聚糖纳米粒阿霉素对移植瘤小鼠的体内抑瘤作用探讨

目的:探讨聚糖纳米粒载导的阿霉素移植瘤小鼠的体内抑瘤作用。方法:利用研制的聚乳酸阿霉素纳米粒对移植瘤小鼠的抑瘤作用,并选取生理盐水、空白脂质体以及游离阿霉素作为对照组,观察各组体内抑瘤情况。结果:聚乳酸阿霉素纳米粒组动物平均瘤重较对应游离阿霉素组明显减轻,药物抑瘤率显著提高(P<0.05),两组治疗组较生理盐水对照组、空白脂质体对照组抑瘤率有显著提高(P<0.05),而空白脂质体组与生理盐水对照组抑瘤率无显著差异(P>0.05)。结论:聚糖纳米粒阿霉素对移植瘤小鼠的体内抑瘤作用较游离阿霉素效果显著,作用时间更持续长久。     

磁性阿霉素白蛋白纳米粒的研制

目的：制作具有稳定磁性、能够携带化疗药物的白蛋白纳米粒,并对白蛋白纳米粒的磁性,药物含量进行检测。方法：将市售用Fe3O4粉末,经化学方法处理,制成纳米大小的Fe3O4泥糊,将Fe3O4泥糊、纯盐酸阿霉素、人体血清白蛋白按一定比例混合,通过在棉仔油中超声乳化,加热变性、乙醚洗涤等工艺制作出磁性阿霉素白蛋白纳米粒,用乙醇提取法提取磁性纳米粒中的阿霉素,并用荧光光度计测定含量。将纳米粒溶于生理盐水中,在光学显微镜下观察在磁场作用下磁性纳米粒的运动情况,通过检测溶液中的游离药物,观察在不同的加热温度下,磁性纳米粒的稳定性,并用电子显微镜观察纳米粒的内部结构。结果：磁性白蛋白纳米粒阿霉素含量为57．5μg/g,阿霉素包含率为98．3％,磁性白蛋白纳米溶液在光学显微镜下观察,在磁场的作用下,纳米粒迅速向磁铁的方向移动并发生聚集,当磁铁与纳米粒的距离加大时,纳米粒运动速度减慢,并沿磁力线的方向形成串珠状聚集。电子显微镜下观察,Fe3O4颗粒均匀分布在白蛋白纳米粒中,结论：磁性白蛋白纳米粒具有磁性稳定、靶向性强、药物包含率高、释药速率可控制的特点,为靶向药物治疗提供了可靠的载药工具。     

半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对肝癌细胞株侵袭力的影响的实验研究

目的研究半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒对肝癌细胞株HepG2侵袭力的影响.方法应用半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒于HepG2细胞,并设A组:RPMI-1640对照组、B组:普通盐酸阿霉素组(ADM)、C组:磁性白蛋白阿霉素纳米粒联合磁场(MADM M)组、D组:半乳糖化白蛋白阿霉素纳米粒(Gal-ADM)组、E组:半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒联合磁场(Gal-MADM M)组.药物作用后以β-actin基因作为参照,半定量的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Cathepsin B-mRNA的表达差异,应用Transwell 小室检测体外侵袭力的变化,并用裸鼠肝癌皮下转移模型检测对体内侵袭力的影响.结果半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒作用HepG2肝癌细胞后Cathepsin B-mRNA表达降低较其他各组更为明显且有显著性,侵过小室滤膜细胞数目减少于其他各组且差异有显著性(P＜0.01),裸鼠肝癌生长明显受到抑制(P＜0.01).结论半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒抑制肝癌细胞株HepG2的侵袭力的作用较阿霉素、磁性白蛋白阿霉素纳米粒和半乳糖化白蛋白阿霉素纳米粒为强.     

甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒的制备及特性研究

目的:制备具有肝细胞靶向的甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒,并考察其理化特性。方法:采用离子凝胶法制备阿霉素壳聚糖纳米粒,再以高碘酸盐氧化法制备甘草酸表面修饰阿霉素壳聚糖纳米粒。激光透射电子显微镜观察纳米粒的形态,马尔文激光粒度仪测定其粒径。RP-HPLC法间接测定纳米粒中甘草酸结合率和阿霉素包封率,并初步研究体外甘草酸的结合稳定性和阿霉素释药特性。结果:电镜显示纳米粒呈类球形,平均粒径为179.5 nm,甘草酸结合率达到80%以上,在释放介质中,12 h的甘草酸结合率仍保持(65.2±3.4)%;纳米粒中阿霉素包封率达90%以上,体外释药缓慢,无明显的\     

温度敏感性脂质体磁性阿霉素纳米粒的制备

目的 制备能够携带化疗药物阿霉素的温度敏感性脂质体磁性纳米粒,并对纳米粒的粒径大小、药物包裹率、稳定性等物理性质进行检测.方法 以化学共沉淀法制备四氧化三铁纳米粒,以逆相蒸发法制备空白温度敏感性磁性脂质体纳米粒,梯度反向装载法包封阿霉素,激光粒度分析仪检测粒径大小分布范围,透射电镜观察粒子形态;酸性乙醇荧光分光光度法测量阿霉素包裹率和泄漏率.结果 制备的温度敏感性脂质体磁性纳米粒平均粒径为(76±18)nm,粒径较均匀,平均包裹率为(42.6±0.7)%,室温下贮存稳定.结论 本实验制备的温度敏感性脂质体磁性纳米粒基本符合要求,可为进一步研究提供了基础.     

载阿霉素纳米粒温敏凝胶的制备及评价

目的 对制备出可用于肝动脉化疗栓塞(TACE)的载阿霉素纳米粒温敏凝胶(DOX-NPs-Gel)复合体系的相关特性进行评价。方法 以乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体,采用复乳法制备载阿霉素纳米粒(DOX-NPs),考察其外观、粒径、PDI和Zeta电位,经冷冻干燥得DOX-NPs冻干粉,将其分散于壳聚糖(CS)/β-甘油磷酸(β-GP)温敏凝胶(Gel),制得DOX-NPs-Gel;采用倒瓶法考察Gel、DOX-Gel、空白-NPs-Gel及DOX-NPs-Gel在37℃下的胶凝化时间及胶凝温度;扫描电镜观察微观结构;通过兔耳中动脉栓塞实验考察了空白-NPs-Gel的栓塞性能;通过在皮下注射空白-NPs-Gel于不同时间脱颈死小鼠,剥离出空白-NPs-Gel,测量其大小及质量,评价其吸收特性;采用动态膜透析法考察DOX、DOX-NPs、DOX-Gel的体外释放;采用无膜溶出法考察DOX-NPs-Gel的体外释放。结果 制备出的DOX-NPs形态规则,粒径为(186.68±5.99)nm,多分散系数(PDI)为(0.17±0.01),Zeta电位为(-23.33±1.54)mV,包...     

白蛋白阿霉素磁纳米粒在大鼠体内的生物分布

目的：观察白蛋白阿霉素磁纳米粒肝动脉给药与肝动脉给予高剂量的游离药物在体内生物分布上的差异。通过直接测量组织中阿霉素的浓度,进一步证实白蛋白阿霉素磁纳米粒的靶向性。方法：大鼠正中开腹,胃十二指肠动脉插管。实验组：肝动脉注射白蛋白阿霉素磁纳米粒（相当0．5mg/kg阿霉素）左肝外叶应用磁场30min,磁场去除后,动物处死。对照组：肝动脉注射10倍于实验组剂量的阿霉素（5mg/kg),30min后处死。动物处死后,取靶区肝组织、非靶区肝组织、心、肾、脾和肺捣碎、匀浆,用乙醇提取法提取阿霉素,用荧光光度计测量。结果：实验组左肝外叶应用磁场30min,磁区肝组织阿霉素的浓度较非磁区肝组织的阿霉素浓度明显升高,磁共肝组织阿霉素浓度为非磁区肝组织的2．6倍,对照组靶区肝组织和非靶区肝组织的阿霉素浓度无统计学差异,对照组和心和肾组织的阿霉素浓度平均为实验组的9倍以上,脾为4．6倍,肺两组之间无统计学差异。而对照组靶区肝组织的阿霉素只有磁区肝组织阿霉素浓度的1／4。实验组心、肾、肺和脾组织与靶区肝组织阿霉素浓度的比值大大低于对照组。结论：通过纳米粒加磁场的方法从肝动脉给予阿霉素在靶区产生的药物浓度比肝动脉给予10倍剂量的游离阿霉素在靶区产生的药物浓度高3倍。而在心、肾和脾的阿霉素浓度比对照组大为降低。另外,实验组心、肾、肺和脾组织和与靶区肝组织阿霉素的比值比对照组明显降低,其意义若在靶区产生同样的阿霉素的浓度,实验组肝外脏器的阿霉素浓度将大大降低对照组。     

经血脑屏障载药纳米粒的研究

目的克服血脑屏障的有效方法,是利用纳米粒作为载体将药物转运到中枢神经,使载药纳米粒通过血脑屏障。方法制作经聚山梨脂(TweenR80)修饰的纳米粒,使其通过血脑屏障。检测小鼠的存活率,跟踪脑内毛细血管内皮细胞的吸收量。结果小鼠的存活率明显的增加(存活率达到6个月的小鼠增加到40%)。结论经聚山梨脂80修饰的阿霉素纳米粒药物对通过血脑屏障有很重大的临床意义。     

半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的急性毒理实验研究

目的研究半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒经外周静脉用药的药物毒性。方法将受试动物分为8个剂量组,观察静脉给药后的急性毒性试验,采用Bliss法计算LD50,统计分析其对大鼠的外周血细胞和生化指标的影响。给予腹腔注射3次后,再皮下注射,观察其有无过敏现象发生。结果半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒的动物半数致死量为515.5mg/kg,同时肝、肾功能的损害和心肌酶学的改变也明显减轻。20只动物进行过敏实验,观察到一只动物有过敏现象。结论半乳糖化白蛋白磁性阿霉素纳米粒是一种很好的新型改进性药物,它经过修饰后,明显的减轻了药物对心脏,肾脏和心脏的毒性损害作用。有望批量生产,在临床上推广试用。     

表阿霉素脂质体纳米粒治疗大鼠移植性肝癌的实验研究

目的 通过对移植肝癌模型大鼠肝动脉注射表阿霉素脂质体纳米粒,观察表阿霉素脂质体纳米粒对移植性肝癌的治疗效果.方法 建立大鼠移植性肝癌动物模型,并将肿瘤模型大鼠随机分为3组,每组20只.大鼠正中开腹,暴露肝脏,游标卡尺测定肿瘤的长短径;肝动脉插管固定;依次分组给药.各组动物肝动脉注药后生存超过一周者,记录生存天数.一周后再次开腹,测定并记录肿瘤的生长率、肿瘤的坏死范围及生命延长率.结果 治疗前各组间肿瘤体积无显著性差异(P＞0.05),治疗后肝动脉注射NS组,平均生存期为12.7 d;肝动脉注射游离表阿霉素(EPI)组,平均生存期18.7 d;肝动脉注射EPI-PBCA-NP治疗组,平均生存期为32.5d.治疗后各组间肿瘤体积存在差异性(P＜0.05),EPI组、EPI-PBCA-NP治疗组动物平均生存天数较NS组均显著延长(均P ＜0.01).结论 肝动脉注射表阿霉素脂质体纳米粒组肿瘤生长率明显降低、生命延长率明显提高(P＜0.01).     

载阿霉素和顺铂的透明质酸纳米粒子对小鼠移植性乳腺癌的抑制作用

目的：探讨肿瘤CD44受体靶向的载阿霉素和顺铂的透明质酸（HA）纳米粒子HA_CDDP-DOX在乳腺癌治疗中的应用,阐明HA_CDDP-DOX对小鼠移植性乳腺癌的抑制作用。方法：通过绿色合成途径合成乳腺癌靶向的载药HA纳米粒子HA_CDDP-DOX,并测定其粒径、不同pH值条件下的稳定性及搭载阿霉素的释放情况。于小鼠乳腺脂肪垫接种4T1细胞,构建乳腺癌肿瘤模型。根据肿瘤体积和体质量将小鼠随机分为对照组、DOX/CDDP组和HA_CDDP-DOX组,于肿瘤生长至80 mm³后的第1、5和9天通过尾静脉注射PBS、游离混合药物DOX/CDDP和HA_CDDP-DOX进行治疗。通过检测肿瘤体积、小鼠体质量变化和免疫组织病理学等指标评价HA_CDDP-DOX对小鼠乳腺癌的抑制效果及生物安全性。利用生物荧光成像技术观察HA_CDDP-DOX在小鼠体内的药物组织分布情况。结果：HA_CDDP-DOX纳米粒子的平均粒径为（80.0±17.4） nm,pH值为7.4条件下稳定;在酸性条件下粒径增大,可有效释放DOX。抑瘤实验,与DOX/CDDP组比较,HA_CDDP-DOX组小鼠体质量增加（P<0.05）,肿瘤体积减小（P<0.05）。HE染色,对照组小鼠肝脏存在肿瘤转移灶,且肺泡间隔增宽;DOX/CDDP组和HA_CDDP-DOX组肿瘤组织均有坏死,HA_CDDP-DOX组肿瘤组织的坏死程度明显重于DOX/CDDP组。与DOX/CDDP组比较,HA_CDDP-DOX组Caspase-3活性明显升高（P<0.01）,而Ki-67活性明显下降（P<0.01）。生物荧光成像,HA_CDDP-DOX能够通过靶向作用有效聚集于肿瘤部位释放药物。结论：HA_CDDP-DOX纳米粒子可以有效靶向于乳腺癌细胞,降低化疗药物系统毒性,同时增强乳腺癌治疗效果。     

血管抑素基因转染联合化疗药物对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的治疗作用

目的研究血管抑素(angiostatin)基因转染联合化疗药物顺铂对人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤的协同治疗作用及其相关机制。方法使用人卵巢癌细胞株SKOV3建立人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤模型。将荷瘤裸鼠随机分为4组,分别注射空质粒PcDNA3、angiostatin/PcDNA3、化疗药物顺铂、angiostatin/PcDNA3 顺铂,质粒用脂质体DOTAP介导转染细胞。观察各组动物的腹水量及腹腔荷瘤量,检测各组肿瘤组织中angiostatin的表达和微血管密度,利用TUNEL染色法行原位细胞凋亡分析。结果联合治疗组裸鼠的腹水量(P<0.01)及腹腔瘤负荷(P<0.005)均显著低于其他实验组;肿瘤组织中angiostatin蛋白局部高表达,微血管密度显著低于其他实验组(P<0.01),细胞凋亡指数显著高于其他实验组(P<0.05)。结论Angiostatin基因联合化疗治疗人卵巢癌裸鼠腹腔移植瘤可以产生协同抑制作用,多途径联合用药是提高疗效的有效方法之一。     

腹腔投药器在卵巢肿瘤化疗中的应用

目的：研究腹腔投药器在卵巢癌化疗中的应用及化疗效果。方法：对３０例卵巢患者进行化疗,上皮性肿瘤采用两种化疗方案：ＰＡＣ（吡柔比星＋环磷酰胺＋卡铂／顺铂）或西艾克＋环磷酰胺＋卡铂／顺铂。２２例患者安置腹腔投药器。结果：３０例患者至今共完成１２３个疗程的化疗。２２例安置腹腔投药器的患者中２０例保持药器通畅,穿刺成功率１００％,临床完全缓解率（ＣＲ）为７０％,总有效率为７８％。结论：经腹腔投药器腹腔化疗     

高渗Hank’s液对脑胶质瘤的破坏作用

目的 :通过体外与体内动物试验证明高渗环境对脑胶质瘤的破坏作用。方法 :将生长于小鼠腋下的G42 2胶质瘤制成细胞悬液 ,分别经高渗与等渗Hank’s液处理后接种于健康昆明小鼠的颅内及腋下 ,分别观察肿瘤生长情况。结果 :经高渗处理后的胶质瘤接种后无一例生长。经等渗处理后的胶质瘤细胞接种后 ,无论是颅内还是腋下均有不同程度的生长 ,成功率达 10 0 %。结论 :高渗平衡液对脑胶质瘤细胞具有明显的破坏作用。     

制备单抗偶联载阿霉素白蛋白免疫毫微球的初步研究

目的:制备阿霉素牛血清白蛋白纳米粒(DOX-BSA-NP),观察其形态、粒径及药物缓释规律;制备并初步鉴定甲胎蛋白(AFP)单抗导向阿霉素白蛋白免疫毫微球(antiAFP- DOX-BSA-NP).方法:以阿霉素、牛血清白蛋白为材料,采用去溶剂化法制备DOX-BSA-NP;使用电镜技术观察其形态及颗粒大小;采用胰蛋白酶消化方法测定其载药量和包封率,测定体外释药性质.采用SPDP交联法制备单抗导向的载阿霉素免疫毫微球,使用电镜技术观察其形态及颗粒大小,凝胶电泳测定共价连接.结果:(1) DOX-BSA-NP呈圆球状,外观呈红色;粒径大小均匀,载药量约为1.8%,包封率为90.3%,体外释药持续缓慢,第7天时,累积释药分数达到95%.(2) 采用SPDP交联方法制备的antiAFP-DOX-BSA-NP呈球形,粒径330~400 nm.结论:采用去溶剂化法可制备出具有缓释效果的阿霉素白蛋白微球;SPDP方法可以将单克隆抗体与载药微球连接制备出具有免疫功能的毫微球.     

纳米活性碳作为药物载体在淋巴靶向治疗中的作用

目的探讨载阿霉素的纳米活性碳在治疗恶性肿瘤淋巴道转移中的应用效果。方法雌性Wistar大鼠,右后肢脚掌皮下接种Walker256瘤细胞悬液后形成淋巴结转移模型,分别在肿瘤部位注射载有阿霉素的活性碳混悬液、阿霉素水溶液和生理盐水。注射后21d处死大鼠取腘窝淋巴结,测量各组淋巴结重量、淋巴结中肿瘤细胞坏死率和凋亡率。结果载阿霉素活性碳组大鼠的淋巴结重量较其他两组为轻,淋巴结中肿瘤细胞坏死率、凋亡率较其他两组明显增高。注射载阿霉素活性碳组大鼠皮肤无溃烂,而单纯注射阿霉素水溶液组大鼠皮肤均有溃烂。结论活性碳作为化疗药物的载体,在不影响化疗药物抗肿瘤活性的同时,可将药物导入淋巴系统内并有助于在淋巴结中停留,能较好地发挥药物杀灭淋巴系统中的肿瘤细胞的作用,并且减轻了药物的毒性。     

Growth of G422 glioma implanted in the mouse brain was affected by the immune ability of the host

Background  It is generally accepted that gliomas are the most common primary brain tumors with poor prognosis. We aimed to explore the relationship of the immunity of the central nervous system and the genesis and development of glioma.

Methods  G422 glioma was implanted in the brain of BALB/c mice (immuno-competent mice), nude mice (T cell related immuno-deficient) and complement C3 knock-out mice (complement C3 related immunodeficient). The survival time of the host, growth and histopathology of the tumor, and concentrations of tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interferon-γ (INF-γ) in tumor tissues were assessed.

Results  Tumor spheres were formed in all mice after injection, and glial fibrillary acidic protein (GFAP) positive staining of the cells declared their glioma origin. The longest median survival time of (44.3±6.0) days was found in BALB/c mice, followed by (24.8±5.2) days in nude mice and the shortest (18.6±5.8) days in complement C3 knock-out mice. Accordingly, the growth of the tumor was fastest in complement C3 knock-out mice, followed by the nude mice and slowest in the BALB/c mice. Although the proportions of infiltrating CD68⁺ lymphocytes in tumor tissues showed no significant difference (P >0.05), TNF-α level in the nude and C3 knock-out mice, (28.11±4.86) μmol/L and (22.87±6.36) μmol/L respectively, were significantly lower (P <0.01) than that in the BALB/c mice, which was (230.21±39.17) μmol/L. The INF-γ level was highest in the BALB/c mice ((180.76±29.19) μmol/L), followed by the nude mice ((113.46±23.76) μmol/L) and then the C3 knock-out mice ((16.84±4.45) μmol/L). 

Conclusions  The G422 glioma implanted in the brains of mice with different immune ability would be a useful model for studying the relationship of the immune system and tumor in the central nervous system. Furthermore, the T cells and complement C3 compartments of the immune response may affect the growth of implanted tumors and inflammatory factors such as TNF-α and INF-γ.

     

多柔比星脂质体与表柔比星在HER-2阴性乳腺癌术后辅助化疗中的比较

目的 比较聚乙二醇多柔比星脂质体与表柔比星在HER-2阴性乳腺癌术后辅助化疗中的有效性和安全性.方法 回顾性收集2015年5月至2020年2月在复旦大学附属华山医院行乳腺癌手术并进行辅助化疗的368例HER-2阴性乳腺癌患者的临床资料.其中175例接受多柔比星脂质体化疗的患者纳入试验组,193例接受表柔比星化疗的患者纳...     

阿霉素聚合物胶束的制备及其体外特性评价

优化阿霉素(DOX)全反式维甲酸(ATRA)修饰低分子量肝素纳米粒的载药工艺,并系统评价载药胶束的体外特性。用全反式维甲酸修饰低分子量肝素(LMWH)合成LMWH-ATRA聚合物(LHR),采用透析法制备DOX载药胶束(DOX/LHR),并测定其粒径、Zeta电位、载药量和包封率;考察DOX/LHR胶束在不同pH条件下的体外释放特性,以及MCF-7细胞对其摄取情况;采用流式细胞凋亡法评价DOX/LHR胶束诱导MCF-7细胞凋亡的作用。结果表明,LHR聚合物胶束能高效包载DOX,载药量最高可达18.7%,包封率为78.8%,粒径为112.1~153.0 nm,荷负电;体外释放动力学研究显示,在pH 4.5,DOX/LHR胶束具有更快的释药速度;体外细胞实验表明,DOX/LHR胶束易被MCF-7细胞摄取,从而诱导MCF-7细胞凋亡。因此,LHR聚合物是DOX的优良载体,制备的DOX/LHR胶束具有良好的理化性质及体外抗肿瘤特性,其成功制备将有助于提高DOX的抗肿瘤作用。     

胃肠道肿瘤腹腔化疗中药泵相关并发症分析与预防

目的 探讨胃肠道肿瘤腹腔化疗中药泵相关并发症的表现、原因、处理方法和预防策略.方法 对2002年1月-2006年6月经治的325例胃肠道肿瘤行术中植入化疗药泵,随访并总结与药泵相关的并发症,分析其表现、原因、处理和预防措施.结果 共出现与化疗泵有关的并发症89例,发生率27.4%,其中泵周积液9例,泵周感染4例,药泵侧翻6例,泵周渗漏28例,药泵或导管堵塞11例,滴注不畅27例,其他少见并发症4例.结论 植入式腹腔化疗泵相关并发症表现多样,应就不同的并发症采取相应治疗,规范的操作是预防并发症的重要措施.