Shh在大鼠牙胚发育过程中的表达

目的 :通过检测Shh(SonicHedgehog)在大鼠牙胚发育不同时期的表达 ,探讨其在牙齿发育过程中的作用。方法 :采用免疫组化方法 ,观察大鼠牙齿发育各阶段标本中Shh的表达。结果 :大鼠牙齿发育早期 ,Shh表达于口腔上皮和牙上皮 ;帽状期表达于成釉器 ;钟状期 ,成釉细胞和成牙本质细胞表达阳性。结论 :Shh在牙齿发育过程中的表达有时空特异性 ,提示它参与牙釉质和牙本质的形成     

新基因mcpr1在小鼠牙胚发育中的时空表达和意义

目的:探讨mcpr1在牙胚发生过程中的可能作用。方法:采用免疫组化LsAB法观察MCPR1在小鼠牙胚发育各个时期的表达分布及其变化情况。结果:MCPR1在小鼠牙胚各个时期均有表达,但各期分布模式有所不同,帽状期开始在成釉器上皮细胞表达,在釉结节内亦呈现强阳性表达,在分化成熟的成牙本质细胞及成釉细胞内呈现出强阳性表达。结论:mcpr1可能通过上皮-间充质之间的信号传递及相关基因的相互调控,参与成釉器的成熟及牙胚的发育。     

转化生长因子β2 mRNA在小鼠磨牙牙胚发育过程中表达的研究

目的：探讨转化生长因子β2（transforminggrowthfactor-β2，TGFβ2）mRNA在小鼠磨牙牙胚发育过程中的表达及其意义。方法：制备小鼠磨牙各发育阶段标本，用原位杂交分析TGFβ2mRNA在牙胚中的表达与分布。结果：TGFβ2mRNA在小鼠磨牙牙胚不同发育阶段呈时间一空间特异性模式表达。结论：TGFβ2mRNA在牙形态发生过程中可能通过自分泌和旁分泌机制协同调控上皮一间充质相互作用及成牙本质细胞和成釉细胞的分化。     

Smad1在人牙胚发育过程中的表达变化

观察骨形成蛋白特异的细胞内信号转导分子Ｓｍａｄ１在人牙胚发育过程中的表达变化,探讨Ｓｍａｄ１在牙齿发育过程中的作用,方法制备人牙发育各期标本,免疫组化方法观察Ｓｍａｄ１在人牙胚发育过程中的表达情况。结果：Ｓｍａｄ１在牙胚发育的不同时期均见不同的时表达模式。     

同源盒基因Msx-1、Msx-2和Dlx-2在小鼠下颌第一磨牙发育阶段的表达

目的 观察同源盒基因Msx—1、Msx-2和Dlx-2 mRNA在小鼠下颌第一磨牙发育阶段的表达。方法 取胎龄E11～E18和新生P1～P3小鼠的头或下颌，制备5μm连续冠状切片。体外转录合成地高辛标记的Msx—1、Msx-2和Dlx-2 RNA探针。原位杂交后观察Msx—1、Msx—2和Dlx—2在小鼠下颌第一磨牙中的表达。结果 在牙胚发育过程中，Msx—1转录信号始终只在间质细胞中观察到，在上皮细胞中呈阴性。Msx-2和Dlx-2在牙源性上皮和间质中均表达，在磨牙发育起始期二者表达相似，但在随后的牙胚发育过程中，它们出现不同的表达特征。结论 牙胚发育过程中，Msx—1、Msx-2和Dlx-2有不同的表达特征，可能共同参与调控上皮和间质问的相互作用。     

表皮生长因子受体在小鼠磨牙牙胚发育过程中的表达及其生物学意义

目的:探讨表皮生长因子受体在小鼠磨牙牙胚发育过程中的生物学作用。方法:用免疫组织化学检测表皮生长因子受体(EGFR)在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育过程中的定位。结果:证实EGFR在鼠牙胚不同发育阶段呈时间-空间特异性分布模式。EGFR特别地在细胞增殖活跃的部位强染,在形态发生和分化晚期染色减弱。结论:EGF及其受体可能在调控蕾状期和帽状期形态发生的上皮-间充质相互作用中以旁分泌模式起作用。     

Runx2/cbfa1在人牙胚发育过程中的表达

观察核心因子Runx2/cbfa1在人牙胚发育过程中的表达,探讨cbfa1在牙齿发育过程中的作用。方法:制备人牙胚发育各期标本,免疫荧光法观察cbfa1在人牙胚发育过程中的表达情况。结果:在牙胚发育的不同时期均可见不同的时空表达模式。蕾状期表达比较广泛;帽状期内外釉上皮细胞和牙囊中呈强阳性表达,中间层也为强阳性,牙乳头为弱阳性;钟状早期,前成牙本质细胞处有强阳性表达;钟状中后期,成釉细胞为强阳性,成牙本质细胞为阴性,而牙囊部位仍为强阳性。结论:Runx2/cbfa1转录因子在人牙胚整个发育过程中的表达状况,提示该因子可能在牙胚各期的发育起一定作用,参与了各种成牙相关细胞的分化和硬组织的形成。     

跨膜蛋白Syndecan-1在不同发育时期小鼠磨牙组织中的表达

目的以小鼠磨牙为发育模型,研究其不同发育时期跨膜蛋白Syndecan- 1的表达特点,进而分析Syndecan-1在牙齿发育中的作用。方法取不同胎龄的胎鼠,制作其下颌第一磨牙的切片,进行免疫荧光染色,并在荧光显微镜下观察Syndecan- 1的表达情况。结果Syndecan- 1的表达随牙胚发育的时期不同而变化：蕾状期时在牙源性上皮和间充质中有弱的阳性分布,帽状期时成釉器上皮阳性表达减弱,而牙乳头及周围的间充质的阳性反应明显增强,钟状期时成釉器上皮又呈阳性表达,并以在中间细胞层的反应更为强烈,而牙乳头间充质的染色则很弱,同时前成釉细胞以及下方的成牙本质细胞的顶端也呈Syndecan- 1的阳性表达。结论Syndecan- 1参与了成釉器和牙乳头的发育和分化过程的调节,并与牙胚细胞的增殖以及成釉细胞和成牙本质细胞的分化相关。     

Barx1与Wnt-1在大鼠磨牙胚发育的时空表达及意义

目的 探讨Barx1、Wnt-1在SD大鼠磨牙胚发育过程中的时空表达及其在牙齿发育过程中的作用.方法 制备SD大鼠磨牙发育各期标本,免疫组织化学检测Barx1、Wnt-1、β-catenin的表达情况.结果 Barx1在帽状期开始表达于牙乳头、牙囊,在内釉上皮、星网状层中有少量表达;在钟状形态发生期广泛表达于内釉上皮、星网状层、中间层、牙乳头,牙囊及外釉层也有少量表达;钟状分化期在前成釉细胞、中间层、前牙本质细胞、牙乳头有表达;钟状分泌期主要在成釉细胞、星网层中表达,牙乳头、中间层、成牙本质细胞表达减弱.Wnt-1和β-catenin在蕾状期强表达于牙板、牙蕾上皮;在帽状期主要表达于牙板上皮、内釉上皮、星网状层,少量表达于外釉上皮、牙乳头、牙囊;钟状期后在各部分表达都逐渐减弱,Wnt-1与β-catenin的表达量正相关(r＝0.4332,P<0.001).结论 Barx1、Wnt-1、β-catenin在SD大鼠磨牙胚发育的不同阶段和不同的牙胚组织细胞间均存在差异,提示其在磨牙胚的增殖、分化过程中起着各自不同的作用.     

Shh在鼠磨牙牙胚发育晚期的基因表达

目的：观察信号分子Sonic hedgehog(Shh)在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育晚期的基因表达，探讨其在成釉细胞、成牙本质细胞分化中的作用。方法：制备昆明小鼠磨牙牙胚发育晚期(E16．5—P1．5)标本，用原位杂交法分析Shh mRNA在牙胚中的表达和分布。结果：Shh mRNA在牙胚发育晚期的前成釉细胞和中间层细胞呈阳性表达，在成牙本质细胞层表达较弱。结论：在牙胚发育晚期，Shh可能通过自分泌途径和旁分泌途径，参与了成釉细胞和成牙本质细胞分化。     

Shh及其受体Ptc1、Ptc2在鼠帽状期磨牙的基因表达

目的 观察信号分子Sonic Hedgehog(Shh)及其受体Ptcl、Ptc2在小鼠下颌第一磨牙帽状期的基因表达，以探讨Shh信号路径在牙胚形态发育早期的作用。方法 制备昆明小鼠磨牙形态发育早期标本(E10．5～E15．5)，常规HE染色观察组织形态。免疫组化SP法对增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)进行定位研究。原位杂交法分析Shh、Ptcl、Ptc2 mRNA在牙胚中的表达与分布。结果 E14．5，内、外釉上皮，星网状层及牙乳头细胞PCNA阳性，大部分釉结细胞PCNA阴性，少量釉结细胞PCNA阳性。Shh、Ptcl、Ptc2 mRNA在内、外釉上皮、星网状层及釉结中均有表达。结论 在帽状期，信号分子Shh可能经自分泌或旁分泌途径作用于釉结以外的上皮和间充质，促进其增殖。     

Expression of neural cell-adhesion molecule mRNA during mouse molar tooth development

This study employed in situ hybridisation using a probe recognising all isoforms of the molecule. Expression of the molecule in tooth germs started at embryonic day 13, when they were at the bud stage. Both inner cells of the epithelial bud and peripheral cells of the dental mesenchyme were positive. At the cap stage, positive cells were found in the inner part of the enamel organ but only in a limited area near the outer enamel epithelium. In the mesenchyme at the cap stage, expression was weak in the dental papilla and strong in the follicle. From the bell stage onward, epithelial cells in the enamel organ were negative except for the cells of the stratum intermedium, which were transiently positive at early and late bell stages. In the dental papilla, expression had mostly ceased during and after the bell stage, although transient expression was found in cuspal areas at the early bell stage. The dental follicle strongly expressed neural cell-adhesion molecule (NCAM) to the end of the experimental period, at post-natal day 4. In contrast to the first molar at its earliest stage of appearance, in which both the thickened epithelium and surrounding mesenchyme were negative for the expression of the molecule, the second molar appeared as a combination of extending epithelial thickenings and mesenchymal cells strongly positive for its expression. This study newly identifies the dental papilla and the stratum intermedium as NCAM-expressing sites.     

Expression of transforming growth factor-beta 1 mRNA during mouse molar morphogenesis]

OBJECTIVE: To investigate the temporal and spatial expression and localization of transforming growth factor-beta 1 mRNA during mouse molar morphogenesis. METHODS: The distribution pattern of TGF-beta 1 mRNA was analysed on 5 microns serial sections of paraformaldehyde-fixed and paraffin-embedded embryonic mouse heads or mandibles using in situ hybridization. RESULTS: The results show that TGF-beta 1 mRNA was expressed during mouse molar morphogenesis in a temporally and spatially regulated fashion. Local expression of TGF-beta 1 mRNA in the dental epithelium at bud-staged (E13) and cap-staged (E15) teeth were observed. During bell stage (E16-18), TGF-beta 1 mRNA was very abundant in the ameloblast layer and dental papilla cells. The expression of TGF-beta 1 was increased in the layer of odontoblast and ameloblast with the differentiation of these cells. CONCLUSIONS: These results suggest that TGF-beta 1 may have an important role in tooth morphogenesis, and TGF-beta 1 acts as a paracrine and autoinducing factor.     

口腔鳞癌中Shh/Gli1的表达及其临床生物学意义

目的：明确Hedgehog信号通路关键分子Shh及Gli1在口腔鳞癌中的表达情况,并初步探讨其与口腔鳞癌临床生物学的关系及对预后的影响。方法：采用免疫组织化学方法分别检测35例正常口腔黏膜及35例口腔鳞癌中Shh和Gli1的表达及细胞内定位情况。采用SPSS11.0软件包对Shh、Gli1的表达与口腔鳞癌患者的各项临床病理参数进行非参数统计分析,应用生存表法分析Shh及Gli1的表达水平与口腔鳞癌患者预后的关系。结果：Shh及Gli1在35例正常黏膜中均无表达,在口腔鳞癌组织中Shh的阳性率为60%,Gli1胞质、胞核阳性率分别为54.3%及42.9%,与正常黏膜相比差异显著（P〈0.05）。非参数分析显示,Shh的表达水平与口腔鳞癌患者的肿瘤大小及临床分期显著相关（P〈0.05）;生存分析表明,Shh的表达水平与口腔鳞癌患者预后相关,高表达的口腔鳞癌患者预后较差（P〈0.05）。Gli1的表达水平与口腔鳞癌患者预后不相关。结论：Hedgehog信号通路的主要配体Shh及核转录因子Gli1在口腔鳞癌中有不同程度的表达,其中Shh的表达水平与肿瘤大小、临床分期及患者预后明显相关,提示Hedgehog信号通路的异常激活在口腔鳞癌中发挥一定的作用。     

Expression of the Hedgehog antagonists Rab23 and Slimb/betaTrCP during mouse tooth development

The sonic hedgehog signalling peptide has been demonstrated to play an important role in the growth and patterning of several organs including the tooth. Inappropriate activation of Shh signalling in the embryo causes various patterning defects and complex regulation of this pathway is important during normal development. A growing list of diverse antagonists have been identified that restrict Shh signalling in the embryo, however, only Ptc1, Gas1 and Hip1 have been studied during tooth development. We have examined the expression pattern of the putative antagonists Rab23 and Slimb/betaTrCP during early murine odontogenesis and find that these molecules are expressed in the developing tooth. Interestingly, Rab23 demonstrates contrasting expression domains in the incisor and molar dentition during the cap stage, being restricted to the mesenchymal compartment of molar teeth and the epithelium of the enamel knot in incisor teeth. These findings provide the first evidence of distinct regulatory pathways for Shh in teeth of different classes.     

DMP1、Runx2在小鼠下颌第一磨牙萌出过程中的免疫学定位

目的 研究小鼠下颌第一磨牙萌出过程中牙本质基质蛋白1（DMP1）和Runt相关转录因子2（RUNX2）的表达, 并探索其表达与牙萌出之间的关系。 方法 分离出生后1 d至14 d小鼠的下颌骨,连续切片,偶氮卡红苯胺蓝染色显示磨牙萌出过程骨胶原形成情况,切片原位杂交法分析DMP1及RUNX2 mRNA在牙齿及周围组织的表达与分布,免疫组化法显示DMP1和RUNX2蛋白的表达与分布。结果 冠方骨组织中骨胶原形成在P5 d出现高峰,以后呈逐渐减少的趋势;根方骨胶原形成在整个萌出过程中一直呈活跃状态,在P9 d出现高峰。DMP1表达越丰富,骨胶原形成越多,成骨活动越活跃。结论 下颌第一磨牙萌出过程中,根方成骨活动一直很活跃,DMP1的表达与根方成骨活动参与了小鼠第一磨牙的萌出过程。     

核心结合因子a1在小鼠牙齿发育过程中的表达

目的：观察Cbfal蛋白在小鼠牙胚发育过程中的表达情况。方法：用自制的Cbfal多克隆抗体，采用免疫组化染色观察其时空表达特性。结果：Cbfal蛋白在帽状期牙胚中表达较广泛，在钟状早、中期牙胚表达于内釉细胞、成釉细胞以及紧靠成牙本质细胞层的牙乳头细胞，而在钟状晚期，Cbfal在牙乳头表达为阴性，成牙本质细胞层弱阳性，成釉细胞为阳性或强阳性。结论：Cbfal可能在小鼠牙胚发育，尤其是在成牙本质细胞和成釉细胞分化过程中具有重要作用。