心痛方对急性心肌梗死大鼠NCX mRNA表达及Ca2+浓度的影响

目的:探究心痛方对心肌梗死大鼠心肌组织内钠钙交换蛋白(NCX mRNA)的表达及钙离子(Ca~(2+))浓度的影响。方法:将50只SD大鼠分为假手术组、模型组、心痛方高剂量组、心痛方低剂量组、硫氮卓酮组,采用结扎大鼠冠状动脉左前降支的方法建立急性心肌梗死大鼠模型。运用RT-PCR法检测各组大鼠心肌细胞内NCX mRNA的表达,激光扫描共聚显微镜法检测大鼠心肌组织中的Ca~(2+)浓度,HE染色法测定大鼠心肌梗死面积。结果:在下调NCX mRNA表达方面,心痛方高、低剂量组与假手术组、模型组、硫氮卓酮组比较,差异有统计学意义(P0.01);在降低MFI方面,心痛方高、低剂量组与假手术组、模型组比较,差异有统计学意义(P0.05),且心痛方高剂量组在降低MFI方面还优于硫氮卓酮组(P0.01);在减少心肌梗死面积方面,心痛方高、低剂量组与模型组、硫氮卓酮组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:心痛方能下调急性心肌梗死大鼠NCX mRNA的表达,降低胞内Ca~(2+)的浓度,从而抑制钙超载对心肌细胞的损害,减少心肌梗死面积。     

益肾化浊方对阿尔茨海默病模型大鼠海马区Ca~(2+)浓度及钙相关记忆蛋白表达的影响

目的观察益肾化浊方对AD模型大鼠海马区Ca~(2+)浓度及钙相关记忆蛋白表达的影响,初步探讨益肾化浊方治疗AD的部分作用机制。方法将30只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组和益肾化浊方组。采用右侧侧脑室注射Aβ25-35建立AD模型,造模成功后益肾化浊方组大鼠按照4.32g·kg~(-1)·d~(-1)剂量给予药液灌胃,假手术组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃,持续4周。采用Rhod 2-AM荧光探针法和Western blot检测各组大鼠海马区突触Ca~(2+)浓度及Ca MKⅡ、NR2B、CREB、BDNF和Trk B蛋白的表达。结果 (1)Rhod 2-AM荧光探针法检测结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠钙离子浓度显著升高(P0.01);与模型组相比,益肾化浊方组钙离子浓度显著减低(P0.01),差异具有统计学意义。(2)Western blot检测结果显示:与假手术组比较,模型组大鼠海马区NR2B、Ca MKⅡ、CREB、BDNF和Trk B蛋白的表达显著降低(P0.01);与模型组比较,益肾化浊方组NR2B、Ca MKⅡ、CREB、BDNF和Trk B蛋白显著升高(P0.01),差异具有统计学意义。结论益肾化浊方治疗AD的作用机制可能与调节海马突触体内Ca~(2+)浓度,减轻Aβ诱发的神经毒性;同时增加钙相关记忆蛋白的表达有关。     

心痛泰对心肌梗死大鼠血清ET-1、NO的影响

目的:探讨心痛泰对心肌梗死大鼠血清ET-1、NO的干预作用。方法:制备心肌梗死大鼠模型,随机分成模型组,假手术组,心痛泰低、中、高剂量组及麝香保心丸组。模型组和假手术组以蒸馏水等量灌胃,其余各组分别给予相应药物及相应剂量灌胃,用药2周后分别检测各组大鼠血清ET-1、NO水平及心肌梗死面积。结果:与模型组相比,各用药组的心肌梗死面积均有减小,差异具有统计学意义(P0.01);与心痛泰低剂量组相比,心痛泰中、高剂量组及麝香保心丸组梗死面积有减小,差异具有统计学意义(P0.01),而心痛泰中、高剂量组及麝香保心丸组三者之间差异无统计学意义(P0.05)。与假手术组相比,各治疗组及模型组ET-1表达均显著增加,NO表达均显著减少,差异有统计学意义(P0.01);与模型组相比,各治疗组ET-1表达均减少,NO表达均增加,差异有统计学意义(P0.01);心痛泰中、高剂量组及麝香保心丸组ET-1、NO表达改善均优于心痛泰低剂量组(P0.01);而心痛泰中、高剂量组与麝香保心丸组3组组间差异无统计学意义P0.05)。结论:心痛泰颗粒在一定程度上通过干预NO、ET-1的表达,抑制血管重塑,增加冠脉血流,减少模型大鼠心肌梗死面积。     

大建中汤对脾阳虚腹痛大鼠CaMKⅡmRNA的影响

目的:观察大建中汤对脾阳虚疼痛大鼠大脑中环氧合酶-2(COX-2)mRNA的影响,探讨大建中汤对脾阳虚疼痛的作用机理。方法:将SD大鼠40只随机分为正常组、模型组、大建中汤大、小剂量组各10只,采用综合造模法制备脾虚动物模型,根据实验分组以灌胃形式进行给药,各组大鼠连续给药15天后,断颈处死大鼠并立即取脑组织。用RT-PCR法分析检测脑组织Ca MKⅡmRNA表达的变化。结果:与正常对照组相比,脾阳虚模型组大鼠大脑Ca MKⅡmRNA表达明显增加,具有显著统计学意义(P﹤0.01);大建中汤高剂量组Ca MKⅡ表达与模型组相比明显下降,具有显著性差异(P﹤0.01)。结论:Ca MKⅡmRNA在脾阳虚疼痛中高表达,大建中汤可抑制脾阳虚疼痛大鼠大脑中Ca MKⅡ的表达,并可能通过此抑制作用来达到治疗疼痛的目的。     

黄芩苷对注意缺陷多动障碍动物模型生长状态的影响及对CaMKⅡ,ERK1/2的调控作用

该研究观察黄芩苷对注意缺陷多动障碍动物模型生长状态的影响及对Ca MKⅡ,ERK1/2的调控作用。40只SHR大鼠,随机分为模型组、盐酸哌甲酯组及黄芩苷低、中、高剂量组,每组8只,WKY大鼠8只另设为正常对照组。盐酸哌甲酯组(0.07 g·L~(-1))及黄芩苷低(3.33 g·L~(-1))、中(6.67 g·L~(-1))、高(10 g·L~(-1))剂量组分别按体质量0.015 m L·g~(-1)灌胃给药,正常组及模型组按体质量灌胃生理盐水。各组大鼠连续灌胃4周,每日2次。每日称取大鼠体质量及剩余饲料量,每周进行统计评估大鼠生长状态。Percoll密度梯度离心法制备脑突触体,电镜观察突触体结构;运用Western blot及Real-time PCR法分别检测突触体内Ca MKⅡ,ERK1/2蛋白及mRNA表达水平。研究结果显示,黄芩苷不影响大鼠的正常进食及体质量增长,甚至较正常组大鼠体质量增长更为显著(P0.05)。在对大鼠突触体内Ca MKⅡ及ERK1/2蛋白表达的影响研究中,各给药组对2种蛋白的表达均较模型组有所增高(P0.05),且盐酸哌甲酯组及黄芩苷高剂量组Ca MKⅡ及ERK1/2蛋白表达显著升高(P0.05)。通过运用PCR法检测突触体内Ca MKⅡ及ERK1/2 mRNA相对表达量,黄芩苷中、高剂量组及盐酸哌甲酯组显著提高了SHR大鼠突触体内Ca MKⅡ及ERK1/2 mRNA相对表达量(P0.05)。该研究表明,黄芩苷不影响SHR大鼠的正常生长发育,给药安全。黄芩苷及盐酸哌甲酯均能上调Ca MKⅡ及ERK1/2 mRNA及蛋白的相对表达量,黄芩苷的药效稳定性具有一定浓度依赖性。     

心痛方对急性心肌缺血大鼠CD40/CD40L、PS/PSGL-1的影响

目的:观察心痛方对急性心肌缺血大鼠血浆中CD40/CD40L、PS/PSGL-1表达及大鼠心肌梗死面积的影响。方法:40只SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、心痛方组、欣康对照组,采用结扎法制备心肌缺血模型,NBT染色法测定心肌梗死面积,酶联免疫法检测血浆中CD40/CD40L、PS/PSGL-1的表达。结果:与模型组相比,心痛方和欣康均缩小心肌梗死面积(P0.01),且心痛方组较欣康组更有优势(P0.01)。心痛方组、欣康组及模型组造模后分别与假手术组相比,血浆中CD40/CD40L、PS/PSGL-1均明显增高(P0.01);用药后心痛方组、欣康组分别与模型组相比,CD40/CD40L、PS/PSGL-1的表达均明显降低(P0.05);心痛方与欣康在抑制CD40/CD40L、PS/PSGL-1表达方面作用相近。结论:心痛方能抑制急性心肌缺血大鼠血浆CD40/CD40L及PS/PSGL-1的表达、缩小大鼠心肌梗死面积。     

辛润苦泄方对胰岛素抵抗大鼠糖脂代谢影响的实验研究

目的研究辛润苦泄方对胰岛素抵抗(IR)大鼠糖脂代谢的影响。方法采用高脂饮食结合腹腔注射链脲佐菌素方法建立2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型,将成功造模的30只大鼠随机分为模型对照组、唐旨宁颗粒低剂量组、唐旨宁颗粒中剂量组、唐旨宁颗粒高剂量组和吡格列酮组,每组6只。另设正常对照组。药物干预6周后,采用酶联免疫吸附检测法(ELESA)检测各组血清中脂联素(ADP)、游离脂肪酸(NEFA)含量;采用RT-PCR方法检测大鼠肝脏胰岛素抵抗相关基因磷酸烯醇式丙酮酸羟激酶(PEPCK)和胰岛素受体底物2(IRS-2)的mRNA表达;采用Western-blot方法检测大鼠肝脏胰岛素抵抗相关蛋白PEPCK和IRS-2的蛋白表达。结果模型组大鼠空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)和血清胰岛素(FINS)均显著高于正常组,胰岛素敏感性指数(ISI)显著低于正常组(P0.01)。药物干预6周后,与模型组比较,各治疗组大鼠血清ADP浓度均升高,NEFA含量均降低(P0.01);各治疗组大鼠肝脏组织中PEPCK的mRNA表达水平均显著下调,IRS-2的mRNA表达水平均显著上调(P0.05);各治疗组大鼠肝脏组织中PEPCK的蛋白表达均显著上调,IRS-2的蛋白表达均显著下调(P0.01)。与吡格列酮组比较,唐旨宁颗粒中、低剂量组的ADP浓度均偏低,低剂量组的NEFA浓度偏高(P0.05),唐旨宁颗粒高剂量组的ADP浓度高于吡格列酮组,中、高剂量组的NEFA浓度均高于吡格列酮组,差异均不具有统计学意义(P0.05);唐旨宁颗粒中、低剂量组中PEPCK均上调,IRS-2的mRNA表达均下调(P0.05);高剂量组中PEPCK和IRS-2的mRNA表达均上调(P0.05);中、低剂量组中PEPCK蛋白表达均上调,IRS-2蛋白表达均下调,差异均具有统计学意义(P0.05);高剂量组中PEPCK蛋白表达上调,IRS-2蛋白表达下调,差异不具有统计学意义(P0.05)。结论辛润苦泄方使2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠血清中的ADP含量升高,NEFA含量下降,能明显改善胰岛素抵抗大鼠的糖脂代谢,其作用机制可能是通过下调PEPCK、上调IRS-2的表达实现的。     

心痛方对心肌缺血大鼠黏附分子表达的干预作用

目的:探讨心痛方对心肌缺血大鼠心肌梗死面积的影响及黏附分子ICAM-1、VCAM-1表达的干预作用。方法:80只SD大鼠,随机分成假手术组、模型组、心痛方组、欣康对照组,采用结扎法制备心肌缺血模型,NBT染色法测定心肌梗死面积,免疫组化法检测黏附分子在缺血心肌的表达。结果:心痛方和欣康均能缩小心肌梗死面积,心痛方呈现出优于欣康的趋势。与假手术组相比,心痛方组、欣康组、模型组缺血心肌ICAM-1、VCAM-1表达的AOD均明显增高(P<0.01);与模型组相比,心痛方组、欣康组ICAM-1、VCAM-1表达的AOD均明显降低(P<0.01);心痛方与欣康在抑制ICAM-1表达方面作用相近,在抑制VCAM-1表达上较欣康略显优势。结论:心痛方能缩小大鼠心肌梗死面积,抑制缺血心肌ICAM-1、VCAM-1的表达。     

心痛方对急性心肌梗死大鼠血浆ICAM-1、VCAM-1的影响

目的:观察心痛方对急性心肌梗死大鼠心梗面积和血浆中细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)水平的影响,探讨炎症反应与急性冠状动脉综合征(ACS)的关系及心痛方干预急性心肌梗死的疗效机制。方法:选用40只SPF级SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、心痛方组、欣康组,冠脉结扎法造模;处死动物后取心肌组织,测定心梗面积;酶联免疫法检测ICAM-1、VCAM-1的表达。结果:术后血浆中ICAM-1、VCAM-1的表达明显升高(P0.01),心痛方及欣康给药后均能抑制血浆ICAM-1、VCAM-1的表达(P0.01),心痛方及欣康给药后均能缩小心梗面积(P0.01),且心痛方较欣康组更具优势;ICAM-1、VCAM-1与心肌梗死面积存在线性关系,ICAM-1水平与梗死面积相关性更高。结论:黏附分子ICAM-1、VCAM-1参与ACS的炎症反应过程,心痛方能抑制黏附分子ICAM-1、VCAM-1的表达,缩小急性心梗大鼠心梗面积。     

心痛方对急性心肌梗死大鼠MMP-9 mRNA及TIMP-1 mRNA表达的影响

目的通过观察心痛方对大鼠急性心肌梗死(AMI)后基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA和金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA表达及对心肌形态学的影响,探讨心痛方治疗AMI的疗效机制。方法 80只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、心痛方组、双抗组(阿司匹林+氯吡格雷),冠脉结扎法制备AMI模型,灌胃给药7 d后处死大鼠,运用RT-PCR法测定心肌组织MMP-9 mRNA、TIMP-1 mRNA表达,心肌细胞HE染色观察形态学改变。结果心痛方能使AMI大鼠心肌内MMP-9 mRNA表达减少(P0.01);TIMP-1mRNA表达升高(P0.01);MMP-9 mRNA/TIMP-1 mRNA比值降低(P0.01);心肌损伤程度及心梗面积与MMP-9 mRNA/TIMP-1 mRNA比值呈正直线相关。结论心痛方对AMI缺血心肌具有保护作用,其作用机制可能与增加TIMP-1 mRNA表达,降低MMP-9 mRNA表达,从而调节MMP-9 mRNA/TIMP-1 mRNA的平衡有关。     

辛润苦泄方通过葡萄糖转运体改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的实验研究

目的研究辛润苦泄方通过葡萄糖转运体改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗(IR)的机制。方法采用高脂饮食结合腹腔注射链脲佐菌素方法建立2型糖尿病IR大鼠模型,将成功造模的30只大鼠随机分为模型组、唐旨宁颗粒低剂量组、唐旨宁颗粒中剂量组、唐旨宁颗粒高剂量组和吡格列酮组,每组6只。另设正常对照组。药物干预6周后,采用荧光定量PCR法检测大鼠肝脏葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)的mRNA表达;采用Western-blot方法检测糖尿病大鼠肝脏组织中GLUT2和肌肉组织中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的蛋白表达。结果模型组大鼠空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)和血清胰岛素(FINS)均显著高于正常组,胰岛素敏感性指数(ISI)显著低于正常组(P0.01)。药物干预6周后,与模型组比较,各治疗组大鼠肝脏组织中GLUT2的mRNA均显著上调(P0.05);唐旨宁颗粒中、高剂量组、吡格列酮组中GLUT2和GLUT4的蛋白表达上调显著(P0.05);唐旨宁颗粒低剂量组中GLUT2和GLUT4的蛋白表达上调不显著,差异无统计学意义(P0.05)。与吡格列酮组比较,唐旨宁颗粒中、低剂量组GLUT2 mRNA表达均下调,(P0.05);唐旨宁颗粒高剂量组GLUT2 mRNA表达上调,差异无统计学意义(P0.05);中、低剂量中药组中GLUT2和GLUT4的蛋白表达均下调(P0.05);唐旨宁颗粒高剂量组中GLUT2的蛋白表达上调、GLUT4的蛋白表达下调,差异不具有统计学意义(P0.05)。结论唐旨宁颗粒高剂量组通过上调GLUT2的mRNA及GLUT2和GLUT4的蛋白表达水平,加速葡萄糖代谢,提高胰岛素敏感性,从而改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗。     

养心通脉方对心肌梗死后大鼠缺血心肌血管新生及相关生长因子表达的影响

目的:探讨养心通脉方对心肌梗死后大鼠缺血心肌血管新生及相关生长因子表达的影响。方法:将120只大鼠制作成急性心肌梗死(AMI)模型,随机分为6组,每组20只:A正常对照组、B模型组、C麝香保心丸组、D养心通脉方低剂量组、E养心通脉方中剂量组、F养心通脉方高剂量组。灌胃6周后处死动物,取心肌组织,检测急性心肌梗死面积与左室面积比、大鼠心肌梗死边缘区心肌微血管数(MVC)、微血管密度(MVD)和心肌梗死边缘区血小板源生长因子(PDGF)、胰岛素样生长因子(IGF-1)的表达。结果:养心通脉方各剂量组心肌梗死面积与左室面积比和麝香保心丸组相似,和模型组相比明显减小(P0.05);养心通脉方各剂量组梗死边缘区MVC、MVD、PDGF、IGF-1的表达均高于模型组(P0.05),养心通脉方高、中剂量组高于麝香保心丸组(P0.05);低剂量组与麝香保心丸组相似(P0.05)。结论:养心通脉方能缩小大鼠急性心肌梗死范围,并能促进心肌梗死后大鼠缺血心肌的局部血管新生,对大鼠缺血心肌具有保护作用,而上调心肌梗死边缘区PDGF、IGF-1的表达可能是其作用机制之一。     

连夏配方颗粒对心肌梗死后大鼠心梗周围区神经生长因子mRNA、酪氨酸激酶受体A mRNA表达的影响

目的观察连夏配方颗粒对心肌梗死后大鼠心梗周围区心肌组织神经生长因子(nerve growth factor,NGF)mRNA、酪氨酸激酶受体A(tyrosine kinase receptor A,Tr KA)mRNA表达的影响。方法将90只清洁级健康7周龄Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、心梗模型组、美托洛尔组、连夏配方颗粒高、中、低剂量(189.00、94.50、47.25 mg/kg)组。各组均结扎左冠状动脉前降支以复制心肌梗死大鼠模型,假手术组只穿线,不结扎。假手术与心梗模型组大鼠予生理盐水,余各组予相应实验药物;连续灌胃给药30天,采用Real-time RT-PCR方法检测心梗周围区NGF mRNA、TrKA mRNA表达水平。结果与假手术组比较,心梗模型组大鼠心梗周围区心肌组织NGF mRNA、Tr KA mRNA表达均明显增高(P0.01);与模型组比较,连夏配方颗粒高、中、低剂量组大鼠心梗周围区NGF mRNA表达均明显降低(P0.01);连夏配方颗粒高、中剂量组大鼠心梗周围区Tr KA mR-NA表达均明显降低(P0.01);与美托洛尔组比较,连夏配方颗粒高剂量组大鼠心梗周围区NGF mRNA表达明显降低(P0.05)。结论连夏配方颗粒可显著降低心肌梗死后大鼠心梗周围区心肌组织NGF mRNA、Tr KA mRNA的表达,达到改善心肌梗死后大鼠心梗周围区自主神经重构的作用。     

益气逐瘀方对心肌梗死大鼠心功能、细胞凋亡及miR-24相关基因表达的影响

目的探讨益气逐瘀方参元益气活血胶囊(SYD)对急性心肌梗死大鼠心功能、细胞凋亡及miR-24相关基因表达的影响。方法 50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、SYD高剂量组、SYD中剂量组、SYD低剂量组,每组10只,采用左冠状动脉前降支结扎法建立心肌梗死模型,SYD高、中、低剂量组从术后第2天开始给予SYD药液灌胃,共给药2周。治疗结束后检测大鼠血清CK、LDH水平,超声心动图检测左室功能,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,RT-PCR检测心肌组织miR-24、Bim、Bcl-2、Bax、caspase-9mRNA表达。结果与模型组比较,SYD高、中、低剂量组均能显著降低血清CK、LDH水平(P0.05,P0.01),降低左室舒张和收缩末期内径(P0.05,P0.01),升高左室短轴缩短率及射血分数(P0.05,P0.01),升高心肌组织miR-24、Bcl-2 mRNA表达(P0.05,P0.01),降低Bim、Bax、caspase-9 mRNA表达(P0.05,P0.01),同时降低心肌细胞凋亡指数(P0.05,P0.01)。结论 SYD能够减轻心肌梗死大鼠心肌损伤及细胞凋亡,其作用机制可能与上调miR-24表达,抑制靶基因Bim及促凋亡基因Bax、caspase-9表达有关。     

益气健脾中药对脾虚大鼠骨骼肌组织中Ca~(2+)/CaMKⅡ通路关键分子的干预作用

目的:观察脾气虚大鼠骨骼肌Ca2+/Ca MKⅡ信号通路关键分子[Ca2+]i以及Ca M、Ca MKⅡ、p-Ca MKⅡ蛋白表达及益气健脾中药四君子汤和红芪提取物的干预作用。方法:动物随机分为正常对照组、脾气虚模型组、四君子汤组和红芪提取物组,每组10只。除正常对照组外,其余动物采用复合法建立脾气虚证大鼠模型,四君子汤组给予四君子汤煎剂20 g/(kg·d)灌胃,红芪提取物组给予红芪提取物6 g/(kg·d)灌胃,连续干预21 d后,观测各组大鼠一般生存状态、胃肠激素GAS、MOT含量和骨骼肌组织ATP酶活性,同时采用激光共聚焦技术检测骨骼肌组织[Ca2+]i浓度,蛋白免疫印迹技术检测小肠组织Ca M、Ca MKⅡ和p-Ca MKⅡ表达变化。结果:与正常对照组比较,脾气虚模型大鼠一般生存状态较差,胃肠激素GAS、MOT含量显著降低(P0.01);骨骼肌组织Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性、[Ca2+]i浓度及Ca M、Ca MKⅡ、p-Ca MKⅡ蛋白表达量显著降低(P0.01);与模型组比较,四君子汤组和红芪提取物组大鼠一般生存状态明显改善,小肠组织胃肠激素MOT含量升高(P0.05),四君子汤组小肠组织GAS含量显著升高(P0.05);各给药组骨骼肌组织Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性及[Ca2+]i浓度和Ca M、Ca MKⅡ蛋白表达量显著升高(P0.05);四君子汤组骨骼肌组织p-Ca MKⅡ蛋白表达显著升高(P0.05)。结论:四君子汤组和红芪提取物能调节脾气虚大鼠胃肠激素GAS、MOT分泌,提高骨骼肌组织Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase活性,并能上调Ca2+/Ca M信号通路关键分子表达,且以四君子汤作用显著。     

和肾络宁风颗粒干预FGF23/Klotho轴对慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱模型大鼠的影响

目的观察和肾络宁风颗粒通过FGF23/Klotho轴对慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱模型大鼠的干预机制。方法采用5/6肾切除及高磷饮食喂养构建慢性肾衰竭钙磷代谢紊乱大鼠模型,模型复制成功后给予和肾络宁风颗粒灌胃,持续给药8周。以PAS染色观察肾组织变化,检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血钙(Ca~(2+))、血磷(P~(3+))、血清碱性磷酸酶(ALP)、血清甲状旁腺激素(PTH)等,免疫组化、Western Blot法和RT-PCR法检测大鼠肾脏Klotho和股骨FGF23的蛋白及基因表达。结果 1. PAS染色观察模型组大鼠肾小球结构紊乱、肾小管扩张,间质有大量炎性细胞浸润;与模型组比较,和肾络宁风颗粒中、高剂量组肾小球轻度增生,肾小管轻度扩张,间质炎性细胞浸润数目减少。2.与正常组比较,模型组大鼠血Scr、BUN、P~(3+)、PTH、ALP明显升高,体质量和血Ca~(2+)下降(P0.01),Klotho蛋白及mRNA表达下调(P0.05,P0.01),FGF23蛋白及mRNA表达上调(P0.01)。与模型组比,和肾络宁风颗粒中、高剂量组血Scr、BUN、P~(3+)、PTH、ALP明显降低,体质量和血Ca~(2+)升高(P0.01),Klotho蛋白及mRNA表达上调(P0.01),FGF23蛋白及mRNA表达下调(P0.01)。与骨化三醇组比较,和肾络宁风颗粒中、高剂量组血Scr、BUN和P~(3+)降低(P0.01,P0.05),FGF23蛋白和基因表达下降(P0.01,P0.05)。结论和肾络宁风颗粒可能通过对FGF23/Klotho轴的调控改善慢性肾衰钙磷代谢紊乱模型大鼠的肾功能和钙磷代谢,在一定范围内呈剂量依赖性。     

肉桂醛对0℃冷应激大鼠背根神经节神经细胞胞浆内Ca2+变化及TRPA1和TRPM8 mRNA表达的影响

目的:观察肉桂醛对0℃冷应激大鼠背根神经节神经细胞胞浆内Ca~(2+)浓度变化,并探讨其对瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1)和M8(TRPM8)mRNA表达的影响。方法:取大鼠原代背根节神经细胞置于0℃冷应激状态,噻唑蓝(MTT)法检测不同时长冷应激状态下细胞的活性;加入肉桂醛,采用激光共聚焦显微镜观察细胞内外Ca~(2+)分布的变化;另以实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测其TRPA1,TRPM8 mRNA的表达。结果:不同时长的冷应激状态下,细胞存活度无明显差异;冷应激可降低背根神经节(DRG)神经细胞胞浆内Ca~(2+)浓度(P0.05),一定量的肉桂醛则能使Ca~(2+)浓度显著升高(P0.01)。Real-time PCR检测显示,长时间冷应激TRPA1 mRNA表达上调(P0.05);长时间冷应激TRPM8 mRNA表达明显要高于短时冷应激(P0.05);适当浓度的肉桂醛使冷应激大鼠DRG神经细胞TRPA1 mRNA表达升高(P0.05,P0.01),对TRPM8 mRNA的影响尚不明显。结论:冷应激能影响TRPA1,TRPM8 mRNA的表达,降低胞浆内Ca~(2+)浓度,作用机制可能为肉桂醛通过活化TRPA1通道,升高细胞浆内Ca~(2+)浓度。     

防风多糖治疗骨质疏松大鼠的效果及对血清IL-6、TNF-α、TGFβ1、NO、NOS水平的影响

目的:探讨防风多糖治疗骨质疏松大鼠的实验效果及作用机制。方法:选取60只SPF级雌性SD大鼠,采用随机数字表分为假手术组(等量生理盐水)、模型组(等量生理盐水)、阳性对照组[乙烯雌酚0.05 mg/(kg·d)]、防风多糖低剂量组[250 mg/kg浓度防风多糖供试液,20 m L/(kg·d)、防风多糖高剂量组500 mg/kg浓度防风多糖供试液,20 m L/(kg·d)]各12只。结果:干预70 d后,模型组股骨干重较假手术组显著降低(P0.05),阳性对照组、低剂量组、高剂量组的股骨干重大于模型组(P0.05),高剂量组的股骨干重大于低剂量组(P0.05);阳性对照组、低剂量组、高剂量组的血清IL-6、TNF-α水平低于模型组(P0.05),TGF-β1、NO、NOS高于模型组(P0.05);高剂量组的血清IL-6、TNF-α水平低于低剂量组(P0.05),TGF-β1、NO、NOS高于低剂量组(P0.05);阳性对照组、低剂量组、高剂量组的血清Ca~(2+)、Mg~(2+)、ALP水平低于模型组(P0.05),P~(2-)高于模型组(P0.05);高剂量组的血清Ca~(2+)、Mg~(2+)、ALP低于低剂量组(P0.05),P~(2-)高于低剂量组(P0.05)。结论:防风多糖治疗骨质疏松大鼠能有效降低血清中钙、镁离子及ALP浓度,调节细胞因子,缓解去势大鼠的骨高分解状态,达到治疗效果。     

健脾解毒中药对铅中毒大鼠学习记忆损伤及海马Ng表达的影响

目的:探讨健脾解毒中药对铅中毒致学习记忆能力损伤、Ng蛋白及基因表达的影响。方法:40只大鼠按随机数字表法分为空白组(8只)饮用双蒸水,造模组(32只)饮水中添加0.02%醋酸铅,60 d后造模组按随机数字表法分为4组(8只/组):中药高、低剂量治疗组(分别以3.0 g·kg-1·d-1、0.6 g·kg-1·d-1灌胃中药)、阳性对照组(依地酸钠钙50 mg·kg-1·d-1肌注)及模型组,连续60 d后进行Morris水迷宫试验,再检测血铅,WB和RT-PCR检测海马组织Ng、Ca MKⅡ、PSD95的表达。结果:模型组血铅增高,各治疗组血铅降低;与模型组比较,空白组及高剂量组体质量、血红蛋白含量增高,潜伏期降低;模型组Ng、Ca MKⅡα、PSD95 mRNA及蛋白表达均降低,高剂量组Ng、Ca MKⅡα、PSD95 mRNA及蛋白表达均高于模型组。结论:健脾解毒中药可改善铅中毒大鼠的学习记忆损伤,其机制可能与其上调大鼠脑海马组织Ng、Ca MKⅡα表达有关。     

胃炎饮对胃溃疡模型大鼠溃疡组织生长因子表达的影响

目的 探讨胃炎饮促进胃溃疡愈合的可能作用机制。方法 40只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、胃炎饮高剂量组、胃炎饮低剂量组、奥美拉唑组,每组8只。除假手术组外,其余各组大鼠采用冰醋酸腐蚀法建立胃溃疡大鼠模型,造模3天后,胃炎饮高、低剂量组大鼠分别灌服浓度为2.14、1.07 g/ml的胃炎饮方药液10 ml/kg,奥美拉唑组灌服0.368 mg/ml的奥美拉唑药液10 ml/kg,假手术组、模型组灌服等量生理盐水。治疗14天后,肉眼观察胃壁冰醋酸腐蚀处大体形态,测量、计算胃黏膜溃疡面积及溃疡抑制率,检测胃黏膜表皮生长因子(EGF)、血管内皮生长因子(VEGF)及其mRNA表达。结果 模型组、胃炎饮高、低剂量组、奥美拉唑组大鼠胃溃疡面积分别为(26.8±9.99)mm2、(10.0±4.62)mm2(19.5±6.02)mm2、(17.5±6.18)mm2,各用药组溃疡面积均较模型组显著缩小(P<0.05或P<0.01),且胃炎饮高剂量组溃疡面积明显小于胃炎饮低剂量组与奥美拉唑组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠胃黏膜EGF、VEGF表达的平均光度值显著升高,平均灰度值显著下降(P<0.05或P<0.01);各治疗组与模型组比较,其平均光度值显著升高,平均灰度值显著下降(P<0.05或P<0.01),且胃炎饮高剂量组改善程度优于胃炎饮低剂量组与奥美拉唑组(P<0.05或P<0.01)。与假手术组比较,模型组大鼠胃黏膜EGF mRNA、VEGF mRNA表达显著升高(P<0.05或P<0.01);各治疗组与模型组比较,EGF mRNA、VEGF mRNA表达显著升高,且胃炎饮高剂量组显著高于奥美拉唑组与胃炎饮低剂量组(P<0.05或P<0.01)。结论 胃炎饮可能通过提高胃溃疡模型大鼠胃黏膜生长因子的表达,从而促进胃黏膜修复及溃疡愈合。