脓毒症大鼠调节性T细胞凋亡对辅助性T细胞漂移的影响及血必净注射液的干预作用

目的 探讨脓毒症大鼠CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)凋亡对辅助性T细胞(Th)漂移的影响及血必净注射液的干预作用.方法 将Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、血必净组,每组8只.行盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症大鼠模型.于第3日采用免疫磁珠法分选各组CD4+CD25+Treg并培养12 h,用流式细胞仪检测Treg凋亡率及叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)的表达,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-10(IL-10)的分泌量;再将CD4+CD25+ Treg与CD4+CD25-T细胞1∶1共培养,刀豆素A刺激68 h,ELISA检测Th1、Th2、Th17分泌的γ-干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-17水平.结果 正常组Treg凋亡率[(12.03±0.89)%]与假手术组[(9.48±2.17)%]比较差异无统计学意义;模型组Treg凋亡率[(5.87±0.44)%]明显低于正常组和假手术组;而血必净组的Treg凋亡率[(27.29±2.48)%]显著高于其他各组(P均<0.01).Foxp3、CTLA-4表达和IL-10分泌量随Treg凋亡率增加而减少,相关系数(r)分别为-0.878(P=0.042)、-0.877(P=0.042)、-0.743(P=0.010).与正常组比较,模型组IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值均明显升高[IFN-γ:(254.70±44.88)ng/L比(0.68±0.78)ng/L,IL-4:(8.82±0.61)ng/L比(3.48±0.98)ng/L,IFN-γ/IL-4比值:30.28±4.87比0.23±0.30,P均<0.01];而血必净组IFN-γ[(491.54±84.28)ng/L]和IFN-γ/IL-4比值(45.31±8.01)均显著高于模型组(P<0.01和P<0.05);各组间IL-17水平无明显差异(P均>0.05).结论 脓毒症时Treg凋亡率增加可减轻对效应T细胞的抑制功能,血必净注射液能有效促进脓毒症Treg凋亡,介导Th2向Th1漂移.     

重度子痫前期患者外周血Th17和Treg细胞变化及意义

目的探讨重度子痫前期(s PE)患者外周血Th17及CD4~+CD25~+Treg细胞变化及意义。方法选取2011-2013年镇江妇幼保健院40例s PE患者及40名健康对照者。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4~+CD25~+Treg细胞水平;采用ELISA检测血浆IL-17、IL-22、TGF-β和IL-10水平,并分析其与s PE的相关性。结果 s PE患者组外周血Th17细胞水平为(1.21±0.82)%,显著高于健康对照组的(0.74±0.63)%,差异有统计学意义(t=3.45,P=0.002)。s PE患者组外周血CD4~+CD25~+Treg细胞水平为(1.65±0.49)%,显著低于健康对照组的(2.42±0.91)%,差异有统计学意义(t=-4.25,P=0.001)。s PE患者组IL-17、IL-22水平分别为80.03±31.25、60.22±18.32ng/L,高于健康对照组的32.84±17.23、35.24±14.33ng/L,差异有统计学意义(t值分别为10.74、5.89,P均0.01),IL-10、TGF-β水平为26.29±10.31、25.65±11.81ng/L,低于健康对照组的33.24±11.93、48.261±13.85ng/L,差异有统计学意义(t值分别为3.35、6.78,P均0.01)。s PE患者血浆IL-17、IL-22水平与Th17细胞水平呈显著正相关(r=0.69、0.58,P0.01)。结论 s PE患者Th17细胞数量增高,CD4~+CD25~+Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在s PE的发病机制中可能起到重要作用。     

重度子痫前期患者外周血Th17和Treg细胞及相关细胞因子的表达及意义

目的探讨重度子痫前期(sPE)患者外周血Th17及CD4+CD25+Treg细胞及相关细胞因子白细胞介素(IL)-17、IL-21、IL-10和转化生长因子β(TGF-β)的水平变化及意义。方法选取30例sPE患者(sPE组)及30例正常妊娠者(对照组)作为研究对象。采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4+CD25+Treg细胞水平。采用QRT-PCR检测维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)mRNA和Foxp3 mRNA的表达水平。采用ELISA法检测血浆IL-17、IL-21、IL-10和TGF-β水平。结果 sPE组外周血Th17细胞水平为(1.16±0.78)%,显著高于对照组的(0.68±0.35)%,差异有统计学意义(t=3.447,P=0.002)。sPE组外周血CD4+CD25+Treg细胞水平为(1.65±0.49)%,显著低于对照组的(2.42±0.91)%,差异有统计学意义(t=-4.25,P=0.000)。sPE组RORγt mRNA表达水平为0.190±0.063,高于对照组的0.136±0.037,差异有统计学意义(t=3.776,P=0.001)。而sPE组Foxp3mRNA表达水平为0.069±0.025,低于对照组的0.127±0.027,差异有统计学意义(t=-8.218,P=0.000)。sPE组IL-17、IL-21、IL-10水平分别为(82.03±37.61)、(63.29±27.42)、(56.89±17.28)ng/L,高于对照组的(30.81±21.87)、(33.87±13.73)、(33.24±11.93)ng/L,差异有统计学意义(P0.01),TGF-β水平为(24.34±6.51)ng/L,低于对照组的(46.97±15.81)ng/L,差异有统计学意义(t=-7.781,P=0.000)。sPE患者血浆IL-17、IL-21水平与Th17细胞水平呈正相关(r分别为0.695、0.586,P0.01)。结论 sPE患者Th17细胞数量升高,CD4+CD25+Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在sPE的发病机制中可能起到重要作用。     

维生素D_3对支气管哮喘患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞的影响

目的探讨维生素D_3对支气管哮喘患儿CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞表达的影响及其治疗支气管哮喘的效果。方法支气管哮喘患儿160例,随机分为观察组和对照组各80例,对照组在常规对症支持治疗基础上给予硫酸沙丁胺醇吸入气雾剂1揿/次,3次/d,喷吸;观察组在对照组治疗基础上给予维生素D_30.25μg/次,1次/d,口服;2组疗程均为12周。采用ELISA法检测2组治疗前、后血清1,25-二羟维生素D_3[1,25-dihydroxyvitamin D_3,1,25(OH)_2D_3]、白细胞介素(interleukin,IL)-4,IL-10,IL-17水平,采用流式细胞技术检测CD4~+CD25~+调节性T细胞和Th17细胞表达,比较2组疗效。结果观察组总有效率(96.2%)高于对照组(87.5%)(P0.05);观察组和对照组治疗后CD4~+CD25~+调节性T细胞[(7.56±1.24)%、(5.44±1.34)%]、1,25(OH)_2D_3[(36.06±5.98)、(31.44±6.32)nmol/L]水平均高于治疗前[CD4~+CD25~+调节性T细胞:(3.53±1.03)%、(3.54±1.01)%;1,25(OH)_2D_3:(25.64±5.24)、(25.72±4.65)nmol/L],Th17细胞[(1.94±0.73)%、(2.87±0.97)%],IL-17[(58.26±10.24)、(76.21±9.42)ng/L]、IL-4[(14.26±3.24)、(21.21±4.26)ng/L]及IL-10[(42.44±9.53)、(64.37±11.33)ng/L]水平均低于治疗前[Th17细胞:(4.38±1.68)%、(4.36±1.21)%;IL-17:(110.22±15.32)、(109.24±16.64)ng/L;IL-4:(41.22±9.32)、(41.24±10.64)ng/L;IL-10:(92.43±12.83)、(92.40±10.42)ng/L](P0.05),且观察组治疗后各指标改善较对照组明显(P0.05)。结论补充维生素D_3可提高支气管哮喘患儿临床疗效,其机制可能与上调CD4~+CD25~+调节性T细胞、抑制Th17细胞表达有关。     

急性缺血性脑卒中患者血浆趋化因子12与白细胞介素-33和泛素羧基末端水解酶-1水平变化及意义

目的探讨急性缺血性脑卒中患者血浆趋化因子12(CXC chemokine ligand-12,CXCL-12)、白细胞介素-33(interleukin-33,IL-33)、泛素羧基末端水解酶-1(ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase-L1,UCH-L1)水平变化,及其与病情严重程度、预后的关系。方法急性缺血性脑卒中患者89例为观察组,依据美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分分为轻度患者27例、中度患者42例,重度患者20例;患者入院后均给予抗血小板聚集、改善侧支循环等常规处理或溶栓治疗,并依据改良Rankin量表(modified Rankin scale,mRS)评分分为预后良好组46例和预后不良组43例;同期60例体检健康者为对照组。采用ELISA法检测观察组和对照组入院时血浆CXCL-12、IL-33及UCH-L1水平,并进行比较;Spearman法分析血浆CXCL-12、IL-33及UCH-L1与NIHSS评分、mRS评分的相关性。结果观察组入院时血浆CXCL-12[(7.47±1.71)ng/L]、IL-33[(62.91±11.33)ng/L]及UCH-L1[0.17(0.09,0.23)μg/L]水平均高于对照组[(3.24±1.29)ng/L、(34.26±9.45)ng/L、0.06(0.03,0.11)μg/L](P0.05);观察组轻、中、重度患者血浆CXCL-12[(5.61±0.75)、(7.61±0.58)、(9.70±1.38)ng/L]、UCH-L1[0.12(0.07,0.18)、0.18(0.13,0.22)、0.25(0.23,0.29)μg/L]水平均逐渐升高(P0.05),血浆IL-33水平在轻度患者[(66.29±10.55)ng/L]、中度患者[(64.05±11.60)ng/L]均高于重度患者[(58.64±10.52)ng/L](P0.05),轻度患者与中度患者比较差异无统计学意义(P0.05);预后良好组血浆CXCL-12[(6.21±0.93)ng/L]、UCH-L1[0.16(0.09,0.20)μg/L]水平均低于预后不良组[(8.23±1.26)ng/L、0.22(0.13,0.26)μg/L],血浆IL-33[(65.23±11.49)ng/L]水平高于预后不良组[(60.43±10.72)ng/L](P0.05);Spearman相关分析结果显示,观察组血浆CXCL-12、UCH-L1与NIHSS评分(r=0.794,P0.001;r=0.638,P0.001)及mRS评分(r=0.422,P0.001;r=0.215,P=0.043)均呈正相关,血浆IL-33与NIHSS评分(r=-0.289,P=0.006)和mRS评分(r=-0.256,P=0.015)均呈负相关。结论急性缺血性脑卒中患者血浆CXCL-12、IL-33及UCH-L1水平均升高,且与病情严重程度及预后密切相关。     

腹腔镜下直肠癌手术对免疫平衡及CD4+CD45RA+和CD4+CD45RO+T细胞的影响

目的 通过分别测定腹腔镜手术和开腹手术直肠癌患者Th1/Th2平衡偏移情况及CD4+CD45R细胞的比例变化,以比较两种术式对直肠癌患者免疫功能的影响.方法 分别采用流式细胞学和酶联免疫吸附法方法 检测行腹腔镜下直肠癌手术和常规开腹手术2组患者术前1 d、术后2、7 d的外周血中CD4+IFN-γ+T和CD4+IL-4+T细胞比率及IFN-γ和IL-4血清浓度,同时检测CD4+CD45RA+T细胞和CD4+CD45RO+T细胞在不同手术影响下的比例变化.结果 开腹组术后2、7 d的Th1细胞[(4.51±1.52)%,(7.26±2.59)%]与术前[(12.06±1.82)%]相比明显减少(P均<0.05),Th2细胞[(6.70±2.41)%,(6.70±2.41)%]与术前[(4.47±1.90)%]相比明显增加(P均<0.05);开腹组术后2、7 d的IFN-γ[(57.15±23.64)ng/L,(72.70±27.31)ng/L]与术前(123.47±32.52)ng/L相比明显下降(P均<0.05),而术后2、7 d的IL-4[(55.55±7.29)ng/L,(57.56±7.13)ng/L]与术前[(41.87±5.83)ng/L]相比明显升高(P均<0.05);腹腔镜组Th1细胞、Th2细胞、IFN-γ和IL-4手术前后数量无明显变化(P均>0.05);术后7 d开腹组CD4+CD45RA+T细胞(35.11±7.82)与术前(31.11±6.72)相比明显增加(P均<0.05),开腹组术后CD4+CD45R O+T细胞(61.21±9.13)较术前(68.11±11.42)减少(P<0.05).结论 腹腔镜下直肠癌手术较开腹手术对机体免疫平衡影响较小,有利于保护直肠癌患者的细胞免疫功能.     

地塞米松对系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中细胞因子分泌及T细胞亚群表达的影响

目的 探讨地塞米松对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中白细胞介素(IL)-17、干扰素(IFN)-γ分泌水平和Th17、Tc17、Th1、Tc1等T细胞亚群表达的影响.方法 SLE患者和健康对照者的PBMCs分空白孔、佛波酯(PMA)/离子霉素(Ionomycin)孔、PMA/Ionomycin+地塞米松(DEX)孔行体外培养,运用四色流式细胞术检测PBMCs表达Th17、Tc17、Th1、Tc1等T细胞亚群的百分比,采用酶联免疫吸附法测定SLE患者和健康对照者血浆及PBMCs培养上清中IL-17、IFN-γ的表达水平.结果 SLE组患者血浆IL-17[138.98(84.82～187.04)ng/L]、IFN-γ[21.92(15.95～27.09)ng/L]含量均高于正常对照组[57.21(47.78～72.12)ng/L,13.43(7.04～17.37)ng/L].无PMA刺激条件下,SLE患者PBMCs培养上清中细胞因子水平、PBMCs中各T细胞亚群的百分比与正常对照组相比差异均无统计学意义(P均＞0.05);加入PMA刺激后,SLE患者PBMCs上清中IL-17的水平[(26.43±10.04)ng/L]和外周血Th17[(2.49±1.49)%]、Tc1[(44.89±16.43)%]细胞的比例均显著高于正常对照组[(18.06±5.42)ng/L,(1.47±0.73)%,(31.41±9.05)%)(P均＜0.05),SLE患者Th1、Tc17细胞百分比与正常对照组相比,差异均无统计学意义(P均＞0.05);地塞米松能明显抑制活化状态下的PBMCs分泌IL-17的水平[(16.72±6.09)ng/L](P＜0.01),且显著下调Th17(1. 34±0.76)%、Tc1(34.62±17.25)%细胞百分比(P均＜0.05),而地塞米松对IL-17的抑制作用更强.结论 SLE患者体内T细胞亚群及其相应细胞因子的表达水平存在明显异常,地塞米松能干扰SLE患者体内细胞因子网络失衡的免疫病理过程,且对IL-17有明显的抑制作用,为临床使用糖皮质激素治疗SLE提供新的理论依据和实验室基础.     

原发免疫性血小板减少症患者Th17细胞和调节性T细胞检测的意义

目的探讨Th17细胞和调节性T细胞(Treg)在原发免疫性血小板减少症(ITP)患者中的意义。方法选取32例初诊ITP患者,其中位年龄49(18~70)岁;30例健康对照,中位年龄42岁(20~65岁)。用流式细胞术检测外周血Th17细胞及Treg细胞分别占淋巴细胞的比例;用ELISA法检测血浆中IL-6和IL-17的水平。并分析ITP患者Th17细胞、Treg细胞、IL-6和IL-17的水平与PLT的相关性。结果 (1)ITP患者Th17细胞比例明显高于健康对照(2.81%±1.33%vs.0.35%±0.75%,P<0.05);Treg细胞比例明显低于健康对照(0.70%±0.39%vs.1.26%±0.24%,P<0.05);Treg/Th17比值明显低于健康对照(0.27±0.17 vs.3.76±0.87,P<0.05);ITP患者血浆中IL-17和IL-6水平均明显高于健康对照,分别为(24.07±2.22 pg/ml vs.15.89±2.23 pg/ml,P<0.05)和(75.12±4.06 pg/ml vs.49.75±4.19 pg/ml,P<0.05)。(2)ITP患者外周血Treg细胞比例与IL-6、IL-17水平均呈显著负相关(r=-0.423,P<0.05;r=-0.456,P<0.05);IL-6与IL-17水平呈显著正相关(r=0.368,P<0.05);Th17细胞及Treg细胞呈显著负相关(r=-0.417、P<0.05)。Th17细胞比例与IL-6、IL-17水平不具相关性(r=-0.272,r=-0.104,P>0.05)。(3)ITP患者Th17细胞比例、IL-6水平和IL-17水平与血小板计数呈显著负相关(r=-0.365,P<0.05;r=-0.353,P<0.05;r=-0.464,P<0.01);Treg细胞比例与血小板计数不具相关性(r=-0.101,P>0.05)。ITP患者Th17细胞比例、IL-6水平与骨髓颗粒型巨核细胞比例呈显著正相关(r=0.371,P<0.05;r=0.359,P<0.05);Treg细胞比例、IL-17水平与骨髓颗粒型巨核细胞比例不具相关性(r=-0.230,P>0.05;r=-0.043,P>0.05)。结论 ITP患者Treg/Th17细胞平衡失调可能是影响其发生发展的一个重要因素,Th17细胞与疾病的严重程度相关。     

维生素D对Graves病Th17/Treg细胞失衡的调节作用

目的 探讨维生素D对Graves病（Graves’ disease,GD）患者Th17/Treg失衡的调节作用。方法 收集2020年1月至12月复旦大学附属金山医院收治的30例GD患者和30例健康体检者。采用电化学发光免疫法测定2组人群25-羟维生素D水平,将GD患者外周血平均分为2份,根据是否予以维生素D干预分为GD未干预组和GD干预组。比较GD未干预组、GD干预组及对照组外周血中Th17、Treg细胞的占比及Th17/Treg比值。结果 GD患者血清25-羟维生素D[(20.55±6.69)ng/mL]明显低于对照组[（25.48±6.12）ng/mL,P=0.004]。GD未干预组、GD干预组及对照组外周血的Th17细胞占比分别为（0.299±0.191）%、（0.263±0.176）%、（0.054±0.017）%,两GD组外周血Th17细胞占比均高于对照组（P<0.001）,两GD组外周血Th17细胞水平差异无统计学意义。3组外周血Treg细胞占比分别为（0.029±0.013）%、（0.040±0.019）%、（0.037±0.017）%;两GD组外周血Treg细胞占...     

乌司他丁对脓毒症小鼠调节性T细胞凋亡及细胞因子分泌的影响

目的观察乌司他丁对脓毒症小鼠调节性T细胞(Treg)凋亡及细胞因子分泌的影响。方法将60只小鼠分为假手术组、模型组和乌司他丁组,每组20只。采用盲肠结扎穿孔方法制备脓毒症大鼠模型,假手术组除不结扎和穿刺盲肠外,其余手术步骤相同,乌司他丁组小鼠术后30 min尾静脉给药100 000 U/kg。采用流式细胞仪检测各组小鼠CD4+CD25+Treg的凋亡率,采用酶联免疫吸附试验检测各组小鼠白细胞介素2(IL-2)、IL-4、干扰素γ的水平。结果假手术组、模型组和乌司他丁组小鼠CD4+CD25+Treg细胞的凋亡率比较,差异有统计学意义[(20.1±1.0)%、(10.9±0.8)%、(13.7±0.8)%,F=10.236,P=0.030],且乌司他丁组小鼠显著低于假手术组,而高于模型组(P均0.05)。同时,与假手术组比较,模型组与乌司他丁组IL-2[(352±76)、(172±59)、(249±64)ng/L]和干扰素γ[(177±25)、(56±14)、(109±18)ng/L]均显著下降,而IL-4显著升高[(46±15)、(328±81)、(242±62)ng/L],且与模型组比较,乌司他丁组IL-2和干扰素γ均明显升高,而IL-4明显降低(P均0.05)。结论乌司他丁可诱导脓毒症小鼠Treg细胞凋亡,上调IL-2和干扰素γ,降低IL-4水平。     

慢性鼻窦炎患者鼻黏膜组织GATA结合蛋白-3表达及与炎性因子水平的关系

目的探讨转录因子GATA结合蛋白-3(GATA binding protein-3,GATA-3)在慢性鼻窦炎患者鼻黏膜中的表达及与白细胞介素(interleukin,IL)-5、IL-6、IL-8的关系。方法慢性鼻窦炎患者41例为观察组,同期行鼻内镜修补手术脑脊液鼻漏患者23例为对照组,采用免疫组织化学法检测2组鼻黏膜组织GATA-3蛋白阳性表达,实时荧光定量PCR法检测鼻黏膜组织GATA-3mRNA相对表达量,ELISA法检测血清IL-5、IL-6、IL-8水平;Pearson相关法分析2组鼻黏膜组织GATA-3蛋白阳性表达与血清IL-5、IL-6、IL-8的相关性。结果观察组鼻黏膜组织GATA-3蛋白阳性表达率(87.80%)、GATA-3mRNA相对表达量(0.60±0.12)及血清IL-5[(78.28±44.22)ng/L]、IL-6[(42.51±5.42)ng/L]、IL-8[(77.15±43.63)ng/L]水平均高于对照组[26.09%、0.13±0.11、(35.73±32.18)ng/L、(18.32±2.51)ng/L、(28.24±31.27)ng/L](P0.05);观察组和对照组鼻黏膜组织GATA-3蛋白阳性表达与血清IL-5(r=0.761,P=0.002;r=0.814,P=0.001)呈正相关,与IL-6(r=0.021,P=0.518;r=0.019,P=0.594)、IL-8(r=0.061,P=0.411;r=0.072,P=0.395)无线性相关。结论慢性鼻窦炎患者鼻黏膜组织GATA-3表达上调,且与血清IL-5水平呈正相关,二者共同促进病情进展。     

急性髓样白血病患者骨髓干细胞CD200的表达及与临床疗效的关系

目的研究急性髓样白血病(AML)患者骨髓中CD200的表达情况及与临床疗效关系的相关研究。方法将51例急性髓样白血病患者根据初发时白细胞计数分为高白细胞组(18例)与非高白细胞组(33例),根据化疗效果分为完全缓解组(31例)和未缓解组(20例),同期选取51例缺铁性贫血或巨幼细胞贫血患者为对照组。采用流式细胞术检测AML患者化疗前后CD200、Foxp3~+/CD4~+的表达,酶联免疫吸附试验检测AML患者及对照组患者外周血白细胞介素17(IL-17)、IL-4和干扰素γ的水平。同时,采用Pearson线性相关分析研究AML患者中CD200表达水平与化疗前后血清IL-17、IL-4、干扰素γ水平及骨髓中Foxp3~+/CD4~+水平的关系。结果高白细胞组患者CD200阳性表达率明显高于非高白细胞组患者[(4.8±2.8)%vs.(3.7±2.2)%,t=4.961,P0.001]。未缓解组患者较完全缓解组患者明显偏高[(4.8±2.6)%vs.(3.1±1.6)%,t=5.716,P0.001]。对照组患者与AML患者化疗前比较,IL-17及干扰素γ水平均明显升高(t=26.970,P0.001;t=4.370,P0.001),IL-4水平及Foxp3~+/CD4~+细胞均明显降低(t=9.965,P0.001;t=7.346,P0.001)。而对照组患者与AML患者化疗后比较,仅IL-17及IL-4水平比较,差异有统计学意义(t=8.897,P0.001;t=3.965,P0.001)。与AML患者化疗前比较,化疗后IL-17[(147±42)ng/L vs.(332±68)ng/L,t=15.920,P0.001]及干扰素γ[(24±8)μg/L vs.(31±12)μg/L,t=3.576,P0.001]水平均明显升高,IL-4水平[(142±54)μg/L vs.(84±31)μg/L,t=6.644,P0.001]及Foxp3~+/CD4~+细胞[(7.5±2.4)%vs.(5.2±2.4)%,t=5.330,P0.001]均明显降低。Pearson线性相关分析发现,CD200表达水平仅与化疗后骨髓中Foxp3~+/CD4~+水平呈正相关(r=0.347,P=0.012)。结论 CD200可能通过抑制免疫相关因子影响AML患者临床疗效。     

白细胞介素17A与老年腹部手术患者术后认知功能障碍的相关性

目的探讨老年腹部手术患者术后血清白细胞介素(IL)-17A、转化生长因子(TGF)-β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平变化及与术后认知功能障碍(POCD)发生的相关性。方法试验组选取红旗医院2015年9月至2016年4月普外科56例老年腹部手术患者,最终50例完成试验,男32例,女18例,年龄65~79岁,ASA分级Ⅰ~Ⅱ级,简易智能量表(MMSE)>23分,所有患者术前1 d和术后7 d进行相同神经认知功能测评。采用国际POCD研究组推荐的Z分法进行患者术后认知功能判定,50例分为POCD组13例和非POCD组37例。分别在麻醉诱导前10 min(T0)、术毕30 min(T1)、术后1 d(T2)、术后3 d(T3)采集静脉血离心取血清酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清细胞因子IL-17A、TGF-β、IL-6和TNF-α的浓度。结果 IL-17A在T1、T2、T3时,POCD组[(93.85±16.12)、(111.03±17)、(83.76±20.82)ng/L]比非POCD组[(84.59±9.14)、(93.78±10.59)、(73.51±8.15)ng/L]明显升高(P值分别为0.007、0.047、0.004),IL-6在T1、T2时POCD组[(56.63±8.00)、(45.76±7.16)ng/L]比非POCD组[(42.9±7.91)、(36.09±6.92)ng/L]明显升高(P值分别为0.006、0.023),TNF-α在T1、T2时POCD组[(32.19±2.49)、(30.33±1.96)ng/L]比非POCD组[(30.61±1.95)、(30.61±0.77)ng/L]明显升高(P值分别为0.004、0.043),TGF-β在T3时POCD组[(42.81±2.46)μg/L]比非POCD组[(35.90±1.60)μg/L]明显升高(P=0.007)。Spearman相关分析,IL-17A在T2时与复合Z分显著相关(r=0.426,P=0.002),IL-6在T1时与复合Z分显著相关(r=0.346,P=0.014),TNF-α在T1时与复合Z分显著相关(r=0.382,P=0.047),TGF-β在T3时与复合Z分显著相关(r=0.537,P<0.001)。结论老年腹部手术患者术后血清IL-17A、IL-6、TNF-α和TGF-β增高促进POCD发生。     

系统性红斑狼疮患者外周血Th17和CD4+CDhigh25Treg细胞及相关细胞因子的检测及意义

目的 探讨SLE患者外周血Th17及CD4+ CDhigh25Treg细胞及相关细胞因子IL-17、IL-21、TGF-β和IL-10的水平变化及意义.方法 选取2009-2010年河南省人民医院56例SLE患者(非活动期26例、活动期30例)及28名健康对照者.采用流式细胞术检测外周血单个核细胞中Th17及CD4+ CDhigh25 Treg细胞水平;采用QRT-PCR检测RORγt mRNA和Foxp3 mRNA的表达水平;采用ELISA检测血浆IL-17、IL-21、TGF-β和IL-10水平,并分析其与SLE的相关性.结果 SLE患者组外周血Th17细胞水平为(3.44±0.96)％,显著高于健康对照组的(2.42±0.52)％,差异有统计学意义(t=5.38,P=0.000).SLE患者组外周血CD4+CDhigh25Treg细胞水平为(1.32±0.57)％,显著低于健康对照组的(2.07±0.67)％,差异有统计学意义(t=3.28,P=0.034).SLE患者的RORγt mRNA表达水平为(0.219±0.063),高于健康对照组的(0.087±0.045),差异有统计学意义(t=6.41,P=0.000);而SLE患者的Foxp3+ mRNA表达水平为(0.063±0.045),低于健康对照组的(0.128±0.056),差异有统计学意义(t=5.28,P=0.000).SLE患者组IL-17、IL-21、IL-10水平分别为122.4(60.5～188.3)、167.2(128.7 ～871.4)、51.3(20.9 ～123.7)ng/L,高于健康对照组的27.1(18.1 ～86.2)、31.0(31.0～424.5)、33.5(16.4～54.1) ng/L,差异有统计学意义(Z值分别为3.83、4.54、1.87,P均＜0.05),TGF-β水平为31.0(31.0 ～168.6) ng/L,低于健康对照组的159.8(63.4～389.7)ng/L,差异有统计学意义(Z=4.87,P＜0.05).SLE患者血浆IL-17水平与Th17细胞水平、SLEDAI积分、抗dsDNA抗体水平呈显著正相关(r=0.621、0.581、0.512,P＜0.05),与补体C3水平呈负相关(r=-0.543,P＜0.05).CD4+ CDhigh25Treg细胞与SLEDAI积分呈负相关(r=- 0.423,P＜0.05),与补体C3水平呈正相关(r=0.511,P＜0.05).结论 SLE患者Th17细胞数量增高,CD4+ CDhigh25 Treg细胞数量减少,以及相关细胞因子的紊乱在SLE的发病机制中可能起到重要作用.     

香烟烟雾提取物致Th17/Treg的失衡在慢性阻塞性肺疾病发生发展中的作用与意义

目的观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血中Th17细胞、Treg细胞占CD4+T细胞的比例及香烟烟雾提取物(CSE)对其的影响,探讨CSE对Th17细胞、Treg细胞的影响及Th17/Treg的平衡关系在COPD发生发展中的作用。方法随机收集慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者20例(A组),COPD稳定期患者20例(B组),吸烟肺功能正常者20例(C组),不吸烟肺功能正常者20例(D组)。抽取空腹静脉血制备单个核细胞悬液(PBMC),将每个试验对象的PBMC分为空白对照组和CSE干预组,采用流式细胞术检测所有试验对象对照组和干预组CD4+Th17细胞及CD4+Treg细胞各占CD4+T细胞的比例;ELISA法检测各组血浆中IL-17的浓度。结果 Th17/CD4+T细胞百分比对照组A组(5.33±0.66)高于B组(2.99±0.50)、C组(2.09±0.68)、D组(1.19±0.48)(P<0.001),CSE干预组较对照组升高(P<0.001);Treg/CD4+T细胞百分比对照组C组(5.88±0.52)高于D组(3.35±0.30)、B组(2.25±0.30)、A组(1.58±0.39)(P<0.001),CSE干预组较对照组升高(P<0.001);CD4+Th17细胞百分比对照组与CSE干预组差值A、B组高于C、D组(P<0.001),A组与B组之间差异无统计学意义(P=0.866),C组与D组之间差异无统计学意义(P=0.793);CD4+Treg细胞百分比对照组与CSE干预组差值C、D组高于B组、A组(P<0.001),C组与D组之间差异无统计学意义(P=0.756);外周血IL-17水平A组(145.22±5.50)高于B组(94.99±3.19)、C组(59.77±5.09)、D组(50.84±5.85)(P<0.001);COPD组血浆中IL-17的水平与外周血Th17细胞比例呈正相关(rA=0.524,rB=0.462);与FEV1/FVC值呈负相关(rA=-0.456,rB=-0.567);与FEV1/预计值%呈负相关(rA=-0.503,rB=-0.445)。结论 Th17与Treg比例的失衡可能是COPD的其中一个重要的发病机制;外周血IL-17水平与FEV1/FVC值、FEV1/预计值%呈负相关。     

Tim-3及Th-17在儿童急性ITP发病机制中的作用

目的 探讨Tim-3、Th17细胞及Treg细胞在ITP患者中的表达及其临床意义.方法 应用流式细胞术检测42例ITP患者与39名健康对照者Th17细胞及Treg细胞的表达;采用ELISA法检测外周血血浆中IL-17、IFN-γ和IL-4的表达;应用RT-PCR方法 检测Tim-3、IFN-γ、IL-4、T-bet等细胞因子和转录因子的mRNA表达.结果 ITP患者Th17细胞比例为(2.41±1.43)%,明显高于健康对照组的(1.08±0.59)%,差异有统计学意义(t=5.35,P<0.05);ITP患者Treg细胞比例为(1.64±0.74)%,明显低于健康对照组的(3.12±0.52)%,差异有统计学意义(t=10.33,P<0.05).IL-17在ITP患者血浆中的表达水平为(14.42±6.37)ng/L,健康对照组为(13.91±4.47)ng/L,差异无统计学意义(t=0.42,P>0.05);而ITP患者血浆IFN-γ含量为(55.74±15.25)ng/L,较健康对照组的(31.33±12.99)ng/L明显升高,IL-4含量为(7.42±1.50)ng/L,较健康对照组的(18.17±5.19)ng/L明显降低,差异均有统计学意义(t=7.72、2.87,P均<0.05).ITP患者的T-bet mRNA和IFN-γmRNA表达水平明显升高,分别为健康对照组的(3.34±1.32)倍和(8.57±3.44)倍,差异有统计学意义(t=6.41、13.21,P<0.05);而Tim-3 mRNA和IL-4 mRNA表达水平明显下降,分别为健康对照的(0.29±0.15)倍和(0.25±0.15)侪,差异均有统计学意义(t=9.61、10.02,P<0.05).结论 Th17/Treg细胞亚群比例失调和Tim-3的表达下降可能是ITP发生和发展的重要决定因素.     

肝泡状棘球蚴病与慢性牙周炎患者龈沟液Th1与Th2型细胞因子水平变化及意义

目的检测新疆地区肝泡状棘球蚴病(hepatic alveolar echinococcosis,HAE)与慢性牙周炎(chronic periodontitis,CP)患者龈沟液Th1与Th2型细胞因子水平,探讨HAE与CP发病的关系。方法 HAE患者19例(HAE组),CP患者20例(CP组),HAE并CP患者22例(HAE+CP组),20例体检健康者(对照组),比较4组牙周检测结果;采用ELISA法检测4组龈沟液Th1型细胞因子干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和Th2型细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-4、IL-10水平;Pearson相关法分析Th1与Th2型细胞因子的相关性。结果 CP组、HAE+CP组探诊深度[(5.10±0.79)、(4.45±0.86)mm]、附着丧失[(2.20±0.77)、(1.55±0.59)mm]、出血指数(2.75±0.72、2.45±1.01)高于HAE组[(2.00±0.81)mm、(0.00±0.00)mm、0.84±0.68]和对照组[(1.45±0.51)mm、(0.00±0.00)mm、0.80±0.69](P0.05),CP组探诊深度、附着丧失高于HAE+CP组(P0.05),HAE组探诊深度高于对照组(P0.05);CP组龈沟液IFN-γ[(29.69±5.55)μg/L]、TNF-α[(5.15±0.92)μg/L]水平高于HAE组[(8.32±1.78)、(3.40±0.88)μg/L]、HAE+CP组[(7.03±1.53)、(3.18±0.84)μg/L]和对照组[(21.42±3.76)、(2.84±0.65)μg/L](P0.05);HAE组IL-4[(8.22±2.30)μg/L]、IL-10[(7.47±1.61)μg/L]水平高于CP组[(5.26±1.11)、(4.53±1.28)μg/L]、HAE+CP组[(7.29±2.07)、(5.16±1.43)μg/L]和对照组[(5.87±0.98),(3.16±0.69)μg/L](P0.05),HAE+CP组IL-4水平高于CP组(P0.05);Pearson相关分析结果显示,IFN-γ与IL-4、IL-10水平均呈负相关(r=0.558,P=0.000;r=0.428,P=0.000);TNF-α和IL-4、IL-10水平无线性相关(r=0.061,P=0.591;r=0.050,P=0.625)。结论 HAE并CP患者銀沟液Th2相关细胞因子高于CP患者,可一定程度上抑制牙周炎症反应,减轻牙周组织破坏。     

持续性非卧床腹膜透析患者全段甲状旁腺激素和细胞因子与左心室肥厚关系

目的探讨持续性非卧床腹膜透析(continuous ambulatory peritoneal dialysis,CAPD)患者血清全段甲状旁腺激素(intact parathyroid hormone,iPTH)水平、血浆白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平与左心室肥厚的关系。方法行CAPD患者114例,采用化学发光免疫夹心法检测血清iPTH水平,按iPTH水平分为300ng/L组36例、150~300ng/L组28例、70~150ng/L组24例和70ng/L组26例。采用ELISA法检测4组血浆IL-6、TNF-α水平,应用彩色超声心动图检测左心室心肌重量指数(left ventricular mass index,LVMI)。结果 300ng/L组左心室肥厚发生率(69.4%)明显高于150~300ng/L组(42.9%)和70~150ng/L组(25.0%)(P0.05),与70ng/L组(53.8%)比较差异无统计学意义(P0.05);70ng/L组左心室肥厚发生率高于70~150ng/L组(P0.05),与150~300ng/L组比较差异无统计学意义(P0.05);300ng/L组和70ng/L组血浆IL-6[(12.74±9.81)、(12.28±8.96)ng/L]、TNF-α[(18.59±11.85)、(17.38±10.24)ng/L]水平和LVMI[(151.62±38.49)、(125.27±41.62)g/m2]明显高于150~300ng/L组[(3.19±1.54)ng/L、(7.28±2.79)ng/L、(117.80±36.04)g/m2](P0.01),300ng/L组与70ng/L组以上指标比较差异无统计学意义(P0.05);iPTH与LVMI、IL-6、TNF-α呈正相关(r=0.507,P=0.019;r=0.364,P=0.030;r=0.297,P=0.041),LVMI与IL-6、TNF-α呈正相关(r=0.413,P=0.024;r=0.263,P=0.038)。结论 CAPD患者iPTH与左心室肥厚的发生、发展密切相关;iPTH水平过高或过低患者血浆IL-6、TNF-α水平均增高,IL-6、TNF-α可能参与iPTH引起左心室肥厚的发生。     

慢性心力衰竭急性发作患者发生利尿剂抵抗的危险因素

目的探讨白细胞介素(interleukin, IL)-6、-17联合可溶性基质裂解素-2(soluble suppression oftumorigenicity 2, sST2)预测慢性心力衰竭急性发作患者发生利尿剂抵抗的价值。方法慢性心力衰竭急性发作患者89例,入院后静脉注射呋塞米40 mg/次,1次/8 h,共2次。应用呋塞米发生利尿剂抵抗者49例为利尿剂抵抗组,未发生利尿剂抵抗者40例为非利尿剂抵抗组。比较2组血清IL-6、IL-17、sST2、尿酸、肌酐、氨基末端脑钠肽前体、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶水平;采用多因素logistic回归分析慢性心力衰竭急性发作患者发生利尿剂抵抗的危险因素,并建立利尿剂抵抗的回归方程;绘制ROC曲线,评估回归方程评价慢性心力衰竭急性发作患者发生利尿剂抵抗的效能。结果利尿剂抵抗组血清IL-6[(38.83±8.12)ng/L]、IL-17[(42.15±8.69)ng/L]、sST2[(43.61±12.28)μg/L]、尿酸[(474.89±146.25)μmol/L]、肌酐[(101.66±66.23)μmol/L]、氨基末端脑钠肽前体[15 774.00(10 972.80,21 655.37)ng/L]水平高于非利尿剂抵抗组[(32.40±7.66)ng/L、(34.56±10.71)ng/L、(36.22±11.02)μg/L、(393.45±148.78)μmol/L、(77.57±31.66)μmol/L、4 982.05(3 695.22,6 367.68)ng/L](P0.05),谷草转氨酶[(42.40±15.24)u/L]、谷丙转氨酶[(37.42±13.57)u/L]、肌酸激酶[(108.76±29.87)u/L]、肌酸激酶同工酶[(18.23±5.78)u/L]与非利尿剂抵抗组[(39.62±14.31)、(34.61±15.49)、(98.67±36.12)、(16.74±4.92)u/L]比较差异无统计学意义(P0.05)。尿酸(OR=1.004,95%CI:1.001～1.008,P=0.028)、IL-6(OR=1.086,95%CI:1.014～1.162,P=0.014)、IL-17(OR=1.095,95%CI:1.005～1.116,P=0.031)、sST2(OR=1.046,95%CI:1.001～1.092,P=0.047)是慢性心力衰竭急性发作患者发生利尿剂抵抗的影响因素。建立利尿剂抵抗的回归方程logit(P)=-8.545+0.004×尿酸+0.082×IL-6+0.057×IL-17+0.045×sST2,回归方程评估慢性心力衰竭急性发作患者发生利尿剂抵抗的Youden指数最大值为0.532,AUC为0.860(95%CI:0.714～0.899,P0.001),灵敏度为85.7%,特异度为67.5%。结论尿酸、IL-6、IL-17、sST2水平增高是慢性心力衰竭急性发作患者应用呋塞米后发生利尿剂抵抗的危险因素,建立的回归方程对慢性心力衰竭急性发作患者是否发生利尿剂抵抗有较高的预测价值。     

骨髓增生异常综合征患者CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞特点及环孢素对其的影响

目的探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastie syndrome,MDS)-难治性贫血(refractory anemia,RA)及难治性血细胞减少伴有多系发育异常(refractory cytopenia with multiple dysplasia,RCMD)患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与白细胞介素(interleukin,IL)-10表达水平,评估环孢素对MDS患者CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞的影响。方法选择2016年1月至2018年1月于新疆维吾尔自治区人民医院25例MDS-RA及RCMD患者(MDS组)和13名健康对照(健康对照组),采用流式细胞术及酶联免疫吸附试验检测外周血标本CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10表达水平,检测MDS-RA及RCMD患者在应用以环孢素为基础的免疫抑制方案治疗前、治疗6个月后及MDS组治疗有效及无效的CD4+CD25+FOXP3+Treg与IL-10的表达情况。结果全部25例患者中,13例(52%)有效,12例(48%)无效。MDS组CD4+CD25+FOXP3+Treg占CD4+T细胞比例显著高于健康对照组[(0.37±0.10)%与(0.12±0.06)%,t=2.02,P<0.001]。MDS组IL-10水平显著高于健康对照组[(7.16±1.27)μg/L与(2.75±1.06)μg/L,t=2.03,P<0.001]。MDS治疗有效组CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞比例低于无效组[(0.15±0.06)%与(0.26±0.08)%,t=1.71,P<0.001],有效组IL-10水平低于无效组[(3.22±1.01)μg/L与(4.25±1.22)μg/L,t=2.06,P=0.030]。25例MDS患者外周血CD4+CD25+FOXP3+Treg比例与IL-10表达水平呈正相关关系(r=0.35,P=0.02)。结论MDS患者存在CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞与IL-10的表达升高,环孢素治疗后降低。