阿托伐他汀对骨髓基质细胞增殖及向成骨细胞分化的影响

目的比较不同浓度的阿托伐他汀对小鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化、矿化成骨的影响。方法分别将10^-8、10^-7、10^-6mol／L的阿托伐他汀和空白药物加入传代培养的小鼠骨髓基质细胞，通过细胞形态学观察、细胞增殖率检测、碱性磷酸酶（ALP）检测和钙结节染色，比较药物在成骨细胞分化过程中对细胞增殖和分化的影响。结果阿托伐他汀可以剂量依赖性方式抑制骨髓基质细胞的增殖，10^-7mol／L组和10^-6mol／L组较明显（均P〈0．05）。阿托伐他汀可以提高骨髓基质细胞ALP活性，培养10～22d，10^-7mol／L组和10^-6mol／L组ALP活性高于对照组和10^-8mol／L组（均P〈0．05）。矿化成骨染色显示在培养26d后，10^-6mol／L组染色明显深于其它各组。结论阿托伐他汀可促进骨髓基质细胞来源的成骨细胞的分化，抑制了细胞增殖，促进骨结节钙化。     

重组人甲状旁腺激素(1-34)对体外培养成骨细胞骨形成的作用

目的 体外观察重组人甲状旁腺激素[recombinant human parathyroid hormone（1-34），rhPTH（1-34）]对成骨细胞骨形成的刺激作用。方法采用酶消化法分离获得大鼠成骨细胞，间隙加药方法给予rhPTH（1-34），观察药物对成骨细胞增殖、分化及矿化功能的影响。结果 10^-12～10^-8mol／L浓度对成骨细胞的增殖、分化和矿化功能均显示刺激作用。10^-11～10^-8mol／L浓度组的MTT、ALP的A值及矿化结节形态计量结果与对照组比较，具有显著性增加（P〈0．05），增加率以10^-9mol／L浓度组为最高，并呈剂量一效应关系。结论 rhPTH（1-34）对体外培养成骨细胞的增殖、分化和矿化功能具有明显促进作用。     

木犀草素对小鼠体外培养前成骨细胞MC3 T3-E1增殖、分化、矿化和Wnt通路的影响

目的:探讨木犀草素对小鼠体外培养前成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化及Wnt通路的影响.方法:在体外培养的MC3T3-E1s培养基中加入木犀草素0.25~8.00μmol/L培养12、24和48 h,以洛伐他汀0.04μmol/L作为阳性对照,采用细胞计数试剂盒法检测细胞增殖情况;用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测细胞内ALP的活性;茜素红S染色法检测细胞矿化能力;采用实时荧光定量反转录PCR法检测细胞Ⅰ型胶原、骨钙素、低密度脂蛋白受体相关蛋白5(Lrp5)、β-连环素、护骨素/细胞核因子κB受体活化因子配体mRNA表达水平.结果:木犀草素可以剂量依赖性和时间依赖性地促进成骨细胞MC3T3-E1增殖(P<0.05~P<0.01);木犀草素(2.00、4.00和8.00μmol/L)可以剂量依赖性地促进MC3T3-E1成骨细胞ALP活性,增强MC3T3-E1成骨细胞矿化能力并上调MC3T3-E1成骨细胞中Ⅰ型胶原、骨钙素、Lrp5、β-连环素和护骨素/细胞核因子κB受体活化因子配体mRNA表达.结论:木犀草素2.00、4.00和8.00μmol/L可以促进MC3T3-E1细胞的增殖、分化与矿化及Wnt通路中Lrp5和β-连环素mRNA的表达.     

锌和N-乙酰半胱氨酸对镉致人正常肝细胞HL-7702凋亡的拮抗作用研究

目的：探讨氯化锌（ZnCl：）和N-乙酰半胱氨酸（N—acetylcysteine,NAC）对镉所致人正常肝细胞HL-7702凋亡的拮抗作用。方法：体外培养的人正常肝细胞HL-7702分别以0、10、20、40、80、160Ixmol／L的氯化镉（CdCl2）处理24h,ZnCl,和NAC顸处理组分别在各浓度的CdCl2处理前以25．0、50．0、100．0、200．0μmol／L的氯化锌和2．5、5．0、10．0、20．0mmol／LNAC预处理24h,MTT法测定各组HL-7702细胞的相对存活率;流式细胞术Annexin—V—PI双染法检测细胞凋亡百分率。结果：随着镉处理浓度的增加,氯化镉对细胞活力的抑制作用增强,40、80、160ixmol／L的镉处理组细胞相对存活率明显降低,50ixmol／L锌预处理组在CdCl：剂量为40、80μmol／L时,细胞相对存活率显著高于相应剂量的单纯镉处理组（P〈0．01）,10mmol／LNAC预处理组只在40mmol／LCdCl2组细胞相对存活率显著高于相应剂量的单纯镉处理组（P〈0．05）;与0μmol／L镉处理组比较,40、80、160μmol／L镉处理组HL-7702细胞的凋亡百分率显著升高（P〈0．01）;与40μmol／L镉处理组比较,100μmol／L锌预处理组细胞凋亡率显著降低（P〈0．01）;5．0、10．0、20．0mmol／LNAC预处理可有效拮抗镉诱导的HL-7702细胞凋亡（P〈0．05）。结论：锌和NAC对镉致HL-7702细胞损伤和凋亡有明显的拮抗作用。     

大黄酸-雌酮对大鼠成骨细胞增殖和分化的作用

【目的】研究大黄酸-雌酮（LC-1）对原代培养大鼠成骨细胞增殖和分化的作用。【方法】酶消化法分离培养SD乳鼠颅盖骨成骨细胞；采取MTT法测定细胞增殖，磷酸苯二钠法（pNPP）测定细胞内外碱性磷酸酶（ALP）活性，研究不同浓度LC-1对成骨细胞增殖和分化能力的影响，并与雌酚酮和大黄酸的作用进行比较。【结果】给药3d后，与空白对照组相比：10^-6mol／L LC-1组、10^-7mol／L LC-1组和10^-7mol／L雌酚酮组明显促进成骨细胞增殖和增加细胞内外ALP活性（P〈0．05）；大黄酸抑制成骨细胞增殖，其中10^-6mol／L组有明显差异（P〈0．05），同时有增加细胞ALP活性的趋势，但无统计学差异。【结论】大黄酸-雌酮在体外可以促进成骨细胞增殖和分化。     

不同浓度淫羊藿苷对大鼠成骨细胞增殖、分化的影响

目的：观察不同浓度淫羊藿苷对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化及功能的影响。方法：利用酶消化法从新生小鼠颅盖骨中分离和培养成骨细胞;用组织化学染色和矿化结节法进行细胞鉴定;用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测不同淫羊藿苷浓度对大鼠成骨细胞的增殖、分化作用;同时通过检测成骨细胞碱性磷酸酶的活性,以观察淫羊藿苷对成骨细胞功能的影响。结果：与各浓度组比较,10μg/L淫羊藿苷对成骨细胞的生长增殖、分化均有促进作用,且作用最强,最为持久。结论：浓度为10μg/L的淫羊藿苷能显著促进成骨细胞增殖,并增强其成骨活性。     

雌激素受体和过氧化物酶体增殖物激活受体γ介导大豆苷原对骨形成的量效作用

目的：研究不同剂量大豆苷原（daidzein,DAI）对成骨细胞骨形成的作用及雌激素受体（estrogen receptor,ER）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ）对DAI促进骨形成的调节作用。方法：以培养的未经处理的人类胎儿成骨细胞（human fetal osteoblast,hFOB）为对照组,用17β-戊酸雌二醇（β-estradiol-17-valerate,E2）和不同浓度DAI分别处理hFOB72h后,噻唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）法测定细胞增殖情况,4-硝基苯基磷酸二钠盐（4-nitrophenylphosphate disodiumsalt,PNPP）偶氮法测定成骨细胞碱性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）活性。用ER拮抗剂ICI182780、ERα拮抗剂MPP（methyl-piperidino-pyrazole）、PPARγ拮抗剂GW9662分别阻断受体ER、ERα和PPARγ后,再给予E2及不同浓度的DAI处理,MTT法检测成骨细胞增殖情况并计算细胞增殖率,PNPP偶氮法测定ALP水平。结果：随着DAI剂量的增加,成骨细胞增殖率递减,DAI10-9mol/L组较对照组显著升高,DAI10-5mol/L组较对照组显著降低（P〈0.05）。随着DAI剂量的增加,成骨细胞ALP水平递减,但差异无统计学意义（P〉0.05）。ICI182780阻滞ER后,E2组,DAI10-9、10-7及10-5mol/L组的细胞增殖率分别为88.16%、76.30%、81.18%、83.19%,均显著低于阻滞前（P〈0.05）;MPP单纯阻滞ERα后,E2组,DAI10-9、10-7及10-5mol/L组的细胞增殖率分别为69.78%、63.31%、70.71%、78.43%,均显著低于阻滞前（P〈0.05）。MPP阻滞后,DAI10-9mol/L组的ALP水平显著低于阻滞前（P〈0.05）。GW9662阻滞PPARγ后,E2组,DAI10-9、10-7及10-5mol/L组的细胞增殖率分别为103.14%、96.99%、112.88%和122.22%,其中DAI10-7及10-5mol/L组均较阻滞前显著升高（P〈0.05）,DAI10-9mol/L组轻度降低但差异无统计学意义。DAI10-5mol/L组的ALP水平较阻滞前显著升高（P〈0.05）。结论：DAI的骨保护作用具有剂量依赖性的双相作用特点,即低剂量DAI促进成骨细胞增殖,高剂量DAI抑制成骨细胞增殖。低剂量DAI主要通过作用于ER促进成骨细胞增殖和分化,对PPARγ的作用不明显;高剂量DAI主要通过作用于PPARγ抑制成骨细胞增殖和分化,同时也可通过作用于ER产生一定促进成骨细胞增殖的作用。     

槐角苷及染料木素对成骨细胞生物学特性的影响

目的：比较槐角苷及染料木素对成骨细胞生物学特性的影响。方法：成骨细胞由新生24h SD大鼠头盖骨分离得到。通过细胞增殖率测定、碱性磷酸酶活性测定、茜素红染色矿化结节形态计量方法,对比槐角苷和染料木素在体外对成骨细胞骨形成功能的影响。利用基因克隆和报告基因方法,检测槐角苷和染料木素对人骨保护素（osteoprotegerin,OPG）启动子活性的作用,观察两者对骨保护素基因转录活性的调节。结果：体外培养的成骨细胞在1和0．1μmol／L槐角苷的干预下,均显示增殖刺激作用（与对照组比较P〈0．05）。10μmol／L染料木素使细胞增殖受抑制,但0.1μmol／L染料木素则显示增殖刺激作用（与对照组比较P〈O．05）。槐角苷在实验的各种浓度中均能提高ALP活性,而染料木素只在0．1μmol／L浓度才能提高ALP活性。槐角苷在10、1和0．1μmol／L浓度对成骨细胞的矿化总面积较对照组分别提高了73％、138．6％和114．3％,而染料木素各个浓度下成骨细胞矿化总面积均减少。10、1和0．1μmol／L浓度槐角苷干预后检测报告β-半乳糖苷酶基因（LacZ）活性均增加,但染料木素仅在0．1μmol／L浓度对LacZ活性有增强作用（与对照组比较P〈0．05）。结论：槐角苷能够促进成骨细胞的增殖、分化和矿化功能,与染料木素比较,不出现对成骨细胞成骨功能的抑制作用。而对于成骨细胞产生的破骨细胞抑制因子骨保护素,较染料木素有更强的上调作用。     

骨愈1号药物血清对成骨细胞增殖分化功能的影响

目的观察中药骨愈1号药物血清对成骨细胞增殖、分化以及矿化的影响。方法从新生SD大鼠颅骨获取成骨细胞进行培养，取第3代成骨细胞进行试验，将其分为4组，在各组培养液中分别加入不灌胃骨愈1号的新西兰兔血清（对照组）和灌胃骨愈1号浓度分别12．5g／Kg、25g／Kg、50g／Kg的新西兰兔血清（高、中、低剂量组）。用MTT法测定细胞增殖功能；用对硝基苯基磷酸二钠法测定碱性磷酸酶（ALP）活性；用茜素红染色法，在40倍光镜下作矿化结节计数。结果与对照组比较，骨愈1号药物血清高、中、低剂量组在MTT显色的OD值、ALP活性和矿化结节数均明显升高（P〈0.01或者P〈0.05），且高剂量组优于低剂量组（P〈0.01或者P〈0.05），在提高ALP活性方面，高剂量组优于中剂量组（P〈0.05）。结论骨愈1号具有促进成骨细胞增殖、分化及矿化作用，且其作用呈剂量相关性。     

淫羊藿提取液与雌二醇联合用药对大鼠成骨细胞的作用

目的 观察淫羊藿提取液（Epimedium Extract, EE）和雌二醇（17β- Estradiol, E2）联合使用对体外培养大鼠成骨细胞增殖和分化的影响。方法 用酶消化法分离新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞。用基础培养基培养3d后获得未分化成骨细胞（undifferenciation osteoblast,udOB）,继续用条件培养基培养3d定向诱导分化为成骨细胞（differenciation osteoblast, dOB）,分别以低剂量（1mg/L）、中剂量5mg/L）及高剂量（10mg/L）EE与10μM E2联合干预48h,检测细胞增殖率、碱性磷酸酶（Alkline phosphatase,AKP）比活性及骨连接素（osteonectin,ON）基因mRNA水平。结果 对udOB,高剂量联用组的增殖率及各联用组的AKP活性显著高于其它组,但ON的mRNA水平没有显著性差异;对dOB,高剂量联用组的增殖率也明显高于其它组,但各联用组的AKP活性较对照组降低,而ON的mRNA水平上调。结论 EE和E2联合使用,较低剂量EE即有协同促进成骨细胞增殖作用,但高剂量EE的协同促增殖效应更强,而协同促分化作用主要表现在成骨细胞的分化早期,对分化成熟的成骨细胞有促成骨作用。     

论《伤寒论》的六病、六时、六证

《伤寒论》的辨证论治理论体系是以三阴三阳为基础构建的,三阴三阳是中医的时位观和属性论。《伤寒论》中“六病”和“六证”是两个不同概念,六病讲病时,六证辨表里寒热,应加以区别。这也是造成《伤寒论》千余年来以经解病的根源,也是引起三阴三阳界属不清的重要原因。本文旨在探讨其含义和相互关系,为《伤寒论》的研究发表一己之见。1六病是一种时间分类方法《伤寒论》编排体例是按六病分篇,每篇篇题都是“辨某某病脉证病治”,条首也多冠以“某某病”。六病皆有发热,其热型和病痛的时间是有特点和规律的。笔者认为“六病”是和“六病时”密…     

原子吸收火焰法测定合力康粉剂中钾、钠、钙、镁、锌、铁的含量

目的：采用原子吸收火焰法测定合力康粉剂中钾、钠、钙、镁、锌、铁的含量。方法：用盐酸-硝酸-水(9：1．5：25)混酸湿法水浴加热消化处理样品，硝酸锶作镁离子释放剂，乙炔-空气火焰原子吸收法。结果：钾、钠、钙镁、锌、铁加样回收率与RSD(n=5)分剐为98．3％、0．8％；100．8％、3．2％；101．8％、1．3％；102．5％、2．1％；101．2％、2．8％；97．4％、2．4％。特征浓度分别为(产生0．0044吸收所需要的浓度，μg/m1)0．02、0．01、0．07、0．003、0．0l、0．06。结论：该方法简便、快速、结果准确，适用于合力康粉剂粉剂中钾、钠、钙、镁、锌、铁的含量测定。     

蝌蚪中铜、锌、镁、铁、钙含量测定

目的 :探讨蝌蚪的化学成分。方法 :用火焰原子吸收分光光度法测定蝌蚪中无机元素的含量。结果 :蝌蚪中的无机元素铜、锌、镁、铁、钙的质量分数分别为 :0 .0 72mg·g-1、0 .12 4mg·g-1、3.316mg·g-1、5 .776mg·g-1和31.5 1mg·g-1。结论 :蝌蚪中无机元素钙的含量很高     

海洛因依赖者HIV、CT、UU、HPV、HSV-2、TP感染情况分析

海洛因依赖(俗称吸毒)是当今世界一大公害,全世界吸毒人数呈上升趋势,贵州省是全国几大毒品危害严重的省份之一,在毒品问题上面临着严峻的形势.据有关资料统计,全球22％艾滋病患者、32％梅毒、尖锐湿疣患者,感染者都与吸毒相关[1].卖淫、吸毒人员是性病、艾滋病的高发人群,由于缺乏安全套使用意识或部分吸毒人员共用注射器注射毒品,极易感染HBV、HIV和梅毒等[2].鉴于海洛因依赖者无菌意识淡薄,有共用注射器及性乱史行为,感染人类免疫缺陷病毒(HIV)、沙眼衣原体(CT)、解脲脲原体(UU)、尖锐湿疣(HPV)、单纯疱疹病毒(HSV-2)、梅毒(TP)的几率比其他人群高,为此我们对250例海洛因依赖者与200例健康人群进行了HIV、CT、UU、HPV、HSV-2、TP指标调查对比研究,现报告如下.     

Trends in prevalence,awareness, treatment,and control of hypertension in the United States, 1988-2000

Context  Prior analyses of National Health and Nutrition Examination Survey (NHANES) data through 1991 have suggested that hypertension prevalence is declining, but more recent self-reported rates of hypertension suggest that the rate is increasing. Objective  To describe trends in the prevalence, awareness, treatment, and control of hypertension in the United States using NHANES data. Design, Setting, and Participants  Survey using a stratified multistage probability sample of the civilian noninstitutionalized population. The most recent NHANES survey, conducted in 1999-2000 (n = 5448), was compared with the 2 phases of NHANES III conducted in 1988-1991 (n = 9901) and 1991-1994 (n = 9717). Individuals aged 18 years or older were included in this analysis. Main Outcome Measures  Hypertension, defined as a measured blood pressure of 140/90 mm Hg or greater or reported use of antihypertensive medications. Hypertension awareness and treatment were assessed with standardized questions. Hypertension control was defined as treatment with antihypertensive medication and a measured blood pressure of less than 140/90 mm Hg. Results  In 1999-2000, 28.7% of NHANES participants had hypertension, an increase of 3.7% (95% confidence interval [CI], 0%-8.3%) from 1988-1991. Hypertension prevalence was highest in non-Hispanic blacks (33.5%), increased with age (65.4% among those aged =" BORDER="0">60 years), and tended to be higher in women (30.1%). In a multiple regression analysis, increasing age, increasing body mass index, and non-Hispanic black race/ethnicity were independently associated with increased rates of hypertension. Overall, in 1999-2000, 68.9% were aware of their hypertension (nonsignificant decline of -0.3%; 95% CI, -4.2% to 3.6%), 58.4% were treated (increase of 6.0%; 95% CI, 1.2%-10.8%), and hypertension was controlled in 31.0% (increase of 6.4%; 95% CI, 1.6%-11.2%). Women, Mexican Americans, and those aged 60 years or older had significantly lower rates of control compared with men, younger individuals, and non-Hispanic whites. Conclusions  Contrary to earlier reports, hypertension prevalence is increasing in the United States. Hypertension control rates, although improving, continue to be low. Programs targeting hypertension prevention and treatment are of utmost importance.      

微波消解火焰原子吸收光谱法测定奶粉中铁镁钾钠钙

目的：采用微波消解对奶粉进行前处理,火焰原子吸收光谱法测定奶粉中铁、镁、钾、钠、钙的含量。结果：测定上述各种元素的相对标准偏差（n=6）在0．9％-2．6％之间。各元素的标准曲线具有良好的线性关系,线性相关系数在0．9990至0．9999之间。各元素加样回收率在98．6％-101．0％之间。