产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性及基因型研究

肺炎克雷伯菌是医院和社区感染的重要病原菌 ,产生超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs) ,对第三代头孢菌素产生耐药性。为了对我院产肺炎克雷伯菌的耐药情况和基因型特征进行调查 ,以便采取有效措施加以控制 ,我们对 1999年 8月～ 2 0 0 1年 12月临床分离的肺炎克雷伯菌 ,进行了耐药性和基因型研究。一、材料和方法1.菌株来源 :试验菌株全部为我院 1999年 8月～ 2 0 0 1年 12月从各类临床感染性标本中分离出来的肺炎克雷伯菌。2 .仪器 :生物梅里埃公司生产的VITEKAMS全自动微生物鉴定及药敏系统 ,美国BIO RAD公司产的基因扩增仪。3 .抗生素敏…     

肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶耐药性分析

超广谱β—内酰胺酶(ESBLs)主要由肠杆菌科细菌产生，尤以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为代表。为了解我院ESBLs菌的发生率和耐药特点，以为临床合理选择抗生素和有效控制ESBLs的传播和流行，我们对82株肺炎克雷伯菌(K．Pn)做了ESBLs的检测，并分析其对11种抗生素的耐药性，结果如下。     

肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测

目的　了解耐氨苄西林肺炎克雷伯菌超广谱β 内酰胺酶 (ESBL)产生情况。 方法　用双纸片扩散法和Etest筛选肺炎克雷伯菌ESBLs ;用SHV PCR检测SHVβ 内酰胺酶基因 ,进一步用PCR NheⅠ酶切检测SHV ESBL。 结果　 36株肺炎克雷伯菌中有 30株产 β 内酰胺酶 ,31株含SHVβ 内酰胺酶基因 ,8株ESBL菌表型阳性 ,其中 3株为SHV ESBL。 结论　肺炎克雷伯菌是产ESBL的常见菌 ,实验室对其检测和监控非常重要     

医院产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的 研究医院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌(KPN)的耐药现状,为临床用药提供依据.方法 将医院分离KPN的药敏试验结果应用WHONET 5.5软件进行统计学分析.产ESBLs菌株采用双纸片协同实验测定并经CLSI确证试验确认.结果 13年中KPN和产ESBLs KPN的分离率为18.7%和75.3%,产ESBLs菌株的耐药率远高于非产ESBLs菌株.除亚胺培南、阿米卡星和左氧氟沙星对产ESBLs KPN敏感率高外,其他抗菌药物耐药严重.结论医院应加强对产ESBLs菌株的监控,防止多药耐药菌的传播.碳青霉烯类是治疗产ESBLs KPN最有效的药物.     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的将2009年1月-2011年12月我院培养分离的319株KPN采用双纸片协同试验筛选ESBLs菌株,以美国临床试验室标准化协会（CLSI）2009年版为判断标准。应用WHONET 5.5软件进行统计学分析。结果 KPN和产ESBLs KPN的分离率为14.0%和41.7%。产ESBLs菌株的耐药率远高于非产ESBLs菌株（P〈0.01）。产ESBLs KPN除对亚胺培南/西司他丁、美罗培南、阿米卡星、呋喃妥因和头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦敏感率较高外,对其他抗菌药物耐药严重。结论应重视对产ESBLs菌株的监控。控制易诱导产生ESBLs的三代、四代头孢菌素的使用。碳青霉烯类是治疗产生ESBLs最有效的药物。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药分析

目的　了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药性、耐药特点,指导临床合理用药。方法　采用纸片扩散法(K -B法)对产ESBLs肺炎克雷伯菌的体外抗生素耐药性作了初步研究。结果产ESBLs细菌对哌拉西林、头孢唑啉、头孢呋新、头孢噻肟的耐药性高达81.8%～10 0 .0 % ,对头孢他啶、头孢哌酮/舒巴坦的耐药性铰低,分期为2 7.3%、36 .4 % ,对喹诺酮类、氨基糖苷类、磺胺类的耐药率分别达到5 9.1%、6 3.6 %、95 .5 % ,所有受试菌对亚胺培南均敏感。结论　治疗ES BLs菌引起的感染,最有效的抗菌药物是亚胺培南,其次是β-内酰胺酶抑制剂的复合物。     

产超广谱β-内酰胺酶多重耐药的肺炎克雷伯菌相关基因研究

目的 了解山西地区五家医院多重耐药的肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumoniae,KP）的耐药特点,并研究其产超广谱β-内酰胺酶（extended spectrum β-lactamaes,ESBLs）多重耐药的KP相关基因的流行情况.方法 收集2010年1月-2012年12月山西地区五家医院临床标本中分离的KP2516株,采用药敏试验（K-B法）和ESBLs确证实验筛选多重耐药的KP,采用PCR法扩增ESBLs多重耐药的KP相关基因,选取阳性产物进行测序并在Genbank进行分析.结果 2516株KP中,筛选出40株产ESBLs的多重耐药KP.PCR法基因扩增检测出40株blaTEM型,1株SHV型和4株KPC型;检测出染色体介导的GyrA型32株,质粒介导的qnrA型8株,qnrB型15株,以及qnrS型2株;没有检出金属酶NDM-1基因.结论 多重耐药的KP耐药机制非常复杂,多重耐药菌株的出现导致同一菌株中同时携带几种基因.因此,应加强临床病例的监测,合理使用抗菌药物,减少泛耐药菌株的传播.     

新疆乌鲁木齐市产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌基因分型及耐药分析

目的了解新疆乌鲁木齐市产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的基因分型和耐药性。方法采用纸片扩散法对肺炎克雷伯菌进行抗菌药物的敏感性实验,并用PCR对ESBLs进行基因型分析。结果 50株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,有10株携带TEM型基因,有12株携带SHV型基因,有38株携带CTX-M型基因。其中,有24株同时携带两种或两种以上基因,且多为CTX-M型与TEM型或SHV型基因共同存在。另外,还有1株实验菌株扩增结果显示为阴性。50株产ESBLs的肺炎克雷伯菌对亚胺培南和美洛培南100.0%敏感;对头孢唑啉、头孢呋辛、头孢哌酮、哌拉西林100.0%耐药;对氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星的耐药率分别为97.1%、92.2%;四环素类、磺胺类抗生素及头孢哌酮/舒巴坦耐药率分别为18.6%、28.5%及28.5%。结论新疆乌鲁木齐市产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性严重,基因型以blaCTX-M为主而且多基因携带情况比较常见,多为CTX-M型与TEM型或SHV型基因同时存在。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌的耐药情况分析

目的调查萍乡市人民医院痰标本中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌的耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法收集萍乡市人民医院2014年7月至12月临床分离肺炎克雷伯菌的169例痰标本,对产ESBLs肺炎克雷伯菌和非产ESBLs肺炎克雷伯菌的药敏结果进行对比分析,了解产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药情况。结果 169例检出肺炎克雷伯菌的痰标本中,分离出产ESBLs阳性株76株,其阳性率为44.97%;肺炎克雷伯菌产ESBLs株与非产ESBLs株对14种抗生素耐药情况的比较:除两者对亚胺培南的耐药率均为0外,对其他抗生素产ESBLs株的耐药率均高于非产ESBLs株。结论产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药情况严重,但对亚胺培南、美罗培南和哌拉西林/他唑巴坦呈现较高敏感性。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌基因型研究

目的：研究医院感染超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的基因型。方法：收集分离鉴定菌株，通过K—B法药敏实验初筛以确认产ESBLs菌株，并对ESBLs基因进行初步分型。结果：17株肺炎克雷伯菌产生的ESBLs以CTX-M-3、CTX-M-15、CTX-M-22为主要基因型，其中8株为CTX—M-3型；6株为CTX-M-22型；1株为CTX-M-15型；1株同时产CTX-M-3、CTX-M-22；1株同时产CTX-M-15、CTX-M-22型。结论：我院肺炎克雷伯菌临床分离株中的ESBLs基因型以CTX-M型酶为主。     

产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌中质粒头孢菌素基因型研究

肺炎克雷伯菌是医院内感染相关的常见细菌之一，对抗生素耐药主要原因是产生了各种β内酰胺酶。为了解我院肺炎克雷伯菌中β内酰胺酶编码基因存在情况，我们进行了相关基因的检测，现将结果报道如下。     

肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的监测肺炎克雷伯菌超广谱β—内酰胺酶(extended spectrum B-lactamases,ESBLs)的产生及其对常用抗生索的耐药性。方法对我院2003年1月~2004年12月所分离的482株肺炎克雷伯菌,采用法国梅力埃自动细菌鉴定及药敏测试仪进行检测。结果肺炎克雷伯菌产ESBLs率山2003年的28.9%上升到2004年的40.1%,差别有显著性(P<0.05)。产ESBLs株耐药性显著高于非产ESBLs株;β—内酰胺酶抑制剂复合物头孢哌酮/他唑巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、第四代头孢菌素头孢吡肟和碳青酶烯类(亚胺培南和美罗培南)对产ESBLs菌株有较好敏感性,亚胺培南和美罗培南仍然为最有效抗尘素。结论近年来肺炎克雷伯菌产ESBLs率显著升高:亚胺培南和美罗培南仍然为最有效抗牛素;应该采取有效措施控制产ES-BLs肺炎克雷伯菌感染。     

产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌分子流行病学研究进展

产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）是导致肺炎克雷伯菌耐药的主要原因.现对其基因分型、检测方法及产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌分子流行病学研究作一综述.     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及其耐药基因分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的发生率,分析及研究其耐药性和耐药基因分型。方法用药敏纸片法对142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌进行抗生素药物敏感试验,并对这2种菌株做ESBLs初筛和确证试验。对其中60株ESBLs阳性菌（大肠埃希菌29株,肺炎克雷伯菌31株）用聚合酶链反应（PCR）检测TEM、SHV、CTX-M3种基因并进行测序分型。结果142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌中确证试验阳性率分别为56.3%和41.8%。产ESBLs菌对头孢类抗生素高度耐药,对庆大霉素、环内沙星的耐药率为71.3%-88.5%,对亚胺培南高度敏感（100.0%）,对头孢西丁、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦等的敏感性在63.8%-92.0%。60株ESBLs阳性菌中,TEM、SHV、CTX-M3种基因检出率分别为58.3%、33.3%、66.7%。其中29株大肠埃希菌中,TEM基因检出率为75.8%,SHV基因检出率为0,CTX-M基因检出率为86.2%。31株肺炎克雷伯菌中,TEM基因检出率为41.9%,SHV基因检出率为64.5%,CTX-M基因检出率为48.4%。有35株（58.3%）菌株同时检测到2种以上基因型。序列分析证实TEM扩增产物均属于TEM-1基因,CTX-M扩增产物均属于CTX-M-3基因,而SHV扩增产物则分别属于SHV-1、SHV-5、SHV-11、SHV-12、SHV-28。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs的检出率较高,CTX-M-3、SHV-11和SHV-12是我院产ESBLs菌株的主要基因型。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测及其耐药基因分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的发生率,分析及研究其耐药性和耐药基因分型。方法用药敏纸片法对142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌进行抗生素药物敏感试验,并对这2种菌株做ESBLs初筛和确证试验。对其中60株ESBLs阳性菌(大肠埃希菌29株,肺炎克雷伯菌31株)用聚合酶链反应(PCR)检测TEM、SHV、CTX-M3种基因并进行测序分型。结果142株大肠埃希菌和79株肺炎克雷伯菌中确证试验阳性率分别为56.3%和41.8%。产ESBLs菌对头孢类抗生素高度耐药,对庆大霉素、环内沙星的耐药率为71.3%~88.5%,对亚胺培南高度敏感(100.0%),对头孢西丁、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦等的敏感性在63.8%~92.0%。60株ESBLs阳性菌中,TEM、SHV、CTX-M3种基因检出率分别为58.3%、33.3%、66.7%。其中29株大肠埃希菌中,TEM基因检出率为75.8%,SHV基因检出率为0,CTX-M基因检出率为86.2%。31株肺炎克雷伯菌中,TEM基因检出率为41.9%,SHV基因检出率为64.5%,CTX-M基因检出率为48.4%。有35株(58.3%)菌株同时检测到2种以上基因型。序列分析证实TEM扩增产物均属于TEM-1基因,CTX-M扩增产物均属于CTX-M-3基因,而SHV扩增产物则分别属于SHV-1、SHV-5、SHV-11、SHV-12、SHV-28。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs的检出率较高,CTX-M-3、SHV-11和SHV-12是我院产ESBLs菌株的主要基因型。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的探讨临床大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的危险因素,对大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产ESBLs与抗生素使用时间的关系进行分析研究。方法前瞻性监测产ESBLs菌的情况,并对感染者进行临床调查。结果产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌的耐药率分别是：头孢噻肟钠为95．3％,阿莫西林加棒酸为72．2％,产ESBLs菌感染者第三代头孢菌素的使用率（72％）显著高于非产ESBLs菌感染者（35％）,P〈0．05;第三代头孢菌素的大量使用诱导ESBLs的产生。结论严重的基础病、高龄、机体免疫力低下、长期住院者是ESBLs菌感染的易感宿主;皮质激素、化疗及介入性疗法是ESBLs感染的高危因素。滥用抗生素是产生ESBLs的重要因素,合理使用抗生素是防止ESBLs产生的主要措施。     

肺炎克雷伯菌产ESBLs基因型分析

目的 分析我院临床分离的肺炎克雷伯菌产ESBLS基因型，为指导临床合理用药提供依据。方法 用琼脂稀释法检测10种抗菌药物对已确定为产ESBLS肺炎克雷伯菌的MIC，分别用TEM、SHV、CTX-M、OXA通用引物进行PCR扩增、产物克隆测序分析。结果 83株产ESBLS肺炎克雷伯菌中，产TEM型75株，SHV型41株，CTX-M型25株，OXA型9株。其中，同时产3种酶有13株，占15．7％；同时产2种酶有59株，占71．1％；仅11株产单1种酶，占13．2％。而9株同时产TEM、SHV和CTX-M型，测序结果为CTX-M-3，TEM-1及多种SHV型（SHV-12、SHV-28）。药敏结果表明，同时产2或3种酶的菌株比产单1种酶的菌株耐药性更严重。结论 所分离产ESBLS肺炎克雷伯菌主要为TEM、SHV、CTX-M、OXA型，且同时存在产2～3种酶，应引起临床高度重视。     

肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶及AmpC酶分析研究

目的：研究目前我国肺炎克雷伯菌中超广谱β内酰胺酶(ESBLs)及质粒介导AmpC酶产生情况。方法：以美国国家临床实验室标准委员会(NCCLS)推荐纸片扩散法确证试验检测肺炎克雷伯菌产ESBLs情况。以三维试验检测其产质粒介导AmpC酶情况。等电聚焦电泳测定所产粗酶的等电点。聚合酶链反应(PCR)检测β内酰胺酶亚型。DNA序列测定判断质粒介导AmpC酶的种类。结果：检出产ESBLs肺炎克雷伯菌37株，检出率17．5％(37／212)。三维试验检测出产质粒介导AmpC酶肺炎克雷伯菌2株，检出率0．9％(2／212)，此2株菌均同时产ESBLs。在所产ESBLs中，CTX—M型占83．8％(31／37)，其中CTX-M-1组占54．1％(20／37)，Toho-2组占29．7％(11／37)，CTX-M-1组：Toho-2组为1．8：1；SHV型占24．3％(9／37)。DNA测序结果，1株肺炎克雷伯菌所产质粒介导AmpC酶为DHA-1。结论：①肺炎克雷伯菌中ESBLs以CTX-M型为主。②在肺炎克雷伯菌中发现1株质粒介导AmpC酶为DHA-1。     

广州地区146株产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型研究

目的 检测临床收集多重耐药的肺炎克雷伯菌的基因型,以利于耐药性的控制与指导临床用药.方法 收集广州地区2006年1月～2008年12月来自各种标本的产超广谱β-内酰胺酶(extended spectrum β-lactamases,ESBLs)肺炎克雷伯菌146株,聚合酶链反应(PCR)对ESBLs阳性菌进行耐药基因检测并测序.结果 146株产ESBLs肺炎克雷伯菌中,120株产CTX-M型β-内酰胺酶,52株产TEM型β-内酰胺酶,12株产OXA型β-内酰胺酶,除66株为CTX-M单独存在外,其余均与TEM,OXA共存.结论 广州地区产ESBLs多重耐药肺炎克雷伯菌株携带基因型复杂,应加强临床细菌基因水平的耐药监测,采取有效措施防止耐药性的传播.     

大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶及耐药性监测

目的分析2004年11月～2005年11月各类临床标本中检出的大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药性，了解这两种细菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况，为临床合理使用抗菌药物提供参考．方法对所有送检标本按《全国临床检验操作规程》进行常规细菌培养，应用湖南天地人生物科技有限公司提供的微生物生化-药敏试剂卡鉴定临床标本到种，对分离出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌采用K—B琼脂扩散法进行药敏试验，按2001年美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的标准判定结果。采用双纸片协同法进行ESBLs菌株初筛试验，采用2001年NCCLS推荐的纸片扩散确证法进行ESBLs菌株确证试验。结果255株大肠埃希菌中超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的筛选试验：确证试验阳性77株，阳性率为30、20％；119株肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的筛选试验：确证试验阳性22株，阳性率为18．49％。产ESBLs菌对抗生素的耐药性与不产ESBLs菌相比有显著差异（P〈0.05）。结论大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的耐药车较严重，产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）耐药菌株的不断出现应引起临床医师的高度重视，在诊疗过程中应根据药敏试验合理选择抗菌药物。