原发性肝癌患者的肝炎病毒感染情况分析

目的了解原发性肝癌患者血液中肝炎病毒感染状况。方法采用ELISA方法检测196例原发性肝癌患者及200例单纯病毒性肝炎患者血清乙肝标志物、丙肝抗体、丁肝抗原及庚肝抗体。结果原发性肝癌患者(观察组)丙型肝炎病毒感染率为11·73%,而单纯病毒性肝炎患者(对照组)丙型肝炎病毒感染为3·00%。原发性肝癌患者乙型肝炎病毒感染为86·22%,对照组为85·00%;观察组丁型肝炎、庚型肝炎及未知病毒感染分别为0·51%、0·51%、2·55%,而对照组分别为1·00%、1·50%、9·50%。经统计学处理丙型肝炎病毒感染在观察组与对照组之间差异有显著性(P<0·05)。结论丙型肝炎病毒更易发生原发性肝癌。     

肝炎血清标志的酶联免疫检测技术探讨

<正> 酶联免疫吸附试验(ELISA)是利用免疫酶标记技术在固相载体上进行抗原或抗体的测定,由于酶催化效率高,抗原抗体反应有高度的特异性,所以普遍应用于乙型肝炎血清标志物的检测,为了更好的使酶联免疫检测技术的日益完善,现把我们在检测中遇到的技术问题进行回顾及探讨。1、ELISA的原理1·1 使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。1·2 使抗原或抗体与某种酶联结成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。     

2360例门诊病人HBV抗原抗体阳性率的临床价值

病毒性肝炎是常见的传染病，乙型肝炎是病毒性肝炎的一种．我院门诊每天都有乙肝病人就诊，通过实验室的检测．现将2360例阳性率报告如下。1临床资料与方法用聚苯乙稀反应板吸附特异性抗原或抗体使它与相应持测标本中的抗原或抗体结合然后加上前标记的纯化的抗原或抗体最后加底物在酶的催化下使无色的底物显色，然后根据色泽的深浅推不与酶结合标本抗原或抗体的量，此法结果可用肉眼判定。2检测乙型肝炎血清抗原或抗体的主要临床价值。2·IHBsAg和抗HBS21·IABsAg阳性说明机体代有HBV可能为急性慢性肝炎患者隐性感染和慢性HBSAg携带…     

异羟基毛花毛地黄毒甙与牛血清白蛋白偶联制备抗原的方法

<正> 异羟基毛花毛地黄毒甙(Digoxine,Dig)与大分子牛血清白蛋白BSA偶联才能形成抗原,这种抗原可在机体内产生抗体,可用来检测抗原。 偶联机理:Dig糖的部分被过碘酸钠进行氧化,在碱性条件下,再与BSA的氨基偶联,再用硼氢化钠将其还原,使Dig与BSA偶联做为抗原。     

肝病患者血浆内皮素水平的临床观察

目的探讨内皮素（ET）在肝病中的血浆水平及其临床意义。方法用特异性放免法测定30例急性肝炎、30例慢性肝炎、周例重症肝炎、对例肝硬化及周例正常人血浆内皮素浓度。结果慢性肝炎、重症肝炎及肝硬化有腹水和无腹水者血浆ET水平分别为73．1ng·L-1±24．7ng·L－1、89．2ng·L－1±25．4ng·L-1、98．5ng·L-1±27．2ng·L－1、78．6ng·L-1±25．1ug·L－1,均明显高于正常人（48ng·L-1±228ng·L-1）（P＜0．01）;慢性肝炎与急性肝炎（58．8ng·L-1±23．7ng·L1-）比较差异有显著性（P＜0．05）;重症肝炎、肝硬化有腹水者与慢性肝炎比较差异亦有显著性（P＜0．01）;肝硬化有腹水者与无腹水者比较差异有显著性（P＜0．01）。结论肝病时血浆ET水平与肝脏损伤的程度有关,血浆ET水平升高可能促进了肝病的发生与发展,并可能与肝硬化患者腹水形成有一定关系。     

血浆纤维连接素的纯化、抗血清制备及其临床初步应用

本文介绍改良的纯化血浆纤维连接素(FN)的gelatin-Sepharose亲和层析法,抗FN血清的制备方法及血浆FN的单向琼脂扩散测定法,初步观察了血浆FN的年龄变化与性别差异,发现健康老人组的血浆FN均值为321·8±22·6微克/毫升,显著低于健康成人组的均值(446·9±22·5微克/毫升)(P<0.001);在老人组与成人组中,男女两组之间均无显著差异(P>0.05)。老年人血浆FN含量的降低是否为其防御功能减退的原因之一,尚有待进一步研究。     

E抗原—抗体系统的检测方法和临床意义

自1972年国外在HBAg阳性血清中发现e抗原后,e抗原在临床预后的重要性受到重视,河南医科所肝炎研究小组用免疫琼脂扩散法(AGD)对361例HBAg阳性血清和57例HBAg阴性对照血清进行e抗原、e抗体及亚型的检测。结果证明e抗原主要存在于HBAg持续阳性各型肝病血清中,检出率为23～60％;而e抗体仅存在于健康HBAg阳性血清。而HBAg阴性的对照组血清中均不含e抗原和e     

应用琼脂双向扩散法测定肝炎协同抗原的体会

1965年Blumberg首次发表应用琼脂双向扩散法发现澳大利亚抗原(现定名为Hepati-tis-associated antigen肝炎协同抗原,简称HAA)。此后对HAA的测定方法,国外学者相继有所报导,如补体结合试验、逆向电泳法、血凝及血凝抑制试验、免疫萤光抗体法等,但每一种方法都各有优劣之处。我院于今年初开始对一些诊断为传染性肝炎及疑诊肝炎患者开展HAA的测定研究工作。由于检验室设备条件的限制,只能采用较简单的琼脂双向扩散法对     

为什么说肾上腺素是治疗过敏性休克的首选药物?

过敏性休克是由过敏性物质(通常大都是药物及血清)进入过敏体质的机体,成为机体的抗原(药物如青霉素等大都是半抗原,在血液中与血浆蛋白结合成全抗原)刺激网状内皮系统产生相应的抗体(IgE),该抗体是一种亲细胞抗体,其 Fc(可结晶片段)端能持久地结合在嗜碱粒细胞及毛细血管周围的肥大细胞表面,使机体处于致敏状态。当第二次同一抗原进入机体,即与结合在嗜碱粒细胞及肥大细胞表面的 IgE抗体的 Fab(抗原结合片段)端结合,一个抗原可结合多个抗体,使靶细胞表面的 IgE 分子联结如“搭桥”,     

用双向琼脂扩散实验检测甲胎蛋白的安全模拟方法

双向琼脂扩散实验是将抗原和抗体分别加到琼脂板相对应的孔中,两者各自向四周扩散,若二者相对应,在比例合适处形成白色沉淀线。若同时含有多种抗原抗体系统,因其扩散速度不同,可在琼脂层中形成多条沉淀线。这项实验可用于多种抗原成分的分析和鉴定,如检测甲胎蛋白。用双向琼脂扩散实验检测甲胎蛋白需要肝癌患者的血清和健康人血清,为避免学生和实验教师接触患者血液标本,我们用模拟方法做这个实验。     

抗肾小球基底膜抗体的亲和力与肾脏病理表现密切相关

目的研究抗肾小球基底膜(GBM)抗体的亲合力及其与临床病理表现的关系。方法以纯化的牛IV型胶原α链非胶原区1[α(IV)NC1]为靶抗原,采用抗原抑制性酶联免疫吸附法对我科近11年来确诊的52例抗GBM抗体相关疾病患者的血清抗体亲合力进行检测,并分析其与临床和病理表现的关系。结果使52例患者血清抗体百分结合率从相同水平下降50%所需的α(IV)NC1从0·02μg~20μg不等,平均为0·625μg。不同患者血清抗体亲合力与肾脏病理中新月体所占比例相关(P=0·001),且为独立决定因素(R2=0·58,P=0·000)。即抗体亲合力越高,肾小球中新月体的比例越高。发病年龄、性别、临床表现不同的患者,抗体亲合力之间差异无统计学意义(P>0·05)。起病后不同时间检测血清抗体亲合力基本稳定,未见增加。结论起病时抗GBM抗体的亲合力成熟过程已经完成。不同患者之间抗GBM抗体的亲合力存在差异,该亲合力与病理肾脏损伤的程度高度相关,提示抗GBM抗体的亲合力在抗GBM抗体相关疾病的发病机制中起了重要作用。     

免疫组织化学染色法中的常见问题及对策

免疫组织化学染色法是指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质,利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在.此方式不只可以用来测知抗原的表现量,也可观察抗原所表现的位置[1].因此其应用越来越广泛,为了提高其检验效果,本文就免疫组织化学染色法中的常见问题进行总结,并提出相应对策.     

免疫磁珠分离技术纯化和检测泰泽氏病原体的研究

目的建立泰泽氏病原体(Ty)纯化方法,获得纯的菌体供抗原研究,为ELISA诊断抗原的制备提供依据;并尝试建立Ty隐性感染血清学抗原检查方法。方法选择特异性抗体包被磁珠,从感染大鼠肝脏中富集和纯化Ty;用SDS-PAGE和Western blot技术考察纯化Ty的蛋白和抗原图谱;同时用免疫磁珠分离技术(IMS)直接检查隐性感染大鼠肠道上皮细胞内的Ty。结果用辛酸-硫酸铵纯化的Ty单克隆抗体M5以0·5μg/107beads以上浓度包被抗IgG抗体预结合的磁珠4h,可最大效率地富集Ty;分离反应进行1h,敏感性达到103菌体/mL;吖啶黄染色镜检法可以直接、快速地观察到结合于磁珠上的细菌;抗原分析表明,IMS较好地去除了肝组织和真核细胞成分,纯化的Ty RJ株具有3个免疫优势的抗原成分,相对分子质量(Mr)分别为160×103、116×103、55×103;此外,IMS法可直接从隐性感染大鼠盲肠上皮细胞中检测到少量寄生的Ty。结论用IMS技术可有效地富集和纯化Ty,并可以作为Ty隐性感染血清学抗原检查的候选方法。     

重症肝炎并发症的观察与护理

肝炎是一种全身性疾病,除病毒本身可侵犯各脏器外,抗原抗体复合物也可沉积于血管内膜而引起各系统的病变;另外发病后不及时休息、过劳以及精神因素等常导致病势加重而成重症肝炎。重症肝炎死亡率高,     

酶联免疫印迹法对弓形虫速殖子功能性抗原分析

目的：研究弓形虫功能性抗原,为开发弓形虫诊断试剂及商苗提供理论基础。方法：采用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹方法,对弓形虫抗原及弓形虫速殖子抗原中能与免疫兔血清和弓形虫抗体阳性人血清起特异性反应的抗原组分进行分析。结果;弓形虫速殖子抗原的蛋白组分在ＳＤＳ－ＡＧＥ中用１２５ｇ／Ｌ的分离胶可产生较好的分辨率,分离出３０多条区带。     

用间接血凝法对流感病毒核蛋白抗体的测定(摘要)

流感病毒的核蛋白(NP)具有型的特征,可用来进行型的签定、血清血诊断和快速诊断。对流感病毒NP抗原及抗体的测定,虽已有补结法、间接补结法、琼脂双扩散、琼脂单扩散和对流免疫电泳等方法,但这些方法都不够理想,操作过程比较复什、费时、敏感性差。如能用一种简便、敏感的方法测NP抗体,将NP阳性的血清再进行表面抗原测定,这就可以大大减少工作量并能达到一定的复核作用,同时也有利于对一些动物血清的保存。我们根据国内外的资料进行比较,认为双醛法较好,故我们采用戊二醛和甲醛的方     

血浆醛固酮的放射免疫分析

用层析纯Ald-3-0与BSA连接物作免疫原制备高特异性抗体,其对10种类固醇激素的交叉反应均在0.0054％以下;建立以~3H-醛固酮为标记抗原,对血浆只经二氯甲烷一步提取的放射免疫分析法;本法测PAC的灵敏度为6pg,提取率92％,回收率在水和血浆中分别为 96±5和105±7％;空白值为零。临床试用初步表明本法可较准确地检出血浆醛固酮浓度。     

抗人卵巢癌COC183B2/抗CD3单链双特异抗体的构建和表达

目的:构建和表达一种可与卵巢癌细胞和淋巴细胞结合的双特异抗体.方法:利用PCR分别扩增抗人CD3单链抗体(single chain variable fragment, ScFv)重链可变区(variable region of the heavy chain, VH)和轻链可变区(variable region of the light chain, VL),重组抗人CD3 ScFv,经测序后将其克隆入有链间连接肽基因序列的载体pALM中,再将抗人卵巢癌COC183B2 ScFv克隆至紧邻链间连接肽前形成COC183B2/抗CD3单链双特异抗体(single-chain bispecific antibody, scBsAb)的重组.最后将COC183B2/抗CD3 scBsAb克隆入表达载体pTMFC中进行表达,同时分别表达抗人卵巢癌单抗COC183B2和抗人CD3单抗的ScFv作为对照组.用ELISA、流式细胞学方法和玫瑰花环实验对scBsAb进行免疫学活性测定.结果:成功构建抗人卵巢癌COC183B2/抗CD3 scBsAb;其表达的蛋白链相对分子质量约60;ELISA结果显示scBsAb可与抗原OC183B2结合,流式细胞学结果显示scBsAb可与抗原CD3结合,花环实验显示scBsAb在体外可引导效应细胞聚集在靶细胞周围.结论:构建和表达抗人卵巢癌COC183B2/抗CD3 scBsAb成功,且具有与抗原OC183B2、CD3结合的免疫学活性.     

二对半与PCR检测在乙肝病毒感染诊断中的价值

乙型肝炎病毒(HBV)分为三部分:一是外壳,含有表面抗原(HBSAg),二是核心,含有核心抗原(HBCAg)及e抗原(HBeAg),三是乙肝病毒的脱氧核糖核酸(HBV—DNA)及DNA多聚酶(DNAP)。HBV感染用放免法和酶联免疫法可检出三种抗原和相应抗体,即抗·HBS、抗—HBC、抗—HBe。通过病人血清中HBV的各种抗原—抗体系统(即二对半)的动态变化来了解HBV在体内的感染状态及病情改变。     

全血快速免疫学试验

全血快速免疫学试验,可用来检测患者血液中抗原、抗体和某些药物.试验过程中仅需一种双特异性试剂:即特异性抗体(或特异性抗原)与特异性凝集红细胞之抗体相连接的试剂.当双特异性试剂中的特异性抗体或抗原与患者血液中相对应的抗原或抗体结合时,则可引起患者血液中红细胞的凝集反应.本试验方法不需特殊设备、操作简便,适用于门诊或群体体检的筛选.