肌醇磷脂代谢与血小板功能

肌醇磷脂是血小板膜磷脂成分之一,由甘油磷脂和肌醇结合而成,包括磷脂酰肌醇(图1),4、酰肌醇。在肌醇磷酸激酶的作用下,磷脂酰肌醇被分步磷酸化为PIP_2。此过程称为肌醇磷脂转换(inositol phospholipid turnover,图2)。     

细胞内钙信号

许多促效剂(Agonists)如激素、神经递质等,是通过细胞内钙信号对细胞过程(包括代谢、分泌、收缩、神经活动、细胞生长和增殖等)起调节作用。钙信号来自细胞内游离钙的动员或细胞外钙的流入,表现为钙波动(Calcium oscillation)。其产生饥制与肌醇磷脂代谢相关。本文扼要叙述钙信号的产生、时空组织、钙波动机理和信号意义。     

G-CSF和IGF-1抑制病理性心室重构及改善心功能的作用机制

粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)对心血管系统有保护作用。G-CSF通过趋化因子受体4(CXCR4)基质细胞衍生因子1介导的干细胞动员机制使骨髓干细胞"归巢"至受损心肌组织,分化成有功能的心肌细胞,并与心肌细胞G-CSF受体结合激活酪氨酸蛋白激酶-信号转导及转录激活蛋白3信号通路实现心血管保护作用。IGF-1除有与G-CSF相似的干细胞动员作用外,还可通过磷脂酰肌醇3-激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(PI3K-Akt)信号通路抑制心肌梗死后病理性心室重构,改善心功能。     

磷脂酶C结构及活化机制的研究进展

磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)是磷脂酰肌醇信号通路的关键酶,在机体内分布极为广泛。许多细胞外信息分子,如激素、神经递质、免疫球蛋白、细胞因子、生长因子等都可以激活磷脂酰肌醇特异性PLC。活化的PLC能水解磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸(PIP2),从而产生两种重要的第二信使:二酯酰     

异常妊娠

991121妊高征患者血小板磷脂酞肌醇和钙内流的变化/刘香环二//中华妇产科杂志一1999,34(3)一179一180 为观察妊高征患者血小板在基础状态下及凝血酶刺激下,磷脂酸肌醇(PI)降解的程度,三磷酸肌醇(IP3)含量与钙内流变化,选择32例妊高征孕妇及正常孕妇44例(正常孕妇组),抽取静脉血测定血小板氖一I一磷酸肌醇累积量(IPs),以评价Pl的降解程度,并测定I巧含量,用V滋erie等方法测定血小板钙离子内流。结果:妊高征组血小板基础状态和凝血酶刺激诱导下,IPS、IP3和4乞扩干内流均显著高于正常孕妇组毒妊高征组朽C护 内流与IPs和IP3呈显著正相关;…     

肌醇磷脂代谢异常导致糖尿病视网膜病变时毛细血管周细胞消失

在高浓度葡萄糖条件下(模拟糖尿病条件)培养视网膜毛细血管周细胞,由于调控细胞增殖的第二信使——肌醇磷脂代谢产物减少,使周细胞增殖活力降低。在高葡萄糖条件下,周细胞内肌醇水平下降、山梨醇通路被激活;外加肌醇或阻断山梨醇通路则可使异常的肌醇磷脂代谢得到不同程度的纠正,周细胞增殖活力亦随之回升。提示外加肌醇和阻断山梨醇通路是防止糖尿病周细胞衰亡的有效体外治疗。     

大白鼠输精管平滑肌中C-激酶的活化与去甲肾上腺素作用机制的研究Ⅱ

在大白鼠输精管中,去甲肾上腺素不仅促使Ca~(++)、磷脂依存性蛋白激酶(C-K)活化,还可促进Ca~(++)的动员。去甲肾上腺素在促进肌醇磷脂代谢的同时,还能促使40K蛋白质磷酸化。40K蛋白质是C-K的底物。磷脂酶C、TPA及钙离子载体A_(23187)也都能促进40K蛋白质的磷酸化反应,说明去甲肾上腺素是借助于肌醇磷脂代谢及蛋白质的磷酸化来发挥它的生理作用。     

磷脂酰肌醇激酶的非同位素酶解测定法

用磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C水解磷脂酰肌醇激酶催化产生的磷脂酰肌醇-4-磷酸,产物1,4-二磷酸肌醇再经碱性磷酸酶水解后,测定磷的含量,建立了磷脂酰肌醇激酶的非同位素酶解测定法。该法回收率可达91％,CV=6.5％。     

PI3K/PKB信号通路参与结缔组织生长因子促人增生性瘢痕纤维化

目的探讨结缔组织生长因子对人增生性瘢痕成纤维细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B的激活作用。方法应用免疫印迹技术检测10ng/mL结缔组织生长因子作用于人增生性瘢痕成纤维细胞不同时间(0、5、15、30、60、120min)后蛋白激酶B的活化情况(以磷酸化蛋白激酶B和总蛋白激酶B比值表示),以及用同法检测磷脂酰肌醇3激酶抑制剂LY294002对结缔组织生长因子活化蛋白激酶B的作用。结果10ng/mL结缔组织生长因子作用于人增生性瘢痕成纤维细胞15min时,蛋白激酶B的活化水平(0.614±0.015)已明显高于对照组(0.308±0.021,P<0.05),30min时最明显(0.724±0.017,P<0.01),而且持续至少达120min,与对照组相比较,差异有统计学意义。10μmol/L LY294002作用人增生性瘢痕成纤维细胞后蛋白激酶B的活化水平下降(0.135±0.025),同对照组(0.422±0.015)相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论结缔组织生长因子可激活人增生性瘢痕成纤维细胞磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路,LY294002可抑制结缔组织生长因子对此通路的激活。     

山莨菪碱对凝血酶诱导的血小板钙内流的影响

血小板在生理性止血及某些病理过程中起着重要作用。近年研究表明,血小板激活时,发生钙离子动员,即胞内钙离子释放和胞外钙离子内流,血小板内胞浆游离钙浓度升高,血小板发生变形,释放和聚集反应,提示钙离子作为第二信使调节血小板功能。本文以正常人血小板为研究对象,采用钙离子荧光指示剂Quin2-AM,测定血小板胞浆游离钙离子浓度,观察正常人血小板静息胞浆游离钙离子浓度,凝血酶对血小板钙转运的影响以及山莨菪碱对凝血酶诱导的钙内流的作用。结果表明,正常人血小板静息胞浆钙离子浓度为115 31nmol/L(n=16)凝血酶可在30s内迅速引起胞浆钙离子浓度升高,1～3min内达高峰。如以     

我国产圆斑蝰蛇的蝰蛇毒磷脂时间测定正常值及其临床意义

蝰蛇毒时间是以蝰蛇毒(Russell's Viper Venom,国外商品名Stypven)代替兔脑浸液按一期法测定凝血酶原时间称之。蝰蛇毒能激活X因子(X_a)具有加速促凝的作用,X因子是同时参与内源性及外源性凝血过程的因子,而X因子的激活过程可被内源性及外源性凝血因子所激活,也可被蝰蛇毒所激活,已激活的X因子与V_a因子,在磷脂及C_a~(++)同时存在条件下,可激活凝血酶原,从而使纤维蛋白原转变为纤维蛋白,致使血浆凝固。(附图) 我国产圆斑蝰蛇(Vipera russellii Siamensis Smith)的蛇毒,也具有同样的作用。因此,我们采用少血小板血浆,加入一定稀释度的国产圆斑蝰蛇毒使激活X因子,在充分提供磷脂的条件下,与血浆中存在的V_a因子及C_a~(++)共同形成凝血活酶复合体,通过激活凝血酶原形成凝血酶,使少血小板血浆凝固,我们将此条件下的蝰蛇毒时间称为蝰蛇毒磷脂时间,以便与不加给磷脂条件下蝰蛇毒使富血小板血浆凝固的时间相区别。     

正常白细胞和白血病细胞中磷脂的分析及肌醇磷脂代谢

通过对正常白细胞及白血病细胞中磷脂的分析表明,白血病细胞中的磷脂高于正常白细胞。其中,以肌醇磷脂的增高尤为明显,而胆固醇与磷脂的比值却表现下降的趋势。本研究还表明,不论正常的白细胞或白血病细胞中均存在肌醇磷脂代谢。     

K物质对大鼠心肌细胞收缩的影响及其信号传导通路的探讨

目的　研究K物质引起大鼠心肌细胞收缩的信号传导通路。方法　应用钙离子荧光指示剂Fluo 3AM负载原代培养的大鼠心肌细胞 ,通过流式细胞仪检测心肌细胞内游离钙离子浓度 ( [Ca2 + ]i)变化 ;分别应用磷脂酶C抑制剂 新霉素 ,三磷酸肌醇受体拮抗剂 肝素阻断肌醇磷脂 钙信号系统 ,观察二者对K物质诱导的 [Ca2 + ]i变化的影响。结果　SK( 1.78× 10 -5mol/L)能升高 [Ca2 + ]i,新霉素、肝素均可阻断SK诱导的 [Ca2 + ]i升高的效应。结论　SK可升高心肌细胞[Ca2 + ]i,其作用与肌醇磷脂 钙信号系统有关     

小鼠成纤维细胞中PLC水解肌醇磷脂的数学模型

目的:构建小鼠成纤维细胞中磷脂酶C水解肌醇磷脂的数学模型. 方法:以细胞实际信号传递过程为基础、以准稳态近似为原则,利用微分方程建立数学模型模拟肌醇磷脂的代谢过程. 结果:建立了一磷酸肌醇和表皮生长因子受体间浓度关系的微分方程,并以此来描述肌醇磷脂的水解速度. 结论:本数学模型描述了肌醇磷脂代谢的生物学特征以及主要产物间的浓度依赖关系,讨论了各个参数对肌醇磷脂代谢的数学模型的影响,分析了磷酸肌醇3激酶和Ras/细胞外信号调节激酶对肌醇磷脂的消耗.     

刺激型抗人血小板McAb对人血小板细胞骨架蛋白的影响

本实验观察到HIP_2、APT_4和HI1173种刺激型McAb均能使PRP中血小板细胞骨架蛋白的主要成分肌动蛋白(actin)含量增加,而钙调蛋白抑制剂(EBB)则能显著抑制HIP_2和APT_4引起的肌动蛋白增加,抑制率分别为76.3％和48.95％,但不抑制HI117引起的肌动蛋白增加。此外,EBB能完全抑制APT_4引起的血小板聚集,部分抑制HIP_2引起的血小板聚集,不抑制HI117引起的血小板聚集。将3种刺激型McAb加入经0.3mmol/L EDTA溶液洗涤过3次的血小板悬液中,无透光度改变,也没有肌动蛋白动员,提示此3种McAb引起的血小板聚集及肌动蛋白动员除与Ca~(2+)有关外,还与血浆中某种(些)因子有关,Ca~(2+)—钙调蛋白系统在HIP_2,APT_4引起的血小板聚集及肌动蛋白动员中起着重要的作用。     

各种类型白血病细胞磷脂的分析

各种类型白血病细胞磷脂的分析赵金星（沈阳师范学院生物系）１９８７年肖静等人报导［１］，白血病细胞中的磷脂高于正常白细胞。其中，以肌醇磷脂的增高尤为明显。并且证明，在正常白细胞或白血病细胞中均存在肌醇磷脂代谢。目前普遍认为，肌醇磷脂代谢所产生的甘油二酯...     

大豆磷脂的保健功能

大豆磷脂是指以大豆为原料所制成的一种混合磷脂,它是由卵磷脂(学名:磷脂酰胆碱,简称PC,高等级为PPC)、脑磷脂(学名:磷脂酰乙醇胺,简称PE)、肌醇磷脂(学名:磷脂酰肌醇,简称PI)和丝胺酸磷脂(又称磷脂酰丝胺酸,简称PS)等组成,还含有胆碱、肌醇、维生素E和生物素等成分,其中最典型的为前三种,是组成人体细胞(细胞膜、核膜、质体膜)的基本成分,为人体生理功能所必需的物质,具有很高营养价值和保健功能,与蛋白质、维生素并列称为"第三营养素".大豆磷脂究竟有哪些保健功能呢? 1、改善脑功能,增强记忆力 磷脂代谢与脑的机能状态有关,随着年龄增长,人的记忆力会减退,这与乙酰胆碱含量不足有一定关系.     

输精管平滑肌中肌醇磷脂代谢与去甲肾上腺素作用间关系的研究

在大白鼠输精管中，去甲肾上腺素可促进肌醇磷脂代谢，而双丁酰ｃＡＭＰ和８－溴ｃＧＭＰ则对去甲肾上腺素所促进的肌醇磷脂代谢，有明显的抑制作用。这提示，很可能在输精管平滑肌中，由去甲肾上腺素所促进的肌张力，能被ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ所抑制。本文还观察到Ａ２３１８７亦能促进肌醇磷脂代谢，而酚苄明（一种肾上腺素能α受体阻断荆）和ＥＧＴＡ则对肌醇磷脂代谢起抑制作用。     

激素对膜的作用

谈到激素作用时,受体对腺苷酸环化酶的控制无疑是生物化学家首先考虑到的问题,所以,1983年9月在荷兰召开的一次专门会议上,基本上没有再涉及这个问题,也许正好说明现在真正的进展已转向其他方面.这次会议的注意点集中在一些能动员Ca~(2+)的刺激物如α_1—肾上腺能配体和加压素等对细胞的控制,特别是这些刺激物对细胞内肌醇磷脂的激活作用以及对细胞器有关的代谢途径,特别是对线粒体内的一些过程的影响.     

Annexin B1与磷脂酰丝氨酸的结合活性

目的:研究annexin B1与磷脂酰丝氨酸的结合活性.方法:在大肠杆菌中表达annexin B1蛋白,经离子交换层析得纯品;选用U937细胞,以过氧化氢诱导凋亡,制备小鼠洗涤血小板,凝血酶激活;以异硫氰酸荧光黄(FITC)标记的annexin B1检测凋亡细胞和活化血小板.结果:FITC标记的annexin B1既能与凋亡细胞特异性结合,又能与活化血小板特异性结合,结合活性接近annexin Ⅴ.结论:研究表明annexin B1可结合于凋亡细胞和活化血小板膜上的磷脂酰丝氨酸(PS),而非其他膜成分,也进一步阐明annexin B1的抗凝血功能是通过与血小板膜磷脂结合干扰凝血过程.