十四酰佛波乙酸酯(PMA)对小鼠免疫细胞功能影响作用的观察

PMA(Phorbol Myristic Acetate)亦名TPA,是一种促癌剂(Tumor Promo-ter)。为了揭示PMA促癌机理的免疫学基础,我们观察了其对小鼠细胞免疫的部分功能的影响作用,现将初步观察结果报告如下。材料和方法一、实验动物: C57BL/6 Balb/c纯系小鼠,8—20周龄,由中国医学科学院动物中心提供。二、效应细胞: 1.巨噬细胞:小鼠腹腔内注射3.0ml3%的巯基乙醇酸钠(Thioglycollate,Becton-Dickinson,Heidelberg)4天后,以10mlPBS冲洗腹腔,将获取的腹腔渗出细胞中的粘附细胞,做为本实验巨噬细胞的来源。2.NK细胞:C57BL/6小鼠的新鲜脾     

巨噬细胞Ia抗原表达和抗原提呈功能调控的研究——Ⅵ.人单核细胞表面HLA-Ⅱ类抗原和IL-2R与其抗原提呈功能的关系

取健康青壮年男性献血员的新鲜外周静脉血,肝素抗凝,经密度梯度离心获得单个核细胞。又经粘附法和尼龙毛柱分离法分别获得高纯度的单核细胞和T淋巴细胞。用单克隆抗体分别阻断单核细胞表面的 HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP 抗原,经洗涤后,将单核细胞与PPD共同温育24小时,观察单核细胞向T淋巴细胞提呈PPD的能力。另一组先将单核细胞与 PPD作用24小时,然后用单克隆抗体阻断单核细胞表面的 IL-2R1小时,再观察单核细胞的抗原提呈功能。结果表明,分别阻断单核细胞表面的 HLA-DR、DQ、DP 和IL-2R 后,其抗原提呈能力均显著减弱。     

促癌剂作用机理的研究——PMA对IL2受体及DNA合成的影响

<正> 乙酸豆寇佛波醇(phorbol myristate acetate,PMA)是一种强促癌剂。我们探讨了它对 T 细胞的白细胞介素2(IL2)受体(IL2R)及 DNA 合成的作用,试图阐明促癌剂作用的较为直接的和本质的原因。BALB/c 小鼠胸腺(Ty)或脾(Sc)细胞经尼龙绒柱两次滤过,经 PMA 处理后得 Typma 及 Scpma 细胞.测定细胞对 IL2的吸附作用,观察细胞表面     

K562细胞总RNA转染对人树突状细胞抗原提呈、成熟及功能影响的初步研究

探讨人的树突状细胞(dendriticcell,DC)体外经K562细胞株总RNA转染后,能否诱导出p210蛋白表达,并诱导特异性CTL,为DC疫苗的临床应用提供理论基础。自健康人浓缩白细胞制剂分离有黏附特性的单核细胞,经GM-CSF、IL-4培养5d后,获得未成熟的DC(imDC);体外以脂质体DOTAP或直接电穿孔转染K562细胞总RNA。抽提后即时以及转染24h后的DC内RNA进行RT-PCR检测,Westernblot分析p210蛋白表达,流式细胞仪检测,以及诱导CTL杀伤K562细胞功能检测等。结果显示,RT-PCR检测表明:DC经K562细胞总RNA转染后,细胞内出现Bcr-Abl的cDNA条带,24h后消失。Westernblot实验表明:转染24h后,开始表达p210特征性蛋白。与对照组相比,转染K562细胞总RNA的DC,在24h后CD80、CD83、CD86、HLA-DR等表面标志均不同程度表达增高,并可促进T细胞对K562的杀伤活性。该研究从多方面角度说明应用肿瘤总RNA负载DC来制备DC疫苗的可行性,提示改良的DC疫苗抗肿瘤可能的应用前景。     

新生小鼠胸腺细胞免疫抑制功能探讨——Ⅱ.对同种半心移植排异反应的抑制作用

经~(60)Co轻度照射(200Rad)之成年CFW小鼠,在接受2×10~8同品系新生早期胸腺细胞及供体新生心肌细胞混悬液腹腔注射后,其对同种半心移植(C57BL CFW)的排异反应明显延缓。新生鼠胸腺细胞组之移植物平均存活期(20.0±1.8天)比对照组(12.9±1.5天)和成年鼠胸腺细胞组(16.2±3.0天)显著延长。提示新生小鼠胸腺细胞对排异反应有抑制作用。 就各种术前处理对移植物存活期影响所作的分析表明,照射对移植物存活期无显著影响,在照射后的5—7天,受鼠免疫系统功能已回复正常水平。而照射联合新生供体心肌细胞注射,则在一定程度上延长移植物的存活期。进一步的分析显示,成年鼠胸腺细胞组移植物的存活期之所以较长,可能是由于受照射联合新生供体心肌细胞注射的影响。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞对内皮细胞抗原提呈功能的影响及机制

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)对内皮细胞抗原提呈功能的影响及机制。方法:磁性细胞分离器(MACS)分离CD4+CD25+T细胞及CD4+CD25-T细胞。在ox-LDL作用下,HUVECs与CD4+CD25+T细胞共培养,24小时后收集HUVECs。应用流式细胞术测定HUVECs抗原提呈分子(HLA DR,CD86,CD80)的表达,Cell Counting Kit-8法(CCK-8)测定HU-VECs刺激CD4+CD25-T细胞增殖的能力,Transwell小室实验初步探讨Treg作用于HUVECs的具体机制。结果:与对照组比较,Treg可显著抑制HUVECs抗原提呈分子的表达及刺激T细胞增殖的能力。用Transwell隔离后,与or-LDL刺激组比较,HU-VECs抗原提呈分子表达及其刺激T细胞增殖的能力无明显变化。结论:Treg可显著抑制HUVECs抗原提呈能力,其作用机制可能为下调CD86的表达,且依赖细胞直接接触。     

口腔颌面部癌瘤手术对细胞免疫功能的影响——(实验与临床研究的初步观察)

动物实验证明:接种肿瘤的小鼠免疫功能明显低下;手术可进一步增加免疫功能损伤;氟烷麻醉对免疫功能影响不大。临床资料证明:手术后第1天免疫功能下降最明显;术后2周基本回复到术前水平。本文讨论了癌瘤手术对免疫损伤的各种可能因素。提出如下建议:①术前即应开始免疫支持治疗。②术中应用氟烷麻醉,操作要细致,尽量减少出血和输血。③术后少用或不用激素,早期继续免疫支持治疗,术后化疗应在2周,免疫功能回复后进行。