著促进小鼠睡眠(P<0.05),但杜仲炭醇煎液组镇静效果更加显著。结论:盐炒杜仲和杜仲炭均具有较好的免疫作用、较强的降血压作用和中枢镇静作用,但杜仲炭的药理活性更强。文献引用:李轩.盐炒杜仲和杜仲炭的药理对比实验研究[J].中医学报,2015,30(2):238-240.     

杜仲的功效学研究现状及其应用前景

杜仲因具有多种功效是目前研究的热点,本文就杜仲的主要功效成分、药理作用等方面的研究现状作了一下综述,并指出杜仲在预防疾病、维护人类健康和改善人们生活等方面有着巨大的应用前景。     

杜仲扦插繁殖技术研究

通过杜仲的扦插繁殖试验，结果认为：在北京地区最适宜的扦插期是5月下旬至7月中旬；成年树插穗的成活率很低，一般在20％以下，2年生幼树插穗成话率可达60％；外源生长素对诱发插穗不定根生长效果显著，其中NAA50μg／mL处理20年生成树的当年生枝条，最高成活率可达68％，根系生长茂密。     

杜仲叶醇对糖尿病大鼠骨密度的影响

目的 :观察杜仲叶醇对糖尿病大鼠骨密度改变的阻断作用 ,并探讨其机制。方法 :雌性Wistar大鼠 30只随机分成正常对照组、糖尿病 ( DM)模型组和模型加中药组 ,以腹腔注射链脲佐菌素 ( STZ)法制备糖尿病动物模型 ,模型加中药组给予杜仲叶醇灌胃 ,正常对照组和糖尿病模型组给予蒸馏水灌胃 ,每日 1次 ,连续 8周。结果 :杜仲叶醇能提高糖尿病大鼠股骨线密度 ( BWD)和面密度 ( BMD) ,提高血清雌二醇 ( E2 )含量。结论 :杜仲叶醇可阻断糖尿病大鼠的骨丢失 ,其部分机制是通过调节性激素而降低骨转换 ,抑制骨吸收。     

杜仲叶醇提物对小鼠免疫功能的影响

通过检测体外脾抗体形成细胞功能、腹腔巨噬细胞吞噬功能以及脾细胞对ConA的增殖反应,初步研究了3种不同浓度的乙醇提取的杜仲叶成分对小鼠免疫功能的影响。结果表明杜叶醇提物能明显增强脾细胞对ConA的增殖反应;明显增强腹腔巨噬细胞的吞噬功能;对脾抗体形成细胞(AFC)无作用。