肿瘤多药耐药机制的研究进展

多药耐药(multidrug resistance,MDR)是肿瘤的重要耐药机制,是肿瘤化疗失败的主要原因之一.MDR是指由一种药物诱发,但同时又对其他多种结构和作用机制迥异的抗癌药物产生交叉耐药[1].近年来,人们对肿瘤多药耐药机制进行了深入的研究,耐药的机制主要涉及以下几个方面:(1)膜糖蛋白介导的药物外排泵机制:与耐药相关的蛋白有P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药相关蛋白(LRP)等,为能量依赖性药物外排泵,可将细胞内药物浓度减低或形成隔室化分布,完成其耐药作用.     

利福霉素逆转多药耐药细胞系A549/ADM的实验研究

目的:探讨利福霉素逆转人肺腺癌细胞多药耐药的发生及逆转机制.方法:采用流式细胞仪检测敏感细胞系、耐药细胞系的P糖蛋白(P-gp)和多药耐药相关蛋白(MRP)表达;MTT法检测其对多种化疗药物的耐药程度及利福霉素对其耐药的逆转效果;采用细胞内阿霉素含量的方法测定利福霉素对多药耐药的逆转作用.结果:多药耐药细胞系A549/ADM的P-gp、 MRP表达分别为74.8%和61.2%;加用利福霉素后,A549/ADM细胞内ADM的含量显著增加,A549/ADM对ADM敏感性增加了2.51倍,对VCR、DDP及VP-16敏感性分别增加7.38倍、1.29倍、2.86倍.结论:A549/ADM对多种常见肿瘤化疗药物表现不同程度耐药,其耐药性可能与P-gp、MRP高表达有关;利福霉素对A549/ADM的多药耐药有一定的逆转作用.     

多药耐药相关蛋白2与肝胆疾病的关系

多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance associated protein2,MRP2)或cMOAT(the canalicular multispecific organic anion transporter)属于ABC超基因家族,编码管状多特异性有机阴离子和多种药物转运蛋白[1].缺乏时易发生淤胆性疾病(cholestatic biliary disease),增高时易导致肝癌对化疗不敏感,产生多药耐药(multidrug resistance,MDR)现象.本文就MRP2结构、分布特点、影响因素及在肝癌多药耐药和淤胆性疾病中的作用.     

风湿性疾病与多药耐药

在风湿性疾病的治疗中,激素、非类固醇类抗炎药、慢作用抗风湿药及免疫抑制剂是重要的治疗手段,并且常为多种药物长期、联合应用。在治疗过程中,部分患者在治疗开始或治疗中对药物逐渐不敏感。除疾病本身特点、患者依从性等因素外,药物耐药是一个重要原因。药物耐药可分为原药耐药和多药耐药,原药耐药可是组织细胞固有的特性,即细胞在以前没有接触过某种药物的情况下就对这种药物耐药;而多药耐药是指对一种药物耐药的同时,对其他结构和机制不同的药物也产生耐药性,是治疗失败的主要原因之一。多药耐药现象可以原发性和继发性两种形式出现。原发性耐药是细胞固有的对药物不敏感,故首次使用药物就产生耐药;继发性耐药则是初始对药物敏感,但经过几个疗程后,对药物产生耐药性。1多药耐药的发生机制多药耐药的发生机制很复杂,根据细胞内药物的作用靶点将多药耐药大体归纳为4类:(1)经典的多药耐药,其耐药性由P-糖蛋白介导。(2)非P-糖蛋白的多药耐药,耐药性由多药耐药性相关蛋白(MRP)介导。(3)非典型的多药耐药,耐药性由拓扑异构酶Ⅱ的表达改变而引起。(4)肺耐药蛋白的多药耐药,耐药性由肺耐药蛋白介导。另外,最近研究发现,大部分化疗药物杀伤肿瘤是通过诱导细胞凋...     

ABCC1介导多药耐药机制及其逆转的研究进展

多药耐药性是肿瘤化疗失败最常见的原因，ATP结合盒（ABC）药物转运蛋白在肿瘤多药耐药性中产生了重要的作用。ABCC1是ABC转运蛋白超家族成员，通过介导细胞内药物排出、改变药物在细胞内分布，进而引起肿瘤耐药。作者就ABCC1介导的多药耐药及逆转的研究作一综述。     

微波热疗对人乳腺癌阿霉素细胞MCF-7多药耐药蛋白及耐药性的影响

目的探讨微波热疗对人乳腺癌阿霉素细胞MCF-7和阿霉素耐药细胞MCF-7/ADM的多药耐药蛋白表达和耐药性的影响。方法应用Real-TimePCR法检测微波热疗对P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响和高效液相色谱法(HPLC)检测微波热疗对细胞内阿霉素浓度的影响。结果MCF-7/ADM细胞在微波热疗后4h和24h,P-gp、MRP表达量明显下降(P<0.01)。微波热疗以后肿瘤细胞内阿霉素(ADM)浓度有明显上升(P<0.01)。结论微波热疗抑制了耐药蛋白的表达,增加了细胞内的药物浓度,热疗可能是逆转化疗耐药从而提高化疗效果的一种有效手段。     

MDR1/P-gp与大肠癌多药耐药及中医药研究概况

肿瘤多药耐药是指肿瘤细胞对分子结构不同、作用机制各异的抗肿瘤药物产生交叉耐药,多药耐药是肿瘤化疗失败的重要原因.大肠癌多药耐药涉及P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)表达增加,谷胱甘肽转移酶(GST)活性增强,DNA拓扑异构酶(Topo Ⅱ)含量减少或性质改变等,其中,对P-gp介导的多药耐药研究最多,通过药物逆转肿瘤多药耐药是提高化疗效果的重要手段,但目前许多药物存在着比较严重的不良反应,临床应用受到一定的限制.中药相对来说,毒性和不良反应较小.近年来,陆续有用中医中药逆转肿瘤多药耐药的报道,现将其研究进展综述如下.     

奥曲肽逆转肝癌细胞多药耐药机制的初步研究

目的：探讨生长抑素类似物奥曲肽(octreotide)逆转肝癌细胞多药耐药，增加肝癌细胞对化疗药物敏感性的机制。方法：应用MTT法分析肝癌细胞对化疗药物的敏感性；用RT—PCR、流式细胞术检测肝癌细胞多药耐药基因MDR1、MRP2 mRNA蛋白质的表达。结果：奥曲肽联合化疗药物可以显著降低各化疗药物的IC50。肝癌原代培养细胞有SSTR2、SSTR3、MDR1、MRP2的表达，奥曲肽可以显著降低肝癌细胞表面MDR1、MRP2的表达。结论：奥曲肽可以与肝癌细胞表面的SSTR结合，降低肝癌细胞表面MDR1、MRP2的表达，从而使细胞内细胞毒药物浓度增加，逆转肝癌细胞多药耐药。     

乳腺癌耐药蛋白及其抗体的研究进展

耐药性是导致肿瘤患者化疗失败的主要原因之一。肿瘤细胞在药物诱导下对结构和功能不相关的药物耐药 ,这就是多药耐药 (multidrugresistance ,MDR)现象。在人类耐药肿瘤细胞中 ,MDR包括几种转运蛋白 :P 糖蛋白 (P glycoprotein ,P gp)、多药耐药相关蛋白 (multidrugresistance     

肿瘤多药耐药的研究进展

肿瘤细胞的多药耐药性 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ,ＭＤＲ)是指肿瘤细胞对一种药物耐药的同时 ,对其他结构和机制不同的药物也产生耐药性 ,是肿瘤化疗失败的主要原因之一。ＭＤＲ的发生机制很复杂 ,主要涉及细胞内Ｐ 糖蛋白 (Ｐ ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ,Ｐ ｇｐ)、多药耐药相关性蛋白 (ＭＤＲｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ ,ＭＲＰ)、拓扑异构酶Ⅱ (ＴｏｐｏⅡ )、肺耐药相关蛋白 (ｌｕｎｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｒｅｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ ,ＬＲＰ)、谷胱甘肽Ｓ转移酶 (ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅｓｔｒａｎｓｆｅｒａｓ…     

MRP1及TopoⅡ的表达与肺癌耐药性的关系

目的探讨肺癌耐药机制及明确耐药基因与化疗药物耐药性的相关性研究。方法应用MTT法对顺铂（Cisplatin）,吉西他滨（Gemcitabine）,长春瑞滨（Vinorelbine）,紫杉醇（Paclitaxel）,畀环磷酰胺（Iphospamide）5种化疗药物针对肺癌细胞悬液进行药敏检测;应用免疫组化进行MRP,（多药耐药相关蛋白1）及TopoII（拓扑异构酶Ⅱ）表达的检测,并将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果①MRP．、TopoⅡ在肺癌中总的阳性表达率分别为：72．5％、50．0％。鳞癌和腺癌MRP1、TopoⅡ相比的表达差异无统计学意义（P〉0．05）,但鳞癌或腺癌和小细胞肺癌在MRP1、TopoⅡ表达相比差异有统计学意义（P〈0．05）;②MRP,的表达与顺铂、吉西他滨、长春瑞滨的耐药性均呈显著的正相关（P〈0．05）,其表达与紫杉醇、异环磷酰胺的耐药性差异无统计学意义（P〉0．05）;TopoⅡ的表达与顺铂、吉西他滨、紫杉醇、异环磷酰胺的耐药性均呈显著的正相关（P〈0．05）,其表达与长春瑞滨的耐药性差异无统计学意义（P〉0．05）。结论①MRP1较高表达及TopoⅡ的较低表达共同介导参与了肺癌耐药的机制,且与检测的化疗药物有不同程度的相关性。②应用肿瘤细胞体外培养、进行体外药敏检测,并明确耐药基因的表达情况,对于识别可能的耐药个体,选择合理有效的化疗药物,可能将会最大限度地避免无效化疗和提高化疗疗效。     

非小细胞肺癌多药耐药因子的表达相关性及临床意义

探讨多药耐药因子在肺癌中表达与共表达的相关性及其临床意义。方法:采用免疫组化SP技术检测52例肺癌患者病理组织中P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白(MRP)、谷胱甘肽S转移酶Ⅱ(GST-Ⅱ)3种多药耐药因子的表达水平。结果: 肺癌组织中P-gp、 MRP、GST-Ⅱ阳性表达率分别为51.9% (27/52)、61.5% (32/52)和78.8%（41/52）;耐药因子在不同病理类型、不同TNM分期和不同分化程度间表达差异无显著性(P＞0.05);P-gp和MRP均阳性40.1%,P-gp和GST-Ⅱ均阳性44.2%,MRP和GST-Ⅱ均阳性50.0%,P-gp、MRP和GST-Ⅱ均阳性21.2%,其中P-gp与MRP间阳性表达率呈正相关关系(r_s=0.632,P<0.01）,P-gp与GST-Ⅱ间阳性表达率呈正相关关系 (r_s=0.521,P<0.01）,MRP与GST-Ⅱ间阳性表达率呈正相关关系(r_s=0.532, P<0.01）。结论: 肺癌的多药耐药现象是由多个耐药因子共同参与作用的结果,肺癌多药耐药的发生与不同的病理组织类型、不同TNM分期、不同分化程度间无关联     

Correlative Expression of Glutathion S-Transferase-π and Multidrug Resistance Associated Protein in Bladder Transitional Cell Carcinoma

Chemotherapylswidelyappliedlnthetreatmentofsuperficial(instravesicaIinstiIlation)andinvasive(systemicadministration)bladdercancer.However,resistancetochemotherapenticagentsstillremainsacriticalprobIemintherapy,whichkeepsamuchhigherrecurrentrateofbIaddercancerandpreventsthecureofpat1ents.Previous1y,theresearchesonthemechanismsofdrugsres1stanceusuallyconcen-trateonthemembersoftheATP--bindingcassette(ABC)transportersuperfamlly(forinstance,P--gp,MRP,LRP,etc.)['2],butatpresentincreasingevi-d…     

药物转运体在高原合理用药中的作用

高原药代动力学是高原合理用药的重要依据,影响药代动力学参数改变的原因很多,以往的研究主要集 中于缺氧对肝药酶的影响,鲜见对缺氧条件下药物转运体的研究。药物转运体是主动转运药物通过细胞膜进入体内 和产生效应的关键因素,如多药耐药蛋白(multidrug resistance protein,MDR)、多药耐药相关蛋白(multidrug resistance associated protein,MRP)、乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)、有机阴离子转运蛋白(organic anion transporter,OAT)、有机阳离子转运蛋白(organic cation transporter,OCT)、有机阴离子转运肽(organic anion-transporting polypeptide,OATP)、寡肽转运蛋白(qligopeptide transporter,PEPT)等,其广泛存在于小肠的绒毛上皮细胞、肾小管上 皮细胞、肝细胞和胆管上皮细胞,在药物的吸收、分布、代谢和排泄各个环节发挥重要作用。缺氧时肠道药物转运 体变化将影响药物的生物利用度;脏器中药物转运体变化将影响药物的分布范围,使药物的适应证发生改变,同样 也可能增加药物不良反应的发生概率;肝、肾中药物转运体的表达发生改变将影响药物的代谢及排泄速率,使药物 在体内的驻留时间发生改变,影响药物的半衰期。     

肺鳞癌、腺癌中多药耐药基因相关蛋白的表达及意义

目的 检测P-糖蛋白（P-gp）、肺癌耐药蛋白（LRP）、多药耐药相关蛋白（MRP）在肺鳞癌、腺癌组织中的表达,以探讨其临床意义。方法 采用S-P免疫组织化学方法,检测105例术前未做化疗的肺鳞癌、腺癌组织中P-gp,LRP,MRP的表达水平。结果 P-gp在肺鳞癌,腺癌组织中表达阳性率为腺癌78．26％,鳞癌47．46％（P〈0．05）;LRP表达阳性率为腺癌89．13％,鳞癌44．07％（P〈0．01）;MRP在不同癌组织中的表达,差异无显著性（P〉0．05）。在腺癌、鳞癌组织中同时有两种或两种以上耐药基因产物表达阳性率分别为：89．13％,49．15％,两种类型问比较差异有显著性（P〈0．01）。结论 肺鳞癌,腺癌存在不同程度的耐药性,检测P-gp,LRP,MRP的协同表达对于指导临床化疗方案的实施有重要意义。     

Correlative expression of glutathion S-Transferase-π and multidrug resistance associated protein in bladder transitional cell carcinoma

Summary In order to elucidate the mechanisms of multidrug resistance (MDR) in bladder cancer, the expression of glutathione S-transferase-π (GST-π) and multidrug resistance associated protein (MRP) in tissue samples resected from 44 patients and 6 normal bladder mucosa as control was detected by using immunohistochemical method, and the results were analyzed by computer-assisted image analyzing system (IAS) to achieve semi-quantitative data. In addition, correlation between the expression of both factors was studied. The results showed that the positive expression rate of GST-π and MRP in bladder cancer was 72. 7 % (32/44) and 68. 2 % (30/44) respectively, significantly higher than those in normal bladder mucosa, being 16. 7 % and 33. 3 % respectively. The rate of GST-π positive staining was increased correspondingly with tumor grade and stage elevated, being higher in recurrent tumors treated by chemotherapy, but not significantly (P > 0. 05). There was no significant differences between the expression of MRP and tumors’ behaviors and clinical characters. However, the results demonstrated that the correlation between the expression of both resistant factors was very evident (r = 0. 695,P < 0. 0025). It was suggested that the activation of GST-π and MRP might occur during malignant transformation of normal mucosa, but tumors’ differentiation and progression could not be the unique factors that influenced both overexpression. Chemotherapy might be another important reason. The correlation of both indicated that there was a common mechanism regulating their expression probably, which made them play a pivotal role in chemotherapy drug resistance of bladder cancers. This project was supported by a grant from the fund of science of Hubei Province (No. 99J124).     

Co-transfection of MRP and bcl-2 antisense S-oligodeoxynucleotides reduces drug resistance in cisplatin-resistant lung cancer cells

Objective To detect the influence of antisense s-oligodeoxynucleotides](S-ODNs) of bd-2 and multidrug resistamce-associated protein (MRP) genes multidrug resistance-associated protein gene and bcl-2 antisense S-oligodeoxynucleotides on cisplatin-resistant lung adenocarcinoma cell line A(549)(DDP)which overexpresses both bcl-2 and MRP.Methods A(549)(DDP)cells were treated with sense and antisense S-ODN mediated by lipofection. Expression of MRP and bcl-2 mRNA and protein in the treated cells was measured by RT-PCR and flow cytometry (FCM), respectively. Apoptosis was identified by DNA electrophoresis and terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-mediated biotin dUTP nick end-labeling(TUNEL). The degree of drug resistance of the treated cells was detected by a cell viability 3’-［4,5-dimethylthiazol-2-yl］-2,5-diphenyl-tefrazolium bromide thiazolylblue (MTT) assay. Results Expression of bcl-2 and MRP significantly decreased in the cells treated with bcl-2 or/and MRP antisense S-ODN for 48h as compared to the cells untreated and sense-treated (P&lt;0.05). Resistance to cisplatin in the cells treated with bcl-2 or/and MRP antisense S-ODN decreased by 60.6% (6.5 times), 56.4% (7.2 times) and 71.0% (4.8 times), respectively, which paralleled the decrease of bcl-2 and MRP expression. Similarly, the resistance to etoposide and epirubicin in antisense-treated cells also reduced in parallel to decreases of the two gene expressions. The drug resistance in sense-treated cells was similar to that in untreated cells. Statistically significant dose-and concentration-dependent increases of apoptotic cells were observed in the groups exposed to 100 μmol/L cisplatin for 48 h after treatment by bcl-2 or/and MRP antisense.Conclusion Bcl-2 and MRP were at least additive and possibly synergistic in conferring drug resistance in a cisplatin-resistant lung adenocarcinoma cell line. Antisense S-ODN could attenuate drug resistance by promoting cells apoptosis, which might lead to a new treatment for patients with non-small cell lung cancers (NSCLCs) who are refractory to conventional chemotherapy.     

MRP的表达与非小细胞肺癌耐药性的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)的化疗耐药性和参与介导多药耐药的相关基因和蛋白(MRP)的表达,对比分析非小细胞肺癌的多药耐药性与三种耐药相关基因表达的关系。方法应用肿瘤细胞体外培养和药敏实验法对91例未经化疗的非小细胞肺癌进行体外化疗药物敏感性测试,观察非小细胞肺癌分别对环磷酰胺、阿霉素、顺铂 氟尿嘧啶三种单药和联合用药方案耐药情况和总的耐药情况,并用免疫组织化学方法对其进行MRP基因表达的检测,并将其表达情况与对应的化疗耐药性进行相关分析。结果91例NSCLC化疗敏感性检测结果显示:53例(58.2%)对环磷酰胺耐药,51例(56.0%)对阿霉素耐药,42例(46.2%)对顺铂 氟尿嘧啶耐药。其中,19例(20.9%)对三种用药均敏感,27例(29.8%)对三种用药均耐药,尚不能认为其耐药性与组织学类型和分化程度有关(P>0.05)。MRP在91例非小细胞肺癌中总的阳性表达率为73.6%。鳞癌和腺癌相比MRP的表达差异无统计学意义(P>0.05),而且MRP的表达与对三种化疗用药的耐药性均呈正相关(P<0.05),并且不同表达程度间差异也有统计学意义(P<0.05)。结论MRP在非小细胞肺癌中均有较高的阳性表达并共同介导参与了非小细胞肺癌固有的多药耐药机制。     

恶性淋巴瘤mdr1和MRP mRNA及 P-gp表达水平与化疗疗效的相关研究

目的探讨恶性淋巴瘤mdr1、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效的相关性.方法应用半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术和流式细胞术(FCM)方法,以8例人正常淋巴结为正常对照,对46例淋巴瘤患者[23例初治(HD1例,NHL22例)及23例复发(HD5例,NHL18例)]的mdr1 mRNA、MRP mRNA和P-gp表达水平与化疗疗效间的关系进行了前瞻性研究.结果复发患者mdr1基因和P-gp表达水平及阳性率均高于初治患者(P<0.001),而MRP基因表达水平及阳性率在复发与初治患者间差异无显著意义(P>0.05).mdr1基因及P-gp表达阳性患者的化疗有效(CR+PR)率(33.33%和26.67%)明显低于mdr1基因及P-gp表达阴性患者(85.71%和83.87%,P<0.001),而MRP基因表达阳性患者与阴性患者的化疗有效率差异无显著意义(P>0.05).相关分析显示,mdr1基因和P-gp表达水平之间有明显相关性(r=0.296 3,P<0.05),而mdr1和MRP之间、MRP与P-gp之间均无明显相关性(r=0.072 3,P>0.05;r=0.081 8,P>0.05).结论 mdr1基因及P-gp表达是恶性淋巴瘤患者多药耐药的主要机制,而MRP基因不是产生耐药的主要机制.mdr1基因及P-gp表达水平的高低与恶性淋巴瘤化疗疗效密切相关,而MRP基因的表达与化疗疗效未见相关.     

P-gp、MRP_1、GST-π在宫颈鳞癌新辅助化疗中的表达及意义

目的:探讨P-gp、MRP1、GST-π在宫颈鳞癌新辅助化疗多药耐药中的作用。方法:采用免疫组化S-P法检测10例正常宫颈组织、20例CIN组织和30例新辅助化疗前后宫颈癌组织中P-gp、MRP1、GST-π的表达水平。结果:(1)化疗前P-gp、MRP1、GST-π的阳性表达率显著高于正常组及CIN组(P<0.05);(2)新辅助化疗后P-gp、GST-π的阳性表达率显著高于化疗前的表达水平且化疗前GST-π、P-gp表达阴性者化疗有效率高于GST-π、P-gp表达阳性者(P<0.05);(3)新辅助化疗后与化疗前相比,MRP1的阳性表达率无显著性差异,且化疗前MRP1表达阴性者与表达阳性者比较化疗有效率也无显著性差异(P>0.05)。结论:P-gp、MRP1、GST-π在宫颈鳞癌耐药中发挥重要作用,这三项指标的联合检测对制定合理的化疗方案具有积极的指导意义。