TGF-β1诱导的调节性T细胞体内输注延长小鼠皮肤移植物存活

目的 利用TGF-β1体外诱导naYve T细胞分化为凋节性T细胞(Treg),通过体内输注延长小鼠皮肤移植物存活时间,并研究其相关机制. 方法 根据诱导条件不同分为3组:对照组(加入IL-2培养的C57BL/6小鼠T细胞)、MLR组(即混合淋巴细胞反应组,经同种抗原刺激活化的C57BL/6小鼠T细胞)和TGF-β组(经同种抗原刺激活化的C57BL/6小鼠T细胞,同时加入5.0ng/ml TGF-β1诱导).利用FACS检测CD4+CD25+T细胞比例,并用RT-PCR检测Foxp3的表达水平.建立小鼠皮肤移植模型,并于第0、l、2和3天输注上述细胞,观察皮肤移植物存活时间.术后第9天,取部分受鼠行移植物病理检测,用FACS检测脾脏中THl、TH2和CD4+CD25+Treg比例,并用Alamar Blue法检测淋巴细胞增殖能力. 结果 TGF-β组中CD4+CD25+T细胞比例高于对照组和MLR组(P<0.05),且其高表达Foxp3.将培养的细胞输注给受鼠后发现,输注MLR组细胞的受鼠其移植物平均存活时间(mean survival time,MST)为(9.4±1.3)d,低于对照组(P<0.05);而输注TGF-13组细胞小鼠MST为(22.8±1.9)d,较对照组和MLR组明显延长(P<0.05).病理检测亦显示TGF-β组受鼠移植物结构完整,无明显淋巴细胞浸润.FACS结果显示TGF-β组小鼠体内TH1细胞(CD4+TIM-3+)比例低于对照组和MLR组(P0.05),但低于对照组(P<0.05);而且TGF-β组中CD4+CD25+Treg比例明显高于对照组和MLR组(P<0.05).用Alamar Blue法检测受鼠外周淋巴细胞增殖活性显示,TGF-β组受鼠淋巴细胞增殖能力被明显抑制,低于对照组(P<0.05). 结论 TGF-β1可诱导T细胞分化为具有抑制能力的Treg将诱导后的细胞进行过继输注可使小鼠体内CD4+CD25+Treg比例升高,同时抑制TH1和TH2细胞分化扩增,并使得外周淋巴细胞增殖能力减弱,从而延长小鼠皮肤移植物存活时间.     

EGCG对小鼠调节性T细胞的产生及细胞因子TGF-β1表达的影响

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对小鼠体内调节性T细胞(Treg)的产生及转化生长因子TGF-β1的表达和分泌的影响。方法:选择健康、雄性、体重相近的BALB/c小鼠40只,随机分为4组(n=10),设立不同剂量浓度的EGCG组(10、50、85 mg/kg)和对照组。EGCG组每天给予EGCG腹腔注射一次,连续注射3天,对照组每天给予等体积生理盐水腹腔注射一次,连续注射3天。采用流式细胞仪检测小鼠脾脏Treg细胞的产生。采用荧光定量PCR和ELISA方法分别检测小鼠脾脏细胞和外周血TGF-β1因子的表达和分泌水平。结果:与对照组相比较,EGCG处理组小鼠体内的Treg细胞的比例上升,TGF-β1的基因表达水平和蛋白分泌水平均明显增高,当EGCG剂量为85 mg/kg时,其促进作用最明显。结论:EGCG可促进小鼠体内的Treg细胞产生,增强TGF-β1表达和分泌。     

肝病患者血清TGF-β1检测的临床意义

本文对77例肝病患者进行了血清转化生长因子β1（TGF-β1）的检测及分析,现报道如下。     

TGF-β1诱导CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+调节性T细胞

目的 研究TGF-β1诱导CD4 CD25 调节性T细胞分化的能力及其相关机理.方法 ①利用丝裂霉素处理的Balb/C裸鼠脾细胞(同种抗原)刺激C57BL/6小鼠T细胞,同时给予TGF-β1予以干预(按TGF-β1剂量不同设立4组:对照组,低浓度组,中浓度组和高浓度组),共同培养5天后,用流式细胞仪检测CD4 CD25 T细胞比例;同时用RT-PCR检测培养细胞中Foxp3的表达水平.②在第一部分实验基础上,通过MACS分离获取C57BL/6小鼠CD4 CD25-T细胞,用同种抗原刺激后,给予TGF-β1干预,培养5 d后分离CD4 CD25 T细胞,利用混合淋巴细胞培养系统检测其抑制淋巴细胞增殖的能力.结果 T细胞经同种抗原刺激后,在中、高浓度TGF-β1诱导下CD4 CD25 T细胞比例均明显升高,Foxp3的表达水平也相应增加,与对照组相比有显著性差异(P＜0.05).TGF-β1可直接诱导CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 T细胞,转化后的CD4 CD25 T细胞可有效抑制淋巴细胞增殖.结论 TGF-β1可诱导CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 Treg,促进其表达Foxp3,并能够抑制淋巴细胞增殖.     

肝病患者血清TGF-β1水平及其临床意义

转化生长因子-β1（TGF-β1）是组织修复过程巾的重要因子，它能促进各种细胞外基质（ECM）如胶原蛋白、层粘连蛋白（LN）、透明质酸（HA）的表达并抑制这些蛋白的降解。为探讨TGF-β1含量对各种肝病的临床诊断和预后判断的意义，本文测定了173例肝病患者血清TGF-β1的含量，及血清HA、LN、C—Ⅳ含量，现将结果报道如下。     

人脑胶质瘤组织中转化生长因子β1表达与Treg浸润的关系

目的:检测胶质瘤组织中转化生长因子β1(TGF-β1)表达,并分析其与CD4+ FOXP3+ 调节性T细胞(Treg)浸润的关系,探讨Treg浸润的临床意义.方法:采用免疫组织化学双标记的方法检测135例胶质瘤组织(WHO I 18,WHO Ⅱ45,WHO Ⅲ53,WH0Ⅳ19)、15例正常脑组织中TGF-β1、Tre...     

Smad7过度表达抑制3T3细胞增殖和TGF-β1基因表达

研究Smad7过度表达对TGF β1基因表达的调控和对 3T3细胞增殖的影响。实验将Smad7质粒 ,通过脂质体介导转染NIH3T3细胞 ,应用RT PCR方法鉴定转染结果和检测TGF β1mRNA的表达 ,以及用免疫细胞化学检测TGF β1蛋白的表达情况 ,并观察基因转染对细胞增殖的影响。结果显示转染Smad7后 ,NIH3T3细胞中TGF β1mRNA的表达显著减少 (P <0 0 5 ) ,TGF β1蛋白的表达下降 ,细胞增殖明显减缓 (P <0 0 5 )。提示Smad7过度表达能够抑制 3T3细胞的增殖和TGF β1基因的表达 ,可以通过阻断TGF β细胞内信号传导来调控TGF β1的生物学行为。     

TGF-β1对单核细胞来源的树突状细胞表型和功能的影响

目的:研究 TGF-β1对树突状细胞(DC)的分化、成熟及功能影响.方法:应用100万U/L粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4)7 d诱导单核细胞分化为不成熟DC,加入终浓度20万U/L的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)48 h后获得成熟DC的体外模型,将TGF-β1加入该模型中,用流式细胞术分别检测DC分化,成熟阶段细胞表型的变化,应用ELISA检测DC IL-12的分泌水平,应用MTT法检测DC刺激同种异体T细胞增殖的能力.结果:TGF-β1对不成熟DC的特征性分子 CD1a的表达无明显影响,但在诱导DC的成熟阶段,TGF-β1明显抑制CD40、CD86及CD83上调.此外,TGF-β1显著减少DC IL-12的分泌,显著抑制DC刺激同种异体T 细胞增殖的能力.结论:DC是TGF-β1免疫抑制活性的靶细胞.TGF-β1不影响DC的分化,但抑制DC的成熟和细胞因子的分泌,降低DC刺激同种异体反应T细胞增殖的能力.     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17细胞/调节性T细胞比值变化的意义

目的测定慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)和CD4+IL-17+T细胞(Th17细胞)频率及其相关细胞因子的变化,并探讨Th17/Treg平衡在CHB发病过程中的作用。方法选取CHB住院患者(CHB组)60例,其中35例轻中度CHB患者(CHB-LM),25例慢性重型肝炎患者(CSHB),同时选取21位健康体检者作为正常对照组(HC)。流式细胞术检测外周血中Th17和Treg的细胞频数,双抗体夹心ELISA检测血清中IL-17、IL-23、IL-10及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平。结果与HC组相比,CHB患者外周血Th17细胞频率及其相关细胞因子IL-17、IL-23浓度明显增高,差异有统计学意义(P0.05);Treg频率及其相关细胞因子IL-10及TGF-β1浓度明显增高。Th17/Treg比值变化显示,与HC组相比,在CHB组中该比例明显升高,具有显著性差异,且与CHSB组相比,在CHB-LM组中该比值明显降低。结论 Th17细胞/Treg的失衡是造成慢性乙型肝炎病程演变的重要因素,检测Th17细胞/Treg比值变化对疾病发展的早期预测有一定价值。     

慢性乙型肝炎患者外周血Th17细胞/调节性T细胞比值变化的意义北大核心CSCD

目的测定慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)和CD4+IL-17+T细胞(Th17细胞)频率及其相关细胞因子的变化,并探讨Th17/Treg平衡在CHB发病过程中的作用。方法选取CHB住院患者(CHB组)60例,其中35例轻中度CHB患者(CHB-LM),25例慢性重型肝炎患者(CSHB),同时选取21位健康体检者作为正常对照组(HC)。流式细胞术检测外周血中Th17和Treg的细胞频数,双抗体夹心ELISA检测血清中IL-17、IL-23、IL-10及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达水平。结果与HC组相比,CHB患者外周血Th17细胞频率及其相关细胞因子IL-17、IL-23浓度明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);Treg频率及其相关细胞因子IL-10及TGF-β1浓度明显增高。Th17/Treg比值变化显示,与HC组相比,在CHB组中该比例明显升高,具有显著性差异,且与CHSB组相比,在CHB-LM组中该比值明显降低。结论 Th17细胞/Treg的失衡是造成慢性乙型肝炎病程演变的重要因素,检测Th17细胞/Treg比值变化对疾病发展的早期预测有一定价值。     

广州汉族葡萄膜炎患者TGF-β1＋869T／C基因多态性

目的探讨转化生长因子（TGF）-β1＋869T／C基因多态性与葡萄膜炎病的关系。方法运用多聚酶链反应技术检测广州汉族75例葡萄膜炎及140例正常人TGF-β1＋869T／C基因多态性的分布。结果葡萄膜炎组TGF-β1＋869T／C基因多态性基因型频率（％）分别为38．67、48．00、13．00,T、C基因频率分别为0．6267和0．3733,而对照组TGF-β1＋869T／C基因型频率（％）分别为38．57、48．57、12．86,对照组TGF-β1＋869C,T、C基因频率分别为0．6286和0．3714;TGF-β1＋869T／C基因多态性各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无统计学意义（xz=0．16,P〉0．05）。结论TGF[31．509C／T基因多态性与葡萄膜炎无明显相关。     

白血病细胞TGF-β1含量减少及外源性TGF-β1基因对HL-60细胞的作用

目的：研究白血病细胞是否存在转化生长因子β1（TGF-β1）量的异常以及这种异常在白血病发病机制中的可能作用。 方法： 应用ELISA法检测白血病细胞株和原代白血病细胞培养上清TGF-β1水平，进一步应用脂质体介导基因转移法将TGF-β1基因转染HL-60细胞，采用有限稀释法及G418筛选得到抗性细胞，应用RT-PCR、白血病细胞集落培养、裸鼠移植瘤成瘤试验、片段化DNA分析、流式细胞术检测HL-60细胞内TGF-β1、bcl-2、端粒酶反转录酶（hTERT）mRNA的表达变化等方法了解外源性TGF-β1基因对HL-60细胞体内外增殖、凋亡的影响。 结果： 白血病细胞株和原代白血病细胞培养上清TGF-β1水平明显低于正常对照组(P<0.01)，转染TGF-β1基因后，HL-60细胞内TGF-β1 mRNA表达上调，bcl-2、hTERT mRNA表达下调，细胞体外增殖受抑制，集落形成抑制率达78.3%，裸鼠移植瘤生长受抑制，荷瘤鼠生存期延长，细胞呈现凋亡特征性的梯形条带，凋亡比例达73.4%。 结论： 内源性TGF-β1水平降低是白血病的发病机制之一,外源性TGF-β1基因能够抑制HL-60细胞增殖，诱导细胞凋亡,该基因通过下调bcl-2、hTERT mRNA的表达而发挥作用。     

妊高征胎盘滋养细胞中TGF-β1mRNA的表达及意义

目的检测滋养细胞中TGF-β1mRNA表达水平,评估TGF-β1 在妊高征中的作用.方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常妊娠胎盘滋养细胞7例、重度妊高征胎盘滋养细胞7例中TGF-β1mRNA表达水平,并通过紫外凝胶图像分析进行定量检测.结果与正常滋养细胞比较,妊高征滋养细胞TGF-β1mRNA的表达强度显著增强(t＝-4.663,P＜0.05).结论妊高征胎盘滋养细胞表达TGF-β1增多可能抑制其侵润能力.     

IgA肾病患者外周血γδT细胞分泌TGF-β1的功能

目的：研究IgA肾病患者外周血γδT细胞分泌TGF-β1的功能。方法：用流式细胞仪分析外周血γδT细胞比率并检测血清IgA的水平，以抗TCRγδ单克隆抗体（mAb）固相法，体外选择性地扩增γδT细胞住体外培养的条件下，以抗CD3抗体刺激48h后．用ELISA法测定培养体系中TGF-β1的水平。结果：IgA肾病患暂外周血γδT细胞的比例升高，并与血清IgA的水平呈正相关。用抗TCRγδmAb固相法能获得高纯度的γδT细胞。经抗CD3抗体刺激的IgA肾病患者的γδT分泌TGF-β1的量比正常对照组明显升高。结论：IgA肾病患者的γδT细胞可通过大量分泌TGF-β1参与该病的发生、发展。     

移植免疫耐受中调节性T细胞的研究进展

调节性T细胞（Tr）在诱导和维持移植免疫耐受过程中的作用越来越受到人们的重视。根据不同的细胞表型和功能已将Tr分为若干亚类，首先是胸腺内T细胞发育过程中自然产生的CD4^＋T细胞亚群，能够构成性表达IL-2受体的仅链（CD25）存在于外周，体内体外均可抑制效应性T细胞的增殖和功能；其次是产生于正常的免疫应答过程中的诱导性Tr亚群，包括Tr1和Th3通过分泌细胞因子如IL-10和TGF—β发挥抑制作用。除此之外，也有报道CD8^＋Tr、双阴性T（DNT）细胞和NKT细胞在移植耐受的不同模型中亦发挥重要作用。因而研究各种Tr亚群的生物学特征、调节机制及其在移植耐受中的作用非常必要。     

肝硬化患者血清TGF-β1和T淋巴细胞亚群检测的临床意义

目的：探讨了肝硬化患行血清TGF-β1和T淋巴细胞眶群的水平。方法：应用放免法测定64例肝硬化患者血清TGF-β1水平,单克隆抗体法测定T淋巴细胞亚群水平,并以35名正常健康人作比较。结果：肝硬化患者血清TGF-β1和CD8水平显著高于正常人组（P〈0．01）而CD3、CD4、CD4／CD8水平显著低于正常人组（P〈0．01）。相关分析显示,血清TGF-β1与CIMT细胞、CIM／CD8呈负相关,与CD8T细胞呈正相关。结论：肝硬化患者TGF-β1水平明显升高,而细胞免疫功能低下。TGF-β1对细胞免疫功能的抑制作用是肝硬化患者细胞免疫功能低下的原因之一。     

慢性乙型肝炎患者血清转化生长因子β1与T细胞亚群的关系

慢性乙型肝炎、肝硬化患者细胞免疫功能低下是乙肝病毒不能被清除体外的主要原因之一。我们采用酶联免疫吸附试验测定 76例慢性乙肝、肝硬化患者(其中慢性轻度 2 0例、中度 2 0例、重度18例、肝硬化 18例 )血清TGF β1和T淋巴细胞亚群 (采用抗体致敏的红细胞花环试验 )。旨在探讨TGF β1对慢性乙型肝炎细胞免疫功能的作用。组间资料比较采用方差分析、q检验 ,各指标间相关分析采用直线相关分析。结果表明 :(1)慢性乙肝轻、中、重度及肝硬化患者血清TGF β1水平(14 4 34± 5 7 1、349 5 3± 10 7 6 7、5 0 8 33± 133 2 7、5 79 38± 2 …     

肿瘤患者胸/腹水和外周血中TCR Vβ亚家族表达及调节性T细胞亚群的研究

目的:探讨肿瘤患者胸/腹水中肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)和外周血T细胞中T细胞受体(TCR)Vβ亚家族的表达变化情况、CD4/CD8细胞比例变化和Treg细胞的分布情况,分析肿瘤患者的免疫状态。方法:分离11例肿瘤患者胸/腹水和外周血以及4例健康人外周血的T细胞,采用流式方法检测Vβ24个亚家族及CD3、CD4、CD8、CD25、CD127的表达情况,统计分析T细胞中Vβ24个亚家族、Treg细胞的特点。结果:TCR Vβ亚家族的表达在肿瘤患者胸/腹水TIL中与血液淋巴细胞中存在着显著差异,其中肺癌患者(4/5)TIL中TCR Vβ8,结肠癌患者(3/4)TIL中TCR Vβ2等亚家族显著高表达;11例肿瘤患者胸/腹水样本中Treg的比例均比外周血高(P<0.05),其中5例肺癌患者胸腹水中CD8+T细胞比例降低。结论:肿瘤患者胸/腹水中的淋巴细胞TCR Vβ亚家族表达与外周血存在差异,表明肿瘤患者体内淋巴细胞发生了明显的优势取用和定向趋化。此外肿瘤微环境可能影响了TIL中CD4+细胞的分化导致胸腹水中Treg细胞的比例升高,同时伴随着CD8+T比例的下降,并可能因此影响到TIL中TCR Vβ亚家族的优势取用情况,且导致免疫耐受。     

八珍汤对TGF-β1抑制的T淋巴细胞增殖及其活化影响

目的:研究八珍汤对TGF-β1抑制下人T淋巴细胞的增殖及活化的影响.方法:以正常人外周血来源的T淋巴细胞为研究对象, 设对照组、 PHA组、 PHA+八珍汤组、 PHA+TGF-β1组、 PHA+TGF-β1组+八珍汤组.以MTT法检测八珍汤对TGF-β1抑制的T淋巴细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)检测八珍汤对TGF-β1抑制的T淋巴细胞活化的影响及对CD4+CD25+调节性T淋巴细胞的数量的影响;ELISA法检测八珍汤对TGF-β1抑制的T淋巴细胞分泌IFN-γ、 IL-2的影响.结果:八珍汤可以使TGF-β1抑制的T淋巴细胞的增殖率回升(P<0.01), 但仍低于对照组(P<0.01), 并随TGF-β1作用时间的延长, 恢复难度增加.八珍汤可以使T淋巴细胞活化率增加, TGF-β1+八珍汤组与TGF-β1组的活化标志CD69表达有统计学差异(P<0.01);八珍汤能使CD4+CD25+调节性T淋巴细胞的比例降低(P<0.01);能使T淋巴细胞分泌IFN-γ、 IL-2的能力恢复(P<0.01), 但都未能恢复到TGF-β1抑制前的水平, 明显低于PHA组水平(P<0.01).结论:八珍汤对TGF-β1抑制的T淋巴细胞增殖率、 T淋巴细胞的活化、 CD4+CD25+调节性T细胞比例、 IFN-γ、 IL-2的分泌水平都有一定的恢复作用.     

TGF-β诱导猪CD4+ T细胞来源的foxp3high调节性T细胞

目的:应用TGF-β2诱导猪CD4 T细胞,分析其细胞表型,并鉴定其免疫生物学特性。方法:用磁珠阳性分选的方法从健康猪外周血淋巴细胞中获取CD4 T细胞,应用TGF-β2诱导培养、扩增CD4 T细胞,监测其细胞表型和foxp3表达,采用混合淋巴细胞培养鉴定其免疫生物学特性。结果:TGF-β2能够诱导CD4 T细胞高表达foxp3,诱导扩增的细胞能抑制同基因CD4 CD25-T细胞的活化,具有免疫抑制功能。结论:TGF-β2能够诱导CD4 T细胞成为具有与天然CD4 CD25 调节性T细胞相似抑制活性的细胞。