不同剂量IL-12对绒毛膜癌JEG-3细胞增殖的影响

目的观察不同剂量白细胞介素-12(IL-12)对绒毛膜癌JEG-3细胞增殖能力的影响。方法体外培养人绒毛膜癌JEG-3细胞,分别给予不同剂量的IL-12进行诱导,四甲基氮唑(MTT)比色法检测细胞增殖能力的变化。结果 5 ng/ml、10 ng/ml、25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml、200 ng/ml IL-12作用后,细胞增殖率显著降低(P<0.01)。且绒毛膜癌JEG-3细胞对IL-12的诱导作用表现为良好的浓度效应。结论外源性IL-12能够抑制绒毛膜癌JEG-3细胞的增殖,具有良好的浓度依赖效应。其相关机制有待进一步探讨。     

姜黄素对人类绒毛膜癌细胞增殖、凋亡的影响及机制

目的探讨姜黄素对人类绒毛膜癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法将人类绒毛膜癌细胞JEG-3细胞株随机分为对照组和姜黄素干预组。姜黄素干预组加入100μl不同浓度的姜黄素与细胞孵育24 h;对照组只加入PRMI 1640培养液与等体积的二甲基亚砜(DMSO),MTT检测检测细胞抑制率。姜黄素干预组加入100μl姜黄素(终浓度为40μmol/L)与细胞孵育24 h后,TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blot检测增殖相关蛋白Ki-67和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达,以及凋亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)和Bcl2相关X蛋白(Bax)的表达。结果与对照组相比,姜黄素干预组JEG-3细胞培养24 h后吸光度显著下降(P 0. 05);姜黄素对JEG-3细胞抑制作用呈药物浓度依赖性,半抑制浓度(IC50)为(39. 33±1. 02)μmol/L;与对照组相比,JEG-3细胞的凋亡率明显升高,增殖相关蛋白Ki-67和Cyclin D1的表达显著降低(P 0. 05),凋亡相关蛋白Caspase-3和Bax的蛋白表达量显著升高(P 0. 05),Bcl-2的表达量显著降低(P 0. 05)。结论姜黄素可以下调人类绒毛膜癌细胞增殖相关蛋白的表达,上调凋亡相关蛋白的表达,调控其增殖和凋亡。     

沉默Caveolin-1基因对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨沉默 Caveolin-1（Cav-1）基因对人膀胱癌细胞株5637增殖和凋亡的影响。方法通过siRNA转染人膀胱癌细胞株5637（沉默组）,以转染 FAM-siRNA为阴性对照组,未转染细胞为正常对照组。Re-al-time PCR法检测Cav-1基因沉默的效率,CCK-8法检测各组细胞的增殖情况,流式细胞术检测各种细胞的凋亡情况。结果 siRNA转染可显著降低人膀胱癌细胞株5637中 Cav-1 mRNA 的表达水平。沉默组细胞的增强能力明显减低,而细胞凋亡率明显升高（均P＜ 0.05）。结论沉默Cav-1基因可抑制人膀胱癌细胞株5637的细胞增殖并促进细胞凋亡。     

转染人livinα基因对Jurkat细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究人livinα基因表达对Jurkat细胞增殖、凋亡的影响。方法基因转染获得稳定表达livinα的Jurkat细胞克隆（Jurkat/livinα）;MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪分析细胞凋亡率,通过观察细胞生长和凋亡情况,探讨livinα对Jurkat细胞增殖及凋亡的影响;RT-PCR检测细胞中livinα和caspase-3 mRNA的表达。结果Jurkat/livinα组livinαmRNA表达高于对照组（Jurkat细胞组）（P＜0.05）,转染后caspase-3 mRNA受到抑制,表达减弱,细胞生长曲线显示Jurkat/livinα组细胞生长速度增快,倍增时间缩短9-10 h（P＜0.05）,细胞凋亡率计算显示Jurkat/livinα组细胞凋亡率较Jurkat细胞组明显减少（P＜0.01）。结论 livin α基因能促进Jurkat细胞生长,可能通过抑制细胞凋亡而在急性T淋巴细胞白血病发生发展中起重要作用,有望成为白血病治疗的新分子靶点。     

人生长激素对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨人生长激素对人胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型,将40只裸鼠随机分为4组:对照组、重组人生长激素(rhGH)组、曲古抑菌素A(TSA)组和rhGH+TSA组,各组腹腔注射给药,2周后,观察各组药物对肿瘤生长的影响.MTF法检测肿瘤细胞的增殖,免疫组织化学检测肿瘤细胞增殖,缺口末端标记(TUNEL)法检测移植瘤组织的细胞凋亡.结果 与对照组相比,TSA组和rhGH+TSA组S期细胞、肿瘤质量及细胞增殖指数明显降低(P<0.05),凋亡指数、G0/G1期及G2M期细胞明显升高(P<0.05),但TSA组与rhGH+TSA组以及rhGH 组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 人生长激素在体内对人胰腺癌细胞既无明显的增殖作用,也无明显的凋亡作用.     

人生长激素对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨人生长激素对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,将40只裸鼠随机分为4组:对照组、重组人生长激素(rhGH)组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组和rhGH+5-FU组,各组腹腔注射(ip)给药,2周后观察各组药物对肿瘤生长的影响.分别采用MTT法和免疫组化检测肿瘤细胞增殖,TUNEI法检测移植瘤组织的细胞凋亡.结果 与对照组相比,5-FU组和rhGH+5-FU组S期细胞、肿瘤质量及PI明显降低(均P＜0 01),凋亡指数、G0/G1期细胞明显升高(均P＜0.05);与5-FU组相比,rhGH+5-FU组的肿瘤质量、细胞增殖指数(PI)及G2M期下降率明显优于5-FU组,G0/G1期上升率明显优于5-FU组(均P＜0.05),而rhGH 组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 人生长激素在体内对人乳腺癌细胞既无明显的增殖作用,也无明显的凋亡作用,但与5-FU联用后能增强MCF-7乳腺癌细胞的化疗效果,且具有协同作用.     

锌指基因1对脑胶质瘤细胞增殖及凋亡能力的影响

目的:研究过锌指基因1(JAZF1)对脑胶质瘤细胞增殖、凋亡能的影响及其信号通路。方法:体外培养脑胶质瘤细胞株,分为对照组、空载组和过表达组;分别于无血清的RPMI 1640培养基中,加入AdvJAZF1-GFP或空载体Adv-GFP,对照组不予转染腺病毒。MTT法检测细胞活力,使用流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法检测糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、β-连环蛋白(β-catenin)、腺瘤性结肠息肉病相关基因(APC)、Bax和Bcl-2蛋白表达量。结果:对照组和空载组细胞活力和凋亡率差异无统计学意义(P>0.05),过表达组细胞活力低于其他2组、细胞的凋亡率高于其他2组(均P<0.05);对照组和空载组β-actenin、GSK-3β、APC、Bax和Bcl-2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05),过表达组β-actenin、GSK-3β、APC和Bax蛋白表达低于其他2组,Bcl-2蛋白表达高于其他2组(P<0.05)。结论:过表达JAZF1可能可通过作用于Wnt/β-catenin信号通路,调控β-catenin、GSK-3β、B...     

上调NDRG1基因表达对人胰腺癌细胞MMP-9、VEGF表达及侵袭和迁移的影响

目的：建立稳定转染含N-myc下游调节基因-1（NDRG1）的SW1990细胞株,探讨NDRG1对 SW1990细胞侵袭与迁移能力的影响及其可能的分子机制。方法经脂质体介导将含有 NDRG1重组表达质粒转染人胰腺癌细胞株 SW1990,用 G418筛选阳性细胞克隆,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot鉴定阳性细胞克隆;采用RT-PCR及Western blot检测阳性细胞克隆MMP-9及VEGF mRNA与蛋白表达;采用Transwell小室侵袭实验与划痕实验分别检测细胞侵袭及迁移能力。结果 N17克隆组、转空载体组及未转染组NDRG1 mRNA表达量分别为0.53±0.25、0.26±0.11、0.25±0.13;相应的MMP-9 mRNA表达量分别为0.33±0.18、0.71±0.45、0.76±0.42;相应的VEGF mRNA表达量分别为0.27±0.16、0.68±0.36、0.69±0.38;相应的NDRG1蛋白表达量分别为0.27±0.13、0.11±0.04、0.12±0.06;相应的MMP-9蛋白表达量分别为0.12±0.04、0.38±0.15、0.36±0.14;相应的VEGF蛋白表达量分别为0.15±0.08、0.39±0.21、0.40±0.25。较其他组,N17克隆组NDRG1 mRNA及蛋白表达量显著增加（P〈0.01）,而MMP-9、VEGF mRNA及蛋白表达量显著降低（P〈0.01）。N17克隆组、转空载体组及未转染组微孔滤膜外侧细胞数分别为31.27±11.54、58.93±17.23、60.26±19.38,N17克隆组较其他组微孔滤膜外侧细胞数显著减少（P〈0.01）。N17克隆组、转空载体组及未转染组细胞迁移距离分别为51.35±18.24、120.68±42.97、124.54±51.66,N17克隆组较其他组细胞迁移距离显著减少（P〈0.01）。结论 SW1990细胞NDRG1表达上调后,细胞侵袭和迁移能力受到显著抑制,其作用机制可能与MMP-9及VEGF表达降低有关。     

PRL-3基因沉默对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的：观察短发夹状小干扰RNA（shRNA）沉默PRL-3基因对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡的影响。方法：构建PRL-3基因特异性shRNA表达载体,使用脂质体法将PRL-3-shRNA表达载体转染入MCF-7细胞。采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测转染后MCF-7细胞PRL-3基因mRNA和蛋白的表达;运用MTT法检测转染后MCF-7细胞的增殖水平,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果：酶切鉴定和测序分析证实PRL-3-shRNA表达载体成功构建。转染成功后,PRL-3-shRNA组PRL-3基因mRNA和蛋白表达水平明显降低。MTT结果显示MCF-7细胞转染PRL-3-shRNA后细胞增殖水平降低;流式细胞仪检测显示,PRL-3-shRNA转染后,MCF-7细胞凋亡率明显增高。结论：沉默PRL-3基因表达可抑制MCF-7细胞的增殖,促进其凋亡。     

HMGB1对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及机制

目的研究高迁移率蛋白1(HMGB1)对膀胱癌细胞增殖、凋亡的影响及机制。方法膀胱癌细胞BIU-87分成对照组、siRNA control组、HMGB1 siRNA组共3组,siRNA control组、HMGB1 siRNA组细胞为感染siRNA control慢病毒和HMGB1 siRNA慢病毒的BIU-87细胞,对照组为不感染慢病毒的BIU-87细胞。用Realtime PCR和Western blot检测细胞中HMGB1表达水平。MTT检测膀胱癌细胞增殖活性,流式细胞术检测膀胱癌细胞凋亡,Western blot检测膀胱癌细胞中CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、活化型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)、活化型Caspase-12(Cleaved Caspase-12)、活化转录因子4(ATF4)蛋白水平。结果 HMGB1 siRNA可以下调膀胱癌细胞中HMGB1的表达和转录,siRNA control对膀胱癌细胞中HMGB1表达没有影响。沉默HMGB1后膀胱癌细胞增殖能力下降,细胞凋亡率升高,细胞中凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-12表达水平升高,内质网应激蛋白CHOP、ATF4表达水平也升高。结论 HMGB1沉默可以通过内质网途径诱导膀胱癌细胞凋亡,抑制膀胱癌细胞增殖。     

转化生长因子β1作用下绒毛膜癌JEG-3细胞c-myc mRNA表达

目的观察在转化生长因子β1(TGF-β1)、-β1受体Ⅰ抑制剂(LY364947)和p38MAPK抑制剂(SB203580)作用下,绒毛膜癌JEG-3细胞中c-myc mRNA的表达变化。方法用5 ng/ml的TGF-β1以及1μM、3μM TGF受体Ⅰ抑制剂(LY364947)和1μM、3μM p38MAPK抑制剂(SB203580)作用JEG-3细胞,用qRT-PCR技术检测各组细胞中c-myc mRNA的表达差异。结果与正常对照组比较,5 ng/ml TGF-β1组细胞中c-myc mRNA的表达水平升高(P0.05);p38 MAPK抑制剂(SB203580)和TGF-β受体Ⅰ抑制剂(LY364947)均抑制了c-myc mRNA的表达,且抑制作用与应用浓度呈正相关(P0.05)。结论 c-myc作为TGFβ1/Smads通路的下游靶基因,其调控有赖于TGFβ1与受体Ⅰ的结合,同时,在绒毛膜癌JEG-3细胞中,TGF-β1介导的Smad途径与p38 MAPK信号转导存在交互作用。     

沉默细胞周期检测点激酶l基因对人膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨沉默细胞周期检测点激酶l(Chk1)基因对人膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响。方法培养人膀胱癌T24细胞,根据转染物的不同,将细胞分为siRNA-Chk1组、siRNA-对照序列组和空白对照组,利用实时荧光定量PCR检测各组细胞中Chk1基因表达,MTT法检测各组细胞增殖能力,利用流式细胞术检测各组细胞凋亡,利用流式细胞术检测各组细胞周期,利用Western blot法检测各组细胞中Chk1、Cdc25C和Cyclin B1蛋白表达。结果与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞中Chk1 mRNA相对表达量降低(F=43.813,P=0.000);与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞24h、48h、72h和96h时吸光度A值均降低(P0.05);与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞凋亡率显著增加(F=90.736,P=0.000);流式细胞术检测结果显示,siRNA-Chk1组G0/G1期和S期高于siRNA-对照序列组和空白对照组,而G2/M期低于siRNA-对照序列组和空白对照组(P0.05);与空白对照组和siRNA-对照序列组比较,siRNA-Chk1组细胞中Chk1、Cdc25C和Cyclin B1蛋白相对表达量均降低(P0.05)。结论特异性沉默Chk1基因可抑制人膀胱癌T24细胞增殖,加速细胞凋亡,其机制可能与抑制Chk1/Cdc25C/CyclinB1通路而减少细胞G2/M期阻滞有关。     

热化疗对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨表阿霉素(EADM)热化疗对人胆管癌细胞(QBC939)的增殖和凋亡的作用。方法以体外培养的人胆管癌细胞株为研究对象,采用水浴加热法进行体外细胞毒实验(MTT)、透射电镜观察及流式细胞仪检测,观察热疗、化疗、热化疗对人胆管癌细胞的生长抑制和凋亡的影响。结果42℃以上单纯热疗对QBC939细胞有明显杀伤作用(P<0.01),42℃以上热化疗对QBC939细胞有明显的协同或相加作用(P<0.01)。透射电镜和流式细胞术均观察到热疗、化疗、热化疗诱导细胞凋亡的作用(P<0.01);热化疗有协同作用(P<0.01)。结论热疗、化疗、热化疗均抑制QBC939细胞增殖;热疗、化疗、热化疗诱导细胞凋亡为其抗癌机制之一;热疗提高化疗药物的细胞毒作用。     

人附睾蛋白4通过上调MMP9及VEGF降低顺铂对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响

目的 探讨人附睾蛋白4(HE4)对顺铂作用后卵巢癌细胞增殖和迁移的影响及潜在机制。方法 构建HE4质粒,脂质体Lipofectamine 2000转染人卵巢癌细胞系HO8910PM,通过Western blot验证稳定转染细胞株构建成功。通过CCK8实验检测HE4过表达对顺铂作用后细胞增殖的影响;通过Transwell实验检测HE4过表达对顺铂作用后细胞迁移的影响;同时通过Western blot实验检测促迁移相关蛋白基质金属蛋白酶9(MMP9)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 过表达HE4人卵巢癌细胞系HO8910PM构建成功;相比于转染空载体的HO8910PM细胞,HE4可明显降低顺铂对细胞增殖的抑制作用,促进HO8910细胞的增殖;同时,HE4过表达细胞中MMP9及VEGF蛋白表达水平也相应提高。结论 HE4可能通过上调MMP9及VEGF表达降低顺铂对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响。     

米非司酮对人早孕绒毛细胞增殖和凋亡的影响

对15例正常早孕吸宫流产和15例米非司酮流产病例的绒毛组织,应用免疫组织化学ABC法检测增殖细胞核抗原(PCNA)在细胞中的染色(细胞增殖)情况,DNA缺口原位末端标记法检测细胞凋亡。结果:正常早孕绒毛细胞滋养细胞增殖指数为53.74%±1.34%。且见细胞浆阳性染色,合体滋养细胞未见PCNA阳性染色;合体滋养细胞和细胞滋养细胞的凋亡指数分别为2.52%±0.86%和0.52%±0.26%;米非司酮流产绒毛细胞滋养细胞增殖指数降为50.86%±1.44%,细胞浆阳性现象消失;细胞凋亡指数显著增加,合体滋养细胞和细胞滋养细胞分别达到22.16%±2.26%和20.12%±1.74%。…     

牛磺酸上调基因1在糖尿病及其并发症中的研究进展

糖尿病是一种临床常见疾病,牛磺酸上调基因1(taurine up-regulated gene 1,TUG1)参与细胞增殖、分化、凋亡、血管生成等过程。研究表明TUG1调节胰岛细胞的增殖与凋亡,调节足细胞线粒体和内质网功能,影响糖尿病视网膜病变中细胞增殖迁移、小管形成和神经修复,参与糖尿病心脏病变中心肌纤维化和心脏功能的改变。外周血中TUG1基因类型和表达水平的改变影响糖尿病及其并发症的发生和治疗的有效性。为了进一步探讨TUG1在糖尿病及其并发症的发病机制和临床诊疗靶点,该文综述了TUG1在糖尿病及其并发症中的研究现状。     

超声造影剂对血管平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨超声波联合超声造影剂对平滑肌细胞增殖、迁移和凋亡的影响.方法体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）.采用MIT法、Millicell小室、Annexin V-FITC/PI双标染色和流式细胞仪,检测VSMC的增殖、迁移能力和凋亡,观察血小板衍生生长因子--BB（PDGF-BB）对VSMC增殖、迁移和凋亡的影响,频率1 MHz、声强0.3 W/cm^2的连续波超声联合声学造影剂辐照VSMC后上述指标的变化.结果PDGF-BB对VSMC的凋亡无影响,但可促进VSMC增殖和迁移.超声联合造影剂辐照VSMC 30 s即可显著抑制PDGF-BB所致的VSMC增殖（P〈0.05）,同时细胞凋亡比例显著增高（P〈0.01）,辐照60 s可显著抑制PDGF-BB所致的VSMC迁移（P〈0.05）,随着辐照时间延长,以上作用增强,辐照60 s时对VSMC增殖的抑制程度最强.结论低强度超声波辐照联合超声造影剂可抑制VSMC增殖、迁移,并促进细胞凋亡.     

HER2基因RNA干扰质粒对SK-BR-3细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨HER2基因高效RNA干扰质粒转染到SK-BR-3乳腺癌细胞后,对细胞的增殖及其凋亡的影响。方法采用脂质体转染法将针对HER2基因的高效RNA干扰质粒转染至乳腺癌细胞SK-BR-3中,通过细胞计数、MTT比色法、流式细胞术和Western blot检测PCNA增殖细胞核抗原,分析检测其对SK-BR-3细胞增殖、凋亡的影响。结果 MTT比色测定显示,HER2-shRNA2干扰质粒转染到SK-BR-3细胞后在48 h后现抑制,与空白对照组比抑制率分别为48 h 16.53%7、2h 39.03%9、6h 65.47%。流式细胞分析HER2-shRNA组细胞在96 h凋亡率达17.36%,明显高于阴性对照组的1.41%和空白对照组的1.25%（P〈0.05）。结论将RNA干扰质粒HER2-shRNA2转染至SK-BR-3细胞中,可特异性地抑制SK-BR-3细胞的增殖并诱导其凋亡,为乳腺癌的靶向治疗奠定了基础。     

二甲双胍对人绒毛膜癌细胞凋亡的影响

目的观察二甲双胍对人绒毛膜癌细胞凋亡的影响和可能的作用机制。方法选用人绒毛膜癌细胞系JEG-3,分为对照组和二甲双胍组(终浓度为5、10、20、40mmol/L)处理48h后,使用流式细胞术和免疫荧光检测细胞凋亡情况,分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和免疫蛋白印迹检测凋亡相关基因半胱天冬酶-3(Caspase-3)、Bcl-2和凋亡调节蛋白(Bax)的mRNA及蛋白变化趋势。结果和对照组相比,二甲双胍组的JEG-3细胞早晚期凋亡率显著上升,同时Caspase-3和Bax的mRNA及蛋白表达水平显著增加,但Bcl-2的mRNA和蛋白表达显著降低。结论二甲双胍可以通过Caspase-3及Bcl-2/Bax通路诱导JEG-3细胞发生凋亡。