柯萨奇病毒-腺病毒受体在肺癌组织中的表达意义

目的：初步探讨柯萨奇病毒-腺病毒受体（Coxsackie and adenovirus receptor,CAR）与人肺鳞状细胞癌及腺癌发生、发展的关系,为设计腺病毒载体对肺癌进行基因治疗的方案提供理论依据。方法：采用免疫组织化学方法检测112例肺癌（包括鳞状细胞癌65例,腺癌47例）组织中CAR的表达情况,利用统计学方法（SPSS10.0软件）分析CAR的表达在鳞状细胞癌、腺癌以及癌旁正常肺组织中有否差异。结果：正常肺组织中仅有少量CAR的表达。两类型肺癌分别与癌旁组织CAR的表达差别有统计学意义（P〈0.01）,在鳞状细胞癌中CAR的表达较癌旁组织提高34.75%,在腺癌中CAR的表达较癌旁组织提高38.30%。其中,鳞状细胞癌的CAR阳性率为43.08%,腺癌的阳性率为70.21%,两类型肺癌间CAR表达的阳性率差别亦有统计学意义（P〈0.01）。但CAR的表达在肺鳞状细胞癌不同组织学分级中（Ⅰ～Ⅲ级）的差别未有统计学意义（P〉0.05）。此外,我们发现在肺腺癌中所包含的细支气管肺泡癌部分几乎都有CAR的表达。结论：肺癌组织（鳞状细胞癌和腺癌）CAR的表达普遍提高,提示CAR与肺癌的发生、发展有一定的联系,并且与肺腺癌的形成及发展的关系更为密切,因此为进一步实现用腺病毒载体对肺癌进行基因治疗提供了理论基础。     

Nanog在多种癌组织中的表达及临床意义

  目的   分析Nanog在非小细胞肺癌（NSCLC）、胃腺癌、食管鳞状细胞癌中的表达特点及规律,探讨Nanog的表达在肿瘤发生、发展中的意义及其与肿瘤干细胞的关系。   方法   采用实时荧光定量PCR法分别检测78例NSCLC及其中10例肺癌患者的癌旁组织、39例胃腺癌及其中10例胃腺癌患者的癌旁组织和35例食管鳞癌及其中10例食管鳞癌患者的癌旁组织中Nanog的相对表达情况。   结果   NSCLC、胃腺癌和食管鳞癌组织中Nanog相对表达量明显高于对应的癌旁组织,且肺癌和胃腺癌与其对应的癌旁组织之间差异具有统计学意义（P < 0.05）。肺癌中Nanog的相对表达量与患者的临床分期和肿瘤组织学类型有关（P < 0.05）;胃腺癌组织中,Nanog的相对表达量与胃腺癌的临床分期、性别有关（P < 0.05）;食管鳞癌组织中,Nanog的相对表达量与淋巴结转移、临床分期有关（P < 0.05）。   结论   在肿瘤进展过程中,Nanog的表达与肿瘤的临床分期和淋巴结转移有关,提示Nanog的表达在腺癌的发生、发展中可能具有一定意义。      

CAR在具有细支气管肺泡癌特征肺癌中的表达及意义

  目的  探讨柯萨奇病毒-腺病毒受体（CAR）在肺腺癌部分亚型中的表达及其与临床病理和患者预后的关系。  方法  采用EnVision免疫组化二步法检测CAR在137例具有细支气管肺泡癌特征的肺癌（PWBF）组织中的表达,分析其与临床因素的相关性;并收集患者的生存资料,采用Kaplan-Meier曲线描述生存率,行Log-rank检验。  结果  CAR在PWBF、其他类型肺癌及正常组织中的阳性率分别为71.5%、50.0%、13.3%,其差异具有统计学意义;CAR蛋白的表达与病理分型和组织学分级相关,与性别、年龄、临床分期等无关。CAR阳性表达患者的生存时间较阴性者长,但无统计学差异。  结论  CAR的表达与肺癌的发生发展相关,并同肺腺癌部分亚型（PWBF）的关系密切。CAR在PWBF中的较高表达为以腺病毒（Ad）载体的基因治疗开辟了更为广阔的空间;同时CAR的高度可调节性也为肺癌其他类型的基因治疗提供了可靠的依据和美好的前景。      

非小细胞肺癌COX-2蛋白表达及与bcl-2相关性

 目的　探讨非小细胞肺癌 (NSCLC)环氧化酶 2 (cyclooxygenase 2 ,COX 2 )蛋白表达的临床意义及与bcl 2的关系。方法　免疫组织化学法检测 5 3例NSCLC癌组织及配对癌旁正常组织COX 2蛋白的表达及定位 ,Western印迹法半定量检测COX 2蛋白表达水平 ;免疫组织化学法检测癌组织bcl 2蛋白表达。结果　肺癌组织COX 2蛋白表达高于癌旁正常组织 (P <0 .0 1) ,腺癌高于鳞癌 (P <0 .0 5 ) ,但与患者的年龄、性别、TNM分期及肿瘤组织的分化程度无明显相关 (P >0 .0 5 )。COX 2与bcl 2蛋白表达相关 (P <0 .0 5 )。结论　COX 2在肺癌组织尤其是肺腺癌中表达上调 ,COX 2与bcl 2在NSCLC发展中可能起协同作用。     

抑癌基因PRDM1在肺癌组织中的表达

目的探讨抑癌基因PRDM1在肺癌组织中的表达情况及其意义。方法45例肺癌患者中,鳞状细胞癌20例、腺癌15例、小细胞肺癌10例。用免疫组织化学方法,研究肺癌石蜡包埋组织中PRDM1蛋白的表达情况;激光微切割技术捕捉冰冻肺癌组织中的肿瘤细胞,抽提RNA、采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术研究PRDM1基因表达;Western blot技术研究冰冻肺癌组织中PRDM1蛋白表达。结果(1)免疫组织化学结果表明鳞状细胞癌、腺癌、小细胞肺癌患者的PRDM1蛋白阳性率分别为90.0%(18/20)、13.3%(2/15)和0(0/10),统计学分析显示,PRDM1蛋白主要在鳞状细胞癌患者中表达(P<0.01)。(2)激光微切割技术联合RT-PCR证实,PRDM1基因特异表达于鳞状细胞癌患者中,腺癌和小细胞肺癌中未发现其基因表达。进一步研究发现,鳞状细胞肺癌患者中,PRDM1基因的DNA结合区表达缺陷。Western blot在鳞状细胞肺癌组织中检测出约70 000的异常PRDM1蛋白。结论PRDM1在鳞状细胞肺癌中优势表达,可作为肺癌诊断的新的肿瘤标志;鳞状细胞肺癌中PRDM1在转录和蛋白水平上均存在异常,失去了抑癌基因的正常功能,可能成为新的研究治疗靶点。     

ASCL-1在肺腺癌组织中的表达及与预后相关性研究

  目的  ASCL-1基因表达与肺神经内分泌肿瘤(小细胞癌、非典型类癌、典型类癌、大细胞神经内分泌癌)密切相关。本研究旨在分析ASCL-1蛋白在肺腺癌组织中的表达情况及与预后的相关性。  方法  采用免疫组织化学法检测南京医科大学附属肿瘤医院2008年1月至2010年1月283例肺腺癌组织中ASCL-1、神经内分泌标志物嗜铬蛋白A (chromogranin A,CgA)、突触素(synaptophysin,Syn)和CD56的表达并进行对比分析,采用Western blot法检测对肺腺癌及癌旁组织中ASCL-1的表达进行检测。采用单因素χ2检验和Logistic多因素回归分析探究影响ASCL-1表达的相关因素,并采用Kaplan-Meier法对肺腺癌患者进行预后评估。  结果  ASCL-1在肺腺癌中的表达阳性率为16.9% (48/283),与神经内分泌标志物的表达呈正相关(0＜r＜1,P＜0.05)。采用Western blot法检测63例患者的肺腺癌组织,9例ASCL-1蛋白表达,而对应癌旁肺组织均无蛋白表达。经单因素χ2检验和多因素Logistic回归分析,发现ASCL-1的表达与肺腺癌患者的吸烟、肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关。经Kaplan-Meier生存分析显示,ASCL-1蛋白表达阳性组患者总生存期(overall survival,OS)低于阴性组。  结论  ASCL-1蛋白表达可能是肺腺癌患者预后的危险因素之一。      

Sox17基因甲基化状态与贲门腺癌发生发展关系研究

  目的  检测贲门腺癌(gastric cardia adenocarcinoma, GCA)组织中Wnt通路相关因子Sox17基因的甲基化状态及mRNA表达情况, 探讨其与贲门腺癌发生的关系。   方法  应用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR, MSP)及RT-PCR的方法检测126例贲门腺癌及相应癌旁非肿瘤组织中Sox17基因的甲基化状态及mRNA表达情况。   结果  在126例贲门腺癌组织中, Sox17基因的甲基率为86.5%(109/126), 明显高于癌旁非肿瘤组织(P < 0.001);癌组织中Sox17基因的甲基化率与贲门腺癌的TNM分期及淋巴结转移均无关; 癌组织中该基因mRNA的阳性表达率为58.7%(74/126), 明显低于癌旁非肿瘤组织(P < 0.001)。其mRNA阳性表达率与该基因的甲基化状态呈明显负相关(P < 0.01)。   结论  Sox17基因在贲门腺癌中呈高甲基化状态, 可作为Wnt拮抗基因甲基化谱中的一个新成员。      

非小细胞肺癌XIAP和Smac的表达与临床病理特征及预后的关系

  目的   探讨XIAP（X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP）和Smac（second mitochondria-derived activator of caspase,Smac）在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）组织中的表达与临床病理特征及预后的关系。   方法   采用免疫组织化学法检测70例非小细胞肺癌组织及70例对应癌旁肺组织中XIAP、Smac的表达。   结果   XIAP在70例NSCLC组织中有59例阳性表达,其中高表达16例;对应70例癌旁肺组织中有52例表达,其中高表达5例,两组XIAP表达强度比较差异有统计学意义（Z=-4.049,P < 0.001）;Smac在70例肺癌组织中有63例阳性表达,其中高（强阳性）表达32例;对应70例癌旁肺组织有53例表达,其中高（强阳性）表达5例,两组Smac表达强度比较差异有统计学意义（Z=-5.484,P < 0.001）。NSCLC组织中XIAP、Smac的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、组织类型、分化程度、吸烟与否等无明显关系（P <0.05）;但二者的表达均与临床分期、淋巴结转移与否有关系（P < 0.05）。通过Kaplan-Meier法分析得出,XIAP和Smac在NSCLC中的表达与患者的预后均无明显关系（P <0.05）。   结论   1）XIAP和Smac在非小细胞肺癌组织及其对应癌旁肺组织中均有表达,但存在表达量的差异。2）XIAP和Smac在非小细胞肺癌中的表达与患者的预后均无显著关系。      

氯硝柳胺联合顺铂对裸鼠肾上腺皮质癌移植瘤的抑制作用

  目的   研究氯硝柳胺联合低剂量顺铂对裸鼠肾上腺皮质癌移植瘤的抑制作用,并探讨其机制。   方法   建立SW-13细胞裸鼠移植瘤模型,设对照组、氯硝柳胺组、顺铂组、联合用药组,比较各组终末肿瘤体积、瘤重、生化指标。TUNEL检测移植瘤组织的细胞凋亡率,免疫组织化学法和Western blot检测移植瘤组织Bcl-2、caspase-3的表达。   结果   联合用药组的终末肿瘤体积、瘤重低于氯硝柳胺组、顺铂组（均P < 0.001）;顺铂组、联合用药组的白细胞低于对照组（均P < 0.001）,顺铂组与联合用药组比较差异无统计学意义（P=0.29）;顺铂组、联合用药组的肌酐、谷丙转氨酶高于对照组（均P < 0.001）,顺铂组与联合用药组的肌酐、谷丙转氨酶比较差异无统计学意义（均P > 0.05）。TUNEL检测显示联合用药组的细胞凋亡率高于氯硝柳胺组（P=0.004）、顺铂组（P=0.005）,免疫组织化学法、Western blot检测显示联合用药组中Bcl-2表达较氯硝柳胺组、顺铂组降低（均P < 0.001）,caspase-3的表达升高（均P < 0.001）。   结论   氯硝柳胺能够增强低剂量顺铂对肾上腺皮质癌生长的抑制作用且不增加毒副作用,可能与影响Bcl-2、caspase-3表达促进肿瘤细胞凋亡相关。      

肺癌细胞表面CAR表达水平与腺病毒转基因治疗的可能性研究

目的:研究肺癌细胞表面柯萨奇腺病毒受体(CAR)表达水平与基因治疗的可能性.方法:用特异性CAR72抗体通过免疫组织化学Envision法在检测CAR在肺癌组织细胞中的表达水平.结果:在32例鳞癌中有25例CAR高表达、5例小细胞肺癌全部高表达,相反,CAR在22例腺癌中仅6例高水平表达.在非恶性肺泡上皮中为阴性.结论:以腺病毒血清型5为载体的基因治疗适合于鳞癌和非小细胞肺癌,而不适合于大多数腺癌.     

Expression of Coxsackievirus and Adenovirus Receptor in Human Lung Cancer: Possible Clinical Significance

OBJECTIVE To explore the relationship between CAR and the development of human lung cancer, as well as to provide the basis for the clinical treatment of lung cancer using an adenovirus vector-based gene therapy.METHODS CAR expression was assessed immunohisto-chemically in tumoral, paraneoplastic and normal samples from 112 lung cancer patients. At the same time, the mRNA and protein expression of CAR in 32 cases were determined by RT-PCR and Western blot. The relationship between CAR expression and clinicopathologic parameters was statistically analyzed.RESULTS There was no expression of CAR in normal lung tissue but a little in paraneoplastic tissue. The positive rate was 43% in squamous cell carcinoma, and 70% in adenocarcinoma.Both were much significantly higher than that in paraneoplastic tissue. The CAR expression level in adenocarcinoma was higher than that in squamous cell cancer, mRNA expression by RT-PCR and protein expression by Western blot were consistent with immunohistochemistry results.CONCLUSION CAR is overexpressed in human lung cancer,especially in adenocarcinoma. This data offer the reliable basis for adenovirus-mediated gene therapy of lung cancer; more important, CAR may take part in the formation or development of lung cancer; this may be exploitable for the development of antibody-directed therapy in human lung cancer.     

Expression of Coxsackie and Adenovirums and its Significance in Human Lung Cancer

OBJECTIVE To study the relationship between the coxsackie and adenovirus receptor （CAR） and the development of human lung cancer. To optimize adenovirus vector-based gene therapy. METHODS The expression of CAR in 112 cases of lung cancer was examined using immunohistochemistry. At the same time, the relationship between CAR expression and clinicopathologic characteristics was analyzed, RESULTS ：lhere is a little expression of CAR in normal lung tissue. Compared with paraneoplastic epithelial tissue of the lung, the expression of CAR is generally up-regulated in tumor tissues showing a significant dif- ference （P〈0.01）. The positive rate of CAR expression in squamous cell carcinoma was 43.1%, and in adenocarcinoma 70.2%, with the difference between the two rates being statistically significant （P〈0.01）. Compared to the paraneoplastic tissues, the difference in CAR positive expression was 35.4% for squamous cell carcinoma and 38.3% for adenocarcinoma. But the difference in different stages of squamous cell carcinoma had no statistical significance （P〉0.05）. However, the expression of CAR was at a high level in the bronchioalveolar carcinomas as 80.4% were CAR positive. This research showed that there was a specially high expression of CAR in adenocarcinomas. CONCLUSION CAR is expressed in human lungs at a low level and up-regulated in the tumor tissues, suggesting that there is a relationship between adenocarcinoma and CAR. This research provides a basis for planning a regimen of gene therapy using an adenovirus vector,     

Expression of the coxsackie and adenovirus receptor in human lung cancers

The aim of this study is to elucidate the relation between expression of coxsackie and adenovirus receptor (CAR) and formation of lung cancer. We investigated the expression of CAR by immunohistochemistry, Western blot and real-time RT-PCR in 120 lung cancers. We found that CAR expression in tumor tissues was significantly higher than that in normal lung tissues. CAR expression had a correlation with the histological grade of lung squamous cell carcinoma; however, there was no relationship between the CAR expression and the other clinical pathological features. In vitro, silencing or overexpression of CAR could significantly inhibit or promote colony formation, cell adhesion, and invasion in A549 cells. Our findings demonstrated that CAR may play an essential role in the formation of lung cancer.     

Expression of Coxsackie and Adenovirurus Receptor and its Significance in Human Lung Cancer

OBJECTIVE To study the relationship between the coxsackie and adenovirus receptor (CAR) and the development of human lung cancer. To optimize adenovirus vector-based gene therapy. METHODS The expression of CAR in 112 cases of lung cancer was examined using immunohistochemistry. At the same time, the relationship between CAR expression and clinicopathologic characteristics was analyzed. RESULTS There is a little expression of CAR in normal lung tissue. Compared with paraneoplastic epithelial tissue of the lung, the expression of CAR is generally up-regulated in tumor tissues showing a significant dif- ference (P<0.01). The positive rate of CAR expression in squamous cell carcinoma was 43.1%, and in adenocarcinoma 70.2%, with the difference between the two rates being statistically significant (P<0.01). Compared to the paraneoplastic tissues, the difference in CAR positive expression was 35.4% for squamous cell carcinoma and 38.3% for adenocarcinoma. But the difference in different stages of squamous cell carcinoma had no statistical significance (P>0.05). However, the expression of CAR was at a high level in the bronchioalveolar carcinomas as 80.4% were CAR positive. This research showed that there was a specially high expression of CAR in adenocarcino- mas. CONCLUSION CAR is expressed in human lungs at a low level and up-regulated in the tumor tissues, suggesting that there is a relationship between adenocarcinoma and CAR. This research provides a basis for plan- ning a regimen of gene therapy using an adenovirus vector.     

Hedgehog信号通路在食管癌中的异常活化

  目的   探讨Hedgehog（Hh）信号通路与食管鳞状细胞癌（ESCC）的关系。   方法   采用免疫组织化学随机分析30例ESCC及癌旁组织样本的Hh信号通路中主要组分Smo和Gli2及靶蛋白CyclinD1表达。构建分泌型配体ShhN的条件培养液,利用条件培养液及Hh信号通路激动剂Purmorphamine或Hh通路抑制剂环杷明及GANT61处理CaEs-17细胞后,MTT法检测细胞生存率的变化。   结果   ESCC组织中的Smo、Gli2和CyclinD1表达普遍高于癌旁组织。含有ShhN的条件培养液能有效激活Hh信号通路下游靶基因CCND1的表达并明显促进食管癌CaEs-17细胞的生存率,提示食管癌中Hh信号通路以配体依赖的方式激活。直接作用于Smo的Hh信号通路激动剂Purmorphamine促进食管癌CaEs-17细胞的生长;而Smo特异性抑制剂环杷明有效地抑制CaEs-17细胞生存率。Gli1/Gli2的抑制剂GANT61比环杷明更为有效地抑制CaEs-17细胞生存率。   结论   Hh信号通路在ESCC中异常活化,将可能成为新的治疗食管癌的药物靶点。      

凋亡抑制因子Livin在三阴性乳腺癌中的表达及其判断预后的价值

  目的  探讨凋亡抑制因子Livin在三阴性乳腺癌中的表达及与预后的关系, 分析三阴性乳腺癌的独立预后影响因素。   方法  用免疫组织化学SP法检测90例三阴性乳腺癌、35例癌旁乳腺组织、10例正常乳腺组织中Livin的表达; 结合临床病理特征和随访资料, 建立Cox模型进行回归分析。   结果   Livin在三阴性乳腺癌中的表达率为57.8%, 在癌旁乳腺组织中的表达率为34.3%, 在正常乳腺组织中表达率为0, 三者之间差异有统计学意义(P < 0.05)。Livin的表达与临床分期、脉管癌栓及腋淋巴结转移均有显著性差异(P < 0.05), 而与年龄、肿瘤大小、乳腺癌家族史及组织学分级无显著性差异(P > 0.05)。Kaplan-Meier生存曲线显示, Livin蛋白低表达组患者的无瘤生存时间及总生存时间明显优于Livin蛋白高表达组患者。多因素Cox回归分析显示, 年龄、临床分期、脉管癌栓及腋淋巴结转移情况是影响患者DFS的独立危险因素; 仅临床分期及腋淋巴结转移情况是影响患者总生存时间的独立危险因素; 而Livin均被剔除。   结论  Livin的异常高表达可能与三阴性乳腺癌的发生、发展及预后有相关性, 提示Livin的表达可能成为判断三阴性乳腺癌浸润进展及预后的指标之一。       

Caveolin-1在腮腺多形性腺瘤及瘤旁组织中的表达及临床意义

  目的   探讨窖蛋白-1（Caveolin-1,Cav-1）在腮腺多形性腺瘤（pleomorphic adenoma,PA）中的表达及临床意义。   方法   采用免疫组织化学法检测了9例正常腮腺、33例原发性PA距离瘤体中心（0 cm）及瘤旁组织中（分别距瘤体中心0.5、1.0、1.5和2.0 cm）Cav-1的表达,并进行统计学分析。   结果   Cav-1在所有正常腮腺样本（100%）均有表达,其主要在导管系统细胞质和细胞膜中表达;除6例距瘤体中心0.5 cm和1例距瘤体中心1.0 cm的样本外,其余瘤旁样本均有Cav-1表达,其表达模式基本上与正常腮腺类似;在PA中,有10例样本（30.30%）表达Cav-1,且在细胞核中显著表达。Cav-1在多形性腺瘤肿瘤组织中的表达最低,并随着与瘤体中心距离的远近,其表达量逐渐升高。Cav-1的表达在瘤体与瘤旁组织间均存在明显差异（P < 0.05）,但瘤旁组织1.0、1.5和2.0 cm间Cav-1表达无显著性差异（P>0.05）。   结论   在腮腺多形性腺瘤发生过程中,Cav-1中表达下调并出现了从细胞质、细胞膜到细胞核的转位现象。上述结果表明Cav-1在多形性腺瘤的发生发展中可能起着重要作用,其表达水平的变化可作为判定手术安全边缘的科学依据之一。      

膜联蛋白A1在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

  目的  检测膜联蛋白A1（annexin A1,ANXA1）在人非小细胞肺癌组织中的表达情况,并探讨其临床意义。  方法  通过实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹和免疫组织化学技术检测非小细胞肺癌患者肺癌组织和癌旁组织（距肿瘤边缘>5 cm）中膜联蛋白A1的表达水平,并分析其与临床病理参数之间的关系。  结果  实时荧光定量PCR显示,膜联蛋白A1 mRNA在肺癌组织中的表达水平（0.574±1.403）高于癌旁组织（0.240±0.893）,差异具有统计学意义（t=2.060,P=0.045）。肺癌组织中膜联蛋白A1的表达与其分化程度、淋巴结转移、TNM分期相关（P < 0.05）;与性别、年龄、吸烟史、肿瘤直径、组织学类型无关（P > 0.05）。蛋白免疫印迹和免疫组织化学结果均显示,膜联蛋白A1蛋白在肺癌组织中的表达高于癌旁组织。  结论  ANXA1在非小细胞肺癌患者肺癌组织中呈高表达,可能与其发生发展和侵袭转移有一定关系。