益肾通络方对膜性肾病大鼠足细胞表型转化的影响

目的通过观察膜性肾病(MN)足细胞标志蛋白Nephrin、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的变化,探讨益肾通络方对膜性肾病大鼠足细胞转分化的干预作用及其可能机制。方法从60只实验鼠中随机选取15只为正常对照组,其余通过尾静脉注射阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)法建立膜性肾病动物模型,造模成功后将大鼠随机分为模型组、贝那普利(10 mg/kg)组、益肾通络方(21.33 g/kg)组。各组依据对应的剂量分别灌胃给药,治疗结束后检测24 h蛋白尿(UTP)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)评估大鼠治疗情况;观察大鼠的肾脏病理形态学变化;免疫组化检测大鼠肾组织Nephrin、α-SMA蛋白表达。结果经贝那普利和益肾通络方干预后,UTP、TC、TG较模型组显著下降,TP、ALB较模型组显著增高(P0.05);BUN、Scr差异无统计学意义(P0.05)。免疫组化显示,贝那普利组与益肾通络方组Nephrin表达较模型组上升,a-SMA表达较模型组降低。结论益肾通络方能够降低膜性肾病大鼠蛋白尿,升高血浆白蛋白,降低血脂,其作用机制可能与抑制足细胞发生表型转分化有关。     

降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠肾保护作用及对肾组织Bcl-2和Bad表达的影响

目的观察降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠模型血液生化指标及对肾组织Bcl-2、Bad表达的影响,探讨降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠的肾保护作用和可能机制。方法将60只SD大鼠随机选取10只为对照组,其余50只进行造模,造模成功后将大鼠随机分为模型组、贝那普利组和降脂通络软胶囊(25、50、100 mg/kg)组,每组各10只,各组按相应剂量给药,在给药的第4周末检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)及血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;采用电镜、免疫荧光观察肾脏病理形态学变化,免疫组化及Real-time PCR法检测各组大鼠肾组织Bcl-2、Bad的表达情况。结果与模型组比较,各给药组UTP、TC、TG均有所降低(P0.05),各给药组TP、ALB均有所升高(P0.05)。降脂通络软胶囊50、100 mg/kg组与贝那普利组UTP、TC、TG、TP、ALB比较差异不显著(P0.05),效果优于降脂通络软胶囊25 mg/kg组(P0.05)。与对照组比较,各给药组及模型组BUN、Scr均未见明显变化,差异不显著(P0.05)。与模型组相比,各给药组大鼠肾组织中Bcl-2 mRNA的表达较模型组明显上调,Bad mRNA表达下调,差异显著(P0.05);降脂通络软胶囊50、100 mg/kg组与贝那普利组Bcl-2、Bad比较差异不显著(P0.05),效果优于降脂通络软胶囊25 mg/kg组(P0.05)。结论降脂通络软胶囊对膜性肾病大鼠的肾保护作用可能与其上调肾组织中Bcl-2 mRNA表达,下调Bad mRNA表达,抑制足细胞凋亡、修复受损足细胞有关。     

丹参多酚酸盐对阳离子化牛血清白蛋白致膜性肾病大鼠的影响

目的观察丹参多酚酸盐对阳离子化牛血清白蛋白致膜性肾病大鼠血液生化指标、肾组织病理形态及足细胞裂孔隔膜蛋白CD2相关蛋白(CD2AP)、结蛋白(Desmin)表达的影响,探讨丹参多酚酸盐对膜性肾病大鼠的肾保护作用及其可能机制。方法健康雄性SD大鼠随机分为对照组和造模组,采用尾iv阳离子化牛血清白蛋白的方法复制膜性肾病大鼠模型。造模成功的大鼠随机分为模型组、盐酸贝那普利组和丹参多酚酸盐低、中、高剂量(16.7、33.3、66.7 mg/kg)组。每组按相应剂量给药,给药结束后检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)和血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;免疫荧光、光镜、电镜下观察大鼠肾脏病理形态;免疫组化及实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测各组大鼠肾组织CD2AP、Desmin m RNA的表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠UTP显著增加(P0.01),血清TC、TG水平显著升高(P0.01),血清TP、ALB水平显著降低(P0.01)。与模型组比较,各治疗组大鼠UTP、TC、TG水平均显著降低(P0.05、0.01),TP、ALB水平均显著升高(P0.01);丹参多酚酸盐各剂量组与盐酸贝那普利组大鼠UTP、TC、TG、TP、ALB比较无显著差异;丹参多酚酸盐各剂量组组内比较亦无明显差异。各组大鼠BUN、Scr相比无明显差异。与对照组比较,模型组大鼠肾组织CD2AP蛋白及m RNA表达量均显著减少,Desmin蛋白及m RNA表达量显著增多(P0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠CD2AP蛋白及m RNA表达量显著增多,Desmin蛋白及m RNA表达量显著减少(P0.01);各治疗组之间相比无显著差异。结论丹参多酚酸盐对膜性肾病大鼠的肾保护作用可能与上调CD2AP表达、下调Desmin表达,抑制足细胞损伤,保护肾小球滤过屏障的完整性有关。     

益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Nephrin mRNA 和Podocin mRNA表达的影响

目的观察益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达的影响。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,其中造模组采用抗近端小管刷状缘抗原(抗Fx1A)血清一次性尾静脉注射诱导被动型海曼(Heymann)肾炎模型,造模成功后将造模组随机分为模型组、洛丁新组及益气活血化瘀汤低、中、高剂量组,每组6只。每组按相应剂量灌胃4周,每周收取大鼠24 h尿量,检测24 h尿蛋白定量(UTP)。4周末处死大鼠,心脏取血,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-c)、三酰甘油(TG)水平,取肾脏行Masson、PASM染色观测肾脏组织病理改变,免疫荧光法观察Ig G、C3改变,实时荧光PCR检测Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达。结果与正常对照组比较,其余5组UTP均升高(P0.05),Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达量均减少(P0.01);与模型组比较,给药组UTP均减少(P0.05),Nephrin和Podocin mRNA表达量均增加(P0.01),TP、ALB有所升高但差异无统计学意义(P0.05),Scr、BUN、TC、HDL-c、TG差异无统计学意义(P0.05);与洛丁新组比较,益气活血化瘀汤低、中、高剂量组UTP有所减少,但差异无统计学意义(P0.05),各生化指标差异无统计学意义(P0.05),益气活血化瘀汤低、中、高剂量组肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA表达均有所增加,但差异无统计学意义(P0.05);益气活血化瘀汤各组之间各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论益气活血化瘀汤可明显减少膜性肾病大鼠的尿蛋白程度,减少肾脏病理损伤,上调肾脏组织Nephrin mRNA、Podocin mRNA的表达,延缓膜性肾病的进展。     

益肾通络方抑制EGFR及下游信号途径对膜性肾病大鼠肾脏保护作用的研究

目的探究益肾通络方对膜性肾病大鼠肾组织表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及足细胞和肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法 SD大鼠尾ⅳ阳离子牛血清白蛋白(cationic bovine serum albumin,C-BSA)建立膜性肾病大鼠模型,给予益肾通络方和盐酸贝那普利进行干预,检测各组大鼠24 h尿蛋白(urinetotal protein,UTP)、血清中白蛋白(albumin,ALB)和总胆固醇(total cholesterol,TC)水平;观察各组大鼠肾组织病理变化;采用TUNEL法检测各组大鼠肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡情况;采用免疫组化法检测各组大鼠肾组织磷酸化EGFR (p-EGFR)和剪切型半胱氨酸蛋白酶-3 (cleaved Caspase-3)的表达情况;采用Western blotting法检测各组大鼠肾组织p-EGFR、Ras相关的C3 肉毒素底物 1 (Ras-related C3 botulinum toxin substrate l,Racl)、c-jun、c-fos、FasL 和 cleaved Caspase-3 蛋白表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠24 h UTP以及血清中TC水平明显升高(P0.01),ALB水平显著降低(P0.01);肾小球基底膜、足细胞结构发生改变;肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡明显增多(P0.01);肾组织p-EGFR、Racl、c-jun、c-fos、FasL和cleaved Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,益肾通络方中、高剂量组大鼠24 h UTP以及血清中TC水平明显降低(P0.01),ALB水平明显升高(P0.01);肾组织病理损伤得到改善;肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡明显减少(P0.05、0.01),肾组织p-EGFR、Racl、c-jun、c-fos、FasL和cleaved Caspase-3蛋白表达水平明显降低(P0.05、0.01)。结论益肾通络方可以减轻膜性肾病大鼠肾脏病理损伤,抑制肾组织足细胞和肾小管上皮细胞凋亡,其机制可能与抑制EGFR及下游Racl/c-jun、c-fos/FasL信号途径有关。     

加味升降散对膜性肾病大鼠肾保护作用及对肾组织线粒体活性氧表达的影响

目的:观察加味升降散对膜性肾病(MN)大鼠模型血液生化指标及对肾线粒体活性氧(ROS)表达的影响。方法:将60只SD雄性大鼠,适应性喂养7 d后随机分为4组,造模成功后西药组给予盐酸贝那普利(10 mg·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,中药治疗组给予加味升降散(13.22 g·kg~(-1)·d~(-1))灌胃,模型组和正常组给予同等剂量的生理盐水灌胃。4周后,生化试剂盒测定各组大鼠24 h尿蛋白定量(UTP),血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),总蛋白(TP),白蛋白(ALB),尿素氮(BUN),肌酐(SCr),实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定大鼠肾组织线粒体ROS mRNA的表达。结果:与正常组比较,其余各组造模后UTP,TC,TG均升高(P0.01),TP,ALB显著下降(P0.05);治疗后,加味升降散组、盐酸贝那普利组与正常组比较,血液生化指标及对肾线粒体ROS均改善,但未恢复正常水平。治疗结束后,与模型组比较,加味升降散组、盐酸贝那普利组UTP,TC,TG均有所降低(P0.05),加味升降散组、盐酸贝那普利组TP,ALB均有所升高(P0.05)。加味升降散组与盐酸贝那普利组UTP,TC,TG,TP,ALB比较无统计学意义。治疗结束后,与模型组比较,加味升降散组、盐酸贝那普利组大鼠肾组织中足细胞线粒体ROS mRNA的表达较模型组明显下调(P0.05);加味升降散组与盐酸贝那普利组线粒体ROS mRNA比较差异无统计学意义。结论:加味升降散对膜性肾病大鼠的肾保护作用可能与其能够下调肾组织线粒体ROS mRNA表达,抑制足细胞凋亡、修复受损足细胞有关。     

雷公藤多苷联合小剂量激素治疗特发性膜性肾病疗效研究

目的:探讨雷公藤多苷联合小剂量激素治疗特发性膜性肾病(IMN)临床疗效。方法:研究对象选择408例IMN患者,由计算机SAS 软件包产生的随机编号将其随机分为观察组和对照组,各组患者204例。对照组采用雷公藤多苷治疗,观察组采用雷公藤多苷、小剂量强的松联合治疗,均治疗6个月。比较两组患者治疗总有效率,治疗前和治疗后的血清白蛋白(ALB)、24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、血清肌酐(SCr)、尿微量白蛋白(MAU)、血清肾损伤分子-1(KIM-1)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平。结果:观察组总有效率92.65%明显高于对照组的74.51%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组ALB水平比对照组高,24 h UTP、MAU、TG、TC和KIM-1水平均比对照组低,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:雷公藤多苷和小剂量激素联合治疗IMN可有效降低MAU和血清KIM-1水平,改善肾功能、血脂指标,临床疗效较好。     

保肾通络方对早期糖尿病肾病大鼠尿蛋白及尿Nephrin、Podocin排泄的影响

目的观察不同剂量的保肾通络方对早期糖尿病肾病大鼠尿蛋白、尿Nephrin、尿Podocin排泄的影响,探讨本方对糖尿病肾病的作用机制及最佳剂量。方法将链脲佐菌素(streptozocin,STZ)建立的早期糖尿病肾病大鼠模型随机分为正常组、模型组及中药高、中、低剂量组。用药8周后,检测各组大鼠血糖、尿糖、尿白蛋白及尿Nephrin、Podocin的水平,并将尿Nephrin、Podocin的排泄浓度与尿白蛋白做相关性分析。结果药物干预8周后,中药各剂量组大鼠的血糖、尿糖、尿白蛋白水平较模型组有降低趋势,但组间差异无统计学意义(P0.05);中药各剂量组大鼠尿Nephrin、Podocin排泄均低于模型组,其中中药中剂量组、中药高剂量组尿Nephrin排泄明显低于模型组(P0.05),但二者组间差异无统计学意义(P0.05);Pearson相关分析显示尿Nephrin、尿Podocin排泄呈正相关(r=0.517,P0.05),且二者均与尿白蛋白水平呈正相关(r=0.746,P0.05)。结论保肾通络方对早期糖尿病肾病大鼠足细胞可能存在保护作用,其中对尿Nephrin排泄的影响可能先于尿白蛋白出现。     

益肾通络方对膜性肾病大鼠的肾保护作用及足细胞骨架相关蛋白的影响

目的探讨益肾通络方对膜性肾病大鼠的肾脏保护作用及可能的机制。方法健康雄性SD大鼠60只随机分为对照组10只和造模组50只,造模组采用尾iv阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)的方法复制膜性肾病大鼠模型。造模成功后再随机分为模型组、盐酸贝那普利组和益肾通络方低、中、高剂量(6.61、13.22、26.44 g/kg)组,各组按照相应剂量ig给药,每天1次,连续给药4周。给药结束后检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)、血清总胆固醇(TC)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)水平;免疫荧光检测各组大鼠肾组织Ig G免疫复合物沉积情况,电镜下观察肾小球基底膜及足细胞形态结构;免疫组化及实时荧光定量PCR(q RT-PCR)法检测各组大鼠肾足细胞骨架相关蛋白ezrin、synaptopodin的表达。结果与模型组比较,各治疗组大鼠UTP、TC水平均显著下降(P0.01),TP、ALB水平均显著上升(P0.01);益肾通络方中、高剂量组与盐酸贝那普利组疗效相当,效果优于益肾通络方低剂量组;各组大鼠BUN、Scr相比无明显差异。与对照组比较,模型组大鼠肾足细胞骨架相关蛋白ezrin、synaptopodin m RNA表达显著减少(P0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠肾足细胞相关蛋白ezrin、synaptopodin m RNA表达均有不同程度增加(P0.01);益肾通络方中、高剂量组大鼠肾组织ezrin、synaptopodin m RNA表达量与盐酸贝那普利组相当,均高于益肾通络方低剂量组。结论益肾通络方对膜性肾病大鼠具有治疗作用,其机制可能与防止足细胞骨架相关蛋白ezrin、synaptopodin降解、维持足细胞骨架及足突结构完整性相关。     

温阳祛湿通络方治疗特发性膜性肾病临床疗效研究

目的:研究温阳祛湿通络方治疗特发性膜性肾病(IMN)患者的临床疗效。方法:选取符合特发性膜性肾病纳入标准的患者120例,随机分为对照组和治疗组,每组60例。对照组60例予以激素联合环磷酰胺治疗,治疗组60例在对照组基础上加用温阳祛湿通络方口服。2组均于治疗6个月后统计临床疗效,观察对比2组治疗前后血清抗磷脂酶A2受体抗体(PLA2R)、24 h尿蛋白定量(24 h UTP)、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、中医证候积分情况以及不良反应发生情况。结果:治疗6个月后,治疗组总有效率88.3%,对照组总有效率65.0%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05);治疗后治疗组血清PLA2R水平低于对照组(P<0.05);治疗后2组24 h UTP均降低(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05);治疗后2组血浆ALB均升高(P<0.05),且治疗组高于对照组(P<0.05);治疗后2组TC、TG、LDL-C均降低(P<0.05),且治疗组低于对照组(P<0.05);治疗后治疗组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论:温阳祛湿通络方可减轻IMN患者的临床不适症状,减少蛋白尿,升高ALB,调节脂代谢,降低激素和免疫抑制剂带来不良反应的发生率,治疗效果明显。     

益肾通络方联合西药治疗原发性膜性肾病脾肾亏虚证30例临床观察

目的观察益肾通络方联合西药治疗原发性膜性肾病脾肾亏虚证的临床疗效及安全性。方法将60例原发性膜性肾病脾肾亏虚证患者随机分为治疗组和对照组各30例。对照组给予醋酸泼尼松片,起始剂量1 mg/(kg·d),晨起顿服;雷公藤多苷片每次20 mg,每日3次;盐酸贝那普利片每次10 mg,每日1次,干咳明显患者改予缬沙坦胶囊每次80 mg,每日1次;双嘧达莫片50 mg,每日3次。治疗组在对照组基础上加用益肾通络方,每日1剂。两组均治疗3个月。分别于治疗前及治疗1、3个月检测24小时尿蛋白定量(UTP)、血总蛋白(TP)、血白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、血尿酸(UA)、血常规及肝功能。结果治疗1个月,两组患者UTP均较治疗前明显下降(P0.05或P0.01);治疗3个月,两组患者UTP、TG、TC均较治疗前明显下降,TP、ALB均明显上升(P0.05或P0.01),且治疗组UTP明显低于对照组(P0.01)。治疗1、3个月,两组患者BUN、SCr、UA均无明显变化(P0.05)。治疗1、3个月两组血常规及肝功能均未见明显变化。结论益肾通络方联合西药治疗原发性膜性肾病脾肾亏虚证能降低24小时尿蛋白定量、提高血浆蛋白水平、降低血脂,且安全性好,在降低24小时尿蛋白方面优于单纯西药治疗。     

普罗布考对2型糖尿病肾病大鼠足细胞的保护作用

目的探讨普罗布考对糖尿病肾病大鼠足细胞的保护作用及相关机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为3组,正常组10只给予普通饲料喂养,模型组13只和普罗布考组13只给予高糖高脂饲料喂养。喂养8周后,模型组和普罗布考组以小剂量链脲佐菌素(STZ)(15~25 mg/kg)腹腔注射诱导2型糖尿病模型。之后普罗布考组给予普罗布考500 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予0.5%羟甲基纤维素钠灌胃,均1次/d,连续8周,期间模型组和普罗布考组给予高糖高脂饲料喂养,正常组普通饲料喂养。测定3组大鼠血糖、血脂及氧化应激指标,免疫组化法检测肾组织中Nephrin蛋白表达情况,RTPCR法检测肾组织中Nephrin、podocin和CD2AP mRNA表达情况。结果模型组和普罗布考组血清TG、TC、LDL-C、FPG、Hb A1c、HOMA-IR均明显高于正常组(P均0.05);普罗布考组血清TC、LDL-C水平均明显低于模型组(P均0.05),但FPG、Hb A1c、HOMA-IR与模型组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。模型组血清SOD、GSH-Px含量和肾组织中Nephrin蛋白及Nephrin、podocin、CD2AP mRNA相对表达量均明显低于正常组(P均0.05),血清MDA含量明显高于正常组(P0.05);普罗布考组血清SOD、GSH-Px含量和肾组织中Nephrin蛋白及Nephrin、podocin、CD2AP mRNA相对表达量均明显高于模型组(P均0.05),血清MDA含量明显低于模型组(P0.05)。结论普罗布考可能通过降低糖尿病肾病大鼠血脂水平及提高抗氧化能力,调节足细胞相关蛋白Nephrin、podocin、CD2AP的表达而延缓糖尿病肾病的进展。     

参芪蛭龙汤对大鼠膜性肾病的实验研究

目的:观察参芪蛭龙汤对阳离子牛血清白蛋白致大鼠膜性肾病的药效学作用。方法:40只大鼠,随机分成空白组、模型组、中药低剂量组和高剂量组,每组10只。制作阳离子牛血清白蛋白致大鼠膜性肾病模型6周,连续造模2周后,每日灌胃给药,给药4周后结束灌胃,取材前先留取24 h尿,之后用5%水合氯醛腹腔注射麻醉,腹主动脉取血,观察大鼠血常规、血流变、凝血四项、血糖、血脂、肾功、肝功,尿蛋白的变化。结果:与空白组比较,模型组TP、ALB含量显著下降(P0.01);尿蛋白定量、TC、TG、HDL-C、PTL、FIB含量明显升高(P0.01,P0.05);LDL-C含量未见明显变化(P0.05)。与模型组比较,中药低剂量组TP、ALB、GLU含量呈上升趋势(P0.05);尿蛋白定量、TG、FIB含量呈下降趋势(P0.05);TC、PTL含量显著下降(P0.05);HDL-C和LDL-C含量未见明显变化(P0.05)。与模型组比较,中药高剂量组TP、ALB、GLU含量显著上升(P0.05);尿蛋白定量、TC、TG、PTL、FIB含量显著下降(P0.05,P0.01);HDL-C和LDL-C含量未见明显变化(P0.05)。结论:参芪蛭龙汤具有降低尿蛋白、升高血清总蛋白和白蛋白的作用;改善膜性肾病大鼠高脂高凝状态,升高血糖,无明显肝肾毒副作用。     

通络愈肾方佐治特发性膜性肾病41例临床研究

目的:观察通络愈肾方对特发性膜性肾病(IMN)患者临床疗效、安全性及高凝状态的影响。方法:采用随机数字表法将82例IMN患者分为对照组和观察组各41例。对照组给予泼尼松、依那普利(或缬沙坦)、双嘧达莫等西药治疗,观察组在对照组基础上加用通络愈肾方治疗。两组均连续治疗3月,观察治疗前后24h尿蛋白定量(UTP)、血白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、血小板计数(PLT)、D-二聚体(D-D)、血小板聚集率(MPAR)等指标的改变情况,并统计不良反应。结果:治疗后观察组UTP、PLT、D-D、MPAR均明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);两组均无严重出血事件,观察组药物性库欣综合征发生率41.46%,明显低于对照组的68.29%,差异有统计学意义(P0.05)。结论:通络愈肾方在西药治疗基础上,可进一步减少IMN患者尿蛋白,改善高凝状态,拮抗激素毒副反应,无明显出血风险,疗效显著。     

Effects of Yishentongluo decoction on the expression of PAI-1, biochemical and pathological indicators in rat with experimental membranous nephropathy

目的 观察益肾通络方对膜性肾病(MN)SD大鼠肾组织纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)及生化、病理指标的影响.方法 将40只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、西药组及中药组4组,每组各10只.模型组、西药组及中药组大鼠予阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA) 2.5 mg(溶于1 mLpH值7.4磷酸盐缓冲液)尾静脉注射,对照组予等容积0.9％氯化钠注射液尾静脉注射,每周二、五、日各1次,连续4周.采用全自动生化分析仪测定各组大鼠血清白蛋白(Alb)、总蛋白(TP)、甘油三酯(TG)及总胆固醇(TC);采用双缩脲法测定24h尿蛋白定量;采用间接免疫荧光法检测免疫球蛋白G(IgG)和补体3(C3),采用透射电镜观察肾小球基底膜及足突变化;采用链球菌抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法进行PAI -1免疫组化检测.结果 模型组、西药组及中药组SD大鼠血清Alb、TP均低于正常对照组(P＜0.05),TG、TC及24h尿蛋白定量均高于正常对照组(P＜0.05);西药组、中药组血清Alb、TP均高于模型组(P＜0.05),TG、TC及24h尿蛋白定量均低于模型组(P＜0.05);中药组与西药组血清Alb、TP、TG、TC及24 h尿蛋白定量比较差异无统计学意义(P＞0.05).模型组、西药组及中药组大鼠肾组织均有不同程度的IgG及C3呈细颗粒状沿毛细血管袢及部分系膜区沉积,与模型组比较,中药组和西药组沉积显著减少.模型组大鼠肾小球基底膜增厚,西药组及中药组与模型组比较明显减轻.PAI -1主要表达于肾小球和肾小管上皮细胞内,在正常组中有微量表达.模型组、中药组及西药组大鼠肾组织中PAI -1的表达较正常对照组增强(P＜0.05),而中药组及西药组较模型组明显减轻(P＜0.05),中药组与西药组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 益肾通络方可显著降低MN SD大鼠尿蛋白,提高血浆蛋白,改善血脂代谢,抑制PAI -1在肾组织中的表达,减轻足变融合,促进受损的肾小球基底膜修复,从而减轻肾脏损伤,延缓肾脏慢性病理进展.     

活血通络方对膜性肾病大鼠肾功能的影响及对肾组织IFN-γ、VEGF干预机制的研究

目的:探讨活血通络方治疗膜性肾病的疗效,为临床治疗膜性肾病提出新的方法和途径。方法:将90只SD雄性大鼠,适应性喂养7天后随机选取15只为空白对照组,其余75只参照改良Border法进行造模,造模成功后将大鼠随机分为模型对照组、贝那普利组、活血通络方5.04、10.08、20.16g/kg组。空白对照组与模型对照组大鼠给予蒸馏水,贝那普利组给予盐酸贝那普利片(10mg/kg/d),治疗组给予活血通络方。在给药的第4周末检测大鼠血总蛋白(TP)、血白蛋白(ALB)、24小时尿蛋白定量(24hUTP)、γ干扰素(IFN-γ)、血管内皮生长因子(VEGF)及IFN-γmRNA、VEGFmRNA表达。总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、血尿酸(UA)的水平;观察大鼠肾脏病理形态学变化;免疫组化及Real-time PCR检测肾组织细胞因子的表达。结果:大鼠造模期间,共有3只死亡。造模4周后,造模组大鼠24h尿蛋白定量较空白对照组明显升高;治疗结束后,与空白对照组相比,模型对照组TP、ALB显著下降,24h-UTP、TC及TG显著升高,与模型对照组相比,活血通络方治疗各组与贝那普利组TP、ALB均不同程度升高,TC、TG均明显下降,活血通络方5.04、10.08、20.16g/kg/d组与贝那普利组相比,差异不明显,各组BUN、Scr水平无明显差异;治疗结束后与模型对照组比较,贝那普利组及活血通络方5.04、10.08、20.16g/kg/d组IFN-γmRNA表达下降,VEGF mRNA表达显著上升。结论:活血通络方可明显升高膜性肾病大鼠血总蛋白、血白蛋白水平,显著降低膜性肾病大鼠24小时尿蛋白定量,降低血TC、TG水平,下调膜性肾病大鼠肾组织IFN-γmRNA,上调VEGF mRNA,具有保护肾功能的作用。     

升阳益胃汤合补阳还五汤对特发性膜性肾病大鼠肾脏的保护作用及对Nephrin、CD2AP表达的影响

目的 观察升阳益胃汤合补阳还五汤对特发性膜性肾病大鼠肾脏的保护作用及对肾组织中肾病蛋白(Nephrin)、CD2相关蛋白(CD2AP)表达的影响。方法 取40只雄性SD大鼠,随机选择10只大鼠作为正常组,余30只大鼠尾静脉一次性注射羊抗大鼠F×1A血清0.4 mL/100 g制备特发性膜性肾病模型。将造模成功后大鼠随机分为模型组、升阳合补阳组、贝那普利组,每组10只。升阳合补阳组给予升阳益胃汤合补阳还五汤全方颗粒剂溶液9.2 g/(kg·d)灌胃,贝那普利组给予盐酸贝那普利溶液0.000 88 g/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,均1次/d,连续灌胃6周。于灌胃6周末收集各组大鼠24 h尿液,用以检测24 h尿蛋白水平;腹主动脉取血,检测血白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)水平;取肾组织,HE染色和Masson染色观察肾脏病理形态,免疫组化法和Western blot法检测肾脏组织中Nephrin、CD2AP表达情况。结果 与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白及血清TC水平均明显升高(P均<0.05),血清ALB水平明显降低(...     

雷公藤多苷联合小剂量激素治疗特发性膜性肾病的前瞻性对照研究

目的:探讨雷公藤多苷联合小剂量激素治疗特发性膜性肾病的临床治疗效果。方法:选取2014年8月至2015年11月黑龙江省中医药科学院肾内科收治的特发性膜性肾病患者91例作为研究对象,按照随机数表法随机分为对照组和观察组。对照组给予雷公藤多苷治疗,观察组给予同等雷公藤多苷治疗的基础上再给予小剂量激素治疗。比较2组患者血TC、TG、BUN、SCr、ALB、24 h尿蛋白水平,临床治疗效果,以及治疗后疾病2年累积复发率。结果:治疗后,2组患者血TC、TG、SCr、尿蛋白/24 h水平均显著低于治疗前,血ALB水平均显著高于治疗前;且观察组患者血TC、TG、SCr、尿蛋白/24 h水平均显著低于对照组,血ALB水平均显著高于对照组;以上差异均有统计学意义(P 0. 05)。观察组患者治疗总有效率明显高于对照组(χ2=4. 561,P=0. 033 0. 05),且差异有统计学意义(P 0. 05)。治疗后观察组特发性膜性肾病患者的2年累积复发率(6. 82%,3/44 vs 25. 53%,12/47; Log-rankχ2=5. 063,P=0. 024 0. 05)显著低于对照组,且有统计学意义(P 0. 05)。结论:雷公藤多苷联合小剂量激素治疗特发性膜性肾病,临床疗效较好,且预后较好,值得在临床推广应用。     

参芪地黄汤对阿霉素肾病大鼠足细胞Nephrin蛋白和mRNA表达的影响

目的:观察参芪地黄汤对阿霉素肾病大鼠Nephrin蛋白和mRNA表达的影响,探讨参芪地黄汤减少阿霉素肾病大鼠蛋白尿的作用机制。方法:随机分为正常组、模型组、参芪地黄汤组,造模后7、14、28、56 d检测尿蛋白,造模后28、56 d检测血清白蛋白(ALB)、血肌酐(Scr),HE染色光镜下观察肾组织,免疫组化法观察Nephrin蛋白表达,RT-PCR法检测Nephrin mRNA表达。结果:造模后7、14、28、56 d,模型组大鼠24 h尿蛋白定量均显著高于正常组(P<0.05)。造模后28、56 d,参芪地黄汤组大鼠24 h尿蛋白定量明显少于模型组(P<0.05)。造模后28、56 d,模型组大鼠肾组织Nephrin蛋白和mRNA的表达与正常组相比明显下降(P<0.05)。参芪地黄汤组Nephrin蛋白和mRNA的表达较同期模型组均有显著增加(P<0.05)。结论:参芪地黄汤可能通过保留阿霉素肾病大鼠Nephrin的表达,从而减少蛋白尿,保护肾功能,改善肾病理。     

益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Podocin表达的影响

目的观察益气活血化瘀汤对膜性肾病大鼠肾脏组织Podocin蛋白表达的影响,为临床治疗膜性肾病(MN)提供依据。方法 SD大鼠随机分为正常对照组和造模组,其中造模组采用抗Fx1A血清一次性尾静脉注射诱导被动型Heymann肾炎模型,造模成功后将造模组随机分为模型组、洛丁新(盐酸贝那普利)组、益气活血化瘀汤低、中、高剂量组。各组按相应剂量灌胃4周,每周留取大鼠24 h尿量,检测24 h尿蛋白定量(UTP)。于4周末处死大鼠,心脏取血,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、三酰甘油(TAG),取肾脏组织行Masson、PASM染色观察肾脏组织病理改变,免疫荧光观察肾脏组织IgG、C3改变,免疫组化观察Podocin蛋白在肾脏组织的阳性表达情况。结果与正常组相比,其余5组UTP均升高(P 0.05);与模型组相比,各给药组UTP均减少(P0.05),肾脏组织Podocin蛋白表达增加(P 0.01),TP、ALB有所升高但差异无统计学意义(P 0.05),Scr、BUN、TC、HDL-C、TAG差异无统计学意义(P 0.05);与洛丁新组相比,益气活血化瘀汤低、中、高剂量组UTP减少,但差异无统计学意义(P 0.05),各生化指标差异无统计学意义(P 0.05),益气活血化瘀汤低、中、高剂量组肾脏组织Podocin蛋白表达增加(P 0.01);益气活血化瘀汤各组之间各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论益气活血化瘀汤可以明显降低膜性肾病大鼠的尿蛋白水平,减少肾脏病理损伤,能够上调肾脏组织Podocin蛋白的表达,延缓膜性肾病的进展。