清肺化痰通络方对大鼠肺纤维化的干预作用及对TGF-β_1表达的影响

目的：观察清肺化痰通络方对肺间质纤维化大鼠肺内胶原纤维沉积和转化生长因子-β1（TGF-β1）表达的影响。方法：Wistar雌性大鼠72只,随机分为对照组、模型组、中药组。模型组和中药组大鼠气管内一次性滴注博莱霉素A5（BLMA5）,对照组大鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。造模后2h开始给药,模型组和对照组灌服生理盐水,中药组灌服清肺化痰通络方药物,每天一次。各组动物分别于第3、7、14、28天各处死6只,取肺组织进行HE和Masson染色,观察肺内胶原的沉积部位和数量;同时进行免疫组化染色,结合图像分析来检测各组肺组织中TGF-β1的表达水平。结果：对照组肺内结构正常,胶原沉积不明显;模型组可见支气管黏膜下、血管壁及其周围、肺间质、肺泡壁有大量胶原沉积;中药组胶原沉积明显轻于模型组。第14天模型组、中药组TGF-β1在肺内的表达呈强阳性,高于对照组,差异有显著性意义（P〈0.01）。中药组TGF-β1表达数量少于同一时段模型组,差异有显著性意义（P〈0.05）。结论：清肺化痰通络方可以抑制肺间质纤维化大鼠肺组织内胶原的沉积,可以减缓肺纤维化的形成,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现。     

清肺化痰通络方对大鼠肺纤维化的干预作用及对TGF-β1表达的影响

目的:观察清肺化痰通络方对肺间质纤维化大鼠肺内胶原纤维沉积和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:Wistar雌性大鼠72只,随机分为对照组、模型组、中药组。模型组和中药组大鼠气管内一次性滴注博莱霉素A5(BLMA5),对照组大鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。造模后2h开始给药,模型组和对照组灌服生理盐水,中药组灌服清肺化痰通络方药物,每天一次。各组动物分别于第3、7、14、28天各处死6只,取肺组织进行HE和Masson染色,观察肺内胶原的沉积部位和数量;同时进行免疫组化染色,结合图像分析来检测各组肺组织中TGF-β1的表达水平。结果:对照组肺内结构正常,胶原沉积不明显;模型组可见支气管黏膜下、血管壁及其周围、肺间质、肺泡壁有大量胶原沉积;中药组胶原沉积明显轻于模型组。第14天模型组、中药组TGF-β1在肺内的表达呈强阳性,高于对照组,差异有显著性意义(P<0.01)。中药组TGF-β1表达数量少于同一时段模型组,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:清肺化痰通络方可以抑制肺间质纤维化大鼠肺组织内胶原的沉积,可以减缓肺纤维化的形成,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现。     

咳喘康对博莱霉素A5致肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β_1及其受体mRNA表达的影响

目的:研究咳喘康对博莱霉素A5致肺纤维化大鼠肺组织中TGF-β1及其受体mRNA表达的影响。方法:将60只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药咳喘康组和激素组。除正常组外,其余3组大鼠经气管注入博莱霉素A5复制肺纤维化大鼠模型,各组于造模后第1天分组予以给药,于给药7、14、28天分批处死各组大鼠,每次每组5只。利用ELISA法检测肺组织中TGF-β1的含量、RT-PCR法检测肺组织中TGF-β1mRNA的表达水平。结果:模型组在不同时段TGF-β1含量及TGF-β1mRNA表达较正常对照组均明显增高,具有显著的统计学意义(P<0.01)。咳喘康组大鼠肺组织匀浆中TGF-β1含量、TGF-β1mRNA的表达水平与模型组对照降低,且有随给药天数增加而降低的趋势,具有统计学意义(P<0.01)。结论:中药复方咳喘康具有显著抑制博莱霉素A5致大鼠肺纤维化的作用,通过降低TGF-β1的含量及抑制TGF-β1mRNA的表达是其可能的机制之一。     

黄芩苷对实验性肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1 mRNA和蛋白表达的影响

目的:观察黄芩苷对实验性肺纤维化大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA和蛋白表达的影响。方法:24只SD大鼠分为对照组、模型组和治疗组。模型组和治疗组经气管内注入博莱霉素(BLM)5mg/kg,诱导形成肺纤维化,治疗组每日经胃管灌注黄芩苷(Bai)12.5mg/kg·d。各组动物于28天均处死,用肺组织羟脯氨酸(HYP)含量测定法来检测大鼠的肺纤维化程度,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织TGF-β1mRNA和免疫组织化学方法测定TGF-β1的蛋白表达水平。结果:(1)观察期间大鼠的一般情况:对照组大鼠表现活泼,反应灵敏,皮毛光滑。模型组大鼠精神差,活动减少,反应迟钝,毛发晦暗竖立,食欲差,发育迟缓,体重低。治疗组大鼠精神、食欲、毛色、体重及活动情况较模型组均有所好转。(2)大鼠肺组织HYP含量:与对照组比较,模型组肺组织HYP含量显著增高(P0.01)。治疗组与模型组肺组织HYP含量相比明显降低(P0.01),但治疗组肺组织HYP含量仍高于对照组(P0.01)。(3)模型组肺组织TGF-β1mRNA表达较对照组增高,差异有统计学意义(P0.01),治疗组TGF-β1mRNA表达较模型组下降,但较对照组增高.差异均有统计学意义(P0.01)。(4)免疫组化法TGF-β1的表达中,对照组阳性率为8.3%,模型组达66.7%,治疗组为25.0%,两两比较差异有统计学意义(P0.01)。结论:黄芩苷可以抑制BLM诱导的肺纤维化大鼠肺内TGF-β1mRNA表达上调,这可能是其防治肺纤维化的作用机制之一。     

甘草干姜汤对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化SIRT1和TGF-β1蛋白表达的影响

目的:探讨甘草干姜汤对肺纤维化信号转导通路影响作用及机制研究。方法 :SD大鼠60只,随机分为正常对照组,模型组,醋酸泼尼松组,甘草干姜汤0.5g/kg、1g/kg和2g/kg剂量组。采用博莱霉素气管注入法,制备肺纤维化模型,于实验第28天留取标本,分别测定大鼠肺组织活性氧、谷胱甘肽、超氧化物歧化酶和丙二醛及羟脯氨酸含量,采用免疫组化实验观察肺组织病理学改变,免疫印迹法检测SIRT1和TGF-β1等相关蛋白的表达。结果:与模型组相比,1g/kg和2g/kg甘草干姜汤作用28天后能够显著提高大鼠肺组织超氧化物歧化酶活力,降低活性氧、丙二醛和羟脯氨酸含量,同时,显著下调TGF-β1、Smad3、α-SMA、ColⅠ和SIRT1蛋白表达并上调Smad7蛋白表达。结论:甘草干姜汤能够减轻博莱霉素导致的大鼠肺纤维化程度,并通过增加抗氧化防御系统和调控SIRT1和TGF-β1发挥作用。     

中药沙参对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1及TNF-α蛋白表达的影响

目的：观察沙参对博来霉素致大鼠肺纤维化的治疗作用。方法：将大鼠按照性别、体质量随机分为正常对照组、模型对照组、强的松纽、沙参1．5g组和沙参3．0g组。按照BLM5ms／kg体重复制大鼠肺纤维化模型。24h后给药，观察各实验组7，14，28d肺组织TGF-β1及TNF-α蛋白表达情况的变化；并采用病理图像分析系统，半定量分析TGF-β1及TNF—α蛋白含量。结果：除正常对照组外，其他各组TGF—β1及TNF—α蛋白表达明显增强，于第7天达到高峰，14d以后逐渐减弱；但与模型对照组对比，实验各组均有显著性差异。结论：沙参可下调BLM致肺纤维化大鼠TGF-β1及TNF—α蛋白的表达，对肺纤维化有一定的治疗作用。     

血必净对急性肺纤维化大鼠TGF-β1表达的影响

[目的]探讨血必净对急性肺间质纤维化大鼠TGF-β1表达的影响。[方法]采用一次性气管内注射博来霉素的方法复制大鼠肺间质纤维化模型,将大鼠随机分为四组,各组动物处死后行肺组织羟脯氨酸含量测定、TGF-β1免疫组化染色。[结论]血必净能有效抑制大鼠TGF-β1的表达,减少肺组织中羟脯氨酸含量,改善实验性肺纤维化大鼠的病理改变,延缓其恶化进程。     

大黄素对肺纤维化大鼠TGF-β_1及smad_（3/7）信号通路的影响

目的：观察大黄素抗博莱霉素诱导大鼠肺纤维化的作用机制。方法：选用健康Wistar大鼠60只,随机分为空白组、模型组、强的松组、大黄素高、中、低剂量组,采用博莱霉素气管内吹入法,制备肺纤维化模型,于实验第29天留取标本,用免疫组化技术检测转化生长因子β1（TGF-β1）及smad3、smad7的表达。结果：大黄素中、低剂量组大鼠TGF-β1、smad3表达减弱,smad7表达明显增强。结论：大黄素的中、低剂量组能够减轻博莱霉素导致的大鼠肺纤维化程度,其作用机制与调控TGF-β1的smad3/7信号转导蛋白表达有关。     

鳖甲煎丸对肺纤维化大鼠TGF-β1及smad信号通路的影响

目的：观察鳖甲煎丸抗博莱霉素所诱导的大鼠肺纤维化的作用机制。方法：SD大鼠50只,随机分为生理盐水组,模型组,醋酸泼尼松组,鳖甲煎丸中剂量组,鳖甲煎丸高剂量组。采用博莱霉素气管内注入法,制备肺纤维化模型,于实验第28天留取标本,用免疫组化技术检测TGF-β1及smad3、smad7在肺组织中的表达。结果：鳖甲煎丸中、高剂量组大鼠TGF-β1表达减弱、smad7表达增强,smad3在鳖甲煎丸高剂量组表达减弱。结论：鳖甲煎丸能够减轻博莱霉素导致的大鼠肺纤维化程度,其作用机制与调控TGF-β1的smad蛋白表达有关。     

黄芪沙参煎剂对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型的干预作用

目的：观察中药黄芪沙参煎剂对肺纤维化大鼠病理、肺泡灌洗液中细胞因子（TGF-β1）表达的影响,探讨黄芪沙参煎剂作用机制,为其临床治疗肺纤维化提供实验依据。方法：取体重190-210g的健康雌性SD大鼠90只,采用随机数字表随机分为6组,每组15只。博莱霉素（B组）、黄芪沙参煎剂高剂量组（H组）、中剂量组（M组）、低剂量组（L组）、强的松组（P组）、生理盐水组（N组）,各组大鼠于造模后第7、14和28天分别随机处死5只。行HE染色、Masson三色染色;右肺支气管肺泡灌洗,收集灌洗液（BALF）,用ELISA法测BALF上清液细胞因子TGF-β1的表达。结果：H组、M组、P组与B组早期肺泡炎和晚期肺纤维化程度比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;第7、14、28天P组、H组、M组的BALF中TGF-β1水平与Β组相比差异有显著统计学意义（Ρ〈0.01）。结论：黄芪沙参煎剂具有与强的松相似的疗效,但副反应小、服用方便,可以明显减少肺泡炎症及肺纤维化形成。黄芪沙参煎剂治疗肺纤维化机制可能与早期抑制炎症细胞浸润,减少炎症细胞分泌释放细胞因子TGF-β1,从而抑制成纤维细胞产生胶原和ECM积聚,起到对肺纤维化的治疗作用。     

芪术合剂对肺纤维化大鼠TGF-β1表达及肺组织形态的影响

目的:观察芪术合剂对博莱霉素致大鼠肺间质纤维化的干预作用及其机制。方法:将60只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、芪术合剂组和强的松组。经气管滴入博莱霉素复制肺纤维化大鼠模型,并分组予以治疗,于治疗3、7、21天分批处死各组大鼠,每次每组6只。观察肺组织TGF-β1的表达和病理变化。结果:模型组在不同时段TGF-β1表达较正常对照组明显增高,芪术合剂组与同期模型组比较明显降低,芪术合剂组和强的松组经干预后肺泡炎和肺纤维化有所减轻。结论:中药芪术合剂具有显著抑制博莱霉素致大鼠肺纤维化的作用,抑制TGF-β1的表达是其可能的机制之一。     

参蛭活血颗粒对系膜增生性肾炎肾组织TGF-β1及PAI-1表达水平的影响

目的：从分子水平初步探讨参蛭活血颗粒治疗系膜增生性肾炎的机制。方法：本实验通过MSPGN大鼠动物模型,使用丽春红蛋白结合法测定大鼠尿蛋白含量;干化学法检测大鼠尿潜血含量;ELISA法检测参蛭活血颗粒治疗MSPGN大鼠肾组织TGF-β1及PAI-1表达水平的影响。结果：参蛭活血颗粒可降低MSPGN大鼠尿蛋白及尿潜血的含量;降低大鼠肾组织中TGF-p1和PAI-1的表达水平。结论：参蛭活血颗粒可通过降低MSPGN大鼠肾组织中TGF-β1和PAl-1的含量,改善肾脏功能,减轻MSPGN的进程。     

鳖甲煎丸对肺纤维化大鼠TGF-β1及smad3／7信号通路的影响

目的：观察鳖甲煎丸抗博莱霉素所诱导的大鼠肺纤维化的作用机制。方法：SD大鼠50只,随机分为生理盐水对照组、模型对照组、醋酸泼尼松组、鳖甲煎丸中剂量组、鳖甲煎丸高剂量组。采用博莱霉素气管内注入法,制备肺纤维化模型,于实验第28天留取标本,用免疫组化技术检测TGF-β1及smad3、smad,在肺组织中的表达。结果：鳖甲煎丸中、高剂量组大鼠TGF-β1表达减弱,smad,表达增强,smad,在鳖甲煎丸高剂量组表达减弱。结论：鳖甲煎丸能够减轻博莱霉素导致的大鼠肺纤维化程度,其作用机制与调控TGF-β1的smad,门信号转导蛋白表达有关。     

痔愈喷剂对大鼠创面TGF-β1表达的影响

目的:探讨痔愈喷剂对大鼠术后创面愈合的作用机制。方法:30只SD大鼠随机分为痔愈喷剂组、空白对照组、湿润烧伤膏组。按照制备大鼠皮肤创伤模型,分别于造模后第7、14、21天,取创伤周围少量皮肤组织。采用免疫组织化学技术观察创面肉芽组织中TGF-β1表达的变化。结果:造模术后第7、14、21天痔愈喷剂组TGF-β1含量明显高于空白对照组(P0.05),与湿润烧伤膏组相比无明显差异。结论:痔愈喷剂可增加术后创面TGF-β1表达量,促进创面愈合的作用。     

牛珀至宝丹对老年大鼠脑TGF-β1表达和NPCs增殖的影响

目的:探讨牛珀至宝丹对老年记忆减退大鼠学习记忆能力及脑TGF-β1表达和NPCs增殖的影响。方法:以成年大鼠平均逃避潜伏期的均值加两倍标准差和加一倍标准差为参照标准,将老年大鼠随机分为记忆正常组、记忆减退组、牛珀小剂量组及牛珀大剂量组。牛珀至宝丹0.05g/kg、0.1g/kg连续给药15d后,BrdU标记处于增殖状态的NPCs,Morris水迷宫进行学习记忆能力检测,免疫组化检测鼠脑尾壳核、皮质区TGF-β1表达及SVZ、DG部位BrdU阳性细胞数。结果:定位航行实验第4～5d,牛珀大剂量组大鼠平均潜伏期明显缩短,与记忆减退组比较,有显著性差异(P0.05);空间探索实验,牛珀大剂量组大鼠第Ⅱ象限停留时间、第一次平台穿越时间、穿越平台次数与记忆减退组比较,有显著性差异(P0.05);牛珀大剂量组大鼠脑尾壳核及皮质区TGF-β1蛋白表达明显增多,SVZ及DG部位BrdU阳性细胞数明显增加,与记忆减退组比较,有显著性差异(P0.05)。结论:牛珀至宝丹对老年记忆减退大鼠学习记忆能力有明显促进作用,能显著促进内源性NPCs的增殖,其机理可能与牛珀至宝丹增强TGF-β1蛋白在大鼠脑内的表达有关。     

针刺对肝纤维化模型大鼠的防治作用及对TGF-β1的影响

目的探讨针刺对肝纤维化大鼠模型的防治作用及其对TGF-β1的影响。方法 Wistar大鼠随机分正常组、模型组、针刺组。采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,针刺组选取足三里和肝俞穴进行电针刺激。实验结束后检查各组肝组织病理学情况,对肝纤维化损伤进行分级评分,检测血清肝功能指标(ALT、AST)和肝纤维化指标(HA、LN、PCⅢ、CⅣ),应用ELISA法检测肝组织中TGF-β1的表达水平。结果与模型组相比,针刺组能显著降低大鼠肝组织纤维化评分(P<0.01),降低ALT,AST,HA,LN,PCⅢ,CⅣ水平(P<0.01),抑制肝组织中TGF-β1的活化(P<0.01)。结论针刺足三里和肝俞穴具有抑制肝纤维化作用,其机制可能与抑制TGF-β1的活化有关。     

温莪术对TGF-β1诱导肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质的影响

目的:探讨温莪术对人转化生长因子β1 (TGF-β1)诱导的肾小管上皮细胞转分化及细胞外基质纤维连接蛋白(FN)、胶原Ⅰ (Col-Ⅰ)的影响.方法:将体外培养的肾小管上皮细胞(NRK-52E)随机分为6组:正常血清组、TGF-β1诱导模型组、洛汀新组、温莪术高剂量组、温莪术中剂量组、温莪术低剂量组.其中温莪术及洛汀新以含药血清方式给药,运用MTT法检测不同浓度温莪术含药血清对细胞增殖的影响,确定适合的药物作用范围.应用倒置显微镜观察细胞的形态学改变,实时荧光定量PCR法检测Col-ⅠmRNA、FN mRNA的表达水平.结果:TGF-β1可诱导肾小管上皮细胞(NRK-52E)向成纤维细胞转化,细胞出现肥大、拉长,显现梭形,并且使Col-Ⅰ、FNmRNA的表达水平升高(P＜0.05).而加入不同浓度温莪术后,细胞的形态接近于正常细胞,Col-Ⅰ、FNmRNA的表达均显著下降(P＜0.05),并且呈现药物浓度依赖性.结论:温莪术可抑制TGF-β1诱导肾小管上皮细胞向成纤维细胞转分化,并且出现Col-Ⅰ、FNmRNA表达的升高,并且有浓度依赖性.     

姜黄素对肺纤维化大鼠肺组织胶原沉积及转化生长因子β1表达的影响

目的观察姜黄素对博莱霉素诱导肺纤维化大鼠胶原沉积、转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响.方法SD雄性大鼠144只,分为假手术组、模型组、醋酸泼尼松组、姜黄素高剂量组、姜黄素中剂量组、姜黄素低剂量组,每组24只.除假手术组外其余各组大鼠气管内1次性滴注盐酸博莱霉素,假手术组大鼠气管内1次性滴注等体积的生理盐水.造模后第1天开始给药,持续到处死动物的前1天.姜黄素高、中、低剂量组分别为200、100、50 mg·kg-1,醋酸泼尼松组每天为0.56 mg·kg-1,假手术组,模型组分别灌服等体积的生理盐水.各组动物于7、14、28天随机处死8只,取肺组织进行HE和Mallory染色,同时进行免疫组化显色,结合图像分析来检测各组肺组织中转化生长因子的表达水平.结果模型组支气管黏膜下、血管壁及周围、肺泡壁、肺间质均有胶原大量沉积;姜黄素治疗组胶原沉积明显轻于模型组;假手术组最轻,胶原沉积不明显.免疫组化发现模型组TGF-β1表达最强,姜黄素治疗组较弱,假手术组微弱表达.结论姜黄素可抑制肺纤维化大鼠肺组织的胶原沉积,在延缓肺纤维化形成中起重要作用,其作用机制可能是通过抑制TGF-β1的表达来实现.     

十枣汤对肺纤维化大鼠血清TNF-α和TGF-β1浓度的影响

目的：通过检测博莱霉素所致肺纤维化大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和转化生长因子-β1（TGF-β1）浓度,探讨十枣汤对肺纤维化大鼠的治疗作用及疗效机制。方法108只雄性健康Wistar大鼠随机分为6组：空白对照、模型对照、强的松、十枣汤低剂量、十枣汤中剂量、十枣汤高剂量组,每组18只。空白对照组以气管内注入生理盐水的方法设立对照,余各组气管内注入博莱霉素建立肺纤维化模型,造模第2天始进行药物干预,第14天、28天各处死9只大鼠,采集血清,取右肺,光镜下观察肺组织病理变化,ELISA法检测血清中TNF-α和TGF-β1浓度。结果给药后第14、28天,与空白对照组相比,模型对照组出现典型肺纤维化改变,血清TNF-α和TGF-β1的浓度明显升高（P＜0.01）;与模型对照组相比,各药物治疗组肺纤维化程度明显改善,血清TNF-α和TGF-β1的浓度显著降低（P＜0.01）;十枣汤高剂量组血清TNF-α和TGF-β1的浓度较其余各组显著降低（P＜0.01）。给药第14d时,强的松组与十枣汤低、中剂量组大鼠血清TNF-α浓度无显著差异（P＞0.05）,与十枣汤中剂量组血清中TGF-β1浓度无显著差异（P＞0.05）;28天时,强的松组大鼠血清TNF-α含量较十枣汤低剂量组低,有显著差异（P＜0.05）,与十枣汤中剂量组无显著差异（P＞0.05）;强的松组与十枣汤低剂量组大鼠血清中TGF-β1浓度无显著性差异（P＞0.05）,十枣汤中剂量组比强的松组大鼠血清中TGF-β1低,有显著差异（P＜0.05）。结论十枣汤可减轻博来霉素所致肺纤维化大鼠血清中TNF-α、TGF-β1的含量,延缓肺纤维化进展,减轻肺纤维化程度。     

针刺捻转补泻手法对SHR大鼠肾脏TGF-β1表达的影响

目的:研究针刺捻转补泻手法对SHR(spontaneous hypertensive rats,自发性高血压大鼠)肾脏中TGF-β1(transforming growth factor-β1,转化生长因子-β1)表达的影响及其与肾损害的关系,探讨其保护作用机制。方法:60只12周龄的雄性SHR大鼠被随机分成5组,分别为捻转补法组(A)、捻转泻法组(B)、平补平泻组(C)、针刺留针组(D)、模型组(E),均为高血压组,每组12只;12只12周龄雄性WKY大鼠作为空白对照组。针刺处理28天后,分别取各组大鼠肾脏,观察肾脏病理学改变;应用免疫组化法检测TGF-β1在各组肾脏中的表达。结果:TGF-β1在空白组肾小管的表达无或极微量;在模型组的肾小球有少量表达,但在肾小管的表达显著,且随高血压病程的进展,TGF-β1的表达显著性增加(P0.01):B组与E组比较有明显差异(P0.05),A、C、D组之间比较无明显差异(均P0.05)。结论:捻转泻法是积极有效的降压治疗方法,会减少高压血流对血管内皮和平滑肌细胞的机械性损伤,改善血管内皮功能,减少TGF-β1的分泌,从而降低高血压肾损害的发生率。