神经元型一氧化氮合酶与先天性肥厚性幽门狭窄发病关系的研究

【目的】本实验旨在探讨神经元型一氧化氮合酶在幽门区的表达减少与先天性肥厚性幽门狭窄发病之间的相互关系。【方法】Wistar大鼠受孕后随机分为对照组和实验组。对照组为正常喂养;实验组母鼠孕14d开始口服NOS抑制剂至子鼠生后21d断奶,后继续对子鼠进行相同喂养,将NOS抑制剂溶解于饮用水中至相同浓度进行喂养,所有子鼠的液人量无显著性差异。子鼠出生后42d称重,取胃及10cm／小肠分别称重,幽门组织切片测量幽门肌肉厚度,免疫组织化学染色后计数幽门肌肉内神经元型一氧化氮合酶染色阳性的细胞数量。【结果】（1）体质量：实验组与对照组比较,子鼠体质量减低（t=4．12,P〈0．05）。（2）肌肉厚度：实验组与对照组比较,肌肉厚度增加（t=5．94,P〈0．05）。（3）nNOS染色阳性的细胞数量：实验组与对照组比较,nNOS染色阳性的细胞数量减少（t=17．84,P〈0．05）。（4）两组子鼠胃重量无显著性差异（t=0．19,P〉0．05）。（5）小肠重量：实验组与对照组比较小肠重量增加（t=4．85,P〈0．05）。【结论】神经元型一氧化氮合酶在幽门区表达的下降是引起先天性肥厚性幽门狭窄发病的重要原因。     

睡眠剥夺对大鼠大脑皮层及海马一氧化氮合酶的影响

【目的】观察睡眠剥夺 (sleepdeprivation ,SD)对大鼠大脑皮层及海马一氧化氮合酶活性 (NOS)的影响。【方法】采用小平台水环境法 (flowerpot)建立大鼠SD模型 ,选用 2 4只Wistar大鼠 ,将其随机分为 6组 :正常笼养对照组、大平台对照组、SD 1d组、SD 2d组、SD 3d组、SD 4d组 ,每组 4只。观察大鼠经过不同时间SD后大脑皮层及海马NADPH d阳性神经元数目的变化情况。【结果】与正常对照组比较 ,各组SD大鼠皮层及海马NADPH d阳性神经元数目均显著减少 (P <0 0 5 ) ,并且随着SD时间的延长 ,神经元数目减少的越多。【结论】SD能够引起大鼠皮层及海马NOS活性降低 ,SD时间越长 ,活性越低。     

小站台水环境应激不同时间对小鼠胸腺细胞凋亡的观察

目的探讨小站台水环境应激不同时间对小鼠胸腺细胞的破坏及凋亡的影响。方法利用小站台水环境诱发的应激模型，观察应激12h、24h、48h组和对照组在站台前后体重、胸腺重量、胸腺指数的变化以及胸腺细胞凋亡的状况。结果站台前后小鼠体重改变与对照组相比差异无显著性（P〉0．05），但有降低趋势，应激48h组胸腺重量、胸腺指数改变与对照组相比有极为显著性（P〈O．001），而应激24h组、12h组无显著性（P〉O．05），应激48h、24h、12hAnnexin-v凋亡蛋白增加与照组相比差异极为显著性（P〈O．001），应激12h出现TFAR19蛋白的百分率为96％左右，与对照组相比有极显著性（P〈0．001）．结论小站台水环境应激不同时间都可促进胸腺细胞的凋亡。     

大鼠中缝背核一氧化氮合酶神经元投射分布于大脑皮质一氧化氮合酶神经元

目的：研究通过损毁脑干中缝背核（DR），探讨中缝背核一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元是否投射分布于大脑皮质NOS阳性神经元。方法：将16只SD雄性成年大鼠分为实验组与对照组，对实验组动物DR微量注射喹啉酸，饲养1周，灌注固定，然后将大脑及脑干作冠状冷冻切片，NADPH－d组化染色。结果：实验组动物的中缝背核被有效损毁，其NOS阳性神经元的数量减少了59．1％（P＜0．001），大脑皮质NOS阳性纤维终末减少了28．2％（P＜0．05），与大脑皮质NOS神经元构成接触的NOS阳性纤维终末减少了33．9％（P＜0．05），结论：位于中缝背核的NOS阳性神经元投射分布于大脑皮质NOS神经元，推测中缝背核的NOS阳性神经元可能通过大脑皮质NOS阳性神经元间接对皮质脑血流量起调节作用。     

原代培养大鼠海马神经元液压冲击后PAFR、COX-2和GluR2基因表达比较研究

【目的】研究海马神经元在中度液压冲击损伤后PAFR、COX-2和2GluR2基因表达时序性变化的相关性。【方法】原代培养大鼠海马神经元,复制改良Scott’s中度液压冲击神经元损伤模型,采用免疫荧光双标技术鉴定神经元纯度,应用RT-PCR技术对PAFRmRNA、COX-2mRNA和GluR2mR．NA的表达进行定量研究。【结果】对照组COX-2mRNA呈低表达,损伤后表达逐渐增高,12h达最高值,损伤后12h组与对照组相比差别有显著性（P〈0．05）;对照组GluR2mRNA呈高表达,损伤后表达逐渐减弱,8h达最低值,损伤后8h、12h组与对照组相比差别有显著性（P〈0．05）;对照组PAFRmRNA呈高表达,损伤后表达逐渐减弱,8h达最低值,损伤后8h、12h组与对照组相比差别有显著性（P〈0．05）。【结论】正常时COX-2mRNA在体外培养神经元中仅有少量表达,损伤后4h表达增加,12h达最高值,钙h时仍高于正常。正常时GluR2mRNA在体外培养神经元有较多表达,损伤后4h表达下降,8h达最低值,48h时仍低于正常。正常时PAFRmRNA在体外培养神经元中有较多表达,损伤后4h表达下降,8h达最低,48h时仍低于正常。PAFRmRNA、COX-2mRNA和GluR2mRNA在体外海马神经元中度液压冲击损伤中表达的时序性变化特点基本一致,三者关系密切,共同参与脑损伤病理生理过程。     

红景天对应激小鼠睾丸NO、NOS和总抗氧化能力的干预作用

【目的】研究红景天提取物对应激雄性小鼠睾丸一氧化氮（NO）、一氧化氮合成酶（NOS）及总抗氧化能力（T-AOC）的作用。【方法】束缚应激诱发小鼠睾丸过氧化损伤,灌胃给与3个剂量的红景天提取物（2,1,0．5g／kg）,1次／d,15d后,断头处死,摘取睾丸匀浆,分别测定睾丸组织中NO含量、NOS活性及T-AOC。【结果】应激模型组小鼠睾丸组织中NO、NOS均有明显的升高（P〈0．01）,T-AOC显著降低（P〈0．001）。高、中、低剂量的红景天提取物可以显著升高应激小鼠睾丸组织的T-AOC,且中高、中剂量的红景天提取物能逆转因应激引起的小鼠睾丸组织NO含量和NOS活性的升高（P〈0．05）,但各组小鼠睾丸重量未见明显变化。【结论】红景天提取物对束缚诱发的小鼠睾丸过氧化状态具有一定的改善作用。     

两种热应激预处理对小鼠行为学的影响

【目的】研究两种不同方式的热应激预处理对小鼠行为学的影响。【方法】复制小鼠间歇性和连续性热应激预处理模型,将90只小鼠随机分为对照组、持续热应激组（HP）、间歇性热应激组（PHP）。称重并记录小鼠实验前后不同时间点的体重,分别采用穿梭实验法和斜板实验法,观察各组小鼠预处理后0、6、12、24、36h不同时间点学习记忆能力以及体力状况。【结果】（1）与对照组相比,热应激预处理组小鼠体重明显减轻（P〈0.05）。与连续性预处理组相比,间歇性预处理组在6h、12h时体重明显减轻（P〈0.05）;24h和36h时与对照组相比无差别（P〉0.05）。（2）穿梭实验结果表明：与对照组相比,预处理组在0h,6h时成绩明显较差（P〈0.05）。预处理20min组小鼠在24h时较对照组,成绩明显较差（P〈0.05）。（3）斜板实验结果表明：与对照组相比,间歇性预处理组在0h、6h时,爬坡角度明显降低（P〈O.05）;连续性预处理组6h爬坡角度明显降低（P〈0.05）。间歇性预处理组24h时,爬坡角度明显增高（P〈0.05）。【结论】热应激预处理对小鼠的学习记忆以及体力在一定时间内造成明显损伤,但是间歇性热应激预处理小鼠的学习记忆功能以及体力状况明显的提高。     

吡拉西坦氯化钠注射液治疗脑出血的临床疗效分析

【目的】探讨应用吡拉西坦氯化钠注射液治疗脑出血患者的临床效果。【方法】选择本院2010年8月至2012年8月间进行诊治的120例脑出血患者,将其随机分为两组,试验组的60例患者应用20％吡拉西坦氯化钠注射液进行治疗,每次滴注100mL快速输入,每6～8h一次,连续应用7d ;7d后运用常规滴注速度滴注7d。对照组60例患者,快速静脉滴注20％甘露醇125mL ,每6～8h一次,连续应用7d;所有患者均连续进行颅内压监护,并在治疗前、治疗后的d7及d14分别观察比较两组患者颅内压,血浆神经肽Y及神经功能缺损评分的改变情况。【结果】试验组与对照组患者治疗前颅内压两组相比较差异无显著性（P＞0．05）,经过药物治疗后,两组患者的颅内压较治疗前均明显降低,且治疗前后相比较差异有显著性（P＜0．05）。但两组之间颅内压及降低幅度相比较差异均无显著性（P＞0．05）。试验组与对照组患者治疗前两组神经功能缺损评分,神经肽相比较差异均无显著性（P＞0．05）,治疗后14d两组神经功能缺损评分,神经肽较治疗前明显下降,且治疗前后相比较差异均有显著性（P＜0．05）。试验组比对照组下降更明显,且两组之间相比较差异均有显著性（P ＜0．05）。【结论】脑出血患者运用吡拉西坦氯化钠注射液进行治疗可明显降低颅内压,改善患者的神经功能缺损评分,显著降低血浆神经肽Y水平。     

TZC对SD复合DU污染大鼠SS神经元的保护作用

【目的】探讨牛磺酸锌（taurine-zinc coordination compound，TZC）对贫铀（depleted Uranium，DU）污染复合睡眠剥夺（sleep deprivation，SD）大鼠皮层生长抑素（somatostatin，SS）阳性神经元的保护作用。【方法】Wistar大鼠贫铀颗粒气管灌注后3个月，采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型，观察大鼠睡眠剥夺72h后大脑皮层生长抑素阳性神经元变化情况，并以牛磺酸锌进行保护。【结果】光镜下NS组大鼠皮层SS阳性神经元均匀分布。NSSD组、DU组和DUSD组SS阳性神经元染色浅，尤以DUSD组为甚。DU＋TZC组SS阳性神经元染色较DU组深，DUSD＋TZC组与DUSD组比较也较深。DU组皮层SS阳性神经元数目比NS组明显减少（P〈0．05），NSSD与NS、DUSD组比DU组均明显减少（P〈0．05），DUSD＋TZC组与DU＋TZC组比较无明显差别（P〉0．05）。DUSD组阳性神经元数目比NSSD组明显减少（P〈0．05），而DUSD＋TZC组与NSSD组比较仍无明显差别（P〉0．05）。【结论】贫铀污染能引起皮层SS阳性神经元形态改变和数目减少，SD可以使这种效应加剧。牛磺酸锌可能通过影响大脑皮层SS阳性神经元保护大鼠受损的脑功能。     

谷氨酸转运体在体外培养大鼠皮质星形胶质细胞机械性损伤中的表达变化

【目的】研究机械性损伤后星形胶质细胞内谷氨酸转运体的表达变化，并探讨其在细胞损伤过程中可能的作用机理。【方法】采用免疫组化方法对培养的细胞进行鉴定，流式细胞术和Western Blotting定量谷氨酸转运体蛋白的表达改变。【结果】流式细胞术结果表明，机械性划伤12h和24h后，谷氨酸转运体（EAATl）蛋白表达均较对照组显著增加（P〈0．05），而损伤12h和24h组组间无显著差异（P〉0．05）；Western blotting显示，对照组、机械性划伤12h和24h组谷氨酸转运体（EAATl）蛋白表达吸光度（A）相对值为：0．21、0．44和0．46。与对照组比较，损伤后12h和24h星形胶质细胞EAATl的蛋白表达均明显升高（P〈0．05），损伤两组间表达无显著性差异（P〉0．05）。【结论】机械性损伤可导致星形胶质细胞内EAATl的表达明显升高，提示其可能在脑损伤的发生发展以及修复过程中起到了一定的作用。     

不同时间脑室注射BDNF对大鼠脑缺血再灌注损伤氧化应激及神经细胞凋亡的影响

目的：比较大鼠脑缺血再灌注（I／R）损伤前后不同时间脑室内注射外源性脑源性神经营养因子（BDNF）对脑缺血再灌注后氧化应激及神经细胞凋亡的影响．方法：采用大鼠大脑中动脉线栓法建立局灶性脑I／R损伤模型,分别于缺血前12,6h、缺血即刻（0）及再灌注6,12h经侧脑室注射0．5μgBDNF．观察指标为超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及脑皮层凋亡神经细胞,每组随机取一术侧大脑皮层行常规透射电镜标本制备,观察脑组织超微结构的改变．结果：与I／R组比较,BDNF侧脑室给药各组脑组织SOD活性明显增强,MDA含量明显降低,给药各组中脑皮层神经细胞凋亡指数均明显降低（P〈0．05或P〈0．01）;以BDNF缺血前12,6h给药组脑组织SOD活性较高、MDA含量以及神经细胞凋亡指数较低（P〈0．05或P〈0．01）．透射电镜观察,I／R组缺血侧脑皮层神经细胞染色质浓缩、集聚或边集化,部分崩解,胞质肿胀、扩张,线粒体肿胀,线粒体嵴断裂甚至消失．部分凋亡细胞裂解成小碎片,由膜结构包裹部分细胞核和细胞质而形成凋亡小体;而BDNF给药各组缺血侧脑皮层神经细胞超微结构损伤改变不大或仅有轻微改变,胞质相对比较均匀,染色质轻度聚集,核仁存在,线粒体结构基本正常或仅轻微改变．结论：不同时间脑室内注射BDNF对大鼠局灶性脑I／R损伤均有不同程度的保护作用,此作用可能与BDNF能够增加体内抗氧化物质SOD的活性并能抑制脑缺血再灌注后神经细胞凋亡等因素有关,其中以缺血前应用的脑保护效果较为明显．     

NOS和BDNF在糖尿病大鼠下丘脑外侧区的表达及其意义

[目的]探讨NOS和BDNF在糖尿病大鼠下丘脑外侧区的表达及其意义。[方法]腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）50mg／kg制作糖尿病大鼠模型，于成模后1月末以NADPH—d酶组化法观察糖尿病大鼠下丘脑外侧区（LH）NOS阳性神经元的表达，以免疫组化法观察糖尿病大鼠下丘脑外侧区（LH）BDNF阳性神经元的表达。[结果]糖尿病组大鼠下丘脑外侧区NOS及BDNF的表达均较正常组下降，P〈0．01，具有统计学意义。[结论]糖尿病大鼠下丘脑外侧区神经元呈退行性变化，这种变化跟糖尿病脑病的发生有着密切的相关。     

黄芪总苷和三七总皂苷配伍对小鼠缺血再灌注脑组织氧化应激的影响

目的：研究黄芪总苷（astragalosides,AST）和三七总皂苷（Panax notoginseng saponins,PNS）配伍对C57BL/6小鼠脑缺血再灌注早期脑组织氧化应激的影响。方法：80只C57BL/6小鼠随机分为假手术组,模型对照组,高剂量AST和PNS配伍组（AST 220 mg/kg加PNS 230 mg/kg,每天1次,灌胃给药）,中剂量AST和PNS配伍组（AST 110 mg/kg加PNS 115 mg/kg,每天1次,灌胃给药）,低剂量AST和PNS配伍组（AST 55 mg/kg加PNS 57.5 mg/kg,每天1次,灌胃给药）,AST组（110 mg/kg,每天1次,灌胃给药）,PNS组（115 mg/kg,每天1次,灌胃给药）及依达拉奉组（4 mg/kg,每天2次,腹腔注射）,连续治疗4 d。第4天给药后1 h,结扎双侧颈总动脉造成脑缺血20 min,然后再灌注60 min,取缺血脑组织制备组织匀浆,检测脑匀浆液丙二醛（malonaldehyde,MDA）、还原型谷胱甘肽（glutathione,GSH）、一氧化氮（nitric oxide,NO）含量和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）活性。采用2×2析因设计方差分析方法分析110 mg/kg AST与115 mg/kg PNS配伍是否具有交互作用。结果：与假手术组比较,模型组脑组织MDA、NO含量和NOS活性显著升高（P〈0.01）,SOD活性和GSH含量显著降低（P〈0.01）。与模型组比较,AST组MDA含量降低（P〈0.01）,SOD活性升高（P〈0.05）,GSH、NO含量和NOS活性无显著变化（P〉0.05）;PNS（115 mg/kg）组MDA、NO含量显著降低（P〈0.01）,而SOD、NOS活性和GSH含量无显著变化（P〉0.05）;依达拉奉组脑组织MDA、NO含量和NOS活性降低（P〈0.01,P〈0.05）,SOD活性升高（P〈0.05）,GSH含量无显著变化（P〉0.05）;高、中、低剂量AST和PNS配伍组MDA、NO含量和NOS活性降低（P〈0.01,P〈0.05）,SOD活性和GSH含量升高（P〈0.01,P〈0.05）。析因设计方差分析表明,AST（110 mg/kg）和PNS（115 mg/kg）配伍对MDA、GSH、NO含量和SOD、NOS活性的影响有交互作用（P〈0.01）。结论：AST和PNS配伍对脑缺血再灌注早期的氧化应激损伤具有抑制作用,AST（110 mg/kg）和PNS（115 mg/kg）配伍对脑缺血再灌注后的氧化应激损伤具有协同的作用。     

重组人脑利钠肽对急性前壁心肌梗死合并心力衰竭患者左心功能及远期左室重构的影响

【目的】研究静脉应用重组人脑利钠肽(rhBNP)对经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的急性心肌梗死合并心力衰竭患者左心功能和远期左室重构的影响。【方法】将60例首发急性前壁ST段抬高心肌梗死合并急性心力衰竭患者随机分为重组人脑利钠钛(rhBNP)治疗组和对照组,每组各30例患者。比较两组患者治疗24小时的心功能改善情况、呼吸困难程度、整体临床状况、尿量的变化。监测两组治疗前及治疗后24 h、48 h血浆NT-proBNP水平,以及治疗前及治疗后肾素、血管紧张素II、醛固酮水平。观察两组患者治疗后24 h、出院时及出院后6个月时心功能及左室重构变化。【结果】用药后24 h rhBNP组患者呼吸困难程度、尿量、尿量与入量的差值、EF值、Tei指数与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,治疗48h时,rhBNP组的血浆rhBNP、肾素、血管紧张素II及醛固酮水平下降更明显(P<0.05);两组患者好转出院时,左心室舒张末期容积(LVEDV)差异无显著性意义(P>0.05),而rhBNP组EF值及Tei指数较对照组明显升高(P<0.05);出院后6个月时,rhBNP组Tei指数、EF值较对照组仍明显升高(P<0.05),而rhBNP组LVEDV及△LVEDV%较对照组降低(P<0.05)。【结论】rhBNP能有效改善急性心肌梗死后心力衰竭患者的呼吸困难和临床状况,并且可以延缓远期心室重构,改善远期心功能。     

重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织腺苷酸环化酶活性的变化及银杏苦内酯B的影响

[目的]观察重症急性胰腺炎（SAP）大鼠胰腺组织腺苷酸环化酶（AC）活性的变化及银杏苦内酯BN52021）的影响。[方法]Wistar雄性大鼠随机分为阴性对照组（NC组）、SAP模型组（SAP）和BN52021治疗组（BN组）,每组按术后不同时相点（1、2、3、6、12、24h）分为6小组,用放射免疫的方法检测胰腺组织中AC活性的变化,同时对胰腺组织进行病理学观察和测定血清淀粉酶的变化。[结果]血清淀粉酶和病理学结果显示SAP大鼠制模成功,BN52021能降低SAP的血清淀粉酶和改善病理学变化;SAP组AC活性在2h,3h较Nc组显著升高（P〈0．05）;BN组AC活性在2、3、12h较NC组显著升高（P〈0．05）;在2h、3h较SAP组显著降低（P〈0．05）。[结论]SAP发生后,胰腺组织AC活性升高,可能通过第二信使途径完成细胞内信号转导,导致炎症反应延续并放大。BN52021通过降低SAP大鼠胰腺组织AC活性发挥治疗作用。     

白藜芦醇对阿尔茨海默病小鼠记忆能力及脑组织NOS和NO含量的影响

目的观察白藜芦醇（Res）对阿尔茨海默病（AD）小鼠记忆能力及脑组织一氧化氮合酶（NOS）和NO含量的影响。方法50只健康昆明小鼠随机分为5组每组10只：正常对照组、AD模型组、Res低、中、高剂量组。采用D一半乳糖联合氯化铝构建AD小鼠模型。Res干预各组在造模后每天分别灌胃Res22mg／kg、44mg／kg、88mg／kg,连续60d。跳台实验观察各组小鼠记忆能力;生化试剂盒检测脑组织中总NOS、诱导型NOS（iNOS）、结构型NOS（cNOS）活力和NO含量;免疫组化法（IHT）检测大脑皮层神经元型NOS（nNOS）表达。结果AD模型组较正常对照组小鼠忆能力下降,脑组织内总NOS和cNOS活力上升,nNOS和NO含量增加（P〈0．05）。与模型组比较,Res干预的各组小鼠较AD模型组小鼠记忆能力增强,脑组织内总NOS、cNOS活力下降,nNOS和NO含量降低（P〈0．05）。结论Res对AD小鼠记忆能力具有一定的改善作用,可降低脑组织内NOS和NO含量。     

急性心理应激对不同鼠种血浆Ghrelin水平的影响

【目的】探讨急性心理应激对不同鼠种血浆Ghrelin水平的影响。【方法】将WKY（WistarKyoto）及SPD（SpragueDawley）大鼠暴露于水中1h,分别于应激前及应激后采集大鼠血清。【结果】急性心理应激后SPD及WKY两鼠种血浆ACTH[（617．01±70．08）,（689．58±76．98）]及Ghrelin水平[（6．64±0．87）,（5．61±0．84）]较应激前ACTH[（363．14±58．53）,（403．06±68．77）]和Ghrelin[（3．56±0．62）,（3．40±0．43）]显著提高（P〈0．01,P〈0．01）,应激后SPD大鼠血浆ACTH含量低于WKY大鼠（P〈0．05）,Ghrelin水平明显高于WKY大鼠（P〈0．05）。【结论】急性心理应激可明显提高血Ghrelin水平,且SPD大鼠血浆Ghrelin含量显著高于WKY大鼠。