基于Au_(nano)-PB、AEAPS-Dextran-Fe_3O_4和Au_(nano)修饰的前列腺特异性抗原电流型免疫传感器的研究

目的采用普鲁士兰-纳米金(Au_(nano)-PB)、氨基硅烷化-葡聚糖-四氧化三铁纳米复合物(AEAPS-Dextran-Fe_3O_4)及纳米金(Aunano)共修饰于氧化铟锡(ITO)电极表面固载抗体制得高灵敏前列腺特异性抗原电流型免疫传感器。方法先将ITO电极表面滴加适量Au_(nano)-PB,随后将AEAPS-Dextran-Fe_3O_4滴涂在ITO玻璃电极的Au_(nano)-PB膜上,然后通过静电吸附Au-nano并固定前列腺特异性抗体(anti-PSA),制得电流型免疫传感器。结果在最佳实验条件下,该传感器响应的峰电流值与前列腺特异性抗原(PSA)浓度在该传感器(0.8～20)ng/mL及(20～170)ng/mL的范围内保持良好的线性关系,检测下限为0.6ng/mL。结论成功建立了前列腺特异性抗原免疫传感器,该方法制备简单,操作便捷,检测下限低。     

基于AgI模拟酶纳米材料构建阻抗型免疫传感器用于检测癌胚抗原

目的 设计一种基于AgI模拟酶纳米材料的阻抗型免疫传感器,对血清样品中的癌胚抗原(CEA)进行高灵敏检测.方法 合成一种壳聚糖修饰的碘化银(CS-AgI)纳米材料,利用透射电镜(TEM)和傅里叶红外光谱(FTIR)法对合成的CS-AgI进行表征,以CS-AgI为信号标记物修饰CEA抗体,采用夹心式免疫分析法在金电极表面制备一种高效、灵敏的电化学免疫传感器,采用电化学工作站定量分析检测所构建免疫传感器的电化学性能.结果 成功合成CS-AgI纳米颗粒,颗粒呈球形,粒径约为100 nm.以CS-AgI纳米颗粒为信号标记物构建的免疫传感器在pH7.0的磷酸盐缓冲液中检测CEA时表现出良好的电化学性能,其交流阻抗响应值与样品中的CEA浓度的对数呈线性增加趋势,并在CEA浓度为0.1～80 ng/mL范围内展现出良好的线性关系(r=0.996),检测限达到0.05 ng/mL.结论 基于AgI模拟酶纳米材料构建的阻抗型免疫传感器可以高灵敏检测CEA,同时具有较好的精确性、重现性和选择性,为癌症的早期诊断和早期治疗提供了实验依据.     

基于纳米金/多壁碳纳米管-普鲁士蓝-壳聚糖纳米复合物/蛋白A定向固定甲胎蛋白免疫传感器的研究

目的 以金纳米粒子修饰的氧化铟锡(ITO)玻璃为基底电极,将多壁碳纳米管-普鲁士蓝-壳聚糖(MWNTs-PB-CHIT)纳米复合物及蛋白A(PA)共修饰于其表面固载抗体制得高灵敏甲胎蛋白(AFP)电流型免疫传感器.方法 先在ITO电极表面电沉积一层纳米金,随后将MWNTs-PB-CHIT纳米复合物滴涂于ITO玻璃电极的纳米金膜上,最后利用壳聚糖的吸附性及在酸性(pH=6.5)环境的负电性,静电吸附蛋白A并定向固定甲胎蛋白抗体(anti-AFP),制得电流型免疫传感器.结果 在最佳实验条件下,该传感器响应的峰电流值与AFP浓度在1.0～250.0 ng/ml的范围内保持良好的线性关系,检测下限为0.5 ng/ml, 反应达到稳定电流所用时间为6 min,并且电流值相对标准差小于3%.结论 成功构建一次性使用、价格低廉的新型传感器电极材料.     

基于多壁碳纳米管-壳聚糖-硫堇纳米复合物修饰甲胎蛋白免疫传感器的研究

目的采用多壁碳纳米管-壳聚糖-硫堇(MWCNT-CS-THi)纳米复合物及半胱氨酸盐酸盐共修饰于玻碳电极表面固载抗体制得高灵敏甲胎蛋白免疫传感器。方法先在玻碳电极表面滴涂一层MWCNT-CS-THi纳米复合物,随后利用壳聚糖和硫堇分子中大量的正电荷氨基固定纳米金(GNPs)并吸附半胱氨酸盐酸盐(CH),最后用戊二醛(GA)交联甲胎蛋白特异性抗体制得电流型免疫传感器。结果在最佳实验条件下,该传感器响应的峰电流值与甲胎蛋白抗原(AFP)浓度在0.1～200.0ng/ml的范围内保持良好的线性关系,检测下限为0.07ng/ml。结论成功建立了甲胎蛋白免疫传感器,该方法制备简单,线性范围宽,检测下线低。     

快速灵敏检测HCV核心抗原的免疫新方法及其性能分析

目的建立一种用于快速、灵敏检测血清丙型肝炎病毒(HCV)核心抗原(HCcAg)含量的免疫新方法,并对其性能进行评价。方法采用新型纳米材料修饰电极,将HCV核心抗体固定到电极表面,制备检测HCV核心抗原的电化学免疫传感器,并分析该传感器的检测性能。结果该免疫传感器对HCV核心抗原反应灵敏,其线性范围为2.50～300.00ng/mL,相关系数为0.997,检出限为1.20ng/mL。此外,该传感器具有较好的准确性、选择性和精密度。结论该电化学免疫传感器性能良好,可实现对HCcAg的快速、灵敏检测。     

Pt@GR复合物用于构建高灵敏电化学甲胎蛋白传感器的研究

目的 构建基于铂与石墨烯纳米复合物(Pt@GR)的电化学免疫传感器.方法 在洁净的玻碳电极表面滴涂一层壳聚糖与Pt@GR的复合物,通过共价作用将纳米金固定在电极表面,进一步固载甲胎蛋白抗体制得甲胎蛋白免疫传感器,采用循环伏安法(cyclic voltammetry,CV)、示差脉冲伏安法(differential pulse voltammetry,DPV)对实验条件进行优化,对该传感器的响应特性进行研究.同时制备基于普鲁士蓝和石墨烯的免疫传感器以对照研究不同传感器的性能特点.结果 免疫反应最佳时间为24 min,测试底液最佳pH为6.5.在最优的实验条件下,连续扫描100圈,其电流响应下降5.1％.平行测定5支电极的RSD为8.1％,加标回收率为96.40％ ～ 102.49％.在测试底液中加入过氧化氢,其线性范围为0.1 ～ 100.0 ng/mL,检测限为0.026 ng/mL.结论 基于Pt@GR复合物修饰的电化学传感器具有灵敏度高和稳定性好的特点,可用于甲胎蛋白的高灵敏检测.     

基于碳纳米管修饰的无酶型新型甲胎蛋白安培免疫传感器研究

目的构建新型甲胎蛋白安培免疫传感器。方法首先在玻碳电极(GCE)表面修饰一层羧基化碳纳米管(CNTs),然后利用带负电荷的DNA分子和带正电荷的硫堇之间的静电作用,层层自组装修饰硫堇以增强检测信号,然后利用硫堇的氨基固定纳米金,以便固定抗体,最后利用牛血清白蛋白封闭未结合位点。结果修饰的碳纳米管能够显著地提高电极的导电性,利用层层组装技术修饰了5层硫堇。在优化的条件下(pH7.0,温浴时间25min),制作的甲胎蛋白免疫传感器线性范围在0.5～25ng/ml内,检测限0.02ng/ml。结论成功利用层层自组装技术构建新型基于碳纳米管修饰的无酶型甲胎蛋白安培免疫传感器,该传感器灵敏度高,特异性好,有望成为原发性肝癌早期诊断的新方法。     

新型纳米金修饰铂金电极固载白喉抗原免疫传感器的研究

目的报道制作新型电流型免疫传感器的方法。方法用金纳米颗粒吸附白喉抗原,采用聚乙烯醇缩丁醛（PVB）为辅助固定抗原膜基质将其固定在铂金电极的表面,制成白喉抗原免疫传感器。根据抗原抗体特异性结合形成的免疫复合物使电极敏感膜有效扩散面积减小,电流减少的特性,实现对白喉抗体的定量检测。结果该传感器对白喉抗体检测的线性范围是24～600 ng/mL,线性相关系数r为0.9979,检出下限为5.2 ng/mL（S/N=3）。结论我们成功的构建了白喉抗原免疫传感器,并将其用于生物制品中白喉类毒素的检测,其结果较满意。     

采用石墨烯修饰的电化学免疫传感器检测猪肉中的己二烯雌酚含量

利用石墨烯及己二烯雌酚修饰电极,研制了一种用于检测己二烯雌酚的高灵敏新型电化学免疫传感器;通过竞争结合,以铁氰化钾为探针,实现了对己二烯雌酚的高灵敏快速检测。结果表明:研制的石墨烯/己二烯雌酚电化学免疫传感器具有很高的灵敏度,并且在己二烯雌酚质量浓度为500~5 000 ng/mL的范围内具有良好的线性关系,检测限可达到0.2 ng/mL。该传感器具有良好的稳定性和重复性,对猪肉实际样品进行了己二烯雌酚的含量分析,回收率在83.8%~97.7%之间,结果令人满意。     

壳聚糖/碳纳米管修饰电极电化学免疫传感器用于甲胎蛋白检测

目的构建壳聚糖/碳纳米管(CNT)修饰电极电化学免疫传感器用于甲胎蛋白(AFP)检测的新技术。方法采用壳聚糖/CNT复合物修饰玻碳电极,通过共价键合方式将AFP抗体固定在修饰电极表面,固定抗体的电极与AFP、辣根过氧化物酶(HRP)标记的AFP抗体反应,构筑夹心型免疫复合结构。HRP催化TMB底物产生电流信号,电流信号大小与AFP浓度成正相关,实现对AFP的高灵敏检测。结果该电化学免疫传感器可以准确检测AFP标准样品,也可用于检测血清中AFP的浓度。结论壳聚糖/CNT修饰电极构建的用于AFP检测的电化学免疫传感器具有较高的灵敏度和准确性。     

电化学免疫传感器超灵敏检测髓过氧化物酶的研究

目的：本研究拟建立一种电化学免疫传感器用于超灵敏检测人血清中髓过氧化物酶（MPO）水平的方法。方法通过石墨化多孔碳-金复合纳米材料（AuNPs＠ GMCs）将 MPO 抗体固定到玻碳电极表面,研制出一种新型 MPO 电化学免疫传感器,探讨了实验条件对传感器性能的影响,并与酶联免疫吸附试验（ELISA）进行方法学比较。结果在最优条件下该传感器对MPO 反应灵敏,其线性范围为2．000～300．000 ng／mL ,相关系数为0．999,检出限为0．5 ng／mL ,与 ELISA 法检测结果的相关系数为0．983。结论该电化学免疫传感器可实现对 MPO 的超灵敏检测。     

压电石英晶体甲胎蛋白免疫传感器的实验研究

目的　构建一种新型压电甲胎蛋白 (AFP)免疫传感器。方法　AT切向、基频 10MHz的石英晶体用金属夹具和乳胶套圈固定组成检测池 ,抗人AFP单克隆抗体采用巯基化方法固定在金膜电极表面制成抗体敏感膜 ,构成压电AFP免疫传感器。结果　构建的压电AFP免疫传感器对AFP的响应特性良好 ,其线性检测范围为 2 0～ 10 0 0ng ml ,癌胚抗原(CEA)、前列腺特异抗原 (PSA)、人绒毛膜促性腺激素 (hCG)等对AFP的检测基本无干扰 ;传感器可再生后重复使用 5次 ;68例临床标本检测结果与放射免疫检测法符合 ,两种方法的相关系数为 0 92 ,P <0 0 1。结论　研制的压电AFP免疫传感器是一种灵敏度高、特异性好、不需标记、操作简单、省时、能重复使用和实时在线检测AFP的新方法 ,对比实验表明其检测结果准确 ,能用于临床实验诊断 ,具有临床推广价值。     

基于石墨烯-依来铬青蓝R的新型免标记电化学免疫传感器用于CA19-9检测

目的构建石墨烯-依来铬青蓝R(GO-ECR)免标记电化学免疫传感器高灵敏检测CA19-9的新技术。方法化学法合成氧化石墨烯并滴涂于电极表面,通过循环伏安法电沉积制作GO-ECR修饰玻碳电极,在偶联剂EDC和NHS作用下以共价键合方式将CA19-9抗体固定于修饰电极表面,固定的抗体与CA19-9发生免疫反应形成抗原-抗体复合物。铁氰化钾溶液作为检测探针,对比免疫反应前后铁氰化钾响应信号的差异,利用信号降低程度与CA19-9浓度正相关,实现对CA19-9的特异性高灵敏检测。结果该电化学免疫传感器检测CA19-9的线性范围为0.05～500 U/mL,检测限为0.01 U/mL,且能准确测定临床血清样本CA19-9的浓度。结论构建的GO-ECR免标记电化学免疫传感器可以简单、准确、特异地检测CA19-9。     

不同术后镇痛方法对血浆肾素—血管紧张素Ⅱ—醛固酮系统的影响

目的：观察不同术后镇痛方法对子宫切除术患血浆肾素－血管紧张素－醛固酮（R－A－A）系统的影响。方法：将36例ASAⅠ－Ⅱ级子宫切除术患,随机分为持续硬膜外输注镇痛（CEA）组、持续静脉输注镇痛（CLA）组和哌替啶肌注镇痛（MA）组,每组12例。分别于麻醉前（T0）、术毕使用镇痛药前（T1）、术后4小时（T2）和术后第一天晨7时（T3）采静脉血测定血浆肾素、血管紧张素Ⅱ和醛固酮浓度。结果：与T0比较,肾素水平CEA组、CLA组在T3同,MA组在T2显降低（P＜0.01）;血管紧张素ⅡCEA组在T2、T3和MA组在T3均显降低（P＜0.01）;醛固酮CEA组在T3显降低（P＜0.01）,MA组在T2升高（P＜0.01）,而T3时降低（P＜0.01）。组间比较,CEA组、MA组在T2和T3时肾素、血管紧张素Ⅱ、在T3时醛固酮浓度显低于CIA组（P小于0.05或0.01）。结论：CLA患R－A－A系统较稳定,CEA患R－A－A系统被抑制。     

PET/CT联合血清CEA、NSE和CYFRA21-1水平在肺癌诊断中的应用分析

目的探讨PET/CT联合血清癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1)水平在肺癌诊断中应用的价值。方法选取肺癌患者80例,肺良性病患者69例,另选取同时期接受体检的健康人群40例,观察PET/CT联合血清CEA、NSE和CYFRA21-1水平在肺癌诊断中的准确性,并绘制受试者工作曲线(ROC),分析应用价值。结果肺癌组CEA、NSE和CYFRA21-1水平均显著高于肺良性病组和健康组(P0.05)。PET/CT+CEA+NSE+CYFRA21-1联合诊断肺癌敏感性87.62%,特异性92.38%显著高于各指标单独检测。结论 PET/CT与血清CEA、NSE和CYFRA21-1联合对肺癌进行诊断,敏感性和特异性明显高于各指标单独使用,在肺癌诊断中有独特的临床价值。     

RADIOIMMUNODETECTION ()F CANCERS CONTAININGCARCINOEMBRYONIC ANTIGEN AND ALPHA-FETOPROTEIN

We used radiolabeled antibodies to carcinoembryonic antigen (CEA) and alpha-fetoprotein (AFP)to detect and localize CEA- or AFP-producing tumors.The monoclonal antibody to CEA and affinity puri-fied antibody to AFP were prepared and Iabeledwith 131I by iodogen method. The radioantibodieshad 95% of radiochemical purity, 2.16 12 mCi per mgof specific radioactivity, and 8W70-93To of specificimmunoreactivity. Images were made with a r-scintillation camera, at about 48 hours after intra-venous injection of a dose ranging from 0.82 t0 3.5mCi of the labeled antibodies (140-590 ug of protein),and a dual radion.uclide subtraction technique withcomputer-assisted processing was used to enhancethe tumor-related activity. In 10 patients with CEA-producing tumors, 7 0f 8 primary lesions were posi-tive for the CEA radioimmunodetection, and of 15secondary lesions, 11 were positive and 4 weaklypositive. In 10 patients with AFP-producing tumors(liver cancer), 9 0f 10 intrahepatic lesions were de-tected by AFP radioimmunodetection. It is interesting that the tumors were detected by thismethod even in 5 0f 6 patients with normal levelof plasm CEA or AFP, and one tumor site missedby CT scan was detected too. The main factors forsuccessful application of this method are described.The mechanism of localization of the radioantibodiesin tumor is also discussed through an immunopathological approach.