脯氨酸羟化酶抑制剂对人肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤的影响

 目的 探讨脯氨酸羟化酶抑制剂——二甲基乙二酰基甘氨酸（DMOG）通过稳定人肾小管上皮细胞（HKC）中低氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达抗缺氧/复氧损伤（HRI）的作用及其机制。方法 无糖缺氧12 h,复氧6 h制作HKC细胞HRI模型,分别于缺氧前2、4、6、12 h给予DMOG预处理,四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT法）检测细胞增殖活性,试剂盒检测细胞培养液中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性,Annexin/PI染色流式细胞仪技术检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR方法检测bcl-2和bax mRNA的表达,Western印迹检测HIF-1α、bcl-2和bax蛋白的表达。结果 DMOG预处理使HKC中HIF-1α表达增加,细胞损伤明显改善,表现为细胞增殖活性提高,培养上清液中MDA含量下降、SOD活性增强,细胞凋亡率下降（P<0.05）;同时bax mRNA和蛋白表达下调（P<0.05）,bcl-2 mRNA和蛋白表达上调（P<0.05）。结论 DMOG可通过稳定HIF-1α,影响凋亡相关基因的表达,改善HRI诱导的HKC细胞损伤。     

重组人促红细胞生成素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用

 目的 探索不同剂量及给药时间的重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）对大鼠肾脏缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury,IRI）的保护作用。方法 48只雄性SD大鼠随机分为假手术组（S组）、缺血对照组（IR组）、EPO-1组（再灌注时给药1 000、2 000和3 000 U/kg）和EPO-2组（再灌注前给药1 000、2 000和3 000 U/kg）。阻断左侧肾蒂45 min后切除右侧肾脏,建立IRI模型。检测血液中血肌酐（Scr）、血浆尿素氮（BUN）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、IL-6和Caspase-3水平,观察肾脏的病理学改变,采用TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡。结果 EPO组血清Scr、BUN和肾组织MDA、Caspase-3、IL-6水平明显低于IR组（P<0.05）;EPO组肾组织SOD水平明显高于IR组（P<0.05）,并在组织损伤上较IR组轻;TUNEL染色观察到EPO组阳性细胞数明显少于IR组（P<0.05）。再灌注前给药优于再灌注时给药（P<0.05）。结论 rhEPO对肾脏IRI有较好的保护作用,该作用可能通过抗氧自由基、减轻炎症反应、减少肾小管上皮细胞凋亡的协同机制来实现。保护作用与药物剂量呈正相关,再灌前给药优于再灌注时给药。     

DNA甲基转移酶1与CD11a基因在系统性红斑狼疮患者中mRNA水平的表达

 目的 检测系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）患者中DNA甲基转移酶1（DNA methyltransferase 1,DNMT1）和CD11a基因的表达水平,探讨DNMT1的表达异常在SLE发病中的作用。方法 用Real-time PCR方法测定SLE患者缓解期、活动期和正常人外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）中DNMT1和CD11a基因的表达水平。结果 SLE活动期患者PBMC中DNMT1的表达水平较对照组（P=0.014）和缓解期组（P=0.030）显著下降;缓解期的DNMT1表达水平与对照组（P=0.264）相比差异无统计学意义;SLE患者DNMT1的表达水平与SLE疾病活动指数（SLE disease activity index,SLEDAI）呈现负相关（P<0.05）。SLE活动期患者PBMC中CD11a的表达水平较对照组（P=0.003）显著升高（P<0.05）;缓解期的CD11a表达水平与对照组（P=0.250）和缓解期组（P=0.069）相比差异无统计学意义（P>0.05）;SLE患者CD11a的表达水平与SLEDAI呈正相关（P<0.05）。SLE患者DNMT1与CD11a的表达水平无显著相关性（P>0.05）。结论 SLE患者PBMC中DNMT1表达水平的降低可能是造成基因组DNA低甲基化的重要原因,使得CD11a等致病基因过度表达,进而导致SLE发病。     

2型糖尿病患者血清叶黄素与体内氧化应激指标的关系

 目的 研究2型糖尿病（diabetes mellitus,DM）患者血清叶黄素含量与氧化应激反应的关系。方法 检测99例2型DM患者和83例正常对照者的空腹血糖、血清总胆固醇、血清三酰甘油;血清叶黄素、β-胡萝卜素、番茄红素和维生素E含量及血清SOD、GSH-Px、MDA、IL-6含量,采用t检验、单因素相关分析、逐步多元线性回归等方法进行统计分析。结果 2型DM患者组血清叶黄素、番茄红素、β-胡萝卜素、SOD、GSH-Px水平明显低于正常对照组（P<0.05）,血清MDA、IL-6水平高于正常对照组（P<0.01）。血清叶黄素、番茄红素和β-胡萝卜素与血清SOD和GSH-Px的相关系数为正值（P<0.05）,与MDA相关系数为负值（P<0.05）,叶黄素、β-胡萝卜素与IL-6的相关系数为负值（P<0.05）。多因素分析表明,控制BMI和年龄因素后,血清叶黄素与MDA、IL-6含量呈负相关,与血清SOD、GSH-Px呈正相关（P<0.05）。结论 随着2型DM患者血清叶黄素水平的增加,血清MDA、IL-6含量降低,血清SOD与GSH-Px的活性增高。提示叶黄素可能通过抑制机体的氧化应激反应,降低IL-6的表达,从而减轻IL-6水平过高所导致的负面效应。     

堆敷灭螺法土壤中氯硝柳胺含量动态变化及其实验室灭螺效果

 目的 分析堆敷灭螺法氯硝柳胺在土壤中的分布、随时间的变化趋势及其实验室灭螺效果,并探讨其合理的用药量。方法 在四川省普格县特兹乡选择6个试验点,实施氯硝柳胺堆敷灭螺,施药剂量分别为16、8、4、2、1 和0 g/m²。采集的土壤样品经超声萃取、离心、浓缩以后用高效液相色谱测定其含量;灭螺试验分别计算3 d、7 d钉螺死亡率。结果 各施药组土壤中氯硝柳胺含量的标准差均较大,各组表层土与深层土氯硝柳胺的含量差异均无统计学意义（P>0.05）;4 g/m²组施药后5个月土壤中还能检测到氯硝柳胺。随着土壤中氯硝柳胺含量的降低,施药后0个月、5个月各组表层、深层土壤样品的3 d、7 d钉螺死亡率也均呈下降的趋势（P<0.05）;4 g/m²组施药后5个月仍有一定的灭螺效果,其表层土壤样品的3 d、7 d钉螺死亡率分别为5.33%、9.33%,高于对照组（P<0.05）。结论 堆敷灭螺法是一种比较有效的灭螺方法,建议堆敷灭螺现场使用4 g/m²的剂量。     

溃结灵对溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜的CINC-1及其受体CXCR2表达的作用

 目的 探讨溃结灵对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）大鼠结肠黏膜的中性粒细胞趋化因子-1（cytokine-induced neutrophil chemoattractant-1,CINC-1）及其受体CXC趋化因子受体2（CXC chemokine receptor 2,CXCR2）表达的作用。方法 90只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾迪莎组、溃结灵高剂量组、溃结灵中剂量组和溃结灵低剂量组,共6组,每组15只。用5%2,4,6-三硝基苯磺酸（2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBs）灌肠建立大鼠溃疡性结肠炎模型。造模成功后,除正常组外,各组分别给予生理盐水0.33 mL、艾迪莎0.125 g·kg^-1·d^-1、溃结灵高（18.3 g·kg^-1·d^-1）、中（9.2 g·kg^-1·d^-1）、低（4.6 g·kg^-1·d^-1）剂量处理,7 d后处死动物。肉眼观察结合显微镜观察对结肠组织形态学评分;运用荧光定量PCR法及免疫组化染色法分别检测各组大鼠CINC-1及CXCR2 mRNA及其蛋白表达。结果 溃结灵具有明确改善大鼠UC的效应,与艾迪莎组相比,溃结灵高剂量组的疗效差异无统计学意义（P>0.05）,中、低剂量组的疗效差异有统计学意义（P<0.01）;与正常组相比,模型组CINC-1及CXCR2 mRNA及蛋白质表达呈明显上升趋势（P<0.05）,与炎症呈正相关;经过溃结灵和艾迪莎干预后,随着炎症改善,CINC-1及CXCR2 mRNA及其蛋白表达呈下降趋势。结论 溃结灵可能通过干预CINC-1及CXCR2的表达来抑制中性粒细胞趋化,从而达到缓解TNBs诱导溃疡性结肠炎的效应。     

拉萨市藏、汉民族血脂水平的比较

 目的 调查分析拉萨市藏、汉民族间血脂水平及其异常检出率的差异,为该地区血脂异常症的预防提供客观依据。方法 选取拉萨市藏（Tibetan,T）、汉民族（Han,H）1 228例体检人群为调查对象,其中藏族559例,汉族669例,按血脂测定标准化方法测定的血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（triglycerin,TG）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）及低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C） 4项指标的血脂水平;按2007年《中国成人血脂异常防治指南》将研究对象分为4个年龄组,界定4项血脂异常标准值,比较藏、汉民族各年龄组血脂异常检出率的差异。采用协方差分析和χ2检验比较两民族间血脂存在的差异。结果 汉族TG水平高于藏族（P≤0.001）,HDL-C水平低于藏族（P<0.001）;藏族TC和LDL-C水平均高于汉族 （P<0.001、P=0.013）。藏族男性青年组、中年组、老年前期组TC异常检出率均显著高于汉族（P<0.001）,藏族男性中年组和女性青年组、中年组TG异常检出率反而比汉族高（P<0.001、P<0.05、P<0.001）;汉族男性青年组、中年组、老年前期组HDL-C异常检出率明显高于藏族（P<0.001）。结论 藏族是混合型高脂血症的高危人群,尤其藏族男性;汉族男性是低HDL-C血症的高危人群。     

尼尔雌醇对去势雌性大鼠1,25双羟维生素D水平的影响

 目的 研究卵巢摘除（ovariectomy,OVX）后大鼠血清25(OH)D、1,25双羟维生素D［1,25(OH)2D］水平和骨表型的变化及雌激素干预效果。方法 采用6月龄SD雌性大鼠双侧卵巢摘除术建立去势骨质疏松模型并随机分为去势模型组（OVX组）和去势后雌激素干预组（OVX-E组）,另设假手术对照组（SHAM组）,每组10只。术后5周OVX-E组开始灌服尼尔雌醇（1 mg/kg,2次/周）,其他组灌服饮用水作为对照,均给药13周。采用酶免法（EIA）检测血清25(OH)D和1,25(OH)2D水平,用体积骨密度（volume bone mineral density,vBMD）和骨小梁面积（BV/TV）等指标进行骨表型分析。结果 OVX组血清25(OH)D水平保持稳定,与SHAM组比较差异无统计学意义。去势后1,25(OH)2D水平显著升高,OVX组为63.1 pmol/L,较SHAM组的38.5 pmol/L增加了64%（P<0.001）。OVX大鼠骨密度降低,较SHAM组分别减少9.5%（股骨,P<0.001）和9.8%（腰椎,P<0.001）。同时出现骨小梁面积减少和尿吡啶酚增加（58.7%,P<0.05）等骨质疏松表型。口服雌激素后,血清1,25(OH)2D水平较OVX组明显下降60.8% （P<0.001）,甚至低于SHAM组（P<0.01）,同时延缓骨丢失和改善骨微结构。结论 去势影响大鼠维生素D（vitamin D,VD）代谢,致血清1,25(OH)2D水平明显升高,小剂量雌激素对VD代谢改变和骨丢失具有显著纠正作用。     

全麻与全麻复合单次胸椎旁阻滞应用于开胸手术的比较

 目的 评价全麻与全麻复合单次胸椎旁阻滞（thoracic paravertebral nerve block,TPVB）这两种不同麻醉方法应用于开胸手术的效果。方法 选择40例开胸手术的患者,随机分为两组：全麻组（GA,n=20）,全麻+单次胸椎旁阻滞组（GA+TPVB,n=20）。GA组：患者经常规全麻静脉诱导后行气管插管;GA+TPVB组：全麻诱导前于T₄~T₅行胸椎旁阻滞,阻滞成功后记录阻滞平面,30 min后开始全麻诱导。术中采用静吸复合麻醉,七氟醚MAC值控制于1.0,心率、血压维持于术前基础值的25%左右。比较两组术中芬太尼用量、心血管药（麻黄碱）需求量,术后6、12、24、36、48 h安静和运动时的疼痛评分,术后6 h（T_0-6）、6~12 h（T_6-12）、12~24 h（T_12-24）、24~36 h（T_24-36）、36~48 h（T_36-48）阿片类镇痛药（吗啡）消耗量,术后恶心呕吐（post-operative nausea and vomiting,PONV）发生率。结果 GA+TPVB组术中芬太尼用量少于GA组（P<0.05）;GA+TPVB组术中麻黄碱需求量多于GA组（P<0.05）;GA+TPVB组术后6、12 h安静时和运动时的疼痛评分低于GA组（P<0.05）,GA+TPVB组与GA组术后24、36、48 h安静时和运动时的疼痛评分差异无统计学意义;GA+TPVB组在T_0-6、T_6-12的吗啡消耗量少于GA组（P<0.05）,GA+TPVB组与GA组在T_12-24、T_24-36、T_36-48的吗啡消耗量差异无统计学意义;48 h内GA+TPVB组PONV发生率低于GA组（P<0.05)。结论 胸椎旁阻滞可产生完善的镇痛效果,降低术后早期（12 h内)疼痛评分,减少阿片类镇痛药用量及降低术后恶心、呕吐发生率。     

TLR2 mAb和TLR4 mAb对急性期溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜炎症因子IFN-γ、IL-4及 IL-17表达的影响

 目的 探讨TLR2单克隆抗体（toll-like receptor 2 monoclonal antibodies,TLR2 mAb）和TLR4单克隆抗体（toll-like receptor 4 monoclonal antibodies,TLR4 mAb）对葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium,DSS）诱导的急性期溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）小鼠结肠黏膜的炎症因子IFN-γ、IL-4及IL-17表达的影响。方法 50只雄性BALB/c小鼠分为5组（每组10只）：对照组（A）、模型组（B）及TLR2 mAb干预组（C）、TLR4 mAb干预组（D）、TLR2 mAb和TLR4 mAb联合干预组（E）。A组小鼠饮用蒸馏水7 d;B-E组小鼠仅饮用5% DSS水溶液7 d以产生急性期溃疡性结肠炎模型。造模开始的同时,每隔48 h分别给予C、D、E干预组小鼠以TLR2 mAb（10 μg）、TLR4 mAb（10 μg）、TLR2 mAb（10 μg）+TLR4 mAb（10 μg）腹腔内注射,A、B组给予腹腔内注射生理盐水,以观察TLR2 mAb和TLR4 mAb的干预作用。观察指标包括疾病活动指数（disease activity index,DAI）、结肠组织病理学评分（histopathological score,HS）。造模及干预7 d后处死小鼠,Real-time PCR法检测各组结肠黏膜TLR2、TLR4、IFN-γ、IL-4及IL-17的mRNA表达。结果 (1)与A组相比,B组小鼠肠道DAI及HS明显增高（P<0.01）。与B组相比,E组小鼠肠道DAI（P<0.05）和HS（P<0.01）均明显降低。与D组相比,E组小鼠肠道HS明显降低（P<0.05）。(2)与A组相比,B组小鼠结肠黏膜TLR2、TLR4表达明显增高（P<0.01,P<0.05）。与B组相比,C、D、E组小鼠结肠黏膜TLR2、TLR4表达均有不同程度的降低。(3)与A组相比,B组小鼠结肠黏膜IFN-γ、IL-4及IL-17的mRNA表达明显增高（P<0.01,P<0.05,P<0.01）。与B组相比,C、D、E组小鼠结肠黏膜IFN-γ、IL-4及IL-17的mRNA表达均有不同程度的降低。结论 TLR2 mAb和TLR4 mAb可能通过下调小鼠结肠黏膜的炎症因子IFN-γ、IL-4、IL-17的mRNA表达而发挥其干预作用。     

不同剂量舒芬太尼用于小儿腹部手术后静脉镇痛的效果与安全性

 目的 采取随机对照临床实验的方法对不同剂量的舒芬太尼与吗啡用于小儿腹部手术后静脉镇痛的效果与安全性进行比较。方法 90例ASA Ⅰ~Ⅱ级拟行腹部外科手术的患儿被随机分为舒芬太尼Ⅰ组：负荷剂量0.04 μg/kg,维持剂量每小时0.032 μg/kg（SF1,n=30）;舒芬太尼Ⅱ组：负荷剂量0.05 μg/kg,维持剂量每小时0.04 μg/kg（SF2,n=30）和吗啡组：负荷剂量40 μg/kg,维持剂量每小时8 μg/kg（M,n=30）。观察术后1、2、4、8、12、24、48 h氧饱和度、疼痛评分、恶心呕吐及尿潴留发生率。结果 3组之间氧饱和度评分无统计学差异（P>0.05）,但是SF2组部分病人氧饱和度评分低于94%。3组之间疼痛评分无统计学差异（P>0.05）。在不良反应的发生上M组和SF1组、SF2组间比较有统计学差异（P<0.05）,SF1组和SF2组组间则无统计学差异（P>0.05）。结论 舒芬太尼可安全用于小儿腹部外科手术后的病人自控静脉镇痛（PCIA）。负荷剂量0.04 μg/kg、维持剂量每小时0.032 μg/kg作为PCIA镇痛剂量较为适合。     

Apelin通过Akt/eNOS机制促进肺血管内皮细胞一氧化氮释放

 目的 探讨Apelin对肺血管内皮细胞释放一氧化氮（NO)的影响及其机制。方法 培养新生鼠肺微血管内皮细胞（PMVECs）。 (1) 以1 x 10⁵ 个/孔密度接种至24孔板,80%融合后,无血清培养24 h。分为2组：Apelin组,加入Apelin至终浓度为10^-8 mol/L;对照组,加入等量无血清DMEM培养液。每组设立4个复孔。继续培养,并分别在0 min、2 min、5 min、15 min 、30 min时间点取培养液测NO浓度。(2) 以5 x 10⁵ 个/孔密度接种至6孔板,80%融合后,无血清培养24 h分为3组：Apelin组,加入Apelin至终浓度为10^-8 mol/L。Apelin + Akt抑制剂（Akt inhibitor）组,加入Apelin前用5 μmol/L浓度的Akt抑制剂预处理30 min。对照组加入等量DMEM培液。每组设立3复孔。继续培养5 min后立即提取总蛋白,用于Western blot检测磷酸化Akt和磷酸化内皮型一氧化氮合酶（eNOS）蛋白表达。结果 与0 min时间点比较,培养液中NO浓度分别在2 min、5 min、15 min时间点增加（P<0.01或P<0.05）,其中在5 min时间点达到高峰。与对照组比较,Apelin组磷酸化Akt和磷酸化eNOS表达增加（P<0.01）,与Apelin组比较,Apelin + Akt inhibitor组磷酸化eNOS表达降低（P<0.01）。结论 Apelin促进PMVECs释放NO,Akt/eNOS磷酸化参与Apelin促进NO释放机制。     

喀什维吾尔族妇女宫颈癌与HLA-DRB1*15和HLA-DRB1*04的关系

 目的 探讨人类白细胞抗原HLA-DRB1等位基因多态性与新疆宫颈癌高发区喀什维吾尔族妇女宫颈癌的关系。方法 采用聚合酶联反应序列特异性寡核苷酸探针（polymerase chain reaction sequence-specific oligonucleotide,PCR-SSO）法检测90例新疆喀什维吾尔族宫颈癌患者及90例当地正常妇女宫颈组织中HLA-DRB1的等位基因。结果 等位基因 HLA-DRB1*15在宫颈癌组中出现的频率明显高于对照组,差异有统计学意义（χ²=4.05,P<0.05,OR=2.002),表明HLA-DRB1*15可能是喀什维吾尔族妇女宫颈癌的易感基因;而等位基因HLA-DRB1*04在宫颈癌组中出现的频率明显低于对照组,差异有统计学意义（χ²=7.283,P<0.05,OR=0.432),表明HLA-DRB1*04可能是喀什维吾尔族妇女宫颈癌的保护基因;HLA-DRB1的其他等位基因在两组中出现的频率差异无统计学意义（P>0.05）。结论 HLA-DRB1*15可能与新疆宫颈癌高发区喀什维吾尔族妇女对宫颈癌的遗传易感性有关,是当地维吾尔族妇女宫颈癌的易感基因;而HLA-DRB1*04可能是喀什维吾尔族妇女宫颈癌的保护基因。两组基因的检测在维族妇女高危人群的筛选及群体遗传干预工作中有重要意义。     

术中输注氨基酸对胃肠道手术患者脂代谢和体温的影响

 目的 研究术中静脉输注氨基酸对在硬膜外阻滞复合全麻下行胃肠道手术患者脂肪代谢和体温的影响。方法 选择择期行胃肠道手术患者32例,ASAⅠ~Ⅱ级,随机分成两组（n=16）：分别在麻醉诱导同时输注18-氨基酸混合液4 KJ·kg^-1·h^-1（即2 mL·kg^-1·h^-1,AA组）和乳酸钠林格氏液2 mL·kg^-1·h^-1（LR组）直至手术结束。监测麻醉前30 min,诱导后手术开始前,手术开始后30 min、2 h,手术结束后30 min、2 h的鼻咽温度,血清胆固醇、三酰甘油、游离脂肪酸（free fatty acid,FFA）浓度和血酮体的变化。结果 两组术中鼻咽温度均呈下降趋势,但AA组手术开始后2 h鼻咽温度显著高于LR组（P<0.05）,手术结束后两组温度有所回升,AA组手术结束后2 h鼻咽温度［（36.89±0.13）℃］较麻醉前30 min［（36.98±0.13）℃］差异无统计学意义（P>0.05）,且显著高于LR组［（36.10±0.15）℃］（P<0.05）,LR组仍显著低于麻醉前30 min［（37.04±0.15）℃］（P<0.05）;两组术中血清胆固醇浓度均呈下降趋势,手术开始后30 min至手术结束后2 h浓度较麻醉前30 min显著降低（P<0.05）,而两组间差异无统计学意义（P>0.05）;诱导后手术开始前两组的血清三酰甘油浓度均较术前显著升高（P<0.05）,LR组手术结束后2 h浓度［（0.71±0.27）mmol/L］较麻醉前30 min［（0.99±0.38）mmol/L］显著降低（P<0.05）,而在AA组差异无统计学意义（P>0.05）;两组手术开始后30 min、2 h血清 FFA浓度均显著低于麻醉前30 min（P<0.05）,且AA组［（0.52±0.15,0.42±0.09）mmol/L］显著低于LR组［（0.81±0.24,0.82±0.22）mmol/L,P<0.05］,而手术结束后2 h浓度AA组［（1.04±0.28）mmol/L］显著高于LR组［（0.82±0.16）mmol/L,P<0.05］;两组围术期各时间点血酮体均为阴性。结论 术中输注氨基酸可减少硬膜外阻滞复合全麻下行胃肠道手术患者体温的降低,并抑制脂肪动员。     

CpG ODN对非小细胞肺癌患者化疗后免疫功能的影响

 目的 测定非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）患者化疗前后外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）经胞嘧啶-磷酸-鸟嘌呤寡脱氧核苷酸（cytosine-phosphorothioate guanine oligodeoxynucleotides,CpG ODN）刺激后,CD4+CD25^high Treg细胞及IFN-γ、IL-12的变化,评价不同时间点CpG ODN的干预效果。方法 选取NSCLC患者20例,分别抽取患者化疗前（d0）、化疗后第3天（d3）及第7天（d7）外周血3 mL,分离PBMC。每份PBMC均分为实验组及对照组,实验组给予CpG ODN 2006刺激,对照组不做干预。经培养48 h后收集细胞以流式细胞仪检测CD4⁺CD25^high Treg细胞百分比,并取上清液检测INF-γ和IL-12（pg/mL）。结果 实验组CD4⁺CD25^high Treg细胞百分比在d0、d3、d7分别为（2.22±0.66）%,（2.09±0.44）%和（2.08±0.48）%,较对照组均有明显下降（P<0.05）。实验组IFN-γ在d0、d3、d7分别为（40.64±5.90）、（40.57±5.80）和（45.30±4.78）pg/mL,d0和d7时较对照组显著增加（P<0.05）,d3时变化不明显（P>0.05）。实验组IL-12在d0、d3、d7分别为（41.02±6.65）、（39.41±7.41）和（45.75±12.46）pg/mL,d0和d3时较对照组明显增加（P<0.05）,而d7时变化不明显（P>0.05）。动态观察对照组,d3时CD4⁺CD25^high Treg细胞比例下降至最低点,而后逐渐回升;实验组在d7时CD4⁺CD25^high Treg细胞比例仍持续下降;实验组的IFN-γ值呈现升高趋势,d7和d0、d3相比明显升高（P<0.05）;而实验组IL-12值在化疗前后无明显变化,即化疗前d0与化疗后d3、d7比较,以及d3与d7比较,差异均不明显（P值均>0.05）。肺癌患者化疗次数及外周血淋巴细胞的数目与CpG ODN对CD4⁺CD25^high Treg细胞比例及IFN-γ、IL-12的分泌作用无显著相关性（P>0.05）。结论 CpG ODN能有效下调CD4⁺CD25^high Treg细胞,刺激INF-γ的分泌,优化肺癌患者抗肿瘤的免疫微环境,有利于机体的抗肿瘤免疫;肺癌患者即使化疗后外周血淋巴细胞的数目明显减少,CpG ODN仍能下调CD4⁺CD25^high Treg细胞和刺激INF-γ的分泌,发挥抗肿瘤作用。     

慢性肾脏病3~5期伴重度蛋白尿患者的临床病理和预后分析

 目的 分析慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）3~5期伴重度蛋白尿患者的临床表现和病理改变,并随访观察患者的预后。方法 回顾性分析2005年7月至2009年2月CKD 3~5期患者174例。比较尿蛋白≥3.0 g/24 h的重度蛋白尿组（A组）及尿蛋白<3.0 g/24 h的轻、中度蛋白尿组（B组）患者的临床和病理特点、治疗疗效及随访中肾存活率。结果 A组患者与B组患者相比,肾活检时肾功能较差,进入CKD 4期及以上的比例更高（95.92% vs. 86.84%,P<0.05）。A组患者肾脏病理类型多样、复杂,但肾小管间质疾病及血管病变所致肾损伤少见。IgA肾病中,A组患者的肾脏病理活动性病变较B组更为严重。经糖皮质激素或免疫抑制剂治疗后,A组患者尿蛋白较治疗前显著下降［（2.77±1.98）vs.（6.21±3.37）g/24 h,P<0.01］,血白蛋白水平升高［（38.73±5.86）vs.（31.42±7.63）g/L,P<0.01］,肾小球滤过率升高［（34.69±26.35）vs.（20.25±6.87）mL·min^-1·1.73 m^-2,P<0.01］,肾功能改善,但肾存活率低于B组（50.75% vs. 70.83%,P<0.05）。结论 CKD 3~5期伴重度蛋白尿患者与伴轻、中度蛋白尿患者相比,肾功能更差,病理上活动性病变更明显,肾存活率更低;激素及免疫抑制剂治疗可使部分患者的尿蛋白减少,改善肾功能。CKD 3~5期患者仍需行肾活检以便明确诊断、及时治疗。