TEL—AML1阳性及阴性儿童急性淋巴细胞白血病基因重排的特点分析

目的比较TEL—AML1融合基因阳性及阴性急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿的基因重排特点和其临床特点。方法儿童ALL患儿111例,应用多重PCR技术检测IgH、IgK、TCR1基因重排,双色间期FISH检测TEL—AML1／t（12;21）融合基因。分析不同TEL—AML1基因型与基因重排的相关性。结果在41例TEL—AML1阳性儿童ALL患儿中,多数年龄介于2～10岁,其中3～5岁比例最高;与儿童B系ALLTEL—AML1阴性组相比,TEL—AML1阳性患儿Ig κ和TCRγ的基因重排阳性率增高分别为54％（22／41）和71％（29／41）,两者差异有统计学意义（P分别为0．001、0．007）,但IgH重排和至少发生一个重排均无显著差异。结论t（12;21）是儿童ALL最常见的染色体易位,具有与TEL／AML1融合基因共存的亚克隆,该特点可作为微小残留病的辅助检测,值得在临床中推广使用。     

T细胞受体γ基因和免疫球蛋白重链基因在急性淋巴细胞白血病细胞的重排及其在分型中的意义

用PCR扩增检测27例急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia,ALL)和1例T细胞淋巴瘤(T lymphocytic lymphoma,T-LL)的T细胞受体(Tcell receptor,TCR)γ基因和免疫球蛋白重链(immunoglobulin heavy chain,IgH)基因重排。TCRγ基因在9例T-ALL及2例未分型白血病病例中全部重排;在6例B-ALL中有1例重排;在10例C-ALL中有1例重排,而IgH基因在24例ALL病例中重排,其中7例为T-ALL,1例为未分型白血病。TCRγ和IgH基因在1例T-LL中均无重排,在T-ALL、B-ALL和C-ALL中均有交叉重排现象。我们探讨了这些结果在分型中的意义,同时还注意到,在28例中的10例病人存在IgH和TCRγ基因双重重排,如作为特异的双标记检测其微小残留白血病细胞,无疑会提高准确率。     

以IgH/TCR重排为靶分子的PCR急淋白血病微小残留病检测的现状和进展

以IgH/TCR重排为靶分子的PCR微小残留病(MRD)检测,对儿童急性淋巴细胞白血病的预后判断、预防复发具有重要意义。本文主要对这种方法的进展及其应注意的问题进行综述。     

应用荧光定量PCR检测急性白血病微小残留病的临床意义

对于完全缓解的白血病患者,体内存在的微小残留病（MRD）是复发的主要根源？本实验是通过双链DNA结合SYBR GreenI的实时PCR方法应用免疫球蛋白重链（IgH）和T细胞受体（TCR）基因重排作为ALL微小残留病的检测靶基因,实验证明：MRD可以     

PCR检测白血病微小残留病的发展近况和临床评价

ＰＣＲ用于白血病残留病检测时常利用的靶基因有：染色体平衡易位产生的融合基因及其转录产物、抗原受体基因重排和癌基因。已发现用ＰＣＲ检测残留病,对t（９;２２）＾＋ 、t（１５、１７）＾＋、t（１２;２１）＾＋、t（４;１１）＾＋、ＩgＨ/ＴＣＲ重排＾＋白血病具有明确预后和诊断意义,而对t（８;２１）＾＋、t（１;１９）＾＋、inv （１６）＾＋白血病及以ＷＴ１基因为靶基因的残留病检测,包括多重ＰＣＲ、实时定量Ｒ     

免疫球蛋白重链和T细胞受体基因重排与急性髓细胞白血病的关系

目的:探讨急性髄细胞白血病(acutemyeloidleukemia,AML)患者的免疫球蛋白重链(IgH)、T细胞受体(TCR)基因重排对疾病预后的影响。方法:用聚合酶链反应(PCR)方法检测IgH、TCR基因重排。结果:38例患者中12例发生IgH基因重排(31.6%),8例TCR基因重排(21.1%)。阳性病例完全缓解率低;缓解期长的病例阳性率低;初发或复发时阳性率高。结论:IgH、TCR基因重排提示AML患者预后不良,需密切随访。     

PCR检测急性淋巴细胞白血病微小残留病38例临床分析

微小残留病(Minimal residual disease,MRD)是指白血病患者诱导化疗完全缓解后,体内残留微量白血病细胞的状态.MRD是白血病复发的根源,因此检测MRD对白血病判断预后、预防复发及个体化治疗都有重要意义.作者应用PCR检测了38例急性淋巴细胞白血病(ALL)的IgH和TCRγ基因重排,现报道如下.     

同时伴有tel／abl融合基因和IgH／TCRr基因重排的儿童急性粒单核细胞白血病一例

t(9；12)(q34：p13)的白血病极其罕见．我们发现1例携带这种染色体易位的白血病患儿，并对tel/abl融合基因的表达和IgH/TCRr基因重排进行了研究。     

应用PCR方法检测淋巴细胞白血病IgH和TCRγ基因重排

本文应用PCR方法扩增IgH基因重排产生的CDR-Ⅲ区序列和TCRγ基因重排产生的V_9区序列,共检测了20例淋巴细胞白血病病人,其中15例B淋巴细胞白血病均发生IgH基因重排,并有2例出现两种基因扩增产物,它的大小为70-140bp;另5例T淋巴细胞白血病中有2例发生TCRγ基因重排,扩增产物的大小为170-230bp,而在正常人和非淋巴细胞白血病中均未发现有IgH和TCRγ基因重排。     

急性淋巴细胞白血病IgH与TCRγ基因重排模式的探讨

急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblasticleukemia,ALL)IgH和TCRγ基因重排产生了特异性的肿瘤标记,其重排模式反映了白血病细胞克隆形成情况。本研究应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,体外扩增检测了30例ALL病人IgH和TCRγ基因重排,试图在基因水平上观察和分析其重排模式。     

急性淋巴细胞白血病TCR/IgH基因重排的联合检测及临床意义

目的探讨T细胞受体γ（T　cell　receptor．γ，TCRγ）、T细胞受体δ（T cell receptor δ，TCRδ）、免疫球蛋白重链（Immunoglobulin heavy chain H，IgH）基因重排的联合检测方法及其在监测急性淋巴细胞白血病（Acute Lymphoblastic Leukemia，ALL）微小残留病（Minimal Residual Disease，MRD）中的临床意义。方法应用PCR／SSP的方法对104例急性淋巴细胞白血病患者（83例儿童、21例成人）进行TCRγ、TCRδ、IgH三种基因重排的联合检测，并通过动态监测来了解它们与临床MPD的关系。结果三种基因重排联合检测在ALL患者的检出率较高（儿童前B-ALL为89．2％，T-ALL为94．4％；成人PreB-ALL为84．6％，T-ALL为87．5％），远高于单一基因重排的检出率；联合检测持续阳性患者的复发率远高与阴性患者（Χ^2=9．07，P〈0．01）。结论TCRγ、TCRγ、IgH基因重排的联合检测方法简便、敏感性高，对于急性淋巴细胞白血病的诊断以及MRD的监测具有非常重要的临床意义。     

以IgH／TCP重排为靶分子的PCR急淋白血病微小残留病检测的现状和进展

以IgH/TCR重排为靶分子的PCR微小残留病（MRD）检测，对儿童急性淋巴细胞白血病的预后判断、预防复发具有重要意义。本文主要对这种方法的进展有其应注意的问题进行综述。     

白血病基因诊断及其信息系统建立

目的 用基因诊断技术对白血病分型诊断及微小残留病（MRD）监控,同时对所检测数据建立信息系统.方法 巢式RT-PCR扩增急髓性白血病融合基因,PCR扩增急性淋巴细胞白血病基因重排,用Delphi程序设计信息系统.结果 M2b型白血病能扩增出AML1/ETO融合基因;M3型白血病能检测出L型和S型融合基因;慢粒白血病可检测出b3a2和b3a2融合基因;急淋白血病可检测出IgH、TCRγ、TCRδ基因重排.结论 基因诊断能有效进行白血病分型及MRD监控,信息系统的建立方便了检测信息的管理及查询.     

inv(9)血液病患者造血干细胞移植后骨髓造血恢复特征研究

目的探讨9号染色体倒位[inv(9)]患者在接受造血干细胞移植后中性粒细胞计数(ANC)和血小板计数(PLT)等骨髓造血恢复特征。方法选取2010年1月至2015年10月本院确诊的39 589例血液病患者作为研究对象,采用R显带技术、聚合酶链反应(PCR)技术和流式细胞仪检测技术进行染色体核型检查、融合基因检测和骨髓造血恢复相关指标检测。结果 inv(9)血液病患者检出PML-RARα、BCR-ABL1、AML-ETO、EVI1、CBFβ-MYH11、MLL-AF6、AML-AF4、SET-NUM214、SILTALI、IgH重排、TCR重排和BCL1-IgH等多种融合基因。inv(9)患者在接受造血干细胞移植后恢复情况:ANC在移植后12d恢复至大于0.5×10~9/L水平,PLT在移植后16d恢复至大于20×10~9/L水平。非inv(9)患者在接受造血干细胞移植后恢复情况:ANC在移植后12d恢复至大于0.5×10~9/L水平,PLT在移植后13d恢复至大于20×10~9/L水平。结论 inv(9)血液病患者和非inv(9)血液病患者造血干细胞移植后ANC恢复至大于0.5×10~9/L水平所需的时间几乎相等,而inv(9)血液病患者PLT恢复所需的时间比非inv(9)血液病患者所需时间稍长。     

多重PCR法检测初诊成人急性淋巴细胞白血病患者克隆性免疫球蛋白和T细胞受体基因重排

目的 应用多莺PCR方法检测初诊成人急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的克隆性免疫球蛋白(Ig)和T细胞受体(TCR)基因重排,为实时定量RT-PCR(RQ-PCR)法监测ALL患者体内的微量残留病(MRD)奠定基础.方法 参照BIOMED-2协作组制定的Ig和(或)TCR检测方法,设计96条不同的PCR引物,分成14个混合管,通过多重PCR,分别检测患者骨髓单个核细胞的IgH、IgK、TCRB、TCRG、TCRD克隆性基因重排.结果 在22例成人B系ALL患者中,Ig克隆性重排检出率为96%,其中IgH为86%,IgK为14%.在18例成人T系ALL患者中,TCR克隆性重排检出率为100%,其中TCRB为83%,TCRG为78%,TCRD为39%.两个及两个以上克隆性标志物的检出率在B和T系ALL中分别为91%(22例中20例)和89%(18例中16例).结论 BIOMED-2协作组设计的14管多重PCR引物和方法,几乎可检测到淋巴细胞白血病患者体内所有占优势的克隆性T、B细胞增殖群体,方法简便、可靠、覆盖面广,适用于成人ALL患者基因重排检测和MRD监测.     

儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病的流式细胞术分析

目的 根据白血病细胞的异常免疫表达,建立流式细胞术检测儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)微小残留病(minimal residual disease,MRD)的方法 ,探讨流式细胞术检测MRD在儿童ALL个体化治疗中的意义.方法 用流式细胞术以多种四色荧光抗体组合对健康儿童骨髓进行检测,建立健康儿童骨髓细胞双参数点图分析模板.对75例ALL初诊患儿的骨髓细胞进行MRD筛选,找出在双参数点图上的位置明显区别于正常骨髓细胞的免疫表型组合作为MRD监测的有效免疫表型组合,对其中60例患儿诱导治疗结束及后续治疗中的骨髓标本用这些有效免疫表型组合进行MRD监测.同步进行细胞形态学检测和PCR检测29种融合基因、IgH/T淋巴细胞受体(TCR)基因重排.结果流式细胞术检出69例(92.0%)可用于MRD监测的有效免疫表型组合,PCR检出21例(28.0%)可用于MRD监测的融合基因或IgH/TCR基因重排;诱导治疗结束后及后续治疗中有25份骨髓标本细胞形态学未检出白血病残留细胞,流式细胞术检测仍有0.021%～4.130%的白血病残留细胞.结论 流式细胞术检测儿童ALL MRD能较好地评估临床缓解期间ALL患儿体内残留白血病细胞的数量,其覆盖面和速度优于PCR检测方法 ,敏感性高于形态学检测方法 .     

儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病的流式细胞术分析

目的 根据白血病细胞的异常免疫表达,建立流式细胞术检测儿童急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)微小残留病(minimal residual disease,MRD)的方法 ,探讨流式细胞术检测MRD在儿童ALL个体化治疗中的意义.方法 用流式细胞术以多种四色荧光抗体组合对健康儿童骨髓进行检测,建立健康儿童骨髓细胞双参数点图分析模板.对75例ALL初诊患儿的骨髓细胞进行MRD筛选,找出在双参数点图上的位置明显区别于正常骨髓细胞的免疫表型组合作为MRD监测的有效免疫表型组合,对其中60例患儿诱导治疗结束及后续治疗中的骨髓标本用这些有效免疫表型组合进行MRD监测.同步进行细胞形态学检测和PCR检测29种融合基因、IgH/T淋巴细胞受体(TCR)基因重排.结果流式细胞术检出69例(92.0%)可用于MRD监测的有效免疫表型组合,PCR检出21例(28.0%)可用于MRD监测的融合基因或IgH/TCR基因重排;诱导治疗结束后及后续治疗中有25份骨髓标本细胞形态学未检出白血病残留细胞,流式细胞术检测仍有0.021%～4.130%的白血病残留细胞.结论 流式细胞术检测儿童ALL MRD能较好地评估临床缓解期间ALL患儿体内残留白血病细胞的数量,其覆盖面和速度优于PCR检测方法 ,敏感性高于形态学检测方法 .     

罕见的ins(22;9)t(9;13)/Ph~-慢性髓系白血病实验研究

本文报告1例罕见的具有ins(22;9)t(9;13)的Ph(-)慢性髓系白血病。骨髓细胞经24小时短期培养法制备染色体标本,采用G显带技术进行核型分析;用9号、22号全染色体涂染探针进行染色体涂染;用LSI bcr/abl双色双融合探针进行FISH分析;用实时荧光定量PCR法检测bcr/abl融合基因转录本及其拷贝数。结果表明,染色体核型为45,XX,der(9)t(9;13)(q34;q10),-13[20],abl基因插入到der(22)形成插入性的bcr/abl基因重排;实时荧光定量PCR检测到bcr/abl融合基因。结论:插入性的bcr/abl基因重排是t(9;22)的一种罕见的变异类型,可用分子学方法检测,但全染色体涂染及常规的染色体显带分析容易导致误诊。     

急性非淋巴细胞白血病中的染色体易位分子机制研究现状

急性非淋巴细胞白血病中染色体易位种类较多,其中t(6;9)、t(8;21)、t(15;17)、inv(16)以及11q23重组的分子异常已得到阐明。这些易位的共同特点是形成与白血病发病原理有关的融合基因,其产物均推测为转录因子,可能在白血病细胞的生长、增殖和分化异常中发挥关键作用。     

t(11;17)(q23;q21)见于两种具有不同形态学改变和基因重排的急性白血病

急性髓系白血病(AML)大多有特异性染色体重排，它们常显示特定的形态学改变和基因重排，例如t(8；21)白血病有M2的形态学改变和AML1-ETO融合基因，t(15；17)白血病有M3的形态学改变和PML—RARα融合基因，inv(16)白血病有M4Eo的形态学改变和CBFβ-MYH11融合基因，涉及11q23的易位有M5的形态学改变和MLL基因重排。