EB病毒感染在风湿病中的意义

测定各种风湿病317例、鼻咽癌19例和正常人119例血清中的EB病毒(EBV)核抗原(EBNA)、壳抗原(EBVCA)和类风湿性关节炎相关核抗原(RANA)抗体,发现EBNA、EBVCA抗体检出率在各疾病组和正常人中无明显差异.但二者的平均滴度和高滴度血清阳性率在各疾病组显著高于正常人。RANA抗体检出率、平均滴度和高滴度血清阳性率在类风湿性关节炎(RA)患者较其它风湿病和正常人显著增高。提示多种风湿病对EBV均有异常的免疫应答反应,RANA及其所代表的EBV株在RA发病中可能有一定作用.     

Epstein—Barr病毒与类风湿性关节炎

近年来病毒感染和RA(RheumatoidArthritis,下同)之间的关系受到人们的重视。本文采用间接免疫荧光技术检测了132例血清和72例滑液中的抗Epstein-Barr(EB)病毒胞膜抗原的抗体(EBV—VCA—Ab)。结果正常人的45例血清和11例滑液中的EBV-VCA-IgG抗体的平均滴度分别为1:30和1:2,阳性率为44%及阴性;EBV-VCA-IgM抗体的平均滴度分别为1:3和1:2;EBV-VCA-IgA抗体均为阴性。对其他关节病患者的18例血清及33例滑液的测定,结果均与正常人组相似。而RA患者69例血清和28例滑液的EBV-VCA     

Ro60/SSA基因转染HEp-2细胞作为间接免疫荧光检测底物及其应用

本研究拟改造间接免疫荧光技术（IIF）抗核抗体（ANA）检测法的底物HEp-2细胞，建立抗60kDRo60／SSA抗体免疫荧光检测法。采用PCR扩增人源Ro60 cDNA，克隆入真核表达载体pEGFP-C1，并转染HEp-2细胞。通过荧光显微镜、免疫印迹法（IBT）及IIF鉴定转染细胞（HEp-Ro60）中Ro60-绿色荧光蛋白（GFP）融合蛋白的表达和抗原性。分别以HEp-Ro60以及HEp-2为底物的IIF检测10份抗Ro／SSA对流免疫电泳（CIE）检测阳性、其他抗体阴性血清以及对照血清。获得的转染细胞传十几代后仍具有较强的Ro60-GFP表达，融合蛋白保持Ro60的抗原性。IIF检测中HEp-Ro60的滴度比HEp-2增加了6．7倍（P〈0．01），而且2例HEp-2细胞上IIF检测为阴性的血清在HEI-Ro60上为阳性。10例阳性血清中有8例出现了特征性荧光模式。结论是HEp-Ro60可用于IIF检测抗Ro抗体，并增加了ANA检出的敏感性。     

EB病毒感染与类风湿关节炎发病的相关性及血清中特异IgA抗体的预测性研究

目的 探究EB病毒（EBv）感染与类风湿性关节炎（RA）发病的相关性,探讨血清中EB病毒衣壳抗体VCA-IgA对RA是否存在预测作用.方法 选取骨科住院RA患者72例为RA组,另外选取门诊体检人群144人作为正常组,两组均采血取样,用以检测全血中的EBv-DNA及血清中EB病毒VCA-IgA阳性率.结果 比较两组EBv-DNA的检测结果,RA组和正常组阳性率没有显著差异性,比较两组VCA-IgA的检测结果,表明RA组阳性率高达90.3％,正常组阳性率则为6.9％,具有统计学差异性.结论 EB病毒感染与RA发病之间没有明显相关性,但血清中EBv抗体VCA-IgA检测对诊断RA具有一定的预测性价值.     

抗鼠食管角质层抗体的检测及其临床意义

对81例类风湿关节炎（RA）,166例其他风湿病患者和56例正常人进行了抗鼠食管角质层抗体（AKA）检测,以角质层线性、板层状荧光沉着,滴度≥1:80为阳性判断标准,结果:AKA在正常人和其他风湿病患者的阳性率分别为 0％（0/56）和 0.6％（1/166）,而在 RA的阳性率为 19.8％（16/81）;早期 RA的 AKA检出率为28.6％（6/21）;AKA阳性RA的 RF阳性率和平均滴度明显高于AKA阴性者（93.7％对36.9％,1:80对1:32）。提示AKA有助于RA早期诊断,且可能为预后不良的指标之一。     

中山市健康成人外周血EB病毒抗体谱的调查研究

目的探讨来自不同地域的人群感染EB病毒的血清学抗体谱是否存在差异。方法从鼻咽癌高发区中山市的健康成人中收集348例中山籍贯原住居民的血清和81例外省籍贯居民的血清,用ELISA法检测血清中的EBNA1-IgA、EBNA1-IgG、VCA-p18-IgA、VCA-p18-IgG、Zta-IgA和Zta-IgG等6种抗体水平,比较不同抗体组合时两类人群样本的抗EB病毒抗体谱的差别。结果当三项IgA类抗体皆为阴性时,外省籍贯阴性率远远大于中山籍贯样本（P=0）;当EBNA1-IgA单阳时,外省籍贯样本阳性率远远高于中山籍贯样本（P=0.001）;当Zta-IgA单项阳性时（P=0.008）,或者Zta-IgA和VCA-p18-IgA同时阳性时（P=0.001）,中山籍贯样本阳性率明显高于外省籍贯样本;而三项IgG类抗体的任意组合,中山籍贯和外省籍贯都无统计学意义。结论中山籍贯原住居民感染的EB病毒常常处于激活状态;相反,外省籍贯的中山居民感染的EB病毒处于潜伏期时表达的EBNA1水平更高。提示中山籍贯原住居民比外省籍贯居民具有更高的风险罹患鼻咽癌。     

Ro60/SSA基因转染HEp-2细胞作为间接免疫荧光检测底物及其应用

本研究拟改造间接免疫荧光技术(IIF)抗核抗体(ANA)检测法的底物HEp-2细胞,建立抗60kDRo60/SSA抗体免疫荧光检测法。采用PCR扩增人源Ro60 cDNA,克隆入真核表达载体pEGFP-C1,并转染HEp-2细胞。通过荧光显微镜、免疫印迹法(IBT)及IIF鉴定转染细胞(HEp-Ro60)中Ro60-绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的表达和抗原性。分别以HEp-Ro60以及HEp-2为底物的IIF检测10份抗Ro/SSA对流免疫电泳(CIE)检测阳性、其他抗体阴性血清以及对照血清。获得的转染细胞传十几代后仍具有较强的Ro60-GFP表达,融合蛋白保持Ro60的抗原性。IIF检测中HEp-Ro60的滴度比HEp-2增加了6.7倍(P<0.01),而且2例HEp-2细胞上IIF检测为阴性的血清在HEp-Ro60上为阳性。10例阳性血清中有8例出现了特征性荧光模式。结论是HEp-Ro60可用于IIF检测抗Ro抗体,并增加了ANA检出的敏感性。     

抗核抗体致密斑点型与抗环瓜氨酸肽抗体的相关性及临床意义研究

抗核抗体(ANA)的间接免疫荧光法致密斑点型(dense fine speckled, DFS)核型是近年来国际上对HEp-2细胞质呈斑点状,分裂期染色体阳性的荧光核型提出的一种新命名.抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)是类风湿性关节炎(RA)非常重要的血清标志物,ANA荧光DFS核型与anti-CCP具有一定的相关性.现将我院2008年9月至2009年11月,疑似RA患者检测ANA及anti-CCP结果报道如下.     

结缔组织疾病和其它疾病存在的人细胞核抗原的自身抗体

一般认为抗核抗体既无器官特异性,也无种族特异性。然而近几年来,曾报告它有一定限度的特异性。据报道有一种只与粒细胞核抗原起反应的自身抗体,它是类风湿关节炎所特有的。作者通过免疫荧光技术,三年来检测血清23000份,抗核抗体阳性者3450份,发现23份(0.66%)血清里存在一种与人细胞核抗原发生反应的自身抗体。这种自身抗体和鼠肾、鼠肝细胞核反应很弱或不反应。23份血清中只有7份血清可与其它物种细胞核发生弱反应,滴度在1:80以下,这种弱阳性反应,能被丙酮提取的兔胸腺粉吸收而消失。但与人细胞核的反应,既使在低滴度抗     

五厂家EB病毒抗体检测试剂盒血清学诊断鼻咽癌的比较

目的 通过比较EB病毒抗体检测试剂盒血清学诊断鼻咽癌的准确性和检测结果的一致性,为试剂盒在临床上的使用选择和性能改进提供依据.方法 使用五厂家的EB病毒衣壳抗原IgA和IgG抗体检测试剂盒（VCA IgA和VCA IgG试剂盒）、核抗原I IgA和IgG抗体检测试剂盒（EBNA1 IgA和EBNA1IgG试剂盒）、早期抗原IgA和IgG抗体检测试剂盒（EA IgA和EA IgG试剂盒）以及Zta IgA抗体检测试剂盒,分别检测33例鼻咽癌患者（NPC）、30例健康体检者（HD）和41例非鼻咽癌的其他肿瘤患者（NNPC）血清或血浆样本.结果 A厂家的VCA IgA试剂盒灵敏度高于其他厂家同品种试剂盒,但对于NNPC特异度最低（36.6％）;而D厂家VCA IgA试剂盒的特异度最高（97.6％）,且对HD的特异度均大于90％.B和D厂家的EBNA1 IgA试剂盒间阳性、阴性符合率分别为92.1％和100.0％.A和E厂家的EA IgA试剂盒的灵敏度均较低而特异度高,试剂盒间阳性符合率低（39.4％）,阴性符合率高（98.6％）;而VCA IgG试剂盒的灵敏度高但特异度低.A和C厂家的EBNA1IgG试剂盒的灵敏度高（100.0％,97.0％）但特异度低（3.3％,13.3％）.C厂家EA IgG试剂盒检测所有样本结果均为阴性.结论 五个不同厂家VCA LgA、EA IgA试剂盒诊断鼻咽癌的准确性和检测结果的一致性存在差异,特别是A厂家和其他国内厂家同品种试剂间差异明显,需根据临床目的进行选择.三家国产VCA IgA试剂盒的灵敏度需进一步提高.相反,EBNA IgA试剂盒诊断鼻咽癌的准确性和结果一致性较好.单独使用VCA IgG和EBNA1 IgG试剂盒血清学诊断鼻咽癌的特异度差,其判读界值可能需根据检测且的进行调整.     

EB病毒核抗原1对鼻咽癌细胞miR-34a/Notch1轴及增殖、凋亡的影响

目的:探讨EB病毒核抗原1（Epstein-Barr virus nuclear antigen1,EBNA1）对鼻咽癌细胞miR-34a/Notch1轴及增殖、凋亡的影响。方法:体外培养人EB病毒（Epstein-Barr virus,EBV）阴性和阳性鼻咽癌细胞系CNE2、C666-1,CNE2细胞设置对照组、空转...     

RF滴度对类风湿性关节炎特异性诊断的探讨

<正>类风湿因子（RF）是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体,主要分为IgM-RF、IgG-RF和IgA-RF等三种类型,多存在于类风湿性关节炎附则患者血清和关节液中。由于RF在其他自身免疫病患者和一些病毒性感染、细菌感染性疾病及一部分正常人体内均可测出低效价的RF,给RA的诊断带来了困难。因此,应用RF滴度对RA诊断将会增强特异性和准确性。本文总结了自 1995年1月至1996年 6月来我院就诊的742例明确诊断为风湿病患者血清RF滴度的测定结果,并比较了RA患者和非RA患者血清中RF滴度,现报告如下。1 材料和方法1.1实验对象本文选择的实验组病例均系本院风湿科按美国抗风湿病学会（ARA,1982）诊断标准确诊病冽,其中类风湿性关节炎（RA）314例,系统性红斑狼疮（SLE）183例,干燥综合征（SS）163例,混合结缔组织病（MCTD）29例,皮肌炎和多肌炎（DM/PM）36例,进行性系统性硬化症（PSS）17例。对照组50例,均为本院体检健康者。 本文统计资料均为各患者一次检测结果。1.2实验方法IgM-RP乳胶凝集试剂由上海荣盛试剂公司提供。按说明书操作。 血标本均为当日新鲜血液,常规法分离血清后按1:20、1:40、1:80……倍比稀释直到RF测定转阴性为止。2结果2.1各类风湿病RF滴度测定结果见表1。2.2 RF滴度 RA组最高,滴度在1:80以上,占     

30例高尔基体抗体阳性结果分析

高尔基体抗体（GAA）为间接免疫荧光法（IIF）检测抗核抗体（ANA）时较常见的胞浆抗体,其临床意义尚不明确,有认为与风湿性疾病或小脑疾患相关。我们总结了近两年来较高滴度（〉1：320）的GAA的病例,通过分析其与生化指标的关系及临床经过,发现大多数病例有球蛋白增高的现象,     

人内质网分子伴侣BiP抗原表位筛选及其在RA血清学诊断中的作用研究

目的:筛选鉴定人内质网分子伴侣BiP抗原表位多肽,探讨其在类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)血清学诊断中的价值.方法:运用计算机软件分析BiP蛋白的结构特点及抗原决定簇分布,根据结果设计合成系列多肽.比较合成多肽与RA患者血清(BiP抗体阳性)IgG的反应强弱,鉴定抗原抗体反应最强的抗原表位多肽.进一步以获得的BiP抗原表位多肽作为包被抗原,检测79例RA患者、34例系统性红斑狼疮(SLE)患者、66例干燥综合征(SS)患者和173例正常人血清中抗BiP抗原表位多肽IgG抗体水平.结果:筛选到一条与RA患者血清反应最强的多肽(N403),抗N403多肽IgG抗体在RA患者中的阳性率(67%),明显高于SS患者(29%)、SLE患者(0%)、和正常人(0%)(P＜0.01).抗N403多肽IgG抗体在RA血清学诊断中的敏感性为67%,特异性为93%.而且该抗体的检测对于RF、CCP、HRF、RA33、AKA、APF等抗体阴性的RA患者的诊断具有重要意义.结论:筛选获得的BiP抗原表位多肽N403,其检测抗体在RA临床血清诊断中具有很好的应用价值.     

抗环瓜氨酸肽抗体在类风湿性关节炎诊断中的应用

目的　探讨抗环瓜氨酸肽 (CCP)抗体检测在类风湿性关节炎 (RA)诊断中的意义。方法　根据cDNA序列人工合成的CCP为抗原 ,用ELISA方法检测 2 18例 (RA 112例 ,非RA 76例及正常人 30例 )血清中的抗CCP抗体 ,并比较抗CCP抗体与类风湿因子 (RF)的相关性。结果　抗CCP抗体在RA组患者血清中的阳性率 4 9.1% ,明显高于非RA组 ( 3.94 % )和正常对照组 ( 0 .0 % ) ,经 χ2 检验P <0 .0 5。抗CCP抗体对诊断RA的敏感性和特异性分别为 4 9.1%、96 .1% ,阳性预测值和阴性预测值为 94 .8%、4 3.8%。在 112例确诊为RA患者的血清中抗CCP抗体与RF重叠阳性率为 85 .4 % ,两者含量呈正相关。结论　抗CCP抗体对RA具有很高的特异性 ,可视为新的RA血清学诊断指标     

7865例抗核抗体检测者中致密斑点型核型结果的回顾性分析

目的 探讨致密斑点型抗核抗体(dense fine speckled,DFS)在抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)中的检出率及其在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者中的临床价值.方法 回顾性分析2017年至2020年本院就诊患者7 865例ANA检测标本,采用间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,IIF),统计DFS在ANA中的阳性率及风湿免疫科ANA、DFS的阳性率.结果 7 865例ANA检测标本中阳性检出率为34.01％(2 675/7 865),DFS检测率为2.75％(216/7 865),DFS 占 ANA 阳性标本的8.07％(216/2 675).ANA 阳性标本中男性占 18.62％(498/2 675),女性占81.38％(2 177/2 675),DFS阳性标本中男性占29.17％(63/216),女性占70.83％(153/216),男女间DFS差异有统计学意义(P＜0.01).DFS患者中风湿免疫科占52.78％(114/216),114人中有38人已确诊为类风湿性关节炎,占总的DFS阳性比率为17.59％.结论 DFS是ANA阳性荧光模型中常见的一种,归属于细胞核核型中的斑点型,其中类风湿关节炎患者占有较高的比率.     

类风湿性关节炎患者血清Ⅱ型胶原抗体的检测及意义

目的 探讨类风湿性关节炎（RA）患者血清抗Ⅱ型胶原（CⅡ)抗体阳性的意义。方法 分别以人Ⅱ型胶原蛋白（HCⅡ）及牛Ⅱ型胶原蛋白CⅡ（BCⅡ）作为包被抗原进行间接ELISA法，检测30例RA患者，对照组（30例非RA的风湿病患者和34例健康人）血清抗CⅡ抗体。结果 以HCⅡ及BCⅡ作为包被抗原检测RA患者血清抗CⅡ抗体的阳性率分别约为30．0％和33．3％；对照组血清中抗体阳性率均约为1．6％；二者差异极其显著（P＜0．01）。抗CⅡ抗体阳性的RA患者RF的阳性率高于抗CⅡ抗体阴性的RA患者。与HCⅡ和BCⅡ均发生阳性反应的血清8例，均为早期RA患者。结论 抗CⅡ抗体可作为判断RA患者病的辅助手段之一，牛CⅡ可替代人CⅡ进行有关RA发病机制中B细胞免疫的实验研究。     

检测抗聚丝蛋白抗体在类风湿关节炎诊断中的意义

目的探讨抗聚丝蛋白抗体(AFA)对类风湿关节炎(RA)诊断的价值,并比较与RA的其他早期诊断指标的相关性。方法从人表皮细胞中提取并部分纯化聚丝蛋白(filaggrin)抗原,用于免疫印迹检测(Western blot)103例RA血清标本和140例对照血清,包括系统性红斑狼疮(SLE)、干燥综合征(SS)、骨性关节炎(OA)95份及正常人45份。APF和AKA用间接免疫荧光法检测。结果103例RA病人的AFA阳性率、特异性分别为35.9%,93.7%,显著高于疾病对照组和正常人(P<0.001)。在AFA阳性的37例中,AKA也阳性的为26例,重叠率为70.3%;APF亦阳性的为31例,重叠率为83.8%,AFA与AKA、APF之间存在相关性。结论AFA对RA具有很高的特异性。AFA的检测可用于RA的临床诊断。AFA与APF及AKA有相关性,但不能完全取代它们的检测。     

间接ELISA法的改进并用于肾综合征出血热病人血清的初步分型

采用超声、差速离心法制备肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）抗原。通过与免疫荧光法（ＩＦＡ）和捕获ＩｇＭＥＬＩＳＡ法（ＭａｃＥＬＩＳＡ）比较，分析了病人临床四个期血清抗体阳性率，对３组不同地区的正常人群ＨＦＲＳＶ抗体阳性血清作抑制试验，以及比较ＩＦＡ和ＥＬＩＳＡ血清抗体几何平均滴度证实本方法是特异和灵敏的。用这一方法对野鼠型和家鼠型ＨＦＲＳ病人血清，与两型病毒作交叉ＥＬＩＳＡ试验，结果呈单向反应；采用胞膜荧光反应为主的感染细胞制备抗原，可提高其分型效果。     

Epstein-Barr病毒壳抗原gp125的纯化和应用

目的研制ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ（ＥＢ）病毒诊断试剂。方法将重组痘苗病毒表达的Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒ病毒（ＥＢＶ）壳抗原（ＶＣＡ）主要多肽ｇｐ１２５纯化，作为诊断抗原建立了酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），检测了４８份鼻咽癌（ＮＰＣ）病人血清及１０份正常人血清中的ＶＣＡ／ＩｇＡ抗体。结果该方法与免疫荧光（ＩＦ）检测结果一致，但ＥＬＩＳＡ的平均几何滴度（ＧＭＴ）是ＩＦ的１２倍。结论以纯化的ＥＢ病毒壳抗原主要多肽ｇｐ１２５作为诊断抗原建立的检测方法，更适合于ＥＢＶ相关疾病的血清学诊断和血清流行病学调查。