干化学与赖氏两种检测ALT方法直线回归方程的建立

为了探讨干化学法和赖氏法检测 AL T两者之间的关系 ,作者通过检测不同 AL T标本 ,利用 Excel进行快速回归分析 ,建立了直线回归方程 ,赖氏法 AL T2 5卡门单位的临界值相当于干化学法的 4 3U/ L,这为街头用干化学法初筛 AL T的判断标准 ,提供可靠依据 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　无偿献血者 AL T不同值的血液标本 16份。1.2　试剂和仪器　 Reflotron快速全血生化分析仪及试纸条(德国 BM公司 ) ;AL T赖氏法试剂盒 (上海生物制品研究所 ) ;RSP2 0 0全自动加样器 (瑞士 Tecan集团 ) ;BEP 全自动酶标分析系统 (德国 Beh…     

赖氏法测定血清ALT/GPT最佳标准曲线选择和计算

目的以ALT/GPT为例,探讨最佳标准曲线的选择和计算。方法赖氏法测定ALT/GPT标准系列浓度的吸光度A值,并进行回归方程和相关系数的计算。结果线性回归(y=a bx)、r=0.949;对数回归(y=a blnx)、r=0.869;指数回归(y=a×ebx)、r=0.999;幂回归(y=a×xb)、r=0.973。结论通过线性回归、非线性回归方程和相关系数计算得出r=0.990以上,y=a×ebx,为最佳标准曲线。     

全自动酶免分析系统定量检测ALT的应用

手工赖氏试管法定量 AL T,首先要定期制定标准曲线 ,然后按标准曲线进行计算 ,手工计算时要减去空白管 ,费工费时。因此 ,我们利用全自动酶免分析系统 ,采用现有 Au S.L ab2 .0软件读板 ,建立了微板赖氏定量方法 ,以不同量的丙酮酸为标准 ,每次试验仪器均可自动建立标准曲线 ,然后仪器自动给出各样品的卡门单位 ,现报告如下。1　对象和方法1.1　对象　郑州市无偿献血者。1.2　试剂及厂家　 AL T赖氏法试剂盒 (上海生物制品研究所 ) ;96微孔平底板 (丹麦 Nunc公司 )。1.3　仪器及厂家　RSP2 0 0全自动加样器 (瑞士 Tecan集团 ) ;BEP (…     

火箭电泳法测PA二种回归方式的比较

火箭电泳测定法具有不需特殊仪器,有较高的灵敏度和准确度等优点,但用直线回归的基本方程(y=a+bx)或直接作图,结果不够理想,一些低值标本常出现负值。为此在测定血清前白蛋白(PA)     

RIA标准曲线处理模式选择

标准曲线是放射免疫测定法 ( RIA)质量控制的关键 ,它直接反映了测定方法的灵敏度、精密度及特异性等指标 [1 ]。影响标准曲线的因素很多 ,笔者以 AFP测定为例 ,阐述了 RIA标准曲线数据处理模式的重要性及必要性。1　材料及方法1 .1　试剂　 AFP放免测定试剂盒 ( 3V公司 )。1 .2　仪器　 GC-30 0 γ放射免疫计数器 (中佳公司 ) ,该仪器可提供五种标准曲线数据处理模式 [2 ]。折线函数　 Y=ai+ bi X　 i=n-1四参数　 Y=( a+ b) /[1 + ( X/C) d]+ b样条函数　Y=ai+ bi( X-Xi) + ci( X-Xi) 2 + di( X-Xi) 3曲线回归　Y=a+ b X+ c X…     

自动化酶免分析系统对ALT含量的检测分析

对献血者丙氨酸氨基转移酶 (AL T)的检测 ,对于可处于肝炎病毒感染的窗口期患者具有一定意义 [1 ]。传统的赖氏法检测(AL T)多在试管中进行反应 ,虽然结果可靠 [2 ] ,但完全由手工操作 ,繁琐费时。笔者将赖氏法检测 AL T引入到自动化酶免分析系统中 ,把手工操作变为自动化 ,结果可靠 ,工作效率高。1　对象和方法1.1　对象　郑州市无偿献血者。AL T试剂 ,上海生物研究所提供 ;RSP2 0 0全自动加样器 ,瑞士 TECAN公司产 ;BEP 自动化检测系统 ,德国 Berhing公司产 ;HT3酶标仪 ,奥地利 Anthos公司产 ;96微孔平底板 ,丹麦 Nunc公司产 …     

赖氏法测定血清转氨酶(ALT)五种标准曲线绘制方法误差分析

赖氏法(Reitmen)测定血清转氮酶为我国部选法,但因标准曲线处理方法不统一,误差甚大,结果精确性、准确性、可比性较差。而对其差异程度的比较研究,尚无资料报道。本文以 ALT(SGPT)为例,就目前的数种常用标准曲线方法进行探讨,优选出可靠的标准曲线绘法,以便临床参用。材料与方法1 材料1.1 ALT 测定试剂盒,由上海荣盛制剂提供。1.2 计算机(长城)或180P 函数计算器。1.3 721型分光光度计。2 试验方法按试剂盒说明,依卫生部临检中心推荐谷丙转氨酶(ALT)赖氏法操作,做空白(B)及5管标准(S)系列共重复17次实验。用721分光计,     

快速ALT测定筛选法

目前，各基层医院仍较普遍的采用越氏法测定血清ALT，由于赖氏法中基质浓度低和基质内甜酸的干扰，其标准曲线呈抛物线状态，ALT高值血清测定结果明显偏低，已不能满足临床对检验结果越来越精确的要求．而市售的酸偶联速率法（以下称速率法）测定ALT试剂盒价格昂贵，复港后保存期短。因此我们通过实验将越氏法做适当改变，建立了一种快速ALT倒卖筛选法，对需测ALT血清标本进行筛选·然后用速率法测定ALT活力，即提高了准确性，又节约了贵重试剂．现报告如下：1材料和方法1．1试剂、仗8①测定ALT赖氏法试剂：按《全国临床检验操作规…     

肝缺血-再灌注损伤中脂质过氧化反应及左旋精氨酸的干预作用

目的 :探讨脂质过氧化反应在肝缺血再灌注损伤中的作用及左旋精氨酸对其的影响。方法 :实验兔和肝癌手术患者均随机分为肝缺血再灌注组 (n=10 )和肝缺血再灌注 +左旋精氨酸治疗组 (n=10 ) ;分别取缺血前、缺血 4 5 min(兔 )或 2 5 min(患者 )和再灌注 4 5 m in(兔 )或 2 5 m in(患者 )共 3个时间点 ,用硫代巴比妥酸法测定血浆丙二醛 (MDA) ,赖氏法检测丙氨酸转氨酶 (AL T)。结果 :肝缺血再灌注期间 ,实验兔和肿瘤手术患者血浆 MDA和 AL T均明显升高 ,尤以再灌注 4 5 m in(兔 )或 2 5 min(患者 )为著 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。左旋精氨酸可逆转上述指标 ,缺血时兔 MDA虽降低 ,但 P>0 .0 5 ;AL T,P<0 .0 5 ;患者 MDA和 AL T均 P<0 .0 1。再灌注时兔 MDA和 AL T均 P<0 .0 1;患者 MDA和 AL T也均 P<0 .0 1。结论 :脂质过氧化反应在肝缺血再灌注损伤发生、发展中起重要的作用 ,左旋精氨酸通过拮抗脂质过氧化反应而减轻肝缺血再灌注损伤。     

用电子计算机编制血清转氨酶标准曲线表

GPT与GOT测定,由于赖氏法的标准曲线中标准管酮酸量与相应的酶活力单位不呈直线关系,使绘制及重校标准曲线时手续麻烦,且易误差。我们根据该法GPT 在97单位内,GOT 在114单位内,其标准管酮酸浓度与相应的A 值成倍数关系,应用插值多项式编排程序,指令电子计算机编制出标准曲线表,大     

丙酮酸在微板赖氏法测定ALT酶活力中的应用

丙酮酸在丙氨酸氨基转氨酶 ( ALT)的测定中 ,主要用于绘制标准曲线 (赖氏法 )。测定 ALT的方法有速率法和赖氏法等。赖氏法又分为试管法和微板法两种 ,试管法费工、费时 ,不利于计算机对原始数据的网络化管理 ,而速率法受温度影响较大 ,为此 ,笔者在微板赖氏法中 ,利用丙酮酸为标准液 ,进行 ALT检测 ,并与试管法与速率法比较 ,现介绍如下。材料与方法1　仪器　 TECAN GENESIS RSP1 5 0全自动加样系统 (奥地利产 ) ,TECAN SPECTRA温控酶标仪 (奥地利产 ) ,Heidolph温控震荡器 (德国产 ) ,96孔微孔平底板 (天津开元公司提供 )…     

BT—224生化分析仪酶类测定非线性的常见原因及消除方法

BT－224型半自动生化分析仪其结构合理，消耗品、易损件少，测定结果较精确，使用方便，特别适用于中小型医院的生化分析，但在测定酶类时，会遇到不成线性。笔者就使用期间，酶类测定时遇到不成线性的常见原因及消除方法报道如下：1．标本酶活力过高当测定标本酶活力过高时，酶催化底物消耗快速增加，以致在延迟时间内底物大部分消耗、监测时间内每分钟吸光度很小，酶活力反而很小，不成线性，仪器曲线可在某一段突然变为平坦，不易看出，需要认真观察。在动态反应过程中，表现为起始吸光度快速下降，而在监测时间变化很小。据笔者使用体…     

及时分离血清对速率法测定转氨酶活力的意义

目前,国内各实验室测定转氨酶(ALT和AST)多采用赖氏法或速率法。当临床送检的全血标本不及时分离血清时,则用速率法测定的结果偏高。由此,我们进行了以下实验。材料和方法1.ALT、AST活力测定分别用赖氏手工法和荷兰Vital AB-210型半自动生化分析仪速率法。2.血糖使用GOD-POD法,采用上海     

血清总蛋白测定试剂的改良与应用效果评价

目的　探讨能消除脂质与葡聚糖双重干扰的血清总蛋白测定方法。方法　用氢氧化钾代替Doumas法试剂中的氢氧化钠,使脂质的溶解度增大,以消除或减低脂质所致反应液混浊。优选调整酒石酸钾钠的浓度,以消除葡聚糖对测定的干扰。用正交法设计实验,优选氢氧化钾和酒石酸钾钠的最佳浓度。结果　含氢氧化钾 143mmol/L、酒石酸钾钠 56.7mmol/L的改良试剂与含 TG 5.6mmol/L、葡聚糖60g/L的血清反应均不显混浊,可不设标本空白。TG>5.6mmol/L时,反应液混浊程度较Doumas法轻,可用标本空白纠正。对蛋白标准液和新鲜混合血清反应的吸收曲线相同。吸收峰530~560nm,最大峰值546nm,与Doumas法一致。改良试剂和Doumas试剂与蛋白反应的比吸光度分别为0.299 2L·g-1·cm-1和0.303 6L·g-1·cm-1。测定线性范围28~140g/L。回归方程y=0.892 5+0.272 7xL·g-1·cm-1,r=0.999 5。与 Doumas法平行测定外观正常的血清 72 例。配对 t检验,t=0.99,P>0.2。结论　改良试剂性能稳定,成本低廉,既能消除脂质与葡聚糖的双重干扰,又保留了Doumas法的优点。适合手工、半自动和全自动生化分析仪测定血清总蛋白。     

HBV感染与ALT异常结果的相关性分析

为了解乙型肝炎病毒 ( HBV)感染和谷丙转氨酶 ( AL T)异常结果的关系 ,本文对 2 0 0 0年 1月至 2 0 0 1年 6月期间 ,在我院门诊及住院患者中同时检测乙肝病毒表面抗原 ( HBs Ag)和 AL T者 5 5 86例的结果进行分析。并对 HBs Ag阳性者进一步做 HBV血清学标志物 ( HBV- M)即乙肝“两对半”的检测及结果分析。1　试剂及方法HBs Ag和 HBV- M的检测均采用酶联免疫法 ( EL ISA) ,试剂来源于上海实业科华生物技术有限公司。AL T检测采用赖氏法 ,试剂按《全国临床检验操作规程》[1 ]配制。2　结　果 (见表 1、2 )表 1　 5 5 86例受检…     

免疫透射比浊法多点非线性校准在脂蛋白(a)测定中的应用

目的探讨免疫透射比浊法测定脂蛋白(a)中,采用2种多点非线性校准方法的测定结果,并确定最合适的校准曲线。方法分别采用Y=aX~2+bX+c和Spline2种方法在AU680生化仪上进行脂蛋白(a)校准。分别检测200例来自临床患者的血清标本和4个标准定值血清,200例临床患者血清按照测定值高低分为5个不同梯度水平,分别统计2组数据的均值(x)、标准差(s),相关系数(r),相对误差(v),偏倚(%)。采用SPSS19.0软件对2组数据偏倚进行统计学分析,以P0.05表示差异有统计学意义。结果 200例临床患者数据表明,采用Y=aX~2+bX+c曲线时,0~100、400~600、600~800mg/L组的脂蛋白(a)测定值比Spline曲线所得数值高;100~200mg/L组和200~400mg/L组的脂蛋白(a)测定值相反,Spline曲线所得数值较高。4个标准定值血清的测定结果,Spline曲线所得测定值更接近靶值;而Y=aX~2+bX+c曲线所测定结果中,100~200mg/L组和300~400mg/L组所得值偏低,600~800mg/L组所得值偏高,这与临床患者的血清标本结果一致。结论 Spline曲线更为客观,能更准确地体现免疫透射比浊法测定脂蛋白(a)整个反应过程。     

2种测定血清丙氨酸氨基转移酶方法的比较

血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定项目是常用检测肝功能的试验,在健康人群体检中作为了解肝功能情况的主要指标之一,以前一直使用赖氏法检测,该方法存在着血清需要量大、检测时间长、操作步骤多、每批试剂都需要绘制标准曲线等缺点;在健康人群体检时标本数量很大,需要一种能够简便、快速、准确的适合大量筛选的检测方法。然而用丙酮酸氧化酶法测定ALT ,具有血清用量小、检测时间短、步骤简单、无需绘制标准曲线等优点,可以作为体检筛选ALT的好方法。一、材料和方法1.标本来源　随机抽取体检血清标本4 0份。2 .试剂来源　赖氏法检测试剂和…     

某校新生健康乙肝病毒HBVM检出结果分析

为了解新生健康携带乙肝病毒者的有关病毒免疫指标 ,我们对某校 2 0 0 2年秋季入学的 1374名地方新生进行体格复查时检测了乙型肝炎病毒表面抗原 (HBs Ag) ,对 HBs Ag阳性者检测了乙型肝炎病毒五项指标 (HBVM) ,现将检出结果分析报告如下。1　对象和方法1.1　对象　为 2 0 0 2年秋季入学的 1374名地方新生 ,其中男5 84名 ,女 790名 ,检查项目包括肝功能、AL T、HBs Ag,对 HB-s Ag阳性者做 HBVM检测。1.2　方法　采用改良赖氏法检测肝功能、AL T;血清 HBV血清标志物检测采用 EL ISA方法 ,试剂盒系上海实业科华生物技术有限公司…     

1998～2001年蒙城县无偿献血者血液检验结果分析

为了解本地无偿献血者的基本情况 ,笔者对1 998年 1 0月～ 2 0 0 1年 1 0月无偿献血者血液标本的检验结果进行了统计分析 ,现报告如下。材料与方法1　检测对象　自《中华人民共和国献血法》实施以来 ,参加无偿献血的城乡人群共 1 32 60名。2　试剂与方法　 HBs Ag、抗 - HCV、抗 - HIV检测均采用 ELISA法 ,试剂盒由厦门新创公司和上海科华公司提供。ALT采用赖氏法 ,由上海荣盛和科欣公司提供。梅毒采用 TRUST和 RPR法 ,由科华和新创公司提供。实验均按说明书严格操作。结果与讨论1 32 60份无偿献血者标本中 ,AL T、HBs Ag、抗 …     

赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小的选择

目的　探讨赖氏法检测ALT从试管到微板加液体积缩小选择的依据。方法　利用赖氏微板法 ,采用正交试验的方法进行优选。结果　液体总量由赖氏试管法的 6 1 0 0 μl缩小为微板法的 2 70 μl,其中样本、基质、2 ,4 二硝苯肼加液量依次为 1 0、5 0、5 0 μl,NaOH(0 .72mol/L)加液量为 1 6 0 μl,结果判断 :Cutoff =[32×Mw(B) +2 5×Mw(Q) ]/5 7。利用微板赖氏法分别检测 2 0 0 3年卫生部临检中心和上海血液中心的ALT质控品 ,准确率均为 1 0 0 %。结论　 0 .1倍试管的加液量 (除NaOH外 )是微板赖氏法的最佳缩小量 ,选择 1 0 μl丙酮酸标准品作为结果判断标准的换算公式