Toll样受体功能研究进展

表达在免疫细胞上的Toll样受体(TLRs)通过识别已知的病原体相关的分子模式(PAMPs)在宿主防御入侵的病原体过程中起着决定性的作用,是针对病原体和肿瘤细胞的固有免疫应答的感受器.Toll样受体不仅在激活天然免疫中发挥重要的作用,而且还调节获得性免疫,是连接天然免疫和获得性免疫的桥梁.Toll样受体也表达在非免疫细胞上,如内皮细胞和上皮细胞等.细菌感染可能通过Toll样受体影响这些细胞的功能,从而导致局部感染或炎症进程并因此来促进肿瘤发生;而且表达在肿瘤细胞上的Toll样受体被认为可以通过TLRs信号传导引起肿瘤细胞增殖、转移和抵抗细胞凋亡.     

Toll样受体4信号传导途径与肝脏疾病

Toll样受体(Toll like receptor,TLR)是天然免疫系统中识别病原微生物的主要受体,属模式识别受体家族,最早在果蝇体内发现[1]。1997年,Medzhitov等[2]发现在哺乳动物体内存在与果蝇Toll受体结构同源的受体蛋白即TLR。现已发现在人类共有10种TLR,其中Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)是最早发现的哺乳动物TLR蛋白,在人体的先天性免疫和适应性免疫中发挥着重要的作用。     

长春瑞滨上调小鼠尾静脉血管内皮细胞Toll样受体4的表达

背景：Toll样受体4除与抗感染免疫有关外,在心肌梗死、脑梗死等组织损伤和自身免疫病等非感染性炎症反应中也发挥着重要作用。目的：观察长春瑞滨对小鼠尾静脉血管内皮细胞Toll样受体4表达的影响。方法：取20只BALB/c小鼠,随机分为实验组和对照组,实验组尾静脉注射长春瑞滨,对照组注射生理盐水。结果与结论：注射后48h,实验组小鼠尾静脉血管出现内皮细胞脱落、血栓形成和炎细胞浸润,损伤部位内皮细胞高表达Toll样受体4;对照组小鼠尾静脉血管无明显损伤表现,血管内皮细胞Toll样受体4阴性或弱表达。表明长春瑞滨上调了小鼠尾静脉血管内皮细胞Toll样受体4表达,提示Toll样受体4可能参与了长春瑞滨致静脉血管内皮损伤的发生过程。     

树突状细胞Toll样受体介导的免疫逃逸作用

目的:树突状细胞可借助其表面的一种模式识别受体Toll样受体对固有免疫及适应性免疫发挥免疫调节作用,Toll样受体是某些病原微生物借以逃逸机体免疫防御功能的靶分子,本文主要探讨Toll样受体的结构及功能、及其与病毒的相互作用。资料来源:应用计算机检索Pubmed 1980-01/2007-03期间有关树突状细胞表面Toll样受体及DC-SIGN受体结构、功能及相互关系文献,检索词“TLRs,DC-SIGN,antiviral immunity,HBV,HCV”,并限定文章语言种类为English。资料选择:选取树突状细胞表面Toll样受体和DC-SIGN及其抗感染免疫的相关文献,删除与Toll样受体或DC-SIGN抗感染免疫相关性不大的文献。资料提炼:共检索到65篇相关文献,33篇符合纳入标准。排除32篇文献中,12篇是与选取标准无关的研究,20篇属于重复研究。资料综合:目前已发现13种Toll样受体家族成员,其中11种表达于人类细胞。Toll样受体不同程度的表达于淋巴细胞、白细胞以及包括巨噬细胞和树突状细胞在内的单核吞噬细胞表面。巨噬细胞和树突状细胞等抗原提呈细胞上Toll样受体,构成一类独特的模式识别受体,是免疫应答的重要参与者,它能选择性识别侵入机体的病原微生物所携带的病原相关分子模式,诱导巨噬细胞和树突状细胞活化与成熟,产生细胞因子,引发针对病原微生物的适应性免疫应答。DC-SIGN与树突状细胞上Toll样受体之间有交叉联系,而这些交叉联系可导致免疫细胞活化或T细胞抑制。对于Toll样受体和DC-SIGN在人类肝炎病毒和艾滋病病毒-1感染过程中的作用了解尚浅。结论:Toll样受体在一些病毒感染过程中的作用还有待进一步研究。     

紫癜性肾炎患者外周血单个核细胞Toll样受体3和4的信号转导途径

背景：目前关于Toll样受体3和Toll样受体4介导的信号转导通路在紫癜性肾炎的发病机制中的作用尚不清楚。 目的：分析Toll样受体3和Toll样受体4在过敏性紫癜和紫癜性肾炎发病机制中的作用。方法：选取过敏性紫癜患儿64例,分为过敏性紫癜无肾损害组36例及过敏性紫癜性肾炎组28例,另选健康儿童30例作为正常对照组。实时荧光定量PCR检测外周血单核细胞Toll样受体3、Toll样受体4、髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6、白细胞介素12 mRNA的基因相对表达量;应用流式细胞术检测外周血单核细胞Toll样受体3、Toll样受体4蛋白表达率。结果与结论：①过敏性紫癜患儿Toll样受体4 mRNA及蛋白表达显著高于正常对照组（P 〈 0.05）。紫癜性肾炎组Toll样受体4 mRNA及蛋白表达均显著高于紫癜无肾损害组（P 〈 0.05）。②过敏性紫癜组髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6 mRNA的表达均显著高于正常对照组（P 〈 0.05）,白细胞介素12 mRNA的表达显著低于正常对照组（P 〈 0.05）;紫癜性肾炎组髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6 mRNA的表达显著高于紫癜无肾损害组（P 〈 0.05）,紫癜性肾炎组白细胞介素12 mRNA的表达显著低于紫癜无肾损害组（P 〈 0.05）。③过敏性紫癜组患儿外周血单核细胞Toll样受体4 mRNA与蛋白表达呈正相关（r=0.60,P 〈 0.01）;过敏性紫癜患儿Toll样受体4 mRNA与髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6表达均呈正相关（P 〈 0.01）,与白细胞介素12 mRNA表达呈负相关（r=-0.66,P 〈 0.01）。提示Toll样受体4可能通过髓样细胞分化因子88依赖信号转导途径介导过敏性紫癜的免疫发病机制,Toll样受体4的过度活化可能与过敏性紫癜的肾损伤有关。     

Toll样受体4介导非感染性免疫反应在器官功能损伤中的作用

目的 探讨Toll样受体4介导非感染性免疫反应在器官功能损伤中的作用.方法 从Toll样受体4的结构、分布、信号通路及其在不同器官非感染性病变中的作用等方面查阅近年文献,总结Toll样受体4的新作用.结果 近年来关于Toll样受体4介导非感染性免疫反应在器官功能损伤中的作用的研究较多,各项研究发现在器官的非感染性损伤中有Toll样受体4的参与.结论 Toll样受体4参与介导非感染性免疫反应的器官功能损害.     

蝎素组分Ⅲ对脂多糖刺激人白血病单核细胞系THP1细胞TLR4和p65的表达

背景:近年来研究表明,Toll样受体和核因子κB与白血病的发生发展关系密切。蝎毒对肿瘤细胞表面Toll样受体和细胞内核因子κB的影响还未见文献报道。目的:观察蝎素组分Ⅲ对人白血病单核细胞系THP1细胞Toll样受体4和p65表达的影响。方法:将THP1细胞接种于24孔细胞培养板中,实验分5组:对照组、脂多糖(终浓度为1mg/L)组及不同浓度蝎素组分Ⅲ处理组(脂多糖+蝎素组分Ⅲ终浓度为1,10,20mg/L)。Real-timePCR法检测THP1细胞Toll样受体4和p65mRNA的表达;Westernblot检测Toll样受体4和p65蛋白的表达。结果与结论:脂多糖组THP1细胞Toll样受体4、p65mRNA和蛋白的表达均显著高于对照组(P<0.01);不同浓度蝎素组分Ⅲ处理组Toll样受体4、p65mRNA和蛋白表达均低于脂多糖组(P<0.01),并呈剂量依赖性。提示蝎素组分Ⅲ能有效下调脂多糖诱导的THP1细胞中TLR4的表达,并可有效抑制核因子κB的活性,从而抑制细胞的增殖。     

Toll样受体3介导呼吸道合胞病毒感染人肺上皮细胞的炎性反应及其信号转导通路

目的:观察呼吸道合胞病毒感染肺上皮细胞A549后Toll样受体3表达的变化,探讨Toll样受体3介导呼吸道合胞病毒感染肺上皮细胞的炎性反应及其介导的信号转导通路。方法:实验于2006-05/12在安徽医科大学基础医学院分子生物学实验室完成。用呼吸道合胞病毒感染体外培养的A549细胞,于感染后4,8,16,24h收集细胞和细胞培养上清。用Trizol提取细胞总RNA,RT-PCR法检测TOLL样受体3mRNA、肿瘤坏死因子αmRNA表达的变化;提取细胞总蛋白和核蛋白,免疫印迹法分别检测TOLL样受体3蛋白、核内活性核因子κB的变化;用ELISA检测细胞培养上清肿瘤坏死因子α的表达。以未感染病毒的细胞为正常对照组。结果:①呼吸道合胞病毒感染A549细胞后,Toll样受体3和肿瘤坏死因子α的mRNA和蛋白的表达量均升高且有时间依赖性,Toll样受体3mRNA24h表达量是基础表达量的5倍多,肿瘤坏死因子αmRNA24h表达量是基础表达量的3倍多。②A549细胞中核内活性核因子κB有基础表达,经由呼吸道合胞病毒感染,核内活性核因子κB随感染时间的延长升高;同时呼吸道合胞病毒感染能促进Toll样受体3蛋白的表达,高于正常对照组(P<0.01)。③呼吸道合胞病毒感染能促进A549细胞分泌肿瘤坏死因子α,感染24h分泌达到高峰。结论:呼吸道合胞病毒感染A549细胞后上调Toll样受体3表达,其诱导的炎性反应与Toll样受体3介导的信号转导途径有关。     

Toll样受体4的临床应用研究进展

Toll样受体4是先天性免疫系统中的细胞跨膜受体,在急性炎性反应的调节、细胞信号转导方面起苇要作用.目前已发现Toll样受体家族至少13个受体,其中的Toll样受体4参与了多种疾病的发生、发展,有着重要的临床意义.本文就近年来对Toll样受体4的结构分布和配体、信号转导及临床应用方面作简要综述.     

Toll样受体4与急腹症

Toll样受体4(TLR4)为研究最广的先天性免疫受体,主要与免疫、感染相关;已证明与多种感染性疾病、急性脏器损伤及某些肿瘤相关。近年来发现TLR4与新生儿坏死性小肠结肠炎、急性胰腺炎、腹膜炎等急腹症密切相关。现对其研究进展加以综述,为急腹症进一步的研究提供向导。     

假体置入患者外周血白细胞Toll样受体2和4的表达

背景：研究证实全髋关节置换后松动假体表面生物膜中表达Toll样受体,但其变化规律尚不清楚。目的：观察关节假体置入患者外周血白细胞Toll样受体2,4的表达。方法：选择关节置换患者和同期10例行关节镜检套患者,于入院次日和假体置入后第3天早晨空腹抽取肘静脉血,流式细胞术分析外周血白细胞中Toll样受体2和Toll样受体4的阳性表达,同时送血样至枪验科检查A细胞、血沉、C-反应蛋白水平。结果与结论：两组白细胞、血沉、C-反应蛋白均在正常范围内。Toll样受体2,4均主要表达于外周血单核细胞,而在外周血淋巴细胞和中性粒细胞的表达率较低;关节置换组术后外周血单核细胞Toll样受体2阳性表达率明显低于术前（P〈O.05）;关节筐换组Toll样受体4、关节镜组Toll样受体2,4手术前后阳性表达率差异无显著性意义（P〉0.05）。关节置换组手术前后外周血单核细胞Toll样受体2阳性表达率低于关节镜组（P〈0.05）,两组Toll样受体4表达率无差异。提示在无感染的情况下,手术本身应激和局部损伤不影响Toll样受体2,4的表达,假体的置入下调了外阍血Toll样受体2的表达。     

Toll样受体在鼻炎鼻息肉中的研究进展

目前,临床上鼻炎、鼻息肉已成为鼻科最为常见的顽疾。随着对鼻炎、鼻息肉的研究,发现其病因与免疫失衡关系密切。近年来Toll样受体在鼻部及全身的免疫作用逐渐被人们所发现,大量实验结果揭示Toll样受体在鼻部疾病发挥重要作用。本文就先天性免疫中Toll样受体的结构、基本功能与鼻炎、鼻息肉及气道过敏反应关系作一综述。     

Toll样受体9在妇科恶性肿瘤中的研究进展

Toll样受体9(TLR9)是一种模式识别受体,可以参与识别病原相关分子模式(PAMPs),是近年肿瘤学及免疫学专家关注的重要对象之一。研究结果表明,TLR9在许多恶性肿瘤细胞中表达异常,其信号转导通路的激活在促进炎症反应、凋亡和肿瘤形成过程中起举足轻重的作用。它还可通过促进肿瘤微环境形成,参与肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭及免疫逃逸等。现就TLR9与卵巢恶性肿瘤、宫颈恶性肿瘤及子宫内膜恶性肿瘤的研究进展作一综述。     

假体置入患者外周血白细胞Toll样受体2和4的表达

背景:研究证实全髋关节置换后松动假体表面生物膜中表达Toll样受体,但其变化规律尚不清楚.目的:观察关节假体置入患者外周血白细胞Toll样受体2,4的表达.方法:选择关节置换患者和同期10例行关节镜检查患者,于入院次日和假体置入后第3天早晨空腹抽取肘静脉血,流式细胞术分析外周血白细胞中Toll样受体2和Toll样受体4的阳性表达,同时送血样至检验科检查白细胞、血沉、C-反应蛋白水平.结果与结论:两组白细胞、血沉、C-反应蛋白均在正常范围内.Toll样受体2,4均主要表达于外周血单核细胞,而在外周血淋巴细胞和中性粒细胞的表达率较低;关节置换组术后外周血单核细胞Toll样受体2阳性表达率明显低于术前(P < 0.05);关节置换组Toll样受体4、关节镜组Toll样受体2,4手术前后阳性表达率差异无显著性意义(P > 0.05).关节置换组手术前后外周血单核细胞Toll样受体2阳性表达率低于关节镜组(P < 0.05),两组Toll样受体4表达率无差异.提示在无感染的情况下,手术本身应激和局部损伤不影响Toll样受体2,4的表达,假体的置入下调了外周血Toll样受体2的表达.     

重组人白细胞介素10抗家兔皮肤移植排斥反应中Toll样受体的变化

背景:现已认识到Toll样受体的活化与器官移植后排斥反应的关系十分密切,Toll样受体与移植免疫也逐渐成为研究的热点问题。目的:观察重组人白细胞介素10抗皮肤移植排斥反应中受体兔血清Toll样受体的变化。方法:制备兔背部缺损模型,将受体家兔分为6组,重组人白细胞介素10低、高剂量组、环孢素A低、高剂量组、联合用药组和生理盐水组,分别于移植前1d开始肌肉注射5,10μg/(kgd)重组人白细胞介素10,5,10mg/(kgd)环孢素A,5μg重组人白细胞介素10+5mg环孢素A,1mL/d生理盐水,连续用药10d。结果与结论:各组移植后Toll样受体4,7,8,9水平均较移植前升高,移植后14d达到高峰。移植后4,7d生理盐水组Toll样受体4水平高于联合用药组(P<0.05)。移植后7d生理盐水组Toll样受体7高于其他各组(P<0.05),Toll样受体8高于环孢素A高剂量组(P<0.05)。各组移植不同时间点Toll样受体9水平差异无显著性意义(P>0.05)。提示重组人白细胞介素10抗家兔皮肤移植反应中,Toll样受体4,7,8,9水平在皮肤移植后明显升高,当皮片排斥后达到高峰,之后逐渐下降,表明Toll样受体参与排斥反应过程。     

大鼠正畸牙移动中Toll样受体4在牙周组织中的表达

背景:学者们对正畸力作用下牙周组织的改建做了大量的研究,但对于在大鼠牙齿移动过程中Toll样受体4在牙周组织中表达的研究尚未涉及.目的:研究在正畸牙移动过程中,大鼠牙周组织中Toll样受体4的表达.方法:采用NiTi拉簧建立大鼠正畸牙移动模型,力值50 g.分别于加力后1,3,5,7,10,14 d取正畸牙周组织,检测Toll样受体4的表达.结果与结论:免疫荧光染色显示,正畸加力1 d,牙周组织中Toll样受体4的表达量增强,至加力后5 d时表达量最大,之后逐渐降低,第14天时回落至初始水平.可见正畸力可以刺激牙周组织中Toll样受体4的表达,Toll样受体4可能参与了牙周组织的改建.     

激活Hacat细胞表面Toll样受体促进创面愈合的机制

目的:细胞表面Toll样受体对激发先天性免疫、抵抗微生物感染有重要作用.最近研究发现激活细胞表面Toll样受体不仅可以预防微生物感染,还可以促进组织再生.实验通过脂多糖激活体外培养的角质细胞株Hacat细胞表面Toll样受体,观察其促进创面愈合的可能机制.方法:实验于2007-07在解放军第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科完成.①实验分组及方法:角质细胞株Hacat由解放军第四军医大学西京医院皮肤科馈赠;脂多糖为Sigma公司产品;小鼠抗人Toll样受体2单克隆抗体、兔抗人Toll样受体4多克隆抗体购于ebioscience公司.体外培养Hacat细胞,根据脂多糖(500 ng/L)与Hacat细胞共培养24,48,72 h将细胞随机分为脂多糖作用24 h 组、脂多糖作用48 h 组、脂多糖作用72 h 组,另设对照组,只加溶剂二甲基亚枫.②实验评估:蛋白免疫印迹技术检测脂多糖对Hacat细胞Toll样受体2、Toll样受体4及核因子-κB表达的影响;荧光定量聚合酶链反应检测脂多糖作用后Hacat细胞内基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9及血管内皮生长因子的表达.结果:光学显微镜下正常人皮肤表皮及角质细胞Toll样受体2、Toll样受体4表达呈蓝黑色;脂多糖作用于Hacat细胞24,48,72 h 后Toll样受体2、Toll样受体4、核因子-κB表达均高于对照组(P ＜ 0.01).与对照组相比,其他3组基质金属蛋白酶3及血管内皮生长因子表达均增高(P ＜ 0.01,P ＜ 0.05).脂多糖作用24 h 组基质金属蛋白酶9表达与对照组差异无显著性(P ＞ 0.05),脂多糖作用48,72 h 组与对照组比较,差异显著(P ＜ 0.05).结论:激活Hacat细胞表面Toll样受体有促进创面愈合作用,其机制可能与脂多糖作用于Toll样受体从而激活核因子-κB信号传导通路促进细胞释放基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9及血管内皮生长因子等因素有关.     

激活Hacat细胞表面Toll样受体促进创面愈合的机制

目的：细胞表面Toll样受体对激发先天性免疫、抵抗微生物感染有重要作用。最近研究发现激活细胞表面Toll样受体不仅可以预防微生物感染，还可以促进组织再生。实验通过脂多糖激活体外培养的角质细胞株Hacat细胞表面Toll样受体，观察其促进创面愈合的可能机制。 方法：实验于2007-07在解放军第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科完成。①实验分组及方法：角质细胞株Hacat由解放军第四军医大学西京医院皮肤科馈赠；脂多糖为Sigma公司产品；小鼠抗入Toll样受体2单克隆抗体、兔抗人Toll样受体4多克隆抗体购于ebioscience公司。体外培养Hacat细胞，根据脂多糖（500ng/L）与Hacat细胞共培养24，48，72h将细胞随机分为脂多糖作用24h组、脂多糖作用48h组、脂多糖作用72h组，另设对照组，只加溶剂二甲基亚枫。②实验评估：蛋自免疫印迹技术检测脂多糖对Hacat细胞Toll样受体2、Toll样受体4及核因子KB表达的影响：荧光定量聚合酶链反应检测脂多糖作用后Hacat细胞内基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9及血管内皮生长因子的表达。 结果：光学显微镜下正常入皮肤表皮及角质细胞Toll样受体2、Toll样受体4表达呈蓝黑色：脂多糖作用于Hacat细胞24，48，72h后Toll样受体2、Toll样受体4、核因子-κB表达均高于对照组（P〈0．01）。与对照组相比，其他3组基质金属蛋白酶3及血管内皮生长因子表达均增高（P〈0．01，P〈0．05）。脂多糖作用24h组基质金属蛋白酶9表达与对照组差异无显著性（P〉0．05），脂多糖作用48，72h组与对照组比较，差异显著（P〈0．05）。 结论：激活Hacat细胞表面Toll样受体有促进创面愈合作用，其机制可能与脂多糖作用了：Toll样受体从而激活核因子KB信号传导通路促进细胞释放基质金属蛋白酶3、基质金属蛋白酶9及血管内皮生长因子等因素有关?     

肿瘤坏死因子α诱导人皮肤角质形成细胞β-防御素的体外表达

背景:人β-防御素在皮肤的固有免疫中占据重要地位,同时由于其广谱的抗菌活性,从而成为抗感染临床研究中的热点。目的:观察原代培养人皮肤角质形成细胞在浓度梯度肿瘤坏死因子α的刺激下,其免疫分子β-防御素及Toll样受体的表达情况。方法:取8例30岁以下患者包皮组织,分别原代培养获取角质形成细胞,并采用浓度梯度肿瘤坏死因子α(10,50,100,150,200μg/L)进行刺激,实时荧光定量PCR检测β-防御素1,2,3及Toll样受体2,4的基因表达水平。结果与结论:肿瘤坏死因子α对β-防御素1,2,3基因表达均有明显诱导作用,且在150μg/L时达到最大效应(P<0.05),相对于对照组分别出现明显的升高,而在200μg/L时又出现明显降低,呈现出浓度依赖性趋势。肿瘤坏死因子α诱导角质形成细胞后,Toll样受体2,4的表达规律类似于β-防御素。结果可见肿瘤坏死因子α对体外培养的皮肤角质形成细胞有显著的免疫诱导效应。     

高迁移率蛋白B1介导Toll样受体信号通路的研究进展

高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein,HMGB1)是核内一类非组蛋白DNA结合蛋白,属于损伤相关分子模式(damage-associated molecular patterns,DAMPs),参与DNA复制、重组、修复和基因转录调控等。HMGB1能通过Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)等激活固有免疫以及诱导T细胞分化成熟启动适应性免疫应答,与多种自身免疫性疾病、炎症性疾病和肿瘤等关系密切。目前关于HMGB1介导TLR信号通路在某些疾病中的作用的研究较多,HMGB1介导Toll样受体信号通路参与多种病理过程具有广阔的临床前景。