2012－2017年天津市百日咳鲍特菌耐药情况分析

目的 了解2012 — 2017年天津市百日咳鲍特菌菌株对抗生素敏感性的分布情况及耐药位点变异情况,为百日咳防治提供依据。 方法 以2012年2月至2017年7月天津市分离的18株百日咳鲍特菌菌株作为研究对象,采用纸片扩散法对培养的阳性菌株进行红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、左氧氟沙星及克林霉素敏感性进行检测,同时采用E-test法检测菌株对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素、左氧氟沙星及复方新诺明的敏感性;对红霉素结合区域23S rRNA domain V基因片段进行扩增、序列测定及分析。 结果 纸片扩散法结果显示,18株菌株中仅1株对5种抗生素均敏感,其余17株对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素及克林霉素均耐药,红霉素耐药率最高,达94.44%（17/18）,18株菌对左氧氟沙星均敏感;E-test法结果显示,仅1株菌对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素的最低抑制浓度（MIC）在敏感范围内,其余17株对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素的MIC均＞256 μg/ml,18株菌对左氧氟沙星的MIC为0.19～0.38 μg/ml,复方新诺明的MIC为0.047～1.500 μg/ml;23S rRNA扩增产物序列分析发现,17株菌发生A2047G位点突变。 结论 纸片扩散法和E-test法对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素和左氧氟沙星的耐药结果完全符合,17株菌对红霉素、阿奇霉素、克拉霉素同时耐药,耐药株23S rRNA序列均发生A2047G红霉素耐药位点改变。      

薄层法测定牛黄解毒片中胆酸的含量

牛黄解毒片是由牛黄、大黄、黄芩等组成，为药典收载品种，具有清热解毒等功效。本品收载了黄芩苷的含量测定。而牛黄为本方的主药，其主要成分为胆酸，胆红毒及去氧胆酸等。据文献报道，对胆酸的含量测定方主要有比色法，薄层扫描法等。本方为复方制剂，经试验比较，结果表明，用薄层扫描法，方法可靠，结果准确，操作简便易行。     

幽门螺杆菌对两种抗生素的耐药性及相关基因突变分析

目的分析浙江地区26株幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）对克拉霉素和左氧氟沙星的耐药性,探讨H.pylori对克拉霉素、左氧氟沙星的耐药性,及其与23SrRNA基因、gyrA基因突变的关系。方法采用E-test法测定H.pylori对克拉霉素和左氧氟沙星的最低抑菌浓度（MIC）,提取H.pylori基因组DNA,采用PCR法扩增23SrRNA和gyrA基因片段,并对扩增产物进行测序、分析。结果药敏实验结果显示26例临床分离株中,6例对克拉霉素耐药,6例对左氧氟沙星耐药,8例对克拉霉素和左氧氟沙星双重耐药。所有克拉霉素耐药菌株23SrRNA基因都存在A2143G突变;左氧氟沙星耐药菌株gyrA基因中的喹诺酮类耐药决定区（quinolone-resistance-determining region,QRDR）存在突变,主要在第87和91位氨基酸。结论 23SrRNA基因的A2143G突变是导致H.pylori对克拉霉素耐药的主要原因;gyrA基因的87和91位氨基酸突变是导致H.pylori对左氧氟沙星耐药的主要原因。     

舟山群岛渔民幽门螺杆菌克拉霉素耐药菌株23S rRNA全基因生物信息学研究

目的:通过对舟山群岛渔民胃镜检查患者分离胃黏膜幽门螺杆菌(Hp),对Hp克拉霉素的耐药情况和耐药基因进行研究,指导合理使用克拉霉素治疗Hp。方法:取188份胃镜活检标本,Hp培养后对188株Hp临床分离株采用E-test法行克拉霉素药敏试验。对17株克拉霉素耐药和3株敏感的Hp23SrRNA全基因序列和3株标准序列进行比对和生物信息学分析。结果:胃炎患者Hp培养阳性率为26.5%(27/102),溃疡患者培养阳性率为48.7%(38/78),胃癌患者培养阳性率为25.0%(2/8),溃疡患者Hp培养阳性率明显高于胃炎患者和胃癌患者。67例Hp菌株克拉霉素耐药23株,占34.3%(23/67),敏感株44株,占65.7%(44/67)。胃炎患者、溃疡患者和胃癌患者克拉霉素耐药率分别为29.6%(8/27)、36.8%(14/38)和50.0%(1/2)。17株克拉霉素耐药Hp菌株2143位点A>G突变率为29.4%,2182位点C>T突变率为11.8%;新的突变点C588U在6株耐药株中出现,而且该6株菌未见其他已知突变。结论:舟山群岛渔民溃疡患者Hp培养阳性率和克拉霉素耐药率明显高于胃炎患者。本地区分离的克拉...     

阿奇霉素和克拉霉素对铜绿假单胞菌生物膜形成的作用

目的研究阿奇霉素和克拉霉素对铜绿假单胞菌生物膜形成的作用。方法微量肉汤稀释法测定阿奇霉素、克拉霉素、头孢他啶、环丙沙星和庆大霉素对4株铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度(MIC);银染法鉴定使用医用微孔滤膜建立的铜绿假单胞菌生物膜体外模型的生物膜形成情况;结晶紫染色法检测阿奇霉素和克拉霉素对生物膜粘附性的影响;噻唑蓝法检测阿奇霉素和克拉霉素分别与头孢他啶、环丙沙星或庆大霉素的协同作用。结果铜绿假单胞菌ATCC 27853、PA1、PA2和PA3对阿奇霉素、克拉霉素、头孢他啶、环丙沙星和庆大霉素的MIC值分别为(32,64,1,≤0.125,0.25μg/m L)、(32,256,8,0.25,1μg/m L)、(64,128,256,32,2μg/m L)和(64,128,8,2,0.25μg/m L);银染法发现4株铜绿假单胞菌的培养微孔滤膜表面覆盖物均为灰黑色,浓厚致密,呈棉絮状膜样;与不加抗菌药物对照组相比,加入1/16 MIC或1/4 MIC的阿奇霉素以及1/16 MIC或1/4 MIC的克拉霉素均可显著降低4株菌生物膜的粘附性(P均0.05);与单独使用1 MIC头孢他啶、环丙沙星和庆大霉素相比,各抗菌药物联合1/16 MIC的阿奇霉素或1/16 MIC的克拉霉素均可分别降低以上4株菌生物膜中的活菌数量,差异有统计学意义(P均0.01)。结论阿奇霉素和克拉霉素可有效抑制铜绿假单胞菌生物膜的形成,并与头孢他啶、环丙沙星或庆大霉素联合应用有协同作用。     

广东城乡病人中分离的幽门螺杆菌对常用3种抗菌药物耐药的调查

目的：比较广东城乡幽门螺杆菌（Hp)对常用3种抗菌药物的耐药情况，方法：分别用琼脂稀释法和E－test法检测广东城乡164株Hp对甲硝唑，克拉霉素及阿莫西林的耐药情况，结果：广东地区Hp对甲硝唑和克拉霉素的耐药率分别为51．8％和6．1％，城乡两地Hp对甲硝唑和克拉霉素的耐药率均无统计学差异（P＞0．05），性别，年龄及病种对甲硝唑的耐药率无影响（P＞0．05），在所有的Hp菌株中，仅发现1株对阿莫西林耐药。结论：广东无论城乡Hp对甲硝唑耐药均已相当普遍，对克拉霉素耐药也有增加的趋势，且已发现了对阿莫西林的耐药株，故应尽快建立完善的监测系统。     

茶碱含量测定的示差分光光度法

氨茶硷及其片剂在USP中收载的是银量法,该法滴定前要滤去干扰物,且终点不易观察,当加入结构与茶硷相似的化合物(如可可硷、咖啡因等)时,干扰尤为显著。本文提出应用示差分光光度法测定氨茶硷及其制剂中氨茶硷的含量,具有较高的精确度,比法定方法操作方便,选择性好。     

上海地区幽门螺杆菌对克拉霉素耐药的相关基因检测

目的通过荧光PCR熔解曲线方法直接检测临床样本中幽门螺杆菌(Hp)对克拉霉素耐药基因,了解上海地区Hp耐克拉霉素基因的分布特征,并为临床快速检测Hp对克拉霉素耐药性提供一种有效的方案。方法收集2017年9-12月复旦大学附属中山医院消化科就诊并接受胃镜检查的快速尿素酶试验Hp阳性患者的胃黏膜组织标本80份,使用荧光PCR熔解曲线法直接检测黏膜样本中Hp种特异性23S rRNA的区域并对扩增的核酸进行荧光标记,通过检测荧光变化绘制其熔解曲线,以确定Hp的23S rRNA突变情况;采用DNA测序技术直接检测标本中Hp克拉霉素23S rRNA耐药基因突变位点。并对两种方法的结果进行Kappa检验统计学比较。结果 80份胃黏膜组织标本使用荧光PCR熔解曲线法共检测69份Hp阳性,11份Hp阴性,阳性率为86.2%。在69份Hp阳性标本中24份标本存在23SrRNA第2142或2143位点的变异,突变率34.8%。使用DNA测序法共检测出64份Hp阳性,阳性率为80.0%。其中23例患者的标本检测到23S rDNA耐药基因的突变,突变率35.9%。两种方法检测Hp耐药基因突变的阳性符合率、阴性符合率和总符合率分别为87.0%、95.1%和92.2%,Kappa系数为0.829,两者一致性较好。结论上海地区克拉霉素耐药Hp菌株基因型以23S rRNA基因的A2143G突变占主导。荧光PCR熔解曲线法可直接检测胃黏膜活检组织中Hp及其23S rRNA突变基因,该方法结果准确可靠。     

人参皂苷含量测定对复方丹参片产品质量控制的意义

复方丹参片是由丹参、三七、冰片三味药组成，具有活血化瘀；理气止痛的功效。用于胸中憋闷、心绞痛。复方丹参片收载于中国药典2000年版一部，该标准中只有丹参酮ⅡA的含量测定。为了更好地控制产品质量，我们利用高效液相法对其中人参皂苷的含量进行了测定。     

12种抗生素对支原体药敏结果的分析

目的：做支原体药敏试验用的抗生素品种几经淘汰和增加，有必要分析支原体对调整后的12种抗生素的敏感性。方法：以液体培养法鉴定支原体中的解脲支原体(uu)和人型支原体(Mh)，同时做药敏实验。结果：药敏结果的敏感性从高到低依次为：交沙霉素、强力霉素、四环素、克拉霉素、可乐必妥、美满霉素。结论：uu与Mh经临床用药或变异，对多种抗生素易产生耐药性，及时对uu、Mh进行药敏试验，为临床合理选择用药提供依据。     

影响消炎利胆片含量测定的因素

消炎利胆片收载于1995年版《中国药典》1997年增补本，其含量测定采用分光光度法的比色法测定总内酯(规定每比含总内酯以穿心莲内酯计，不得小于16mg)。在实验过程中，我们发现温度和显色时间对测定结果影响很大，对影响实验因素进行观察，结果如下。     

药敏试验对临床幽门螺杆菌菌株根治的指导意义

目的：探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，HP)对常用抗生素耐药特点，为临床选用抗生素治疗HP提供依据。方法：采用改良Kiby-bauer法对53例HP分离菌株进行阿莫西林、甲硝唑、克拉霉素、庆大霉素、氟嗪酸、痢特灵药敏试验。分析其特点，并将体外药敏试验结果与体内治疗效果相比较。结果：①阿莫西林与克拉霉素、甲硝唑与庆大霉素组问差别无统计学意义(P＞0．05)，其余各组问差别均有统计学意义(P＜0．05，P＜0．01)；②阿莫西林耐药菌株对庆大霉素和痢特灵显著敏感(P＜0．005)、克拉霉素敏感(P＜0．025)；甲硝唑耐药菌株对阿莫西林、庆大霉素、痢特灵显著敏感(P＜0．005)、克拉霉素敏感(P＜0．025)；庆大霉素耐药菌株对阿莫西林、甲硝唑、痢特灵显著敏感(P＜0．005)、克拉霉素敏感(P＜0．025)；③高敏根除率为100％(5／5)，中、低敏根除率为75％(6／8)，耐药根除率为25％(1／4)。结论：药敏试验对临床幽门螺杆菌菌株的根治有指导作用。     

雷贝拉唑联合抗生素三联疗法对胃溃疡的临床疗效

将2013年9月~2014年9月所收治的100例胃溃疡病例纳入本次研究,根据随机数字表法将其均分为对照组与观察组各50例,对照组用药方案为奥美拉唑+克拉霉素+阿莫西林,观察组用药方案为雷贝拉唑+克拉霉素+阿莫西林,观察两组临床症状改善情况,统计治疗总有效率以及Hp转阴率,并对研究结果相关数据作统计学处理。结果与治疗前相比,两组治疗后临床症状均有明显改善(P<0.05);与对照组相比,观察组临床症状改善程度更优,治疗总有效率以及Hp阴转率更高,组间差异显著而具有统计学意义(P<0.05)。雷贝拉唑与克拉霉素、阿莫西林联合用药方案治疗胃溃疡效果确切,安全性较高,临床可予以推广使用。     

克拉霉素、羟氨苄青霉素和兰索拉唑联合治疗幽门螺杆菌阳性出血性十二指肠溃疡的临床疗效观察

目的：旨在探讨克拉霉素、羟氨苄青霉素、兰索拉唑联合应用治疗幽门螺杆菌阳性出血性十二指肠球部溃疡的愈合率和幽门螺杆菌（HP）的根除率。方法：经紧急胃镜确诊的HP阳性的十二指肠球部溃疡并出血的住院患者止血后，106例符合条件的病人随机分成两个治疗组，其中50例口服兰索拉唑30mg，克拉霉素500mg，羟氨苄青霉素1000mg。另一组56例口服兰索拉唑30mg，克拉霉素250mg，羟氨苄青霉索1000mg，用法均为每日2次，疗程1周。继而口服兰索拉唑30mg，每日1次，共1周。疗程式结束后1个月复查胃镜。结果：克拉霉素1000mg组HP根治率及溃疡愈合率分别为93％及93％，稍高于克拉霉素500mg组的80％及92％，但无显著性（P〉0．05）。两组副反应率为8／56例（12％）和8／56例（14．3％），二者比较差异无显著性（P〉O．05）两组副反应总发生率为11．3％。克拉霉素两个剂量组间副反应率无明显差别，末发现严重副反应，病人依从性良好。结论：克拉霉素与羟氨苄青霉素及兰索拉唑合用1周疗法有较理想的溃疡愈合率与HP根治率；克拉霉素用量以每日1000mg为佳。     

基因多态性对质子泵抑制剂联合阿莫西林与克拉霉素三联疗法根除幽门螺杆菌效果的影响

目的探讨CYP2C19基因多态性对质子泵抑制剂联合阿莫西林与克拉霉素三联疗法根除幽门螺杆菌（Hp）的影响。方法选择90例Hp阳性的消化性溃疡患者，随机分成观察组与对照组，每组45例，所有患者均于治疗前测定cYP2C19基因型，分为EM、IM及PM型。观察组给予雷贝拉唑＋阿莫西林＋克拉霉素口服，对照组给予奥美拉唑＋阿莫西林＋克拉霉素口服，两组均治疗1周。停药4周后检测Hp根除情况。结果观察组与对照组HP根除率分别为85：7％和77．8％，差异无统计学意义（P〉0．05）；观察组EM、IM、PM型HP根除率及各基因分型比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；对照组EM与IM、EM与PM之间HP根除率差异有统计学意义（P〈O．01），IM与PM间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CYP2C19基因多态性对雷贝拉唑联合阿莫西林与克拉霉素三联疗法Hp根除率无明显影响，对奥美拉唑联合阿莫西林与克拉霉素三联疗法的Hp根除率影响较大。     

克拉霉素单用及联合洛美沙星治疗非淋菌性尿道炎疗效比较

目的：探讨克拉霉素联合洛美沙星治疗非淋菌性尿道炎（NCG）的疗效。方法：将确诊的166例非淋菌性尿道炎患者按门诊工作日志单、双日分为A，B两组；用克拉霉素联合洛美沙星治疗为A组，单用克拉霉素治疗为B组；观察病原清除率和临床评分情况，进行疗效对比研究。结果：A组98例，总有效率96％；B组68例，治疗效率76％；两组比较；X^2＝12．55，P＜0．01。结论：克拉霉素联合治美沙星治疗非淋菌性尿道炎疗效优于单用克拉霉素。     

鼻用激素联合克拉霉素治疗慢性鼻-鼻窦炎疗效观察

目的探讨鼻用激素和克拉霉素联合用药对慢性鼻-鼻窦炎(CRS)的治疗效果。方法将130例CRS患者随机分成3组,即布地奈德鼻喷雾剂组(42例)、克拉霉素组(45例)和布地奈德鼻喷雾剂联合克拉霉素组(43例),疗程均为12周,治疗前后采用主观症状自评治疗效果及Lund-Mackey鼻窦CT评分。结果布地奈德鼻喷雾剂联合克拉霉素组自评得分[(2.39±0.58)分]显著低于布地奈德鼻喷雾剂组[(3.98±1.57)分]和克拉霉素组[(4.12±1.35)分],差异有统计学意义(P<0.05),Lund-Mackey鼻窦CT评分布地奈德鼻喷雾剂联合克拉霉素组[(2.61±0.91)分]显著低于布地奈德鼻喷雾剂组[(4.33±1.05)分]和克拉霉素组[(4.37±0.92)分],差异有统计学意义(P<0.05)。结论布地奈德鼻喷雾剂和克拉霉素联合用药治疗CRS临床疗效较好。     

不同剂型克拉霉素根治十二指肠球部溃疡HP感染的疗效观察

目的探究不同剂型克拉霉素根治十二指肠球部溃疡HP感染的疗效。方法选取我院2017年3月～2018年3月收治的66例十二指肠球部溃疡患者,随机数字法分为对照组和观察组各33例。对照组患者采用0.5g克拉霉素进行治疗,观察组患者采用0.5g克拉霉素缓释进行治疗,比较两组患者治疗后的临床疗效。结果对照组患者总有效率为93.94%,观察组患者总有效率为90.99%,差异无统计学意义(P0.05);对照组HP根除率为87.87%,观察组HP根除率为81.82,差异有统计学意义(P0.05);对照组不良反应发生率为6.06%,观察组不良反应发生率为18.19%,差异有统计学意义(P0.05)。结论不同剂型克拉霉素根治十二指肠球部溃疡HP感染均可取得显著效果,克拉霉素缓释和普通剂型相比较,患者耐受性良好。     

克拉霉素联合噻托溴铵治疗COPD的临床分析

选取我院收治的82例COPD患者作为研究对象,按照数字随机法将其分为治疗组和对照组,对照组单独应用克拉霉素治疗,治疗组患者给予克拉霉素联合噻托溴铵治疗。结果治疗组患者的FEV1/FVC指标均高于治疗前(P<0.05);治疗组患者的FEV1%预测值指标均高于治疗前(P<0.05)。治疗COPD患者采用克拉霉素联合噻托溴铵,能够明显增强药物治疗效果,值得临床广泛推广。     

阿司匹林对耐药幽门螺杆菌的体外影响

目的:探讨阿司匹林(aspirin)对幽门螺杆菌(helicobacter pylori,HP)克拉霉素耐药性的影响,并分析其可能的作用机制。方法:通过克拉霉素药物浓度倍增的方法诱导体外培养的HP26695获得H P26695克拉霉素耐药菌株。采用琼脂稀释法检测阿司匹林对耐药菌的最低抑菌浓度(minimum i n h i b i to r yc o n c e n t r at i o n, M I C),而后通过低浓度的阿司匹林持续培养耐药菌3 0d,检测其对克拉霉素耐药性的变化,并采用实时荧光定量PCR检测外排泵系统基因hef ABC的表达情况。结果:HP26695利用克拉霉素药物浓度倍增法成功诱导出HP26695克拉霉素耐药菌株,其MIC稳定为8μg/mL。阿司匹林可剂量依赖性地抑制HP26695克拉霉素耐药菌的体外生长。低剂量阿司匹林体外持续作用30 d可降低克拉霉素对HP26695克拉霉素耐药菌的MIC,增加耐药菌的敏感性;但并不影响耐药菌外排泵基因hefABC的表达。结论:阿司匹林对HP26695克拉霉素耐药菌具有一定的生长抑制作用,并可提高其对克拉霉素的敏感性;但该作用与耐药菌外排泵基因hefABC的表达无关。