Graves病患者CD3~+CD56~+自然杀伤T细胞及其分泌的细胞因子表达研究

目的探讨CD3~+CD56~+自然杀伤T细胞(natural killer T cell,NKT)及其分泌的白细胞介素(interleukin,IL)-2、IL-6、IL-10、IL-12、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)等细胞因子和血清游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT_3)、游离甲状腺素(free thyroxine,FT_4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody,TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TGAb)和促甲状腺素受体抗体(thyrotrophin receptor antibody,TRAb)水平在Graves病患者体内表达情况。方法 Graves病患者30例为观察组,同期体检健康者30例为对照组,检测2组外周血CD3~+CD56~+NKT占淋巴细胞比率、CD3~+CD56~+NKT分泌的细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α水平及血清FT_3、FT_4、TSH、TPOAb、TGAb、TRAb水平。结果观察组CD3~+CD56~+NKT占淋巴细胞总数比率[(1.37±0.43)%]低于对照组[(2.47±0.39)%](P0.05);观察组血清FT_3[(23.76±5.51)pmol/L]、FT_4[(88.29±31.35)pmol/L]、TSH[(1.68±1.01)mu/L]、TPOAb[(293.58±141.32)u/mL]、TGAb[(380.58±215.31)u/mL]、TRAb抗体[(10.75±8.23)u/mL]水平均高于对照组[FT_3(4.79±0.59)pmol/L、FT_4(17.84±3.15)pmol/L、TSH(0.08±0.01)u/L、TPOAb(20.06±4.85)u/mL、TGAb(31.48±22.68)u/mL、TRAb抗体(1.21±0.23)u/mL](P0.05);观察组血清IL-6[(2.51±0.31)μg/L]、IL-10[(43.79±21.54)ng/L]、IL-12[(1 306.14±514.39)ng/L]、TNF-α[(4.38±0.66)ng/L]水平均高于对照组[(1.01±0.20)μg/L、(27.68±5.41)ng/L、(584.34±214.57)ng/L、(2.41±0.81)ng/L](P0.05);观察组IL-2表达水平[(1.26±0.43)ng/L]低于对照组[(4.81±0.71)ng/L](P0.05)。结论 Graves病患者存在免疫功能紊乱情况及免疫调节细胞失衡,通过CD3~+CD56~+NKT减少及其分泌的细胞因子调节Th1/Th2分化,参与Graves病的发病过程。     

地塞米松对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中细胞因子分泌及T细胞亚群表达的影响

目的 探讨地塞米松对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中白细胞介素(IL)-17、干扰素(IFN)-γ分泌水平和Th17、Tc17、Th1、Tc1等T细胞亚群表达的影响.方法 SLE患者和健康对照者的PBMCs分空白孔、佛波酯(PMA)/离子霉素(Ionomycin)孔、PMA/Ionomycin+地塞米松(DEX)孔行体外培养,运用四色流式细胞术检测PBMCs表达Th17、Tc17、Th1、Tc1等T细胞亚群的百分比,采用酶联免疫吸附法测定SLE患者和健康对照者血浆及PBMCs培养上清中IL-17、IFN-γ的表达水平.结果 SLE组患者血浆IL-17[138.98(84.82～187.04)ng/L]、IFN-γ[21.92(15.95～27.09)ng/L]含量均高于正常对照组[57.21(47.78～72.12)ng/L,13.43(7.04～17.37)ng/L].无PMA刺激条件下,SLE患者PBMCs培养上清中细胞因子水平、PBMCs中各T细胞亚群的百分比与正常对照组相比差异均无统计学意义(P均＞0.05);加入PMA刺激后,SLE患者PBMCs上清中IL-17的水平[(26.43±10.04)ng/L]和外周血Th17[(2.49±1.49)%]、Tc1[(44.89±16.43)%]细胞的比例均显著高于正常对照组[(18.06±5.42)ng/L,(1.47±0.73)%,(31.41±9.05)%)(P均＜0.05),SLE患者Th1、Tc17细胞百分比与正常对照组相比,差异均无统计学意义(P均＞0.05);地塞米松能明显抑制活化状态下的PBMCs分泌IL-17的水平[(16.72±6.09)ng/L](P＜0.01),且显著下调Th17(1. 34±0.76)%、Tc1(34.62±17.25)%细胞百分比(P均＜0.05),而地塞米松对IL-17的抑制作用更强.结论 SLE患者体内T细胞亚群及其相应细胞因子的表达水平存在明显异常,地塞米松能干扰SLE患者体内细胞因子网络失衡的免疫病理过程,且对IL-17有明显的抑制作用,为临床使用糖皮质激素治疗SLE提供新的理论依据和实验室基础.     

血清胱抑素C对原发性高血压和高血压脑出血发病的影响

目的探讨血清胱抑素C(Cys C)对原发性高血压和高血压脑出血发病的影响。方法选择102例高血脑出血患者作为高血压脑出血组,102例单纯高血压患者作为高血压组,另选择102例同期在该院健康体检者作为对照组,测定3组研究对象的血清Cys C、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血肌酐(SCr)及内生肌酐清除率(ECCR)水平。对于3组研究对象按其年龄分为20~49、49~59、59岁组,分析3个年龄段研究对象血清Cys C水平。结果(1)高血压脑出血组血清Cys C水平[(1.82±0.55)ng/L]高于高血压组[(1.20±0.41)ng/L]和对照组[(0.92±0.26)ng/L],差异均有统计学意义(P0.05),高血压组血清Cys C水平高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。高血压脑出血组TC水平[(4.91±1.36)nmol/L]高于对照组[(4.37±1.39)nmol/L],差异有统计学意义(P0.05)。高血压脑出血组TG水平[(1.75±0.55)nmol/L)]高于对照组[(1.58±0.47)nmol/L],差异有统计学意义(P0.05)。高血压脑出血组SCr水平[(129.56±38.33)μmol/L]高于高血压组[(106.76±33.62)μmol/L]和对照组[(98.23±31.78)μmol/L],差异均有统计学意义(P0.05)。高血压脑出血组ECCR水平[(63.45±23.11)mL/min]低于高血压组[(84.54±21.35)mL/min]和对照组[(100.61±32.71)mL/min],差异均有统计学意义(P0.05),高血压组ECCR水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。(2)59岁高血压脑出血患者血清Cys C水平[(3.17±0.79)ng/L]高于大于49~59岁[(1.71±0.46)ng/L]和20~49岁[(1.01±0.32)ng/L]的患者,差异有统计学意义(P0.05),高血压脑出血中年患者血清Cys C水平高于高血压脑出血青年患者,差异有统计学意义(P0.05)。59岁高血压患者血清Cys C水平[(1.38±0.42)ng/L]高于20~49岁[(1.14±0.41)ng/L]的患者,差异有统计学意义(P0.05),49~59岁的高血压患者与大于59岁、20~49岁的高血压患者血清Cys C水平差异均无统计学意义(P0.05)。(3)高血压脑出血患者血清Cys C水平与年龄呈明显正相关(r=0.305),与ECCR呈明显负相关(r=-0.438,P0.05)。结论高血脑出血患者血清Cys C水平与其年龄、ECCR相关,年龄越大,ECCR越低,血清Cys C水平越高。     

益生菌制剂对脓毒症小鼠生存情况的影响及机制研究

目的探讨益生菌制剂对脓毒症小鼠生存情况的影响及作用机制。方法 60只雄性C57BL6小鼠随机分为三组,分别为假手术组(20只)、对照组(20只)和实验组(20只)。在饲养2 d后,实验组小鼠每天给予200μL的益生菌制剂,对照组和假手术组小鼠每天给予200μL等渗Na Cl溶液,连续灌胃4周。分别对实验组小鼠与对照组小鼠进行盲肠结扎穿孔术(CLP),而假手术组小鼠不予盲肠穿刺,其余步骤同CLP。每组10只用于观察小鼠活动状态及7 d存活情况;每组剩余10只,术后24 h取血液、结肠组织。采用酶联免疫吸附实验法检测各组小鼠血清中炎症因子白细胞介素22(IL-22)、IL-2及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察各组小鼠结肠组织形态,免疫组织化学法观察各组小鼠肠黏膜抗紧密连接相关蛋白(Occludin)表达。结果假手术组小鼠生长状态良好;对照组小鼠则蜷缩在笼角,浑身战栗;实验组小鼠较对照组活跃,活动较多,未见明显战栗。术后第7天,对照组无小鼠存活,实验组小鼠仍有3只存活,予安乐死,其7 d存活情况显著高于对照组小鼠(P=0.020);而假手术组小鼠10只均存活,予安乐死。对照组与假手术组比较,小鼠血清IL-22[(103±23)ng/L vs.(27±9)ng/L,t=7.590,P0.001]、IL-2[(328±27)ng/L vs.(77±21)ng/L,t=21.368,P0.001]及TNF-α[(94±22)ng/L vs.(56±9)ng/L,t=4.734,P0.001]表达水平比较,差异均有统计学意义;实验组与假手术组小鼠血清IL-22[(75±33)ng/L vs.(27±9)ng/L,t=3.755,P=0.001]、IL-2[(217±30)ng/L vs.(77±21)ng/L,t=10.850,P0.001]及TNF-α[(107±20)ng/L vs.(56±9)ng/L,t=5.956,P0.001]表达水平比较,差异亦均有统计学意义;与对照组相比,实验组小鼠血清IL-22[(103±23)ng/L vs.(75±33)ng/L,t=2.185,P=0.042]及IL-2[(328±27)ng/L vs.(217±30)ng/L,t=8.371,P0.001]表达水平差异均有统计学意义,而TNF-α[(94±22)ng/L vs.(107±20)ng/L,t=1.363,P=0.188]表达水平比较,差异无统计学意义。假手术组小鼠的结肠黏膜上皮完整,腺体排列规则,少许或无炎症细胞浸润;对照组小鼠则出现结肠黏膜上皮腺体排列紊乱、变形、缺失,肠上皮细胞间紧密连接结构模糊,以及炎症细胞广泛浸润现象,有些伴有隐窝脓肿形成;而实验组小鼠结肠上皮基本完整,未有糜烂缺失,腺体排列基本正常,炎症细胞浸润程度也较对照组小鼠有所减轻。免疫组织化学法检测结果显示,假手术组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构完整,Occludin蛋白表达较多;对照组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构破坏、消失,炎症细胞浸润,Occludin蛋白表达较少;实验组小鼠结肠上皮细胞腺泡结构尚完整,腺泡间间隙增宽,Occludin蛋白表达较对照组有所增加。结论益生菌可通过抑制肠上皮细胞间紧密连接相关蛋白的减少,稳定肠道黏膜屏障结构,有效提高脓毒症小鼠的存活情况。     

肝素雾化吸入治疗喘息样支气管炎反复发作的免疫学机制

目的探讨在常规治疗基础上给予肝素雾化吸入治疗小儿喘息样支气管炎反复发作的疗效及免疫学机制。方法喘息性支气管炎患儿50例,随机分为观察组30例和对照组20例,对照组给予吸氧、抗感染等常规治疗,观察组在对照组基础上给予肝素100u/kg+生理盐水5mL雾化吸入,2次/d,共14d。记录2组喘息时间和肺部啰音时间;分别于治疗前及治疗14d后检测2组血清白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-8、正常T细胞表达分泌的活性调节蛋白(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted,RANTES)、干扰素-γ(interferon-gamma,INF-γ)水平及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率,并与18例体检健康者(阴性对照组)进行比较。结果观察组喘息时间[(4.5±1.1)d]及肺部啰音时间[(6.9±0.8)d]较对照组[(6.6±1.4)、(8.1±0.9)d]短(P<0.01);治疗前,观察组和对照组血清IL-4[(2.45±0.22)、(2.38±0.18)ng/L]、IL-8[(33.90±2.20)、(32.10±2.00)ng/L]、RANTES[(48.8±8.7)、(41.9±9.5)μg/L]水平均明显高于阴性对照组[IL-4(1.41±0.17)ng/L、IL-8(15.60±2.20)ng/L、RANTES(13.3±4.8)μg/L](P<0.01),INF-γ[(0.37±0.14)、(0.38±0.09)ng/L]及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率[(6.4±0.9)%、(5.5±0.8)%]均低于阴性对照组[(1.44±0.20)ng/L、(7.9±1.2)%](P<0.01);观察组治疗后血清IL-4[(1.52±0.13)ng/L]、IL-8[(18.60±2.10)ng/L]及RANTES[(23.1±4.5)μg/L]水平均较对照组治疗后[(1.78±0.16)ng/L)、(22.90±1.20)ng/L、(28.0±6.1)μg/L]降低(P<0.05),观察组治疗后血清INF-γ[(1.46±0.16)ng/L)]及CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率[(7.2±0.9)%]均较对照组治疗后[(0.83±0.09)ng/L、(6.4±1.0)%]增高(P<0.05)。结论喘息样支气管炎反复发作患儿在常规治疗基础上给予肝素雾化吸入治疗,可下调血清IL-4、IL-8、RANTES水平,上调INF-γ和CD4^+CD25^+CD127^-Treg细胞比率,缩短喘息时间及肺部啰音时间。     

再生障碍性贫血患者穿孔素和颗粒酶B表达及意义

目的探讨再生障碍性贫血(aplastic anemia, AA)患者外周血穿孔素及颗粒酶B的表达及其临床意义。方法 AA患者60例,其中重型AA(severe AA, SAA)患者22例为SAA组,非SAA患者38例为非SAA组,选取60例体检健康者为正常对照组;采用流式细胞仪检测3组外周血T淋巴细胞亚群及穿孔素和颗粒酶B表达情况,采用ELISA法检测3组血清穿孔素和颗粒酶B水平,并进行比较。结果 SAA组及非SAA组外周血CD4~+细胞比率、CD4~+/CD8~+和自然杀伤(natural killing, NK)细胞比率均低于正常对照组(P0.05),CD8~+细胞比率高于正常对照组(P0.05)。SAA组和非SAA组CD8~+T淋巴细胞中穿孔素[(17.72±5.53)%、(15.95±6.11)%]和颗粒酶B[(76.91±17.44)%、(69.89±16.69)%]阳性表达率均高于正常对照组[(8.83±4.76)%、(32.57±15.22)%](P0.05),SAA组NK细胞穿孔素[(78.82±9.41)%]和颗粒酶B[(87.66±10.53)%]阳性表达率高于正常对照组[(62.33±5.76)%、(73.15±8.94)%](P0.05);SAA组血清穿孔素[(6 195.26±1 168.35)ng/L]和颗粒酶B[(7.726±2.611)ng/L]水平高于非SAA组[(3 875.77±1 094.68)ng/L、(3.152±1.787)ng/L]和正常对照组[(3 324.92±1 283.51)ng/L、(2.878±0.997)ng/L](P0.05),非SAA组与正常对照组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 CD8~+T细胞参与了AA的免疫应答,CD8~+T淋巴细胞、NK细胞中穿孔素和颗粒酶B在AA发病中可能起一定作用。     

肠道病毒性脑炎患儿外周血T淋巴细胞亚群与自然杀伤细胞及相关免疫细胞因子水平变化

目的探讨肠道病毒性脑炎(enteroviral encephalitis,EVE)患儿外周血T淋巴细胞亚群、自然杀伤(natural killer,NK)细胞、相关免疫细胞因子水平变化及其临床意义。方法246例EVE患儿为EVE组,同期体检健康儿童100例为对照组,测定2组外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞、免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)A、IgG、IgM、白细胞介素(interleukin,IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、干扰素-γ(interferonγ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平。结果EVE组CD8^+T淋巴细胞比率[(24.13±9.71)%]、CD3^+T淋巴细胞比率[(61.42±12.26)%]及血清IL-6[(41.63±34.26)ng/L]、TNF-α[(2.92±1.55)ng/L]、IFN-γ[(9.45±4.26)ng/L]水平高于对照组[(20.11±5.98)%、(57.94±10.53)%、(12.45±10.46)ng/L、(2.04±0.73)ng/L、(6.27±3.44)ng/L](P<0.05),CD4^+/CD8^+(1.37±0.75)、CD20^+T淋巴细胞比率[(0.87±0.75)%]、CD3^-CD16^+CD56^+T淋巴细胞比率[(7.87±5.26)%]、IgA[(0.45±0.32)g/L]、IgG[(7.67±1.35)g/L]及血清IL-2[(3.52±1.02)ng/L]水平低于对照组[1.83±1.23、(1.47±1.41)%、(13.23±6.11)%、(1.05±0.22)g/L、(8.02±1.42)g/L、(4.13±1.28)ng/L](P<0.05);EVE组CD4^+T淋巴细胞比率[(28.81±9.56)%]、IgM[(1.35±0.21)g/L、IL-4[(3.17±0.81)ng/L]与对照组[(30.95±9.22)%、(1.34±0.19)g/L、(3.12±0.86)ng/L]比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论T淋巴细胞调节紊乱、体液免疫紊乱可能参与EVE的发病过程。     

哮喘产妇新生儿脐血IL-18、IL-5、IL-10、TNF-α水平临床研究

目的研究哮喘产妇与健康产妇新生儿脐血白细胞介素(IL)-18、IL-5、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平差异,探讨哮喘发病的早期检测及预防临床意义。方法 46例哮喘产妇为哮喘组,59例健康产妇为健康对照组,比较两组新生儿脐血IL-18、IL-5、IL-10、TNF-α水平差异,研究4指标的相关性;并对哮喘组新生儿行10~13个月随访,比较发生变态反应疾病研究对象(A组,19例)与无变态反应疾病研究对象(B组,27例)两组新生儿脐血IL-18、IL-5、IL-10、TNF-α水平差异。结果哮喘组新生儿脐血IL-18[(489.7±145.3)ng/L]、IL-5[(144.2±48.5)ng/L]、TNF-α[(129.6±23.7)ng/L]水平高于健康对照组,IL-10[(24.7±5.2)ng/L]水平低于健康对照组,差异有统计学意义(P0.05);IL10与IL5呈负相关(r=-0.459,P0.05),IL-10与TNF呈负相关(r=-0.586,P0.05),哮喘组发生变态反应新生儿脐血IL-18[(515.1±71.6)ng/L]、IL-5[(167.3±25.7)ng/L]、TNF-α[(141.6±15.3)ng/L]水平高于未发生变态反应新生儿,IL-10[(21.2±3.2)ng/L]水平低于未发生变态反应新生儿。结论新生儿脐血IL-18、IL-5、IL-10、TNF-α水平的监测有利于哮喘的早期辅助诊断。     

氯沙坦对类风湿关节炎合并高血压患者IL-17的抑制作用

目的探讨氯沙坦对类风湿关节炎(RA)合并高血压患者白细胞介素(IL)-17的抑制作用。方法选择该院RA合并高血压患者20例为RA组,单纯高血压患者20例为高血压组,所有的高血压患者均为新发病例,在未经过控制血压治疗前采血;门诊健康体检人员20例为健康对照组。抽取RA组患者氯沙坦治疗前后、高血压组患者及对照组受试者外周血,ELISA测定血清中IL-17水平。抽取RA组患者全血30mL,密度梯度离心法提取单个核细胞,将外周血单个细胞分为空白对照组(正常培养)、刺激组、阳性对照组和氯沙坦治疗组。刺激组、阳性对照组和氯沙坦治疗组用抗CD3、抗CD28单克隆抗体联合刺激后,阳性对照组加入100μmol/mL甲基强的松龙,氯沙坦治疗组加入100μmol/mL氯沙坦,48h后用ELISA测定培养上清液中IL-17水平,根据DAS28评分将RA患者分为低活动组(DAS28≤3.2)和中高活动组(DAS28>3.2),评估氯沙坦对不同DAS28评分RA患者外周血单个核细胞分泌IL-17的影响。结果 RA组患者血清中IL-17水平高于健康对照组和高血压组(P<0.05),用氯沙坦治疗1周后,RA组患者IL-17平均值低于治疗前(P<0.05)。氯沙坦治疗组RA患者外周血单个核细胞培养上清液中的IL-17水平为(38.214±8.725)pg/mL,刺激组为(126.768±16.552)pg/mL,差异有统计学意义(t=12.56,P<0.001)。结论氯沙坦能够抑制RA患者血清及外周血单个核细胞IL-17的表达,是治疗RA合并高血压的首选药物。     

维生素D_3对支气管哮喘患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞的影响

目的探讨维生素D_3对支气管哮喘患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞表达的影响及其治疗支气管哮喘的效果。方法支气管哮喘患儿160例,随机分为观察组和对照组各80例,对照组在常规对症支持治疗基础上给予硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂1揿/次,3次/d,喷吸;观察组在对照组治疗基础上给予维生素D_30.25μg/次,1次/d,口服;2组疗程均为12周。采用ELISA法检测2组治疗前、后血清1,25-二羟维生素D_3[1,25-dihydroxyvitamin D_3,1,25(OH)_2D_3]、白细胞介素(interleukin,IL)-4,IL-10,IL-17水平,采用流式细胞技术检测CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞表达,比较2组疗效。结果观察组总有效率(96.2%)高于对照组(87.5%)(P0.05);观察组和对照组治疗后CD4~+CD25~+调节性T细胞[(7.56±1.24)%、(5.44±1.34)%]、1,25(OH)_2D_3[(36.06±5.98)、(31.44±6.32)nmol/L]水平均高于治疗前[CD4~+CD25~+调节性T细胞:(3.53±1.03)%、(3.54±1.01)%;1,25(OH)_2D_3:(25.64±5.24)、(25.72±4.65)nmol/L],Th17细胞[(1.94±0.73)%、(2.87±0.97)%],IL-17[(58.26±10.24)、(76.21±9.42)ng/L]、IL-4[(14.26±3.24)、(21.21±4.26)ng/L]及IL-10[(42.44±9.53)、(64.37±11.33)ng/L]水平均低于治疗前[Th17细胞:(4.38±1.68)%、(4.36±1.21)%;IL-17:(110.22±15.32)、(109.24±16.64)ng/L;IL-4:(41.22±9.32)、(41.24±10.64)ng/L;IL-10:(92.43±12.83)、(92.40±10.42)ng/L](P0.05),且观察组治疗后各指标改善较对照组明显(P0.05)。结论补充维生素D_3可提高支气管哮喘患儿临床疗效,其机制可能与上调CD4~+CD25~+调节性T细胞、抑制Th17细胞表达有关。     

黄连素对乳腺癌大鼠的治疗作用

目的探讨黄连素对乳腺癌大鼠的治疗作用及可能机制。方法雌性SD大鼠60只,随机分为对照组10只和实验组50只。实验组给予二甲基苯蒽悬浮液100mg/kg灌胃制备乳腺癌大鼠模型,对照组给予等体积橄榄油灌胃。灌胃13周时对照组处死1只、实验组处死5只大鼠观察造模是否成功。模型制备成功后,将实验组45只大鼠分为模型组,黄连素低、中、高剂量组和三氧苯胺组各9只,分别给予体积分数0.1%羧甲基纤维素10mL/kg、黄连素100mg/kg、黄连素200mg/kg、黄连素300mg/kg、三氧苯胺5.6mg/kg灌胃,1次/d,连续8周。8周后测量肿瘤体积并计算肿瘤细胞数量;采用ELISA法检测血清白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-10、IL-12、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平。结果对照组镜下未见肿瘤细胞,黄连素低、中、高剂量组和三氧苯胺组肿瘤细胞数量[(1.9±0.6)、(1.7±0.7)、(1.6±0.5)、(1.6±0.5)个]较模型组[(2.5±0.5)个]少,肿瘤体积[(2.61±0.37)、(2.56±0.25)、(2.35±0.32)、(2.31±0.40)cm3]较模型组[(3.06±0.53)cm3]小(P0.05);三氧苯胺组及黄连素低、中、高剂量组肿瘤细胞数量及肿瘤体积比较差异均无统计学意义(P0.05);模型组及黄连素低、中、高剂量组和三氧苯胺组IL-12[(20.82±1.75)、(22.74±1.61)、(23.25±1.01)、(25.18±1.33)、(23.80±1.13)ng/L]、IFN-γ[(16.42±1.01)、(19.31±1.04)、(22.83±1.05)、(23.22±0.88)、(23.84±1.60)ng/L]水平均低于对照组[(28.88±2.06)、(27.32±1.26)ng/L](P0.05),黄连素低、中、高剂量组和三氧苯胺组IL-12、IFN-γ水平高于模型组(P0.05);模型组及黄连素低、中、高剂量组和三氧苯胺组IL-4[(116.29±2.84)、(109.19±4.48)、(98.76±3.02)、(95.50±4.77)、(97.10±4.58)ng/L]、IL-10[(57.70±5.98)、(42.50±4.28)、(43.70±3.09)、(40.20±2.66)、(42.90±1.97)ng/L]水平均高于对照组[(91.85±2.26)、(36.57±3.55)ng/L](P0.05);黄连素低、中、高剂量组和三氧苯胺组IL-4、IL-10水平低于模型组(P0.05);三氧苯胺组及黄连素低、中、高剂量组IL-12、IFN-γ、IL-4、IL-10水平比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论黄连素可能通过促进血清IFN-γ、IL-12表达,抑制血清IL-4、IL-10表达来抑制乳腺癌细胞的生长。     

2型糖尿病合并颈动脉粥样硬化患者外周血T淋巴细胞和相关细胞因子的变化及研究

目的探讨2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus, T2DM)合并颈动脉粥样硬化(carotid atherosclerosis, CAS)患者外周血T淋巴细胞比率、相关细胞因子表达及其与颈动脉内膜中层厚度(intima-media thickness, IMT)和糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin, HbA_1c)的相关性。方法 80例T2DM患者,其中有CAS斑块者40例为CAS组,无CAS斑块者40例为无CAS组;体检健康者40例为对照组。3组采用流式细胞仪测定外周血Th1、Th2、Th17及Treg细胞比例,采用ELISA法检测血清白细胞介素(interleukin, IL)-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、干扰素(interferon, IFN)-γ水平,并测量IMT和HbA_1c水平,分析外周血T淋巴细胞与IMT和HbA_1c的相关性。结果 CAS组Th1细胞和Th17细胞百分率[(19.47±2.45)%、(2.34±0.33)%]及IL-2[(211.24±31.49)ng/L]、IL-17[(19.54±3.27)ng/L]、IFN-γ[(19.72±3.21)ng/L]水平、HbA_1c[(11.28±1.56)%]、IMT[(1.45±0.40)mm]明显高于无CAS组[(15.24±1.62)%、(1.50±0.28)%、(184.32±25.74)ng/L、(15.76±2.08)ng/L、(15.68±2.07)ng/L、(8.92±1.09)%、(1.01±0.27)mm]和对照组[(10.02±1.14)%、(0.96±0.25)%、(128.46±17.49)ng/L、(7.32±0.99)ng/L、(10.43±1.21)ng/L、(5.22±0.84)%、(0.76±0.13)mm](P0.05),无CAS组高于对照组(P0.05);CAS组Th2细胞和Treg细胞百分率[(2.25±0.49)%、(4.03±0.75)%]及IL-4[(4.72±0.32)ng/L]、IL-6[(11.21±1.04)ng/L]、IL-10[(11.07±1.27)ng/L]水平低于无CAS组[(2.97±0.67)%、(5.67±1.33)%、(5.36±0.61)ng/L、(13.24±1.96)ng/L、(14.77±1.93)ng/L]和对照组[(3.36±0.83)%、(6.57±1.52)%、(7.32±0.95)ng/L、(17.75±2.36)ng/L、(22.72±2.59)ng/L](P0.05),无CAS组低于对照组(P0.05);CAS组患者IMT与Th1、Th17细胞水平呈正相关(r=0.809,P0.001;r=0.648,P0.001),与Th2、Treg细胞水平呈负相关(r=-0.580,P0.001;r=-0.643,P0.001),HbA_1c与Th1、Th17细胞水平呈正相关(r=0.601,P0.001;r=0.528,P0.001),与Th2、Treg细胞水平呈负相关(r=-0.844,P0.001;r=-0.602,P0.001)。结论糖尿病合并CAS患者存在Th1、Th17细胞比率上调,Th2、Treg细胞比率下调,IL-2、IL-17、IFN-γ分泌增多,IL-4、-6、-10分泌减少,且与患者疾病进展程度相关。     

稳定期慢性阻塞性肺疾病患者血浆及诱导痰中炎性因子水平变化

目的探讨稳定期慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者血浆及诱导痰中炎性因子水平的变化及意义。方法稳定期COPD患者201例为COPD组,根据改良呼吸困难指数(modified British Medical Research Council,mMRC)评分、COPD评估测试(COPD assessment test,CAT)评分、急性加重发作次数分为4个亚组,A组11例(mMRC评分为0～1级,CAT评分10分,急性加重发作次数0～1次),B组33例(mMRC≥2级,CAT评分≥10分,急性加重发作次数0～1次),C组32例(mMRC评分为0～1级,CAT评分10分,急性加重发作次数≥2次),D组125例(mMRC评分≥2级,CAT评分≥10分,急性加重发作次数≥2次);同期体检健康者50例为对照组。比较各组一般资料,检测各组血浆及诱导痰中白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、高敏C反应蛋白(high-sensitivity C-reactive protein,hs-CRP)水平。结果 COPD组血浆IL-6、IL-8、TNF-α水平均高于对照组(P0.05);D组血浆IL-6[(2.61±1.16)ng/L]、IL-8[(16.56±5.52)ng/L]、hs-CPR[(1 862.26±578.39)mg/L]、TNF-α[(373.39±136.24)nmol/L]水平高于C组[(2.07±0.83)ng/L、(14.06±7.26)ng/L、(1 736.19±548.37)mg/L、(380.01±128.65)nmol/L]、B组[(1.87±0.62)ng/L、(12.13±4.70)ng/L、(1 636.54±449.45)mg/L、(301.17±134.60)nmol/L]和A组[(1.69±0.43)ng/L、(9.09±2.57)ng/L、(1 602.34±390.26)mg/L、(258.14±49.48)nmol/L](P0.05),C组高于B组和A组(P0.05);COPD组诱导痰IL-6、IL-8、hs-CRP、TNF-α和IL-1β水平均高于对照组(P0.05);D组诱导痰IL-6[(289.46±131.25)ng/L]、IL-8[(1 409.29±446.95)ng/L]、hs-CRP[(3 614.89±723.25)mg/L]、TNF-α[(1 212.25±247.37)nmol/L]高于C组[(209.39±131.38)ng/L、(921.72±359.77)ng/L、(3 291.68±630.75)mg/L、(779.77±213.75)nmol/L]、B组[(194.29±77.29)ng/L、(966.63±318.65)ng/L、(3 219.12±762.31)、(1 191.50±362.56)nmol/L]和A组[(147.16±32.68)、(894.78±278.33)、(3 139.95±605.17)、(780.20±396.38)nmol/L](P0.05);A、B、C、D组诱导痰IL-1β水平比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论稳定期COPD患者血浆及诱导痰炎性因子水平随mMRC、CAT评分增加相应增高。     

热性惊厥患儿血清白细胞介素-6及10水平变化

目的探讨热性惊厥(febrile seizures,FS)患儿血清白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-10水平变化及意义。方法50例FS患儿为观察组,30例体检健康儿童为对照组,采用ELISA方法检测2组血清IL-6、IL-10水平,并进行比较。结果观察组血清IL-6[(21.81±8.51)ng/L]高于对照组[(4.52±1.46)ng/L],IL-10[(3.06±0.70)ng/L]低于对照组[6.32±1.09)ng/L],差异均有统计学意义(P0.05)。结论儿童血清IL-6水平升高和IL-10水平降低与FS发作有关。     

腹腔镜下直肠癌手术对免疫平衡及CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+T细胞的影响

目的 通过分别测定腹腔镜手术和开腹手术直肠癌患者Th1/Th2平衡偏移情况及CD4+CD45R细胞的比例变化,以比较两种术式对直肠癌患者免疫功能的影响.方法 分别采用流式细胞学和酶联免疫吸附法方法 检测行腹腔镜下直肠癌手术和常规开腹手术2组患者术前1 d、术后2、7 d的外周血中CD4+IFN-γ+T和CD4+IL-4+T细胞比率及IFN-γ和IL-4血清浓度,同时检测CD4+CD45RA+T细胞和CD4+CD45RO+T细胞在不同手术影响下的比例变化.结果 开腹组术后2、7 d的Th1细胞[(4.51±1.52)%,(7.26±2.59)%]与术前[(12.06±1.82)%]相比明显减少(P均<0.05),Th2细胞[(6.70±2.41)%,(6.70±2.41)%]与术前[(4.47±1.90)%]相比明显增加(P均<0.05);开腹组术后2、7 d的IFN-γ[(57.15±23.64)ng/L,(72.70±27.31)ng/L]与术前(123.47±32.52)ng/L相比明显下降(P均<0.05),而术后2、7 d的IL-4[(55.55±7.29)ng/L,(57.56±7.13)ng/L]与术前[(41.87±5.83)ng/L]相比明显升高(P均<0.05);腹腔镜组Th1细胞、Th2细胞、IFN-γ和IL-4手术前后数量无明显变化(P均>0.05);术后7 d开腹组CD4+CD45RA+T细胞(35.11±7.82)与术前(31.11±6.72)相比明显增加(P均<0.05),开腹组术后CD4+CD45R O+T细胞(61.21±9.13)较术前(68.11±11.42)减少(P<0.05).结论 腹腔镜下直肠癌手术较开腹手术对机体免疫平衡影响较小,有利于保护直肠癌患者的细胞免疫功能.     

不同剂量丙种球蛋白对急性免疫性血小板减少症患儿血清白细胞介素-6和白细胞介素-10及自然杀伤细胞表达的影响

目的探讨急性免疫性血小板减少症(immune thrombocytopenia, ITP)患儿应用不同剂量丙种球蛋白(intravenous immunoglobulin, IVIG)治疗前、后血清白细胞介素(interleukin, IL)-6、IL-10水平及自然杀伤(natural killer, NK)细胞占外周血单个核细胞百分比(NK细胞比率)变化。方法新确诊急性ITP患儿50例,随机分为低剂量组和高剂量组各25例,同期健康儿童25例为对照组。低剂量组静脉滴注IVIG 0.4 g/(kg·d),高剂量组静脉滴注IVIG 1.0 g/(kg·d),均连续2 d;之后均口服泼尼松1.5～2.0 mg/(kg·d),血小板计数≥100×10~9/L后稳定1周,逐渐减量至停药。分别于IVIG治疗前、后测定血清IL-6、IL-10水平,NK细胞计数及NK细胞比率,并与对照组进行比较。结果急性ITP患儿治疗前血清IL-6[(7.72±6.37)ng/L]、IL-10[(6.01±3.67)ng/L]高于对照组[(3.63±2.55)、(4.28±1.97)ng/L](P0.05),NK细胞比率[(9.06±3.99)%]低于对照组[(11.61±5.23)%](P0.05),NK细胞计数[(571.31±394.35)个/μL]与对照组[(602.97±497.27)个/μL]比较差异无统计学意义(P0.05)。IVIG治疗前,低、高剂量组血清IL-6[(7.18±6.04)、(11.85±2.12)ng/L]、IL-10[(5.39±3.15)、(6.64±4.09)μg/L]、NK细胞计数[(544.20±340.42)、(598.59±447.29)个/μL]及NK细胞比率[(9.11±3.73)%、(9.01±4.30)%]比较差异无统计学意义(P0.05)。IVIG治疗后,低、高剂量组血清IL-6水平[(8.76±5.12)、(16.35±6.87)ng/L]均高于治疗前(P0.05),IL-10水平[(4.75±2.50)、(5.22±3.90)ng/L]、NK细胞比率[(6.90±4.13)%、(8.31±5.52)%]、NK细胞计数[(340.39±471.55)、(374.24±268.27)个/μL]较治疗前下降(P0.05),高剂量组治疗后IL-6水平高于低剂量组(P0.05),IL-10、NK细胞计数及NK细胞比率与低剂量组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论低、高剂量IVIG均可上调ITP患儿血清IL-6水平,降低IL-10、NK细胞计数、NK细胞比率。     

IL-6、IL-8、CD64和CD11b检测对新生儿感染性疾病的诊断价值

目的探讨白细胞介素-6(IL-6)、IL-8、CD64和CD11b在新生儿感染性疾病早期诊断中的价值。方法选取2013年3月至2014年3月上海市第一人民医院儿科和产科收治的新生儿,分为感染组(50例)、非感染对照组(30例)、健康对照组(50例);采用定量夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清IL-6和IL-8水平,采用全血三色荧光标记法流式细胞术检测外周血中性粒细胞表面CD64和CD11b分子表达水平,比较分析3组新生儿的IL-6、IL-8、CD64和CD11b水平及阳性率。结果对于血清IL-6、IL-8两项检测指标,感染组分别为(187.3±25.1)ng/L、(1.05±0.32)pg/mL,非感染对照组分别为(60.9±5.2)ng/L、(0.35±0.12)pg/mL,健康对照组分别为(53.2±9.3)ng/L、(0.30±0.05)pg/mL;感染组分别高于非感染对照组和健康对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。并且感染组中性粒细胞表面CD64、CD11b分子表达水平分别高于非感染对照组和健康对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论临床检测新生儿血清IL-6、IL-8水平及外周血中性粒细胞表面CD64和CD11b分子的表达水平,可更加及时、准确、灵敏地诊断新生儿早期感染性疾病。     

严重脓毒症患儿Toll样受体4水平及临床意义

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)水平在严重脓毒症患儿中的临床意义.方法 采用前瞻性病例对照研究方法,选择儿科重症监护病房(ICU)住院且诊断符合严重脓毒症、脓毒性休克患儿14例(严重脓毒症组),以同期住院的支气管肺炎患儿(肺炎组)及健康体检儿童(健康对照组)各10例作为对照.取患儿入院时静脉血2 ml,用流式细胞仪检测TLR4水平,用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清白细胞介察(IL-6、IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量.结果 严重脓毒症组TLR4[(71.56±15.32)%]、IL-6[(1.98±1.55)ng/L]、IL-10[(88.20±61.23)ng/L]、TNF-α[(104.08±85.36)ng/L]水平均显著高于肺炎组[分别为(50.07±26.36)%、(0.93±0.16)ng/L、(41.42±7.02)ng/L、(48.96±6.40)ng/L]与健康对照组[分别为(39.43±17.43)%、(0.94±0.43)ng/L、(43.73±22.68)ng/L、(49.94±18.47)ng/L],差异均有统计学意义(均P＜0.05);而肺炎组与健康对照组间比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 TLR4是脓毒症发生与发展的启动点,其水平与促炎因子IL-6、TNF-α及抗炎因子IL-10水平一致;若将TLR4的变化与部分炎症介质水平相互结合,可作为脓毒症患儿早期诊断和病情严重程度的预测指标.     

慢性鼻窦炎患者鼻黏膜组织GATA结合蛋白-3表达及与炎性因子水平的关系

目的探讨转录因子GATA结合蛋白-3(GATA binding protein-3,GATA-3)在慢性鼻窦炎患者鼻黏膜中的表达及与白细胞介素(interleukin,IL)-5、IL-6、IL-8的关系。方法慢性鼻窦炎患者41例为观察组,同期行鼻内镜修补手术脑脊液鼻漏患者23例为对照组,采用免疫组织化学法检测2组鼻黏膜组织GATA-3蛋白阳性表达,实时荧光定量PCR法检测鼻黏膜组织GATA-3mRNA相对表达量,ELISA法检测血清IL-5、IL-6、IL-8水平;Pearson相关法分析2组鼻黏膜组织GATA-3蛋白阳性表达与血清IL-5、IL-6、IL-8的相关性。结果观察组鼻黏膜组织GATA-3蛋白阳性表达率(87.80%)、GATA-3mRNA相对表达量(0.60±0.12)及血清IL-5[(78.28±44.22)ng/L]、IL-6[(42.51±5.42)ng/L]、IL-8[(77.15±43.63)ng/L]水平均高于对照组[26.09%、0.13±0.11、(35.73±32.18)ng/L、(18.32±2.51)ng/L、(28.24±31.27)ng/L](P0.05);观察组和对照组鼻黏膜组织GATA-3蛋白阳性表达与血清IL-5(r=0.761,P=0.002;r=0.814,P=0.001)呈正相关,与IL-6(r=0.021,P=0.518;r=0.019,P=0.594)、IL-8(r=0.061,P=0.411;r=0.072,P=0.395)无线性相关。结论慢性鼻窦炎患者鼻黏膜组织GATA-3表达上调,且与血清IL-5水平呈正相关,二者共同促进病情进展。     

急性缺血性脑卒中患者血浆趋化因子12与白细胞介素-33和泛素羧基末端水解酶-1水平变化及意义

目的探讨急性缺血性脑卒中患者血浆趋化因子12(CXC chemokine ligand-12,CXCL-12)、白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)、泛素羧基末端水解酶-1(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase-L1,UCH-L1)水平变化,及其与病情严重程度、预后的关系。方法急性缺血性脑卒中患者89例为观察组,依据美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分分为轻度患者27例、中度患者42例,重度患者20例;患者入院后均给予抗血小板聚集、改善侧支循环等常规处理或溶栓治疗,并依据改良Rankin量表(modified Rankin scale,mRS)评分分为预后良好组46例和预后不良组43例;同期60例体检健康者为对照组。采用ELISA法检测观察组和对照组入院时血浆CXCL-12、IL-33及UCH-L1水平,并进行比较;Spearman法分析血浆CXCL-12、IL-33及UCH-L1与NIHSS评分、mRS评分的相关性。结果观察组入院时血浆CXCL-12[(7.47±1.71)ng/L]、IL-33[(62.91±11.33)ng/L]及UCH-L1[0.17(0.09,0.23)μg/L]水平均高于对照组[(3.24±1.29)ng/L、(34.26±9.45)ng/L、0.06(0.03,0.11)μg/L](P0.05);观察组轻、中、重度患者血浆CXCL-12[(5.61±0.75)、(7.61±0.58)、(9.70±1.38)ng/L]、UCH-L1[0.12(0.07,0.18)、0.18(0.13,0.22)、0.25(0.23,0.29)μg/L]水平均逐渐升高(P0.05),血浆IL-33水平在轻度患者[(66.29±10.55)ng/L]、中度患者[(64.05±11.60)ng/L]均高于重度患者[(58.64±10.52)ng/L](P0.05),轻度患者与中度患者比较差异无统计学意义(P0.05);预后良好组血浆CXCL-12[(6.21±0.93)ng/L]、UCH-L1[0.16(0.09,0.20)μg/L]水平均低于预后不良组[(8.23±1.26)ng/L、0.22(0.13,0.26)μg/L],血浆IL-33[(65.23±11.49)ng/L]水平高于预后不良组[(60.43±10.72)ng/L](P0.05);Spearman相关分析结果显示,观察组血浆CXCL-12、UCH-L1与NIHSS评分(r=0.794,P0.001;r=0.638,P0.001)及mRS评分(r=0.422,P0.001;r=0.215,P=0.043)均呈正相关,血浆IL-33与NIHSS评分(r=-0.289,P=0.006)和mRS评分(r=-0.256,P=0.015)均呈负相关。结论急性缺血性脑卒中患者血浆CXCL-12、IL-33及UCH-L1水平均升高,且与病情严重程度及预后密切相关。