蒲葵子总黄酮提取工艺的优化及其体外抗肿瘤活性

目的优化蒲葵子总黄酮提取工艺,并评价其体外抗肿瘤活性。方法以提取时间、超声功率、乙醇体积分数、液料比为影响因素,总黄酮提取率为评价指标,星点设计-效应面法优化提取工艺。然后,MTT法检测总黄酮对SGC7901、Hep G2、A549细胞的抑制作用。结果最佳条件为提取时间30 min,超声功率80 Hz,乙醇体积分数65%,液料比30∶1,总黄酮提取率11.59%。与阴性对照比较,总黄酮对3种肿瘤细胞均具有显著抑制作用(P0.05,P0.01),并呈量效关系,48 h内最大抑制率分别为83.77%、93.33%、74.39%。结论该方法稳定可靠,可用于提取具有较强体外抗肿瘤活性的蒲葵子总黄酮。     

Box-Behnken响应面法优化金铃子散的醇提工艺

目的:优化金铃子散的醇提工艺。方法:以去氢紫堇碱、延胡索乙素、延胡索甲素的含量总和为评价指标,在单因素试验结果的基础上,通过Box-Behnken响应面法对影响金铃子散醇提工艺的乙醇浓度、料液比、提取时间进行考察研究,优化了提取工艺。结果:单因素试验结合Box-Behnken响应面法研究得到金铃子散的最佳醇提工艺为:乙醇浓度47%、料液比1∶10(g/mL),提取时间为120 min,提取2次,处方量的金铃子散中去氢紫堇碱、延胡索乙素、延胡索甲素的总含量可达44.99 mg,实测值与模型预测值相对误差为1.76%。结论:Box-Behnken响应面法可用于优化金铃子散的醇提工艺,且优化所得工艺稳定、可行。     

白及茎秆抗肿瘤作用的初步研究

目的:初步研究白及茎秆醇提物的化学成分和抗肿瘤作用,更好地开发利用白及药用资源。方法:采用乙醇回流法提取白及茎秆和块茎醇提物,对醇提物进行化学成分分析。不同剂量白及茎秆醇提物处理体外培养的肺腺癌细胞(A549),用MTS法检测A549细胞的增殖情况,划痕法检测A549细胞的迁移率,Hoechst-PI染色法检测白及茎秆醇提物对A549细胞凋亡的影响,RT-PCR法检测白及茎秆醇提物对A549细胞Bcl-2、Bax和ICAM-1基因mRNA表达的影响。结果:白及茎秆醇提物化学成分同块茎类似,并能抑制A549细胞的增殖,且存在剂量依赖关系。随着药物浓度的增加,Bcl-2、ICAM-1 mRNA表达下调,Bax mRNA表达上调。结论:白及茎秆醇提物可通过抑制A549细胞的生长增殖,影响细胞凋亡相关基因的表达发挥抗肿瘤作用。白及茎杆有潜力成为块茎的补充资源。     

Box-Behnken效应面法优化红旱莲总黄酮提取工艺的研究

目的:提出拟合响应曲面的3水平设计(Box-Behnken设计)优化红旱莲中总黄酮回流提取工艺。方法:以总黄酮得率为评价指标,乙醇浓度、提取温度、提取时间及溶剂量为考察因素,采用Box-Behnken效应面法优化回流提取工艺条件,并进行预测分析。结果:试验表明乙醇浓度和提取温度对红旱莲总黄酮提取量具极显著影响,最优提取工艺为乙醇浓度53.2%,提取温度78.7℃,提取时间2.3h,液料比13.3mL/g,二项式拟合复相关系数较高(r=0.9846),回归模型的提取率预测值与测定值偏差率为-4.01%。结论:Box-Behnken效应面法用于优化红旱莲的提取工艺是可行的,建立的数学模型和实验观察数据相符。     

马钱子总生物碱提取纯化工艺及抗肿瘤研究

目的:探讨马钱子总生物碱提取纯化工艺及其体外抗肿瘤研究。方法:采用氨性氯仿浸提、酸水纯化得到总生物碱,HPLC测定提取液及纯化后浓缩液中马钱子碱和士的宁的含量,以转移率为指标考察提取和纯化工艺。采用MTT法,以IC50为指标比较马钱子总生物碱的体外抗肿瘤活性。结果:采用5倍量氯仿提取5次,每次12h;1mol/L盐酸纯化1次为最佳工艺制备马钱子总生物碱,平均得率为3.49%,其中士的宁和马钱子碱分别占46.76%和26.51%。马钱子总生物碱对十种细胞的抑制效果在72h通过IC50值来比较:MGC-803>A2780>LoVo>SMMC-7721>Hela>A549>MDA-MB-231>MKN-45>BGC-823>SGC-7901,总生物碱对MGC-803,A2780细胞株的IC50分别达到了295.79ng/mL,419.07ng/mL。结论:优选的纯化工艺简便,效率高;马钱子总生物碱的抗肿瘤效果显著,值得进一步研究。     

肾茶总黄酮的提取纯化工艺优化

目的应用Box-Behnken效应面法优化肾茶提取工艺,运用大孔吸附树脂优选肾茶总黄酮的纯化工艺。方法以肾茶总黄酮得率为评价指标,以乙醇体积分数,液料比和提取时间为考察因素,采用Box-Behnken效应面法优化加热回流提取工艺,并进行预测分析。通过静态和动态吸附试验考察大孔吸附树脂对肾茶总黄酮的纯化效果,并研究各因素条件对其纯化效果的影响,筛选主要影响指标的最佳工艺条件。结果肾茶最佳提取工艺为:乙醇体积分数为52.52%,液料比(mL:g)为15:1,提取时间为90分钟。DM-130大孔吸附树脂较适合肾茶总黄酮的纯化,静态吸附生药浓度为0.1 g/mL,药液pH值为2;动态吸附上样量为60 mL,吸附时间为50分钟,除杂水用量为3倍柱体积,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为3倍树脂体积。结论 Box-Behnken效应面法用于优选肾茶的提取工艺是可行的,建立的数学模型和实验观察数据相符,DM-130大孔吸附树脂较适合肾茶总黄酮的纯化。     

Box-Behnken设计优化中药天麻中天麻素提取工艺

目的:优选天麻中天麻素的提取工艺。方法:采用单因素实验结合Box-Behnken实验设计,以天麻素含量、干膏率为评价指标,对提取时间、料液比、醇提浓度、提取次数等4个主要影响因素进行考察,并进行工艺优化。结果:通过Box-Behnken效应面法及总评归一值(OD)系统评价,确定最优提取工艺为:取饮片适量加入13倍量65%乙醇溶液,提取2次,每次2h。结论:Box-Behnken设计优化天麻素提取工艺合理可行。     

Box-Behnken响应面法优选心痛宁胶囊的水提工艺

目的:运用Box-Behnken响应面法对心痛宁胶囊的水提取工艺进行优化。方法:在单因素试验结果的基础上,评价了丹酚酸B含量,总多糖含量和浸膏得率,选择提取次数、提取时间、浸泡时间和影响水提取过程的加水量作为主要考察因素,采用Box-Behnken响应面法设计试验。通过拟合二次多项式模型分析结果,以获得最佳水提取工艺。结果:优化水提取工艺是加入11倍的水,浸泡130 min,然后回流提取3次,每次60 min。结论:选用Box-Behnken响应面法设立的心痛宁胶囊水提工艺条件稳定可行,为后续工业化生产提供了参考。     

木蹄复方体外抗肿瘤作用的实验研究

目的:筛选木蹄复方抗肿瘤活性提取物,初步分析其化学成分并观察其体外抗肿瘤效应.方法:常规水提和醇提的方法提取复方中水溶和醇溶性组分.MTT法测定木蹄复方水提取物(distilled water extract of compound Fomes fomentarius,WECF)和木蹄复方乙醇提取物(ethanol extract of compound F.fomentarius,EECF)对体外培养肿瘤细胞A549,Hela,QGY生长的抑制效应.系统预试法分析WECF化学组成.流式细胞术检测WECF对A549细胞凋亡的影响.结果:WECF对A549,Hela,QGY 3种细胞的IC50分别为(0.28±0.02),(0.40 ±0.06),(0.28±0.05) g·L-1;EECF对3种细胞的IC50分别为(0.50±0.04),(0.50±0.03),(0.60 ±0.06)g·L-1,WECF对肿瘤细胞的生长具有较强的抑制作用.WECF含有有机酸,氨基酸、多肽和蛋白质,糖、多糖和苷类,皂苷,内酯、香豆素及其苷类,植物甾醇、三萜成分以及挥发油和油脂,多糖含量为(16.1±0.5)％.WECF对A549,Hela,QGY,DU145,MDA-MB-435S,SGC-79016种细胞的IC50分别为0.29,0.45,0.32,0.32,0.83,0.23g·L-1; WECF 1 g·L-1作用于A549 24 h后,细胞凋亡率为22.0％.结论:WECF具有较强的体外抗肿瘤效果,对多种肿瘤细胞的生长具有非常明显的抑制作用,并可诱导A549细胞凋亡.     

PB试验结合Box-Behnken响应面法优化丹参水提液中丹酚酸B提取工艺的研究

目的:优化丹参水提液中丹酚酸B的提取工艺。方法:以丹酚酸B含量及浸膏得率的综合评分为指标,在单因素试验的基础上,通过PB试验法,对影响提取工艺的5个因素(浸泡时间、液料比、提取时间、提取次数、溶媒p H值为考察因素,运用Box-Behnken响应面法进行预测分析。结果:最佳提取工艺为液料比为12.5∶1,提取3次,每次100 min。丹酚酸B的含量为41.81 mg/g,浸膏得率为26.97%,综合得分为95.42分,实验观测值与模型预测值偏差为0.75%。结论:采用PB试验法和Box-Behnken响应面法优选最佳工艺条件验证结果与预测结果相近,可用于丹参水提液中丹酚酸B的提取。     

卷丹百合体外对肺腺癌A_(549)细胞抑制作用的实验研究

目的:研究百合对肺腺癌细胞株A549增殖作用的影响及其相关机制。方法:体外培养肺腺癌细胞株A549,用不同浓度的百合水提物分别作用于对数期生长的A549细胞24、48和72h,MTT(甲基噻唑基四唑)比色法检测百合对A549细胞增殖的抑制率,碘化丙啶(PI)染色,荧光显微镜下观察细胞形态改变及凋亡情况。结果:MTT法检测结果显示,百合水提物在1~8mg/mL浓度范围内、24~72h时间范围内对A549的生长有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖关系(P<0.05);PI染色荧光显微镜观察显示百合作用48h后,细胞出现凋亡的形态学改变。结论:百合具有体外抑制肺腺癌细胞株A549增殖的作用,其可能是通过诱导肿瘤细胞凋亡而发挥抑制A549细胞增殖的作用。     

基于Plackett-Burman设计和Box-Behnken响应面法优化仙鹤草总黄酮超声提取工艺及其抗氧化抗肿瘤活性研究

目的:优化仙鹤草总黄酮的超声提取工艺,并对其体外抗氧化、抗肿瘤活性进行研究。方法:以总黄酮提取量为考察指标,在单因素实验基础上,通过Plackett-Burman(PB)试验设计筛选影响总黄酮提取量的显著性因素,运用Box-Behnken设计(BBD)对影响提取工艺的显著性因素进行优化,对试验数据进行多元线性回归和二项式拟合,应用效应面法对最佳工艺进行预测分析,优选仙鹤草总黄酮的超声提取工艺;采用FRAP法、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和羟基自由基的方法,对最佳工艺所得总黄酮的抗氧化活性进行评价,并采用CCK-8比色法对其抗胃癌MKN-45、肝癌Hep G2、骨髓瘤U266、乳腺癌MCF-7、肺癌A549、宫颈癌He La 6种人源肿瘤细胞增殖活性进行研究。结果:对仙鹤草总黄酮提取量影响较大的4个因素为液料比、超声时间、乙醇体积分数、超声温度;最优超声提取工艺为:乙醇体积分数64. 00%,液料比10. 50 m L·g-1,超声时间74. 00 min,超声温度40. 00℃,超声功率200 W,超声次数3次,在此条件下总黄酮提取量为106. 28 mg·g-1,与预测值108. 12 mg·g-1相对误差为1. 70%;总黄酮总抗氧化活性的FRAP值为56. 87 mg-1,其抗氧化活性随着质量浓度的增大而增强,对DPPH和羟基自由基的半数抑制浓度(IC50)分别为19. 53和16. 27μg·m L-1;总黄酮对MKN-45、Hep G2、U266、MCF-7、A549、He La细胞的增殖均有抑制作用,且呈现明显的浓度依赖性,IC50分别为127. 50、53. 31、202. 10、206. 80、54. 17、170. 40μg·m L-1。结论:优选的仙鹤草总黄酮的超声提取工艺合理、可行,且仙鹤草总黄酮在体外具有良好的抗氧化、抗肿瘤活性。     

正交试验结合Box-Behnken响应面法优化靓靓胶囊水提取工艺

目的采用正交试验法结合Box-Behnken响应面法优化靓靓胶囊水提取工艺。方法以没食子酸、葛根素、芍药苷提取率以及水提物出膏率为指标,以液料比、提取时间、提取次数为因素,正交试验初步筛选工艺参数,BoxBehnken响应面法作进一步优化。结果最佳条件为液料比12∶1,提取两次,每次90 min,各指标相对误差均小于2%。结论正交试验结合Box-Behnken响应面法可减少靓靓胶囊水提取次数,降低生产成本。     

Box-Behnken响应面法优化胡黄连苷提取工艺

目的:优化胡黄连苷的提取工艺。方法:以出膏率、胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ转移率为考察指标,以提取溶剂种类(水、乙醇)、液料比、提取次数和提取时间为考察因素,在单因素试验基础上,运用Box-Behnken响应面法进行优化,确定了提取胡黄连苷的最佳工艺条件,并进行实验验证。结果:优化的提取工艺为95%乙醇提取3次,液料比20∶1,提取时间为4.5 h。结论:Box-Behnken响应面优化的提取工艺可用于胡黄连苷的提取。     

南方红豆杉水提物对人肺癌A549细胞增殖抑制作用的研究

目的:研究南方红豆杉水提物对人肺癌A549细胞增殖的抑制作用和机制。方法:采用MTT法检测南方红豆杉水提物对A549细胞增殖的抑制作用;生长曲线法观察其抑制A549细胞的时间-效应曲线;流式细胞仪检测其对A549细胞周期及凋亡的影响;倒置显微镜及电镜观察其对A549细胞形态的影响。结果:南方红豆杉水提物对A549细胞的增殖有抑制作用;其抑制作用机制为使A549细胞周期出现明显的G0/G1期阻滞,诱导细胞凋亡。结论:南方红豆杉水提物对人肺癌A549细胞的增殖有抑制作用。     

Box-Behnken Design-响应面法结合遗传算法和直接搜索算法优化北沙参糖类化合物的提取工艺研究

目的:明确Box-Behnken Design-响应面法、遗传算法与直接搜索算法三种方法在中药提取工艺优化方面的应用,确定北沙参糖类化合物的最佳提取条件。方法:采用水加热回流法提取北沙参糖类化合物,以药材粒度、提取时间和液料比为考察因素,以北沙参糖类化合物的提取率为评价指标,采用Box-Behnken Design-响应面优化法(BBD)进行试验设计,建立数学模型并获得目标函数;使用遗传算法和直接搜索算法搜索确定各因素的最佳取值。结果:北沙参糖类化合物的最佳提取工艺条件为:药材粒度为150目,提取时间为3.2 h,液料比为49 mL/g。提取率可达38.783%。结论:该工艺可用于北沙参糖类化合物的提取,且BBD结合遗传算法与直接搜索算法在中药提取工艺优化方面具有一定优越性。     

傣百解药用部位和非药用部位体外抗肺癌活性对比研究

目的:研究傣百解药用部位根和非药用部位地上部分乙醇提取物不同极性萃取物体外抗肺癌细胞的活性,筛选出傣百解的抗肿瘤活性部位,分析地上部位作为替代药材的可行性。方法:将傣百解地上部位和根干燥粉碎,用95%乙醇回流提取,减压浓缩得到醇提取物;以水分散后,依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取,得到乙酸乙酯部位(A1和B1)、正丁醇部位(A2和B2)和水部位(A3和B3)。采用MTT法测定不同浓度部位对人肺癌细胞A549和H1299增殖的影响。结果:傣百解地上部位和根对两种肺癌细胞株均有一定的细胞毒活性,地上部位的抗肿瘤活性优于根,两个部位中A1和B1萃取物抑制肿瘤细胞增殖活性最强,对A549肿瘤细胞的IC50分别为51.28μg/mL和117.18μg/mL,对H1299肿瘤细胞的IC50分别为63.12μg/mL和95.11μg/mL。结论:傣百解地上部位的抗肿瘤活性优于根,具有替代可行性。     

东魁杨梅树皮不同提取物体内外抗肿瘤作用的实验研究

目的:探讨东魁杨梅树皮水提取物及醇提取物体内外抗肿瘤药效。方法:3H-TdR掺入法分别观察东魁杨梅树皮水提取物及其醇提取物体外对A549细胞的抑制率。采用小鼠移植瘤模型,将S180荷瘤小鼠随机分成东魁杨梅树皮水、醇提物高剂量组(13.2 g生药/kg),水、醇提物中剂量组(6.6 g生药/kg),水、醇提取物低剂量组(3.3 g生药/kg)及模型对照组,每天灌胃给药1次,连续给药10天。停药次日称各组小鼠体质量及瘤重,计算各组抑瘤率。结果:体外实验结果显示,东魁杨梅树皮醇提物(6.25~200 mg/L)对A549细胞的抑制率分别为(7.5%~87.0%),而东魁杨梅树皮水提物无明显作用。体内实验结果显示,东魁杨梅树皮醇提物(13.2 g生药/kg、6.6 g生药/kg、3.3 g生药/kg)能有效抑制小鼠S180肉瘤的生长(P0.05~0.01),抑瘤率在35.6%~46.8%;东魁杨梅树皮水煎液低剂量组(3.3g生药/kg)对S180肉瘤有显著抑瘤作用(P0.05),抑瘤率为39.4%。结论:东魁杨梅树皮提取物有一定的抗肿瘤作用,东魁杨梅树皮醇提物(13.2 g生药/kg)效果最佳,与体外实验结果相符。     

泰山紫草多糖超声提取工艺优化及其体外抗肿瘤活性

目的优化泰山紫草多糖的超声提取工艺,并对其体外抗肿瘤活性进行评价。方法星点设计-响应面法优化提取工艺,MTT法检测体外抗肿瘤活性。结果最佳条件为提取时间25 min,提取温度60℃,料液比1∶25,提取两次,提取率3.261%。多糖对人宫颈癌He La细胞、人肝癌Hep G2细胞、人胃癌SGC-7901细胞的IC50值分别为(9.17±0.07)、(3.89±0.09)、(6.79±0.04)mg/m L。结论该方法简便,提取率高,泰山紫草多糖的体外抗肿瘤活性显著。     

Box-Behnken效应面法优化陈皮中橙皮苷及川陈皮素提取工艺

目的:通过Box-Behnken效应面法优化陈皮中橙皮苷及川陈皮素的提取工艺.方法:采用HPLC测定橙皮苷及川陈皮素含量,以橙皮苷及川陈皮素提取率的总评“归一值”为指标,通过Box-Behnken试验考察提取温度、液料比、提取时间对提取工艺的影响,对结果进行二项式方程拟合,利用效应面法优化提取工艺并进行预测分析.结果:最佳提取工艺为温度77℃,液料比19:1,提取1.6h,乙醇体积分数70％;预测值与验证值偏差较小(＜5％).结论:优选的提取工艺稳定可行,实际值与预测值吻合度高,预测性良好.