熊果酸对脓毒症模型大鼠肺损伤的保护作用及对HMGB1/TLR4/NF-κB通路的影响

目的:观察熊果酸对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用及对HMGB1/TLR4/NF-κB通路的影响。方法:Wistar大鼠75只随机分为假手术组,模型对照组,熊果酸低剂量组(20 mg·kg~(-1))、中剂量组(40 mg·kg~(-1))、高剂量组(80 mg·kg~(-1)),每组15只。采用盲肠结扎穿孔法制备大鼠脓毒症模型,术后立即及8 h后尾静脉注射给药。造模后24 h处死大鼠,苏木精-伊红染色法评估肺组织病理学变化;ELISA法测定血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;硫代巴比妥酸比色法检测肺组织匀浆丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;Western blot法检测肺组织中高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)、Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)的蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠肺组织中MDA、HMGB1、TLR4、NF-κB表达显著增加,SOD活性下降,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,熊果酸各剂量组大鼠肺组织病理明显改善,MDA、HMGB1、TLR4、NF-κB表达显著降低,SOD活性升高,血清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平显著下降(P<0.01或P<0.01)。结论:熊果酸可能通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路减轻炎症反应,从而发挥对脓毒症肺损伤的保护作用。     

虎杖苷通过调控HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路对脓毒症急性肺损伤的保护作用

[目的]观察虎杖苷(polydatin,PD)对脓毒症急性肺损伤大鼠的保护作用,并探究其作用机制.[方法]将50只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级SD大鼠随机分为假手术组、模型组和PD高、中、低剂量组,每组10只.模型组和PD高、中、低剂量组大鼠采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症急性肺损...     

丹参酮ⅡA通过调控HMGB1表达抑制TLR4/My D88/NF-κB通路减轻大鼠脓毒症肺损伤机制研究

目的 探讨丹参酮ⅡA对脓毒症大鼠肺损伤中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子-κB(NF-κB)通路的影响。方法 20只清洁级健康成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠采用盲肠结扎穿孔法（CLP）造模,造模成功后随机分为四组,即模型组,低、中、高剂量治疗组,每组5只。模型组腹腔注射0.9%氯化钠注射液,低、中、高剂量治疗组腹腔注射不同剂量的丹参酮ⅡA(5、10、20 mg/kg)。另取5只SD大鼠作为假手术组,开腹翻动肠道后关闭腹腔并腹腔注射0.9%氯化钠注射液。各组大鼠干预完成后等待24 h处死。测定各组肺湿/干重比（W/D）,观察光镜下各组肺组织结构变化,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测肺组织Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB(NF-κB)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)mRNA的表达。结果 与模型组比较,中、高剂量治疗组的肺组织W/D显著减小[（4.46±0.29）、（4.27±0.21）比（5.09±0.42）,P<0.05或P<0.0...     

葛根素对急性痛风性关节炎大鼠TLR4/NF-κB通路的影响*

目的 观察葛根素治疗急性痛风性关节炎（AGA）大鼠的效果,并基于TLR4/NF-κB信号通路讨论葛根素治疗AGA的作用机制。方法 选取60只雄性SD大鼠作为研究对象,随机分为正常组、模型组、秋水仙碱组及葛根素组,每组15只。复制模型并进行药物干预2周后,记录AGA大鼠治疗前后关节肿胀程度,光学显微镜下观察膝关节滑膜组织病理切片,应用ELISA法和免疫组织化学法分别检测关节腔冲洗液中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量和关节滑膜组织Toll样受体4（TLR4）、核转录因子-κB（NF-κB）表达量。结果 AGA大鼠药物干预后,观察各项指标均得到不同程度的改善。3组AGA大鼠关节肿胀度、关节腔冲洗液中IL-1β、TNF-α含量和关节滑膜组织TLR4、NF-κB表达量比较,差异均有统计学意义（P?<0.05）;与模型组、秋水仙碱组比较,葛根素组大鼠关节肿胀程度减轻,关节腔冲洗液中IL-1β、TNF-α含量均下降,关节滑膜组织TLR4、NF-kB表达量均下调（P?<0.05）。结论 葛根素治疗AGA大鼠的作用机制可能与葛根素抑制TLR4/NF-kB信号通路,抑制下游炎症因子IL-1β、TNF-α的产生有关,从而减轻AGA炎症反应程度,起到治疗作用。     

右美托咪定抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤研究

目的:观察右美托咪定(Dex)对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌功能、炎症反应及HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的影响.方法:取75只成年SPF级10周龄雄性SD大鼠.运用可复性结扎LAD法建立心肌缺血再灌注损伤(MIRI)模型.随机均分为假手术组(Sham组)、Dex预处理+MIRI组(Dex组)、Dex+育亨宾+...     

基于TLR4/NF-κB信号通路上调miR-143对颅内动脉瘤模型大鼠的干预作用

目的 观察通过TLR4/NF-κB信号通路上调miR-143对颅内动脉瘤模型大鼠的干预作用。方法 2020年12月—2021年9月于同济大学附属东方医院神经外科进行实验,选取SPF级SD大鼠60只随机数字表法分为空白组、模型组、上调组和下调组,各15只,除空白组外,其余大鼠建立颅内动脉瘤模型,造模成功后模型组转染空载质粒,上调组转染miR-143过表达质粒,下调组转染miR-143沉默质粒。miR-143慢病毒滴定测定miR-143基因表达量。评估大鼠颅内动脉瘤成瘤率,测定各组大鼠血清转化生长因子β₁(TGF-β₁)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9水平及大鼠颅内动脉TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达量。结果 模型组miR-143基因表达量高于空白组(P<0.05),miR-143基因表达量下调组>模型组>上调组(F/P=7.484/0.001);模型组血清TGF-β₁、TNF-α、VEGF、MMP-2、MMP-9水平高于空白组(...     

HMGB1基因敲除通过抑制TLR4/NF-κB通路减轻脓毒症小鼠急性肺损伤

目的 研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因敲除减轻脓毒症小鼠急性肺损伤及抑制Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路的作用。方法 野生型(WT)小鼠分为WT-Sham组和WT-模型组,HMGB1基因敲除(KO)小鼠分为KO-Sham组和KO-模型组。WT-模型组和KO-模型组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症ALI模型,WT-Sham组和KO-Sham组进行假手术操作。造模后24 h,检测动脉血氧分压(PaO₂),计算氧合指数(OI),检测肺组织病理改变,计算肺损伤评分,检测血清及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的浓度,肺组织中HMGB1、TLR4、核NF-κB的表达。结果 WT-模型组的PaO₂、OI、血清及肺组织SOD的浓度低于WT-Sham组,肺损伤评分、血清及肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS、MDA的浓度、肺组织中HMGB1、TLR4、核NF-κB的表达水平高于WT-Sham组(P<0...     

TLR4/NF-κB信号通路在肾缺血再灌注损伤中的作用机制

目的 探讨Toll样受体4/核因子-κB(Toll- like receptor 4/nuclear factor-κB,TLR4/NF-κB)信号通路在肾缺血再灌注(renal ischemia-reperfusion,RIR)损伤中的作用机制。方法 96只健康SD大鼠随机分为4组,即假手术(Sham)组、模型(Model)组、Model+TAK242(TLR4抑制剂,10mg/kg)组和Model+LPS(TLR4激活剂,5mg/kg)组,每组24只。除Sham组外,其他组采用夹闭双侧肾动脉45min的方法复制RIR大鼠模型;造模前7天开始,各组分别1次/天腹腔注射给药。再灌注6h后,检测血清肾功能指标,HE染色法行肾组织病理学检查;透射电子显微镜观察肾小管上皮细胞超微结构改变;RT-PCR法检测肾组织TLR4、NF-κB p65mRNA表达;Western blot法检测肾组织TNF-α、IL-1β、TLR4、NF-κB p65mRNA和蛋白表达。结果 与Sham组比较,Model组血清BUN、SCr水平升高(P<0.05);肾组织可见肾小球体积增大、肾小管管腔扩张、炎性细胞浸润等病理学改变,病理评分升高(P<0.05);肾小管上皮细胞可见线粒体肿胀、膜破裂、嵴断裂,内质网扩张,核糖体减少等超微结构病变;肾组织TNF-α、IL-1β蛋白表达量升高,TLR4、NF-κB p65mRNA和蛋白表达量均升高(P<0.05)。与Model组比较,Model+TAK242组BUN、SCr水平降低(P<0.05),肾组织病变和肾小管上皮细胞超微结构改变均明显改善,TNF-α、IL-1β蛋白表达量降低,TLR4、NF-κB p65mRNA和蛋白表达量降低(P<0.05);Model+LPS组BUN、SCr水平升高(P<0.05),肾组织病变和肾小管上皮细胞超微结构改变均明显加重,TNF-α、IL-1β蛋白表达量升高,TLR4、NF-κB p65mRNA和蛋白表达量升高(P<0.05)。结论 TLR4/NF-κB信号通路可能通过调节炎性反应参与RIR损伤过程。     

白术多糖对类风湿性关节炎大鼠的抗炎作用及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 探讨白术多糖(PAMK)对类风湿性关节炎(RA)大鼠的抗炎作用及其对Toll样受体4/核因子κB(TLR4/NF-κB)信号通路的影响。方法 采用Ⅱ型胶原诱导建立RA大鼠模型,造模成功后将大鼠分为模型组、阳性药物组(雷公藤多苷片)、PAMK低、高剂量组,同时设置正常对照组,每组12只。给予雷公藤多苷片或PAMK灌胃给药,1次/d,连续4周。测量大鼠体质量、足趾容积和关节炎指数;计算胸腺指数和脾脏指数;HE染色观察踝关节滑膜组织病理学变化;ELISA法检测血清及踝关节滑膜组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;Western blot检测踝关节滑膜组织中总蛋白Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子88(MyD88)、磷酸化核因子κB p65[p-NF-κB p65(Ser536)]及核蛋白NF-κB p65表达水平。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠可见滑膜增生、层次不清等病理学改变,体质量降低(P<0.05),足趾容积、关节炎指数以及胸腺、脾脏指数升高(P<0.05),血清及踝关节滑膜组织中IL-1β、...     

葶苈子水提液通过调控HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路对LPS吸入性肺损伤新生大鼠的影响

[目的] 探究葶苈子水提液对脂多糖（LPS）吸入性肺炎新生大鼠的影响。[方法] 腹腔注射LPS制备吸入性肺损伤大鼠模型,将大鼠随机分为6组：对照组、模型组、葶苈子水提液5 g/kg组、葶苈子水提液10 g/kg组、葶苈子水提液20 g/kg组和地塞米松0.002 g/kg组。干湿法检测肺组织干湿质量比值;苏木精-伊红（HE）染色检测肺组织病理损伤;酶联免疫吸附（ELISA）法检测氧化应激标记物：超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）含量和炎症因子白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测高迁移率族蛋白1（HMGB1）、Toll样受体4（TLR4）和磷酸化核转录因子-κB（p-NF-κB）p65蛋白表达水平。[结果] 与对照组比较,模型组大鼠肺干湿质量比值升高,SOD、GSH含量降低,MDA含量升高,IL-6、IL-1β和TNF-α水平升高,HMGB1、TLR4蛋白表达水平及p-NF-κB p65与核转录因子-κB（NF-κB）p65比值升高,差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组比较,葶苈子水提液10、20 g/kg组和地塞米松0.002 g/kg组肺干湿质量比值降低,肺组织病理损伤程度明显改善,SOD、GSH含量升高,MDA含量降低,IL-6、IL-1β和TNF-α水平降低,HMGB1、TLR4蛋白表达水平及p-NF-κB p65与NF-κB p65比值降低,差异有统计学意义（P<0.05）。[结论] 葶苈子水提液能改善LPS诱导的吸入性肺损伤大鼠模型病理损伤,抑制炎症因子的释放,改善氧化应激,抑制HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路的活化。     

TLR4/NF-κB信号通路在儿童过敏性紫癜发病机制中的研究

目的 探讨TLR4/NF-κB信号通路及其下游炎症因子IL-6、IL-17水平变化在过敏性紫癜(HSP)及紫癜性肾炎(HSPN)发病机制中的作用和意义。方法 选取HSP、HSPN患儿各30例为实验组,入组患儿均为首发并且近1个月内无糖皮质激素、免疫抑制剂或细胞毒性药物等特殊药物使用史,另选取我院儿童保健门诊健康体检儿童30例作为正常对照组,均于无菌操作下采集清晨空腹静脉血6 ml分3支管,1支用于流式细胞仪检测TLR4蛋白的表达量,另1支采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测NF-κB。再取1支2 ml肝素抗凝管离心用于ELISA法检测的IL-6、IL-17含量。结果 (1)HSPN组和HSP组TLR4蛋白表达量分别是：(54.13±6.95)%、(39.37±4.35)%,NF-κB水平分别是：(207.78±121.23)ng/L、(163.33±65.45)ng/L,均高于对照组TLR4:(12.31±1.63)%、NF-κB:(98.24±35.64)ng/L,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)HSPN组和HSP组血清IL-6:(28.29±3.30)ng/L、(2...     

绿原酸通过TLR4/NF-κB信号通路调控脓毒症大鼠肠上皮细胞屏障功能的研究

目的 观察绿原酸通过调控TLR4/NF-κB信号通路减轻脓毒症(sepsis)大鼠肠道氧化应激损伤、改善肠上皮细胞屏障功能的作用。方法 选取SD大鼠60只,采用随机数字表法分成假手术组、模型对照组、绿原酸(低、高剂量)组,每组15只。术后24 h,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-10;比色法测定小肠组织中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;采用Western blotting法测定小肠组织中的蛋白表达[密封蛋白-1(Claudin-1)、闭锁连接蛋白-1(ZO-1)及TLR-4/NF-κB通路相关的蛋白]。结果 与模型对照组[(4.45±0.14)分]比较,低剂量组[(4.17±0.22)分]、高剂量组[(1.95±0.08)分]Chiu评分明显下降(t=4.159、60.048,均P<0.001);高剂量组血清TNF-α、IL-6、IL-10水平及小肠组织中NO、MDA含量均显著降低(均P<0.05),SOD含量、Claudin-1、ZO-1蛋白表达量及MyD88...     

TLR4/MyD88/NF-κB 信号通路对甲基苯丙胺依赖CPP大鼠海马的影响

  目的  研究TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对甲基苯丙胺（methamphetamine,MA）依赖的条件性位置偏好（conditioned place preference,CPP）大鼠海马的影响,同时采用特异性抑制剂TAK-242抑制Toll样4受体（Toll-like receptor 4,TLR4）,减轻MA依赖诱导的海马神经炎症。  方法  建立MA（10 mg/kg,ip,14 d）依赖大鼠CPP模型,分别为生理盐水组、MA组、TAK-242组、MA+TAK-242组。TAK-242组和MA+TAK-242组先分别腹腔注射抑制剂TAK-242（3 mg/kg）,1h后MA+TAK-242组再腹腔注射MA（10 mg/kg）。采用Western Blot实验和采用荧光定量PCR实验检测MA依赖CPP大鼠海马中TLR4、MyD88、TRAF6、IκB-α、p-IκB-α、NF-κBp65、p-NF-κBp65蛋白的表达和mRNA表达。  结果  与生理盐水组相比,MA组TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κBp65的蛋白和mRNA表达均升高（P < 0.001或P < 0.01）,IκB-α的蛋白和mRNA表达下降（P < 0.01）,p-IκB-α、p-NF-κBp65的表达升高（P < 0.01或P < 0.05）;与MA组相比,MA+TAK-242组TLR4、MyD88、TRAF6、NF-κBp65的蛋白和mRNA表达均下降（P < 0.001、P<0.01或P < 0.05）,IκB-α的蛋白和mRNA表达升高（P < 0.01）,p-IκB-α、p-NF-κBp65表达下降（P < 0.01或P < 0.05）。  结论  MA依赖可通过激活TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,诱导CPP大鼠海马神经炎症的发生,采用特异性TLR4抑制剂可以减轻MA诱导的神经炎症。     

白果内酯对脓毒症急性肺损伤大鼠TLR4/NFκB信号通路及Th1/Th2细胞的影响

目的 探讨白果内酯(BB)对脓毒症致急性肺损伤(ALI)大鼠Toll样受体-4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路及辅助性T细胞1/2(Th1/Th2)的影响.方法 50只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(ALI组)、BB低(2.5 mg/kg)剂量组、BB高(10 mg/kg)剂量组、地塞米...     

虫草素对脂多糖诱导的急性肺损伤大鼠的保护作用及TLR4/NF-κB通路的影响

目的：探讨虫草素对脂多糖诱导的急性肺损伤（ALI）大鼠的保护作用及Toll样受体4（TLR4）/核因子-κB（NF-κB）通路的影响。方法：通过脂多糖诱导建立ALI大鼠模型,造模48只大鼠随机分成：模型组、虫草素低（5 mg/kg）、中（10 mg/kg）、高（20 mg/kg）剂量组,12只/组;另设12只健康大鼠作为对照组。虫草素各剂量组大鼠腹腔注射相应剂量的虫草素,模型组和对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水,连续给药1周（1次/d）。检测大鼠动脉血氧分压（PaO2）、二氧化碳分压（PaCO2）、肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-1β（IL-1β）、TLR4、NF-κB信使核糖核酸（mRNA）和蛋白水平,观察肺组织形态学并进行肺损伤评分。结果：对照组大鼠肺泡组织结构正常;模型组肺泡组织受损,毛细血管扩张,红细胞渗漏和肺组织液分泌,可见炎症细胞浸润;虫草素干预后,肺泡组织趋于正常,肺泡壁变薄,红细胞、分泌液减少,炎症细胞浸润减少。与对照组比较,模型组大鼠PaO2水平降低,PaCO2、肺损伤评分、肺组织TNF-α、IL-6、IL-1β、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白水平升高（P<0.05）;与模型组比较,虫草素低、中、高剂量组大鼠PaO2水平依次升高,PaCO2、肺损伤评分、肺组织TNF-α、IL-6、IL-1β、TLR4、NF-κB mRNA和蛋白水平依次降低（P<0.05）。结论：虫草素可改善ALI大鼠肺功能和肺损伤,降低肺部炎症反应,其机制可能与虫草素抑制ALI大鼠肺组织TLR4、NF-κB mRNA和蛋白表达进而抑制TLR4/NF-κB通路的激活有关。     

柴胡疏肝散对抑郁症模型大鼠前额叶皮层SIRT1/NF-κB信号通路的作用研究

目的 观察柴胡疏肝散对抑郁症模型大鼠SIRT1/NF-κB信号通路的作用,探讨柴胡疏肝散抗抑郁可能机制.方法 将大鼠随机分为空白组、模型组、西酞普兰组和柴胡疏肝散组,除空白组外,其他各组制备抑郁症模型.西酞普兰组给予草酸艾司西酞普兰片制成的药液,柴胡疏肝散组给予柴胡疏肝散药液,空白组和模型组给予等体积的纯水.采用旷场实...     

外源性IL-4通过抑制NF-κB信号通路减轻急性脓毒症肺损伤的研究

目的 通过构建脓毒症肺损伤体内及体外模型,探讨外源性白细胞介素-4（IL-4）可否减轻脓毒症急性肺损伤及其可能的调节机制。方法 细胞实验：体外培养小鼠肺泡巨噬细胞MH-S,选用终浓度为1.0μg/mL的脂多糖（LPS）刺激2 h后,加入不同浓度的IL-4作用24 h, CCK-8法检测细胞活力;活性氧（ROS）测定试剂盒检测ROS的含量,Elish法检测IL-1β、IL-6、TNF-α表达水平,Western blot法检测NF-κB p65蛋白表达水平。小鼠实验：选用C57BL/6小鼠,随机分为空白对照组（生理盐水）、模型组（LPS）及实验组（LPS造模30 min后气管滴注IL-4）,12 h后,将3组小鼠经异氟醚诱导后处死收集血清和组织样本。使用H&E染色法观察肺损伤,采用qRT-PCR和ELISA法检测相关基因的表达,流式细胞术检测巨噬细胞的极化情况。结果 外源性IL-4可明显改善肺损伤。体外实验表明,外源性IL-4在24 h内对MH-S细胞的活力几乎无影响;外源性IL-4能够降低MH-S细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β水平,下调NF-κB p65蛋白表达量以及减...