沙利度胺对难治、复发多发性骨髓瘤患者骨髓微环境的影响

背景与目的:越来越多的研究表明,骨髓瘤细胞的生长、生存以及耐药的产生与骨髓微环境密切相关。沙利度胺(thalidomide,Thal)是作用于骨髓微环境的药物之一,我们通过观察沙利度胺对难治、复发多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)患者骨髓微环境的影响,进一步了解Thal的作用机制。方法:用流式细胞仪检测沙利度胺治疗前后难治、复发的MM患者骨髓基质细胞膜表面的细胞间粘附分子(ICAM-1)和血管细胞粘附分子(VCAM-1)的表达强度,半定量RT-PCR法检测骨髓基质细胞IL-1βmRNA、IL-6mRNA、TNF-αmRNA的表达,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定其血清VEGF、bFGF水平。结果:难治、复发MM患者骨髓基质细胞(BMSC)膜表面ICAM-1、VCAM-1平均荧光强度分别为13.28±4.26、10.35±2.47,用Thal治疗有效的难治、复发MM患者BMSC膜表面ICAM-1、VCAM-1平均荧光强度分别为4.29±0.98、3.54±0.62,明显受抑制(P<0.05)。难治、复发MM患者BMSCIL-1βmRNA、IL-6mRNA、TNF-αmRNA与β-actin的比值分别为1.83±0.64、24.52±11.46、3.42±1.83,用Thal后有效的难治、复发MM患者BMSCIL-1βmRNA、IL-6mRNA、TNF-αmRNA与β-actin的比值分别为0.58±0.11、13.47±14.31、1.25±0.76,明显受抑制(P<0.05)。而治疗无效的难治、复发MM患者BMSC膜表面IC     

沙利度胺对人鼻咽癌细胞株血管内皮生长因子表达影响的观察

目的:探讨沙利度胺对人鼻咽癌细胞株体外生长及对血管内皮生长因子表达的影响。方法:采用MTT法检测沙利度胺对人鼻咽癌细胞增殖的抑制率;RT-PCR和免疫细胞化学方法分别检测沙利度胺作用前后血管内皮生长因子基因和蛋白表达水平的变化。结果:沙利度胺能抑制CNE-2细胞增殖,呈浓度依赖性,当60mg/L沙利度胺作用72h,其抑制率为45.6%;不同浓度沙利度胺作用后VEGFmRNA和VEGF-CmRNA表达均降低,VEGFmRNA下降最明显,P<0.05;蛋白表达与其相应mRNA呈正相关,r值分别为0.959和0.974,P值分别为0.035和0.021。结论:沙利度胺能够抑制CNE-2细胞增殖,其作用机制可能与其下调血管内皮生长因子的表达有关。     

沙利度胺联合TACE术治疗中晚期肝癌的疗效分析

目的观察沙利度胺联合经导管肝动脉化疗栓塞术（TACE）治疗中晚期肝癌的疗效以及血清血管内皮生长因子（VEGF）的变化与疗效的关系。方法将无法手术切除的中晚期肝癌64例随机分为两组,每组32例。治疗组：沙利度胺＋TACE术;对照组：单纯TACE术。沙利度胺每晚200 mg口服,服用至少3个月,每位患者至少行TACE术2次,并检测TACE术前1周及术后2周VEGF水平。结果治疗组有效率为59.4%,对照组46.9%,比较差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗组疾病控制率81.2%,对照组56.2%,比较差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗组1、2年生存率分别为65.6%、28.1%,对照组为62.5%、25.0%,比较差异无统计学意义（P〉0.05）;血清VEGF治疗组下降较对照组显著（P〈0.05）,对照组治疗前后血清VEGF水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）;治疗组甲胎蛋白（AFP）下降率81.3%明显高于对照组53.1%（P〈0.05）;两组毒副反应均为Ⅰ~Ⅱ级,治疗组嗜睡、疲劳、头昏、皮疹等症状较对照组高（P〈0.05）。结论沙利度胺联合TACE术治疗中晚期肝癌疗效较好,能提高疾病控制率,降低血清VEGF水平,且毒副反应可以耐受。     

沙利度胺对人乳腺癌细胞血管内皮生长因子-C及其受体表达的影响

 目的 探讨沙利度胺对人乳腺癌细胞系MCF-7和MDA-MB-231VEGF-C及KDR表达的影畸。方法 MTT法检测沙利度胺对细胞增殖的抑制作用，从而选择适当的药物浓度及作用时间；RTPCR法检测沙利度胺处理前后细胞中vEGF-CmRNA的表达水平；流式细胞术检测沙利度胺处理前后细胞中VEGF_C及KDR蛋白的表达水平。结果 沙利度胺在（6～120）μg／ml范围内对MCF-7和MDA-M13-231细胞有明显的抑制增殖作用，60μg／ml明显抑制两株细胞的VEGF-CmRNA及VEGF-C、KDR蛋白的表达。结论 沙利度胺在一定浓度范围内能抑制人乳腺癌细胞的增殖，其抗血管生成作用可能与下调vEGF-C及KDR表达有关。     

急性髓系白血病血管新生因子的表达及临床意义

背景与目的:研究证实,VEGF和bFGF表达水平与多发性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤和慢性淋巴细胞白血病等疾病预后有关,本研究观察急性髓系白血病(AML)细胞血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及其受体的表达谱系、VEGF和bFGF的水平及与临床的关系.方法:RT-PCR方法检测VEGF、bFGF及其受体在转录水平的表达;ELISA检测血浆VEGF和bFGF水平,并分析其表达水平与临床的关系.结果:(1)107例初治AML患者VEGF、Flt和KDRmRNA阳性率分别56.1%、49.5%和2.8%;bFGF和其4个受体mRNA阳性率则分别为21.5%、35.5%、9.4%、35.5%和23.4%.(2)初治AML血浆VEGF水平为(154.75±109.98)pg/ml,明显高于健康对照组(99.91±41.87)pg/ml及AML-CR组(72.05±23.39)pg/ml(P＜0.05);AML-CR组与正常对照组比无统计学差异(P＞0.05).初治AML患者血浆bFGF水平(10.00±6.70)pg/ml与正常对照(9.44±3.04)pg/ml及AML缓解患者(11.28±4.61)pg/ml比较无显著性差异(P＞0.05).2个疗程内获完全缓解患者血浆VEGF水平(124.05±76.57)pg/ml明显低于未获完全缓解者血浆VEGF水平(211.24±169.88)pg/ml(P＜0.05).用Kaplan-Meier生存分析可以评价生存期的86例初治AML患者,显示VEGF和bFGF水平与其生存期呈负相关.结论:AMI细胞表达VEGF、bFGF及其受体,VEGF和bFGF既可能为AML的自分泌因子也可能为旁分泌因子;高VEGF血浆水平可影响患者化疗效果和生存期,以VEGF及其受体作为靶点治疗AML,可能会改善AML患者的预后.     

沙利度胺对人肾癌细胞增生及碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的观察沙利度胺对人肾癌细胞株786—0增生及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）表达的影响。方法将细胞分成沙利度胺6．25、25、100ug／ml组及对照组；应用MTT方法测定细胞抑制率；半定量RT-PCR和流式细胞术分别从mRNA和蛋白水平观察沙利度胺对786—0细胞bFGF表达的作用。结果沙利度胺在6．25～100ug／ml范围内能明显抑制786—0细胞增生，作用48、72h，IC50分别为46．42、19．56ug／ml。凋亡率从12．43％增加到30．30％，并伴随bFGF表达水平下降，以25ug/ml对bFGF抑制最显著。结论沙利度胺能抑制肾癌细胞bFGF的表达，促进凋亡，抑制细胞增生。     

沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721体外生长的抑制作用

目的 研究沙利度胺对人肝癌细胞株SMMC-7721体外生长的抑制作用及其可能的机制.方法 将不同浓度的沙利度胺作用于人肝癌细胞株SMMC-7721,采用四甲摹偶氮唑蓝(MTT)法检测沙利度胺对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用.将SMMC-7721细胞培养至对数生长期,采用DNA琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜观察、流式细胞仪检测等方法 观察沙利度胺处理后SMMC-7721细胞的凋亡梯度、形态学变化和凋亡率,并对凋亡调控蛋白caspase-3的表达进行测定.采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定不同浓度的沙利度胺处理后SMMC-7721细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的变化.结果 沙利度胺的浓度从3.125μg/ml增至200μg/ml时,其对SMMC-7721细胞的增殖抑制率从11.7%增至34.2%;当沙利度胺的浓度>25 μg/ml时,其对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用明显强于空白对照组(P<0.05).200 μg/ml的沙利度胺处理SMMC-7721细胞24 h后,行琼脂糖凝胶电泳,可见到DNA梯形条带;48 h后梯形条带更明显,并且在荧光显微镜下可见SMMC-7721细胞出现核固缩和核裂解现象.200μg/ml的沙利度胺处理SMMC-7721细胞12、24、48和72 h时,碘化丙啶(PI)法检测SMMC-7721细胞的凋亡率分别为3.1%±0.5%、8.4%±1.3%、19.4%±3.5%和25.8%±2.1%,24 h起的凋亡率均明显高于空白对照组SMMC-7721细胞48 h的自然凋亡率(1.6%±0.6%,均P<0.05).50、100和200μg/ml的沙利度胺处理SMMC-7721细胞48 h时,Annexin V-FITC/PI双标法检测SMMC-7721细胞的凋亡率分别为8.7%±1.2%、16.8%±2.5%和25.4%±4.5%,均明显高于空白对照组SMMC-7721细胞48 h的自然凋亡率(2.1%±0.5%,均P<0.05).随着沙利度胺浓度的增加,表达caspase-3蛋白的SMMC-7721细胞数量不断增加,而SMMC-7721细胞中VEGF的含量却逐渐下降.结论 沙利度胺可能通过诱导肝癌细胞的凋亡、抑制肿瘤血管的生成而发挥双重抗肿瘤生长的作用.     

沙利度胺联合PC方案对非小细胞肺癌患者疗效/血清VEGF的影响

背景与目的:沙利度胺具有抗肿瘤血管增生的潜能.本研究旨在研究和评价沙利度胺联合化疗对非小细胞肺癌(NSCLC)患者疗效/血清中血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法:采用前瞻性随机对照研究,将2007年2月-2008年8月就诊的136例晚期NSCLC患者分为联合治疗组(联合组)和对照治疗组(对照组),每组68例.联合组采用PC方案+沙利度胺治疗.PC方案:给予周剂量紫杉醇(PTX)+顺铂(DDP),即PTX 80 mg/m2,静滴,每周1次,连续2周;DDP 80 mg/m2,静滴,分为3 d;沙利度胺200 mg/d口服,第1天起连续给药.对照组采取单化疗,行PC方案,剂量同上.采用酶联免疫法检测100例(两组各前50例)患者治疗前后血清VEGF含量.结果:联合组有效率CR+PR为52.9%,对照组有效率为38.2%,两组有效率差异无显著性(P=0.16);联合组和对照组患者在治疗后血清VEGF水平均有不同程度升高;联合组治疗后血清VEGF水平(568±181 pg/m1)与治疗前(309±128 pg/m1)比较差异无显著性(P>0.05);但对照组化疗后血清VEGF水平(679±175 pg/m1)显著高于化疗前(261±135 pg/m1),差异有显著性(P<0.05). 结论:沙利度胺联合化疗有提高近期疗效的趋势,能抑制晚期NSCLC患者的肿瘤细胞VEGF的产生,从而降低血清VEGF水平.     

沙利度胺抗肿瘤机制及应用进展

沙利度胺（thalidomide）是目前研究广泛的口服抗血管生成和免疫调节剂。通过抑制肿瘤坏死因子（TNF）-α降低血管内皮生成因子（VEGF）表达、抑制环氧合酶（COX）等达到抗肿瘤血管生成、诱导凋亡作用。同时沙利度胺调节多种免疫细胞因子，间接抑制肿瘤细胞。临床试验表明沙利度胺对多种肿瘤治疗有效，是一种有效的化疗药物。目前已开发出多种疗效佳、不良反应小的类似物。     

沙利度胺抗肿瘤血管生成的临床研究进展

沙利度胺抗肿瘤血管生成的作用已经日渐明确,临床研究证实,沙利度胺对多发性骨髓瘤、急性髓系白血病、子宫肿瘤、前列腺癌等有一定的抗肿瘤血管生成作用,而对其它肿瘤的作用也在进一步研究中.本文对沙利度胺抗肿瘤血管生成的临床研究进展做一综述.     

血管内皮生长因子及其受体在白血病中的表达及作用

血管内皮生长因子(VEGF)及其受体的表达,在白血病细胞的增殖和存活中发挥了重要作用.几乎所有类型的白血病均可见VEGF及其受体的表达,VEGF及其受体与白血病的预后及分期等密切相关.     

VEGF和VEGFR通路抑制剂在晚期胃癌治疗中的疗效

抗新生血管形成是目前胃癌治疗的重要研究方向,血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体(VEGFR)抑制剂是主要的研究热点.目前治疗晚期胃癌的VEGF及VEGFR通路抑制剂包括贝伐珠单抗、雷莫芦单抗、阿帕替尼、瑞戈非尼、索拉非尼等,这些药物为晚期胃癌的治疗提供了更多可能性.     

DLL4、HES1、VEGF-C及VEGFR-2在白血病患者骨髓中的表达及其临床意义

 目的　探讨白血病患者骨髓中DLL4、HES1、VEGF-C及VEGFR-2的 mRNA表达水平检测的临床意义,为白血病的诊治提供新的思路。方法　选取白血病患者59例作为病例组,均根据临床表现、血象、骨髓象、细胞化学染色、细胞遗传学及流式细胞术检查确诊;对照组20例为营养性贫血患者。采用半定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定DLL4、HES1、VEGF-C、VEGFR-2 mRNA的含量。结果　各组初发急性和慢性白血病患者骨髓中DLL4、HES1、VEGF-C、VEGFR-2 mRNA的表达与对照组相比均显著升高（P＜0.05）。急性白血病缓解后DLL4、HES1、VEGFR-2的 mRNA表达高于对照组（P＝0.041、0.016、0.047）。急性髓系白血病（AML）组DLL4与VEGFR-2、HES1与VEGF-C表达呈正相关（r＝0.424、0.472;P＝0.030、0.014）;慢性淋巴细胞白血病（CLL）组HES1与VEGF-C表达呈正相关（r＝0.997,P＝0.042）。急性白血病伴髓外浸润者VEGF-C mRNA的表达高于不伴髓外浸润者（P＝0.022）。AML组VEGF-C mRNA的表达与原始细胞数呈正相关（r＝0.315,P＝0.024）。结论　DLL4、HES1、VEGF-C及VEGFR-2在白血病发病中相互作用,促进白血病发展、转移及浸润,且这些因子在不同类型白血病及髓外浸润中的作用存在差异。4.结论：以上结果提示,DLL4、HES1及VEGF-C、VEGFR-2在白血病发病中相互作用,促进白血病发展、转移及浸润;且这些因子在不同类型白血病及髓外浸润中的作用存在差异。这一点提示它们可能成为白血病的肿瘤标记物;阻断DLL4、HES1、VEGF-C和VEGFR-2有可能阻断肿瘤的生长和转移。     

沙利度胺联合CAG方案治疗老年人急性髓系白血病效果观察

目的 评价沙利度胺联合CAG方案治疗老年急性髓系白血病（AML）患者的临床疗效及安全性.方法 对51例初治的老年AML患者进行前瞻性研究,采用简单随机分组法分为沙利度胺联合CAG方案治疗组26例、CAG方案单用对照组25例,评估临床疗效及患者不良反应.结果 诱导缓解治疗2个周期后,治疗组完全缓解（CR）率为61.5％（16/26）,对照组为48.0％（12/25）,两组差异无统计学意义（P=0.404）.治疗组1年CR率为53.8％（14/26）,对照组为24.0％（6/25）（P=0.045）;治疗组2年CR率为42.3％（11/26）,对照组为12.0％（3/25） （P=0.027）;治疗组1年及2年生存率分别为73.1％和46.1％,对照组分别为52.0％和24.0％;随访2年,治疗组中位生存时间为22个月,对照组为13个月,差异有统计学意义（P=0.018）.两组患者诱导死亡率及血液学不良反应发生率差异无统计学意义;但治疗组恶心、呕吐明显减轻,与对照组相比差异有统计学意义（P=0.025）.结论 沙利度胺联合CAG方案治疗老年AML患者,疗效理想,患者不良反应轻,值得进一步研究及临床应用.     

沙利度胺联合NP方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床研究

 目的　研究沙利度胺联合NP方案治疗晚期非小细胞肺癌（NSCLC）的疗效,观察患者治疗前后外周血中血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的变化。方法　经病理学或细胞学确诊的Ⅲ／Ⅳ期NSCLC的初治或未采用NP方案化疗的复治患者57例,随机分为治疗组（NP方案+沙利度胺）36例和对照组（NP方案）21例。采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测VEGF、bFGF的水平。结果　治疗组有效（RR＝CR＋PR）为44.4 %（16／36）,临床受益（CBR）为77.8 %（28／36）;对照组RR为23.8 %（5／21）, CBR为42.9 %（9／21）。两组RR及CBR比较差异无统计学意义（P＞0.05）。治疗组中位肿瘤进展时间（TTP）5.1 个月,对照组为 3.0个月,与对照组比较,治疗组中位TTP延长（P＝0.05）。治疗组CBR的患者血清VEGF水平显著下降（P＜0.05）。对照组CBR的患者治疗前后血清VEGF对比差异无统计学意义（P＞0.05）。两组临床进展的患者治疗后血清VEGF水平均比治疗前升高（P＜0.05）。两组CBR者治疗后血清bFGF均有所下降,但均无统计学意义（P＞0.05）。两组临床进展的患者治疗后血清bFGF水平均比治疗前明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论　沙利度胺联合NP方案能显著延长晚期NSCLC患者中位TTP,提高患者的RR及CBR。沙利度胺联合NP方案具有协同作用,且不明显增加化疗的不良反应;根据血清VEGF水平可推测病情进展;VEGF和bFGF在NSCLC血管形成过程中具有协同作用;血清VEGF和bFGF水平可能作为NSCLC患者疗效及预后的预测指标。     

Thalidomide for the Treatment of Refractory Multiple Myeloma: Association of Plasma Concentrations of Thalidomide and Angiogenic Growth Factors with Clinical Outcome

Recent reports showed that thalidomide has anti-angiogenic activity and is effective for the treatment of refractory multiple myeloma (MM). We examined the relationship between the clinical efficacy and adverse effects of thalidomide and the plasma concentrations of this drug as well as angiogenic growth factors in refractory MM. Ten out of twenty-four evaluable patients (42%) showed more than 25% reduction of M-protein, and eight (33%) achieved more than 50% reduction. These changes were associated with restoration of anemia and recovery of normal immunoglobulin level. Somnolence and headache, constipation, peripheral neuropathy and skin rash were frequently observed, but were well tolerated. However, grade 2–4 severe neutropenia was also observed in nine cases. These adverse effects other than neutropenia occurred more frequently in the patients with higher plasma concentrations of thalidomide (≥2.0 μg/ml at 12 h after the last administration) and were readily alleviated by dose reduction. In contrast, neutropenia developed regardless of the plasma concentration. Plasma concentrations of angiogenic growth factors were frequently elevated before treatment. After thalidomide treatment, these growth factor levels tend to decrease to near-normal ranges in responders but were still high in most non-responders. After thalidomide treatment, plasma vascular endothelial growth factor (VEGF) level was significantly reduced in responders ( P =0.025), but not in non-responders ( P =0.37). Reduction of plasma VEGF level might be an important indicator for anti-myeloma effect of thalidomide.     

VEGF、VEGFR在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFRflt-1和KDR)在卵巢癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测VEGF及VEGFR在45例卵巢癌中的表达情况,并进行相关的临床病理因素分析。结果45例卵巢癌中VEGF、flt-1和KDR阳性表达率分别为86.7%,68.9%,88.9%。Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌中VEGF强阳性表达率93.5%(29/31)高于Ⅰ~Ⅱ期卵巢癌35.7%(5/14)(P=0.001)。淋巴结转移阳性组中VEGF强阳性表达率69.2%(9/13)高于淋巴结转移阴性组27.8%(5/18)(P<0.05)。随着卵巢癌临床分期、病理分级、腹水量及残瘤组织的增加,VEGF阳性表达率升高(P<0.05),而不同组织类型卵巢癌中,VEGF阳性表达率无明显差异(P>0.05)。结论VEGF与卵巢癌发展有关,能促进肿瘤生长、局部侵袭及远处转移。     

血管内皮生长因子与白血病关系的研究进展

 血液系统恶性肿瘤患者多种血管内皮生长因子（VEGF）含量升高,其含量变化与预后相关,VEGF是参与血管形成的主要细胞因子,并与内皮细胞的多种功能相关,现综述VEGF在白血病中的作用,并探讨VEGF家族成员之一的胎盘生长因子在慢性粒细胞白血病发病中作用的最新研究进展。     

VEGF、VEGFR及其在肝癌血管生成中的研究进展

肝癌是富血管性的恶性肿瘤.血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)在肿瘤血管生成中发挥了重要作用.而针对VEGF和VEGFR的肝癌治疗药物如索拉非尼、贝伐单抗、干扰素a、PTK787等也日益受到重视.