肝癌血管生成拟态分子机制的研究

目的 探讨肝细胞肝癌(HCC)中血管生成拟态(VM)形成的分子机制.方法 收集临床资料和随访资料完整、手术切除并死于HCC的病例99例,对99例HCC进行VEGF、MMP-2、MMP-9免疫组织化学染色,采用Mattern积分法评价三者在99例HCC中的表达,通过比较VM组和无VM组HCC中三者表达水平的差异来研究VM形成的分子机制.结果 MMP-2与MMP-9主要以弥漫型或颗粒状在肝癌细胞胞浆内表达,在癌巢的周边伴有组织浸润的部位高表达;VM组比无VM组有更高的MMP-2(t=3.184,P=0.002)与MMP-9的表达(Z=2.659,P=0.009);VEGF阳性表达主要位于肝癌细胞胞浆内,毗邻坏死区域的肝癌细胞有较强表达,HCC中VM组与无VM组之间VEGF表达的差异不具有统计学意义(t=-1.387,P=0.169).结论 MMP-2、MMP-9在肝癌细胞中高表达,降解并重塑细胞外基质,可能参与VM的形成.     

血管生成拟态与肿瘤

近年来,人们发现了一种新的肿瘤血供形式——血管生成拟态,其与经典的肿瘤血供模式完全不同.这一发现对完善肿瘤的血供机制,改善肿瘤的治疗和预后具有重要的意义.本文主要就其结构、形成机制、对临床肿瘤治疗的意义进行综述.     

血管生成拟态在肝细胞肝癌中的研究进展

血管生成拟态是在没有内皮细胞参与下,恶性肿瘤细胞通过自身变形形成为肿瘤生长、侵袭和转移提供血供的特有的微循环管道.MMPs、LN、COX-2、VE-cadherin、TrK、TFPI、FAK等以及肿瘤细胞周围的微环境对血管生成拟态的形成有重要的作用.其在肝细胞癌中也被发现并被认为可能与肝细胞癌的高侵袭性、高转移性以及短的生存时间相关.     

血管生成拟态的研究进展

血管生成拟态为肿瘤组织提供了不同于经典血管的血供途径,抗血管生成拟态治疗已成为抗肿瘤研究的热点。笔者在PubMed、中文生物医学期刊文献数据库、万方数据资源及维普中文科技期刊等数据库中检索血管生成拟态相关的文献,进行比较、归纳和总结。通过对检索到的文献的复习,发现在近十年的时间里血管生成拟态的理论有了令人惊讶的发展。研究主要集中在其分子机制及其临床意义两方面。本研究就血管生成拟态的历史、分子调节机制的研究现状及其临床意义的最新研究进展进行综述,并对研究结果及意义进行了一定的探讨。     

抗血管生成拟态治疗的研究进展

血管生成拟态是一种与经典肿瘤血管生成完全不同的血管模式,即由肿瘤细胞通过自身变形围成一种周围只有肿瘤细胞而没有血管内皮细胞包绕的、由细胞外基质界定的、过碘酸-希夫染色阳性的、互联的网状管道.血管生成拟态与肿瘤侵袭、转移及患者预后密切相关.但是,传统的以内皮细胞为靶向的抗血管生成药物对抑制恶性肿瘤血管生成拟态的形成无明显...     

血管生成拟态在结肠癌肝转移中的表达及分子机制研究

目的 建立结肠癌肝转移动物模型,探讨血管生成拟态在结肠癌肝转移动物模型中的表达规律及相关分子机制.方法 利用改良的盲肠造疝原位接种瘤块法建立BALB/C小鼠结肠癌肝转移模型,随机数字表法将小鼠分为对照组和实验组,每组各16只,CD31/PAS双染法观察血管生成拟态,配对t检验统计分析肝转移灶和原发灶中血管生成拟态表达规律.RT-PCR检测血管生成拟态形成相关基因cox-2、EPHA2基因、Twist基因等的表达,观察cAMP抑制剂对结肠癌肝转移血管生成拟态的影响.结果 BALB/C小鼠结肠癌肝转移模型原发灶和肝转移瘤中均可观察到血管生成拟态的存在,注射8-溴-cAMP后可以抑制结肠癌肝转移的发展进程;实验组血管生成拟态密度显著低于对照组(P＜0.05),实验组血管生成拟态形成相关基因cox-2、E-PHA2、Twist的表达均低于对照组(P＜0.05).结论 小鼠结肠癌肝转移模型中存在血管生成拟态现象,cAMP/PKA特异性抑制剂可以抑制血管生成拟态的形成,cAMP/PKA可能是结肠癌肝转移中血管生成拟态的调节通路.     

TNP-470对胃癌细胞株SGC-7901体外血管生成拟态的抑制作用

目的：研究TNP-470对胃癌细胞株SGC-7901体外血管生成拟态的影响。方法：将培养的SGC-7901细胞分为TNP-470组及对照组，应用克隆形成试验检测细胞增殖活性的变化。Transwell小室检测癌细胞体外侵袭力的变化，体外管状形成试验检测管道形成能力的变化。结果：TNP-470对SGC-7901细胞增殖没有明显抑制作用，可以显著降低SGC-7901细胞的体外侵袭能力，抑制体外管道形成。结论：TNP-470能够抑制SGC-7901细胞的体外血管生成拟态形成。     

Beclin-1在胃癌血管生成拟态形成中的表达及意义

目的 探讨胃癌细胞SGC7901在体外血管生成拟态（VM）的形成过程中,自噬特异性基因Beclin-1的表达情况及其对VM形成的影响.方法 分别将ShRNA整合质粒载体和空白质粒载体转染到胃癌细胞SGC7901中,采用RT-PCR及Western blot法检测SGC7901细胞中Beclin-1表达情况;并在体外构建VM模型,观察不同转染细胞中VM形成能力的差异,同时检测VM形成前后细胞中VM形成基因Notch-1的表达情况.结果 胃癌SGC7901形成VM过程中,Beclin-1及Notch-1 mRNA和蛋白表达均明显升高（均P＜0.05）.与转染空白质粒的SGC7901细胞相比,转染ShRNA整合质粒抑制Beclin-1后,VM形成的细胞管状结构的数目[（15.4±1.1）个比（37.8±1.9）个,P＜0.05]、长度[（316.8±24.6） mm比（385.1±14.2） mm,P＜0.05]和交点数[（11.6±1.1）个比（27.2±1.1）个,P＜0.05]明显减少,同时Notch-1表达亦明显下降（P＜0.05）.结论 Beclin-1通过维持胃癌细胞VM调节基因的稳定表达促使VM形成,抑制Beclin-1为胃癌的基因治疗提供了一个可能的新靶点.     

TNP-470对MHCC97-H体外血管生成拟态的抑制作用

目的研究血管生成抑制剂TNP-470对人肝癌高转移细胞株MHCC97-H体外形成血管生成拟态的影响。方法TNP-470作用于MHCC97-H细胞,应用MTT试验、体外侵袭实验,检测MHCC97-H细胞增殖活性和侵袭力的变化。建立MHCC97-H细胞人工基底膜基质凝胶体外三维细胞培养模型,观察MHCC97-H细胞能否形成血管生成拟态以及TNP-470对其影响,应用扫描电镜、透射电镜观察细胞结构改变。结果TNP-470对MHCC97-H细胞增殖无显著抑制作用,可抑制其体外侵袭能力,明显抑制MHCC97-H细胞形成血管生成拟态,减少细胞表面的微绒毛和细胞间连接。结论人肝癌高转移细胞株MHCC97-H可形成血管生成拟态,TNP-470能抑制人肝癌细胞株MHCC97-H体外血管生成拟态形成。     

血管生成拟态和基质金属蛋白酶-2在前列腺癌中的表达及意义

目的 研究血管生成拟态( vasculogenic mimicry,VM)在人前列腺癌组织中的分布及与预后的关系,探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在前列腺癌VM形成中的作用. 方法 选取天津医科大学第二医院1995年1月至2008年12月收治的前列腺癌患者96例.年龄59 ～ 72岁,平均(66.7±11.0)岁.术前血清PSA为15.6 ～ 76.7 μg/L,平均(34.6±1.7)μg/L.术前经MRI检查及穿刺活检均诊断为局灶性前列腺癌.收集前列腺根治性切除术后的组织标本,采用血小板-内皮细胞黏附分子-1(platelet-endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31)免疫组化和过碘酸雪夫氏( periodic acid-sciff,PAS)组织化学双重染色后,光镜下观察VM结构,比较VM表达阳性组和阴性组的预后情况,分析VM表达与预后的关系.免疫组化法检测MMP-2在前列腺癌组织中的表达,分析MMP-2蛋白表达与VM形成的关系和作用. 结果 96例中24例存在VM结构,VM阳性组平均Gleason评分8.0±0.3,PSA( 37.7±2.3) μg/L,均高于VM阴性组Gleason评分6.2±0.3,PSA(19.5±2.1) μg/L,差异有统计学意义(P＜0.05).VM阴性组无生化复发中位生存期96个月,高于VM阳性组无生化复发中位生存期39个月,差异有统计学意义(P＜0.05).MMP-2表达和VM的形成呈明显正相关(rs =0.60,P＜0.01). 结论 前列腺癌组织中VM形成与组织恶性程度相关,肿瘤细胞分泌MMP-2可能促进了VM的形成,VM阳性和MMP-2高表达与前列腺癌预后不良有关.     

肝癌基质型血管生成拟态的表达及预后意义

目的 研究基质型血管生成拟态( vasculogenic mimicry,VM)在肝细胞癌中表达及其预后意义.方法 收集安徽省立医院2003年1月至2008年12月临床病理资料完整的151例肝细胞癌组织标本,采用层粘连蛋白、CD34和肝细胞免疫组织化学染色以及透射电镜检测肝细胞癌组织中基质型VM表达,分析基因表达与肝细胞癌临床病理指标及生存预后的关系.结果 151例肝细胞癌组织中基质型VM阳性31例(20.5％).组织中基质型VM阳性肝细胞癌患者与阴性患者相比,肿瘤较大(x2=4.132,P=0.042),血管侵犯率高(x2=5.825,P=0.016),Edmondson分级高(x2=5.256,P=0.022),pTNM分期晚(x2 =6.218,P=1.013).基质型VM阳性患者和基质型VM阴性患者1、3、5年总生存率分别为67.7％、34.6％、11.5％和86.7％、64.7％、40.3％(x2=14.852,P＜0.001);1、3、5年无瘤生存率分别为41.9％、19.4％、6.5％和63.3％、40.6％、19.6％(x2=10.065,P =0.002).对总生存率和无瘤生存率的单、多因素分析显示,多发肿瘤、血管侵犯和基质型VM表达是影响总生存率的独立危险因素;而血管侵犯和基质型VM表达是影响无瘤生存率的独立危险因素.结论 肝细胞癌中存在基质型VM,其表达与肿瘤大小、分级、分期、血管侵犯有关,是肝癌患者预后不良的独立危险因素.     

Prostatic tumor cell plasticity involves cooperative interactions of distinct phenotypic subpopulations: role in vasculogenic mimicry

BACKGROUND: Tumor cell plasticity represents a significant clinical challenge in that the fate and function of tumor cells can be elusive until a tumor mass is evident. A remarkable example of plasticity is tumor cell vasculogenic mimicry, recently described in aggressive uveal and cutaneous melanoma, in addition to ovarian carcinoma, whereby tumor cells express endothelial-associated genes and form de novo vasculogenic-like networks in three-dimensional (3-D) culture. In the current investigation, we examined whether there is evidence for vasculogenic mimicry in heterogeneous prostatic neoplasms. METHODS: Dunning rat and human prostate cancer cell lines (comprised of epithelial- and fibroblastic-like tumor subpopulations) were tested for their ability to express selected endothelial-associated genes, laminin, the alpha6beta1 laminin-binding integrin, and for their potential to form perfusable tubular networks in 3-D culture. Simultaneous morphological analysis of tumor-lined channels in rat and human tumors was also performed. RESULTS: Green fluorescent protein labeling of prostatic clonal subpopulations revealed unique cooperative interactions of epithelial- and fibroblastic-like tumor cells in the formation of perfusable vasculogenic-like networks. Furthermore, while these cell lines were shown to express various vascular markers, prostatic tumor cell-lined channels were also detected in vivo in high grade tumors, and occurred in some cases in close proximity to conventional endothelial-lined vasculature. CONCLUSIONS: A multidisciplinary approach to assess vasculogenic mimicry by prostatic tumor cells has revealed supportive evidence that it occurs in invasive, heterogeneous prostate cancer cell lines, and circumstantially in aggressive rat and human tumors. These results reflect the plasticity of aggressive prostatic tumor cells and may provide new prognostic markers for clinical diagnosis and new therapeutic intervention strategies.     

Molecular regulation of vasculogenic mimicry in tumors and potential tumor-target therapy

"Vasculogenic mimicry (VM)", is a term that describes the unique ability of highly aggressive tumor cells to express a multipotent, stem cell-like phenotype, and form a pattern of vasculogenic-like networks in three-dimensional culture. As an angiogenesis-independent pathway, VM and/or periodic acid-schiff-positive patterns are associated with poor prognosis in tumor patients. Moreover, VM is resistant to angiogenesis inhibitors. Here, we will review the advances in research on biochemical and molecular signaling pathways of VM in tumors and on potential anti-VM therapy strategy.     

胃泌素促进胃癌细胞增殖和血管生成拟态形成

目的 探讨胃泌素对胃癌细胞血管生成拟态(VM)的作用及其分子机制.方法 应用免疫细胞化学检测SGC-7901、AGS细胞中胃泌素受体(CCK-BR);用终质量浓度为10、100 nmol/L胃泌素处理SGC-7901和AGS 72 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖率、实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达、酶联免疫吸附实验检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)的分泌水平;三维培养SGC-7901和AGS,用10、100 nmol/L胃泌素处理,显微镜下观察24、48、72 h VM形成,计数72 h VM形成数;软琼脂克隆形成实验检测细胞培养3周的克隆形成率.结果 SGC-7901和AGS细胞表达CCK-BR;经10、100 nmol/L的胃泌素处理后,SGC-7901和AGS的细胞增殖率和克隆形成率高于对照组,细胞的环形、半环形VM形成数也高于对照组(P＜0.01);细胞中HIF-1α的表达量比对照组上调了5.39、11.00(SGC-7901)、4.12和6.06倍(AGS);分泌性VEGF的浓度也比对照组增高[298、339 μg/mg蛋白(SGC-7901)及168和281 μg/mg蛋白(AGS),p＜0.01].结论 通过胃泌素-CCK-BR-HIF-1 α-VEGF构成的信号传递链,胃泌素促进胃癌细胞的体外增殖及VM的形成.