T-细胞急性淋巴细胞白血病的κ轻链基因重排

免疫球蛋白(Ig)和T-细胞受体(TCR)基因重排是检测淋巴系统增殖性疾病克隆性的灵敏方法。已经证明了Ig重链TCRβ和γ基因探针对急性白血病缺乏谱系特异性,而传统认为Ig轻链基因重排是B—细胞谱系的一项很特异的指标。本文报道了1例T-细胞急性淋巴细胞白血病(ALL)患者,其TCRβ链基因发生重排,意外的是Igκ轻链基因也发生重排,未发现Ig重链基因重排。其中T-细胞ALL的κ轻链基因重排尚属首例报道。     

免疫球蛋白基因重排分析在淋巴瘤诊断中的初步应用研究

用免疫球蛋白重链Ｊ区（ＪＨ），Ｋ轻链及λ轻链Ｃ区（ＣＫ，Ｃλ２）基因探针及Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交技术，对２２例非何杰金氏淋巴瘤进行分析。结果显示１３例尿Ｂ细胞淋巴瘤均出现重链基因重排，其中１０例有Ｋ或λ轻链基因重排；３例Ｔ细胞淋巴瘤中，１例出现重链，１例出现Ｋ轻链基因重排。１例分类未明淋巴瘤出现重链基因重排。５例未作免疫表型分析的淋巴瘤中有４例出一现重链，３例出现Ｋ轻链，１例出现λ轻链基因重排。     

免疫球蛋白异常症的发病机理

由于对免疫球蛋白(Ig)遗传基因的阐明,已有可能用新的观点来分析Ig分子的多态性及其调节机制。本文从基因的水平解释了骨髓瘤的双峰性M蛋白、重链病蛋白和半Ig分子等的各种临床表现。 Ig遗传基因及其活化过程 1.胚胎期Ig基因研究发现,小鼠Ig重链κ和λ轻链的基因分别位于第12号、6号和16号染色体上;人的相应基因则位于14、2和22号染色体。由于人和小鼠Ig遗传基因的差别不大,所以,利用小鼠试验得到的结果也适用于人类。胚胎期小鼠重链V区的遗传基因约100个,呈点状排列;其后是与V区氨基酸排列变异性     

石蜡包埋组织恶性淋巴瘤免疫球蛋白重链基因重排研究

目的探讨免疫球蛋白重链基因重排现象应用于石蜡包埋非何杰金氏淋巴瘤（NHL）病理诊断及鉴别诊断中的意义，分析影响实验结果的可能因素。方法应用B细胞性淋巴瘤细胞株Raji作为阳性对照，免疫球蛋白重链V区及J区特异性引物，单轮PCR扩增方法对存档的29例恶性淋巴瘤（B细胞性对例，T细胞性2例），6例淋巴组织反应性增生，2例上皮性肿瘤石蜡包埋组织进行了研究。结果70．4％（19／27）的B细胞性淋巴瘤免疫球蛋白重链基因存在重排现象，并均表现为单克隆性。而T细胞性淋巴瘤以及非淋巴瘤性病变无重排现象。本研究所用方法免疫球蛋白重链基因重排的阳性检出率低于半筑巢式peR扩增（80％）。结论免疫球蛋白重链基因重排在B细胞性淋巴瘤具有特异性，能够用于该类疾病诊断及鉴别诊断中。     

单链可变区片段与趋化因子融合的独特型淋巴瘤疫苗原核表达质粒的构建及表达

本研究目的在于克隆小鼠B细胞淋巴瘤细胞膜免疫球蛋白（Ig）的单链可变区片段（scFv），与单核细胞趋化因子（MCP-3）的基因融合，构建融合基因scFv-MCP-3的表达载体，在大肠杆菌中表达融合蛋白，制备作为治疗B细胞淋巴瘤的独特型融合蛋白疫苗。采用RT-PCR法扩增BALB／c小鼠源B细胞淋巴瘤A20细胞株的Ig VH和Ig VL基因，重组PCR法用一段编码（Gly4Ser），连接肽的基因序列连接两基因，制备scFv片段。用相同PCR方法，选用一段编码NDAQAPKS连接肽的基因序列，连接scFv与MCP-3基因，获得scFv-MCP-3融合基因片段。定向克隆到原核表达质粒pGLo中，并在大肠杆菌中表达融合蛋白。测序结果表明：分别成功克隆A20细胞的Ig VH和Ig VL基因，并成功制备了scFv片段和scFv-MCP-3融合基因片段；限制性酶切方法证实，重组pGLo／scFv-MCP-3原核表达质粒中融合基因准确插入。SDS-PAGE电泳分析显示，融合蛋白分子量约65kD，与预期蛋白分子量一致，并且目的蛋白占菌体蛋白的30％。结论：本研究成功构建鼠源scFv片段与趋化因子MCP-3融合的独特型B细胞淋巴瘤疫苗表达质粒pGLo／scFv-MCP-3，并实现融合蛋白的初步表达。     

有三种免疫球蛋白分泌的多发性骨髓瘤细胞的克隆起源

目的 用1例有3种免疫球蛋白分泌的多发性骨髓瘤（MM）患者免疫球蛋白重链（IgH)基因标志探讨MM究竟是由几个克隆组成。方法 患者血清蛋白电泳发现3个单克隆免疫球蛋白峰;RT-PCR采用IgH V6个家族（VH1-VH6）正向引物,通用J区反向引物,IgH恒区Cμ、Cδ、Cγ、Cα和Cε5种特异性反向引物。采用不同的引物组合进行PCR。获得的免疫蛋白重排基因经克隆后,进行测序分析。结果 患者用VH3家族引物和通用J区引物获得一条边缘清晰的浓染条带,表明患者骨髓瘤细胞是上Ig VH3片段组成可变区。用Ig VH3和恒区Cμ、Cγ、Cα特异性引物也可获得相应的PCR产物条带,但是不能用引物VH1、VH2、VH4、VH5和J以及VH3和Cδ、Cε获得,表明患者有IgM、IgG、IgA基因重排,因此外周血血清有相应免疫球蛋白产物。克隆用Cμ、Cγ、Cα引物获得的PCR产物并扩增,然后测序比较,3种产物除恒区片段不同外,其重链基因的VH-J重排序列完全一致。表明该MM患者血清出现的3种免疫球蛋白IgM、IgG、IgA的可变区是完全一致的。结论 尽管从蛋白角度分析MM细胞似乎是寡克隆性的,但是基因序列分析结果表明其恶性克隆仍然是单克隆性起源。     

地戈辛和生物素标记进行原位PCR方法的比较

由于不同的B细胞克隆可发生不同类型的重链基因重排 ,因此 ,通过检测免疫球蛋白重链基因重排可鉴别细胞的来源 ,也可诊断B系淋巴细胞性肿瘤。本文介绍应用免疫球蛋白重链第三互补决定区引物 ,分别用生物素和地戈辛标记进行原位PCR ,检测了 15例恶性淋巴瘤患者的外周血淋巴细胞     

κ基因重排在霍奇金淋巴瘤H-RS细胞性质中的研究

目的:采用直接原位PCR法,对霍奇金淋巴瘤的恶性成分--H/R-S细胞的克隆性及其与背景 淋巴细胞的相关性进行研究.方法:采用直接原位PCR法.5'-生物素标记的Vk1/Jk124、Vk124、Vk3/Jk3、Vk4/Jk124、Vk5、VK6/Jk混合等6对K家族特异性引物对3例霍奇金淋巴瘤组织H/R-S细胞的K轻链基因重排情况进行检测.结果:(1)1例结节硬化型霍奇金淋巴瘤(NSHL)组织中,部分H/R-S细胞重复出现Vk3/Jk3基因重排,亦有部分H/R-S细胞重复出现Vk1/JK124基因重排,且阳性信号分别重复出现于其周围部分背景淋巴细胞核内,少数H/R-S细胞未检测出K基因重排;(2)2例混合细胞型霍奇金淋巴瘤(MCHL)组织中,所有H/R-S细胞均未检测出K轻链基因重排.结论:(1)本例NSHL的H/R-S细胞可能为多克隆性增生,且H/R-S细胞与其周围部分背景淋巴细胞间可能存在克隆相关性,即可能来自同一个B细胞克隆:(2)2例MCHL的H/R-S细胞发生了λ基因重排或是采用的K家族特异性引物法覆盖其Igk轻键的基因重排方式.     

BIOMED-2标准化基因重排检测在非霍奇金淋巴瘤诊断中的意义

目的:利用BIOMED-2标准化免疫球蛋白(Ig)/T细胞受体(TCR)基因重排检测非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者骨髓Ig或TCR基因重排,探讨Ig/TCR基因重排在非霍奇金淋巴瘤诊断中的应用意义。方法:从骨髓及石蜡包埋组织(FFPE)标本中提取基因组DNA,采用BIOMED-2系统引物,进行多重PCR扩增并利用PCR片段分析法进行Ig/TCR基因重排的克隆性分析。结果:在235例T细胞非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)中,TCRγ和TCRx单克隆重排阳性率分别为57.9%和50.2%,TCRγ和TCRβ的联合检出率为71.9%。在583例B细胞非霍奇金淋巴瘤(BNHL)IgH和IgK单克隆重排阳性率分别为70.7%和69.3%,IgH和IgK的联合检出率为81.6%。套细胞淋巴瘤与滤泡淋巴瘤、弥漫大B细胞淋巴瘤IgH(84.8%对34.0%(P0.001);84.8%对9.2%(P=0.025)和IgK(75.8%vs 50.9%,P0.001;75.8%vs 16.1%(P0.001)重排阳性率差异具有统计学意义。Ig基因重排阳性BNHL患者中,65例(13.7%)患者存在TCR重排阳性。TCR重排阳性T-NHL患者中,未见Ig基因重排阳性。30例弥漫大B细胞淋巴瘤患者FFPE标本有25例(83.3%)检出Ig基因重排,与骨髓标本重排检出率相比较,差异具有统计学意义(P0.001)。结论:利用BIOMED-2标准化Ig/TCR基因重排检测对于淋巴瘤的诊断有辅助性作用,并且利用序列分析法可提高重排检测的敏感性和特异性,对于淋巴瘤的早期诊断有很高的价值。     

BIOMED-2多重聚合酶链反应检测抗原受体基因重排在淋巴增殖性疾病诊断中的应用

目的 建立敏感而有效的检测免疫球蛋白(Ig)和T细胞受体(TCR)基因重排的方法,并探讨在淋巴增殖性疾病诊断和鉴别中的作用.方法 采用BIOMED-2多重聚合酶链反应,检测来自54例淋巴增殖性疾病患者的58份淋巴组织标本,分析抗原受体基凶重排状况及其克隆来源.结果 在88.0%(25份标本中22份)B细胞淋巴瘤/白血病和53.3%(15份标本中8份)T细胞淋巴瘤中检出Ig/TCR呈单克隆重排;在17例淋巴组织非恶性增殖患者的病理活检标本中,14例(82.4%)呈多克隆重排;在合格的57份标本中有44份(77.2%)的结果与最终诊断相符.联合检测Igλ和TCRδ并未提高Ig/TCR单克隆重排的检出率,但可能有助于Igλ和TCRδ+淋巴瘤的诊断.结论 对于分析淋巴增殖性疾病,尤其是不典型病例的克隆来源状况,BIOMED-2多重聚合酶链反应检测抗原受体基凶重排是迅速、敏感而可靠的方法.     

Mesh词表词汇实用例句：“基因,免疫球蛋白-genes,immunoglobulin”

译文：编码免疫球蛋白轻链和重链的基因，它们分别位于不同染色体上。可变区基因片段V、D、J在淋巴细胞发育中发生重排；恒定区基因C包括决定免疫球蛋白类别和型别的各种基因。为表达免疫球蛋白（即抗体）的基因，它具有表达抗体分子多样性的复杂机制。     

人B细胞淋巴瘤独特型DNA疫苗诱导抗肿瘤免疫反应的实验研究

本研究目的在于探讨含人B细胞淋巴瘤免疫球蛋白重链可变区基因片段的DNA疫苗诱导小鼠抗肿瘤免疫反应的情况，为人B细胞淋巴瘤疫苗的应用提供基础实验研究资料。本研究通过PCR方法获得人B细胞淋巴瘤细胞系Namalwa膜表面免疫球蛋白重链可变区(VH)基因片段，同时克隆小鼠单核细胞趋化蛋白-3(MCP-3)作为免疫佐剂分子，进一步以重组PCR的方法获得MCP-3和、VH基因的融合基因片段，构建DNA疫苗重组质粒。在体外以瞬时转染的方法证实以融合基因片段作为抗原基因的DNA疫苗质粒能够在真核细胞中正确表达。DNA疫苗质粒大量提取后免疫小鼠。用流式细胞术检测小鼠抗体生成情况，并用LDH释放法测定CTL活性以检测抗独特型细胞免疫。结果表明，从接种疫苗第8周开始小鼠体内特异性抗独特型抗体明显升高，并且抗体滴度可维持高水平至少至第20周。在DNA疫苗免疫组中5只免疫小鼠有3只产生抗体。所诱导的抗体只特异性识别肿瘤细胞表面独特型抗原，而不识别人A549对照细胞。用乳酸脱氢酶释放法未测到明显CTL反应的产生。结论：以MCP-3与VH的融合作为抗原基因构建的DNA疫苗能够诱导小鼠体内产生抗淋巴瘤细胞的特异性抗独特型抗体，为DNA疫苗临床用于人B细胞淋巴瘤治疗提供了初步实验支持。     

Ig基因重排检测在B细胞性淋巴瘤诊断中的应用

目的探讨Ig基因重排检测在B细胞性淋巴瘤中的诊断价值。方法选取B细胞性淋巴瘤30例、淋巴组织反应性增生30例,提取DNA,应用BIOMED-2引物系统中的47条引物进行PCR扩增,核酸分子异源双链凝胶电泳分析Ig基因重排结果。结果 30例B细胞性淋巴瘤中检测出Ig克隆性重排,包括IGH(A+B)克隆性重排23例,IGK克隆性重排23例,IGL克隆性重排5例,IGH(A+B)+IGK克隆性重排30例,IGHA+IGK克隆性重排29例;在30例淋巴组织反应性增生中未检测到Ig克隆性重排。结论 Ig基因重排是诊断B细胞性淋巴瘤的有用工具。     

多重PCR检测基因抗原受体重排在儿童急性淋巴细胞白血病诊断中的应用

目的 建立多重PCR方法检测免疫球蛋白（Ig）和T细胞受体（TCR）基因重排,探讨在儿童急性淋巴细胞白血病诊断和鉴别中的作用.方法 参照BIOMED-2协作组制定的Ig和（或）TCR检测方法,对儿童ALL患儿114 例,分别检测患者骨髓单个核细胞的IgH、IgK、TCRG和TCRB基因重排.结果 在105例B系儿童ALL患者中,克隆重排的检出率分别为IgH 73%、IgK34%、TCRG 44%和TCRB 35%,所有B-ALL患者Ig基因重排检出率可达85%;在11例T系ALL患者中,克隆重排的检出率分别为TCRB 82%和TCRG 73%,T-ALL 患者TCR基因重排检出率可达100%.结论 BIOMED-2引物系统可以检测出绝大多数儿童ALL患者的Ig/TCR基因重排,是一种有效的检测工具,值得在临床中推广使用.     

淋巴系恶性肿瘤的基因重排

淋巴系恶性肿瘤是淋巴系统造血细胞分化早期的克隆性增生,其最可靠的基因标志是细胞表面的免疫球蛋白(Ig)基因和T细胞受体(TC)基因发生重排。本文就淋巴系恶性肿瘤的Ig和TCR基因重排以及用Ig和TCR基因检测残留淋巴系白血病的研究进展作一综述。     

分子生物学技术在MALT淋巴瘤诊断及鉴别诊断中的应用

目的研究免疫球蛋白重链基因重排及融合基因API2-MALT1在MALT淋巴瘤诊断和鉴别诊断中的作用。方法采用RT—PCR方法对60例MLAT淋巴瘤，对照组30例结外弥漫性大B细胞淋巴瘤和30例淋巴结反应性增生病例石蜡包埋组织中API2-MALT1进行检测，以看家基因PGK作为内对照检测cDNA质量；采用半嵌套式PCR方法，对60例MALT淋巴瘤，对照组30例淋巴结反应性增生病例石蜡包埋组织中B细胞免疫球蛋白重链进行扩增，以看家基因B-actin作为内对照检测基因组DNA质量。结果60例MALT淋巴瘤中42例检出B细胞免疫球蛋白重链基因重排，去除B-actin DNA阴性4例，MALT淋巴瘤中免疫球蛋白重链基因重排检出率75．0％(42／56)。对照组30例弥漫性大B细胞淋巴瘤重排检出率90．3％(23／30)，反应性增生未检出重排。60例MALT淋巴瘤中6例检出API2-MALT1 mRNA表达，去除PGK阴性病例7例，MALT淋巴瘤中API2-MALT1 mRNA阳性率10．1％(6／53)。所有对照组未检出API2-MALT1 mRNA表达。结论半嵌套式PCR技术在石蜡包埋组织中检测B细胞免疫球蛋白重链基因重排可用于MALT淋巴瘤和淋巴组织反应性增生的鉴别诊断。RT-PCR技术在石蜡包埋组织中检测API2-MALT1 mRNA阳性率较低，但特异性强，可用于MALT淋巴瘤的鉴别诊断。     

应用免疫球蛋白基因重排分析多发性骨髓瘤的克隆起源

多发性骨髓瘤(MM)曾长期被认为是以浆细胞浸润骨髓并分泌M蛋白为特征的浆细胞恶性疾病。免疫球蛋白(Ig)轻链表达和细胞免疫表型的研究发现,MM可能起源于比浆细胞更早的B淋巴细胞,提出MM可能是由B淋巴细胞克隆性增生引起的。80年代后期,随着分子生物学研究的进展,对MM克隆起源的研究也进入基因水平,同时随方法学的改进而不断深入。每一种Ig基因重排对于某种B细胞是特异的,克隆性的Ig基因重排可作为恶性增殖的B淋巴细胞所特有的克隆标记,并已广泛     

肝病患者免疫球蛋白及轻链测定的临床价值

<正>免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)由浆细胞合成和分泌,肝脏虽然不是Ig的合成场所,但对血清Ig水平的调节起重要作用~([1])。根据重链恒定区的不同,Ig可分为IgG、IgA、IgM、IgD和IgE5类,其中IgG、IgA、IgM在人体内含量较多。根据轻链恒定区的不同,Ig可分为κ和λ2种类型~([2])。本研究拟探讨Ig在各类肝病患者诊断和肝功能监测中的价值。     

实时定量聚合酶链反应检测石蜡包埋B细胞淋巴瘤组织克隆性IgH基因重排

我们利用SYBR Green Ⅰ荧光染料，应用实时定量PCR（RQ-PCR）检测了15例B细胞非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）患者免疫球蛋白重链（IgH）基因重排情况，以探讨克隆性IgH基因重排在B-NHL诊断和鉴别诊断上的价值。     

免疫球蛋白基因重排在B细胞非霍奇金淋巴瘤诊断中的意义

摘要：目的?探讨骨髓及外周血免疫球蛋白(Ig)基因重排在B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)诊断中的临床意义。方法?采用多重聚合酶链反应(mPCR)技术并根据BIOMED-2引物系统对103例B-NHL患者及20例反应性淋巴组织增生患者骨髓及外周血标本基因组DNA进行扩增，对PCR产物进行IgH、IgK基因重排的克隆性分析。结果?103例B-NHL患者中IgH和IgK单克隆重排阳性率分别为41.7%和50.5%，IgH和IgK联合检出率为64.1%。59例慢性淋巴细胞白血病(CLL)/小B细胞淋巴瘤(SLL)患者中共检出Ig基因单克隆重排49例(83.1%)；除CLL/SLL以外的其他44例B-NHL患者中有17例(38.6%)检出Ig基因单克隆重排，而在20例反应性淋巴组织增生患者中均未检出。70例B-NHL患者外周血标本Ig基因重排检出率与骨髓标本之间的差异无统计学意义(45.7% vs 54.3%，χ2=1.03，P=0.31)；26例CLL/SLL患者外周血Ig基因重排率与骨髓标本之间的差异无统计学意义(69.2% vs 80.8%，χ2=0.92，P=0.34)；44例非CLL/SLL患者外周血Ig基因重排率与骨髓标本之间的差异亦无统计学意义(31.8% vs 38.6%，χ2=0.45，P=0.50)。结论?Ig基因重排可用于B-NHL的临床诊断，外周血与骨髓Ig基因重排检测具有同等的诊断价值。