抗坏血酸对创伤性脑损伤的保护作用

目的 探讨抗坏血酸对颅脑创伤后引起的继发性脑损伤的保护作用. 方法 将实验大鼠随机分为假手术+生理盐水组、假手术+抗坏血酸组、打击+生理盐水组、打击+抗坏血酸组,每组12只. 建立中度颅脑损伤模型,颅脑创伤后24 h进行神经功能损伤评分,测定脑含水量及血脑屏障的通透性;采用Western blot法测定颅脑创伤后24 h的损伤侧脑组织中肿瘤坏死因子α( TNF-α)和水通道蛋白4 ( AQP-4 )的表达情况. 结果 与打击+生理盐水组比较,打击+抗坏血酸组的神经功能损伤程度减轻(P<0. 05),脑水肿程度降低(P<0. 05),血脑屏障的破坏程度明显降低(P<0. 05),TNF-α和AQP-4的含量降低( P<0. 05 ). 结论 抗坏血酸可以减轻打击后脑水肿和血脑屏障的破坏,起到脑保护的作用.     

复方三七纳米颗粒对颅脑损伤大鼠TNF-α、IL-2及IL-6的影响

目的:探讨复方三七纳米颗粒对颅脑损伤大鼠血清TNF-α、IL-2及IL-6的影响,验证复方三七纳米颗粒对颅脑损伤后机体的保护作用。方法:将96只大鼠随机分为假手术组、创伤模型组、复方三七纳米颗粒组和尼莫地平组,分别予生理盐水、生理盐水、复方三七纳米颗粒、尼莫地平灌胃5d,于造模后第1、3、5d腹主动脉穿刺取血留取标本,观察四组血清TNF-α、IL-2及IL-6含量。每组每个时相点随机选8只完成检测。结果:四组血清TNF-α、IL-2及IL-6比较,时间主效应和干预主效应差异有统计学意义(P<0.05)。结论:复方三七纳米颗粒可降低颅脑损伤大鼠血清中TNF-α、IL-6含量,增加IL-2的表达。     

尼莫地平对癫痫大鼠海马Ca2+浓度及Ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα表达的影响

目的 探讨尼莫地平( nimodipin,NIM)对戊四氮( pentylenetetrazol,PTZ) 点燃癫痫大鼠空间学习记忆能力及海马细胞内游离 Ca2+浓度([Ca2+]I)、ca2+/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱα(calcium / calmodulin-dependent protein kinase Ⅱa,CaMKⅡα 蛋白表达的影响.方法 将动物分为正常对照组、PTZ 组和 NIM + PTZ组,采用 PTZ 慢性点燃癫痫模型,应用 Mor-ris 水迷宫观察各组大鼠空间学习记忆能力,运用流式细胞仪检测海马细胞内[Ca2+]I变化,Western blot方法测定 CaMKⅡα蛋白的表达.结果 PTZ 组大鼠空间学习记忆能力受损,其海马细胞内[Ca2+]I明显升高(P<0.05),CaMKⅡα蛋白水平较正常对照组减少(P<0.05);与 PTZ 组比较,NIM + PTZ 组大鼠空间学习记忆能力好转,其海马细胞内[Ca2+]I;下降(P<0.05),CaMKⅡα蛋白水平升高(P<0.05).结论 PTZ 点燃癫痫大鼠海马存在钙超载及CaMKⅡα的表达异常,由此引起大鼠空间学习记忆能力受损;NIM 可以降低细胞内[Ca2+]I;,提高 CaMKⅡα的表达,改善癫痫大鼠的学习记忆能力.     

创伤性脑水肿合并海水淹溺大鼠IL-1β和TNF-α表达的变化

目的:观察创伤性脑水肿合并海水淹溺后大鼠血清、脑组织、肺组织IL-1β和TNF-α含量的变化,探讨其变化规律及临床意义.方法:脑侧方液压打击伤加气管内灌注海水建立大鼠创伤性脑水肿合并海水淹溺模型.伤后1、6、12、24及48 h检测大鼠脑、肺组织含水量及脑、肺组织匀浆和血清中IL-1β、TNF-α的含量;观察伤后24 h脑、肺组织病理学变化.以颅脑创伤合并淡水淹溺、单纯颅脑创伤、单纯海水淹溺、假手术大鼠作为对照.结果:脑损伤合并海水淹溺后,大鼠脑组织含水量较单纯脑损伤、单纯海水淹溺以及脑损伤合并淡水淹溺均显著增高(P＜0.05);脑组织、肺组织IL-1β和TNF-α含量有显著变化.脑、肺组织病理学损伤明显.结论:海水的损伤性作用是重要致伤因素之一,炎症反应在创伤性脑水肿合并海水淹溺性肺水肿的病理生理过程中起了重要作用.     

番茄红素对大鼠创伤性颅脑损伤治疗作用的实验研究

目的 探讨番茄红素对颅脑损伤大鼠脑组织氧化应激及炎症反应的影响.方法 健康SD大鼠随机分为3组.采用自由落体方法造模,造模后第24小时、72小时行大鼠一般状况检查,并采用ELISA法检测脑组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)、钙离子(Ca2+)、TNF-α和IL-1β水平.结果 在造模后第24小时、72小时,模型组较假手术组脑组织GSH-PX水平降低,MDA、Ca2+、TNF-α和IL-1β水平升高(P<0.05);番茄红素组较模型组GSH-PX水平升高,MDA、Ca2+、TNF-α和IL-1β水平降低(P<0.05).结论 番茄红素在大鼠颅脑损伤后,能抑制脑组织氧化应激及炎症反应,提示番茄红素具有脑保护作用.     

蒺藜皂苷对脑缺血再灌注大鼠炎性细胞因子表达的影响

目的：探讨蒺藜皂苷对大鼠缺血再灌注损伤后脑组织的保护作用及其机制。方法：将SD大鼠随机分为假手术组、模型组和蒺藜皂苷治疗低剂量组和高剂量组,采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤模型。脑缺血再灌注24h后检测大鼠神经功能损伤评分;干湿重法测定脑含水量;ELISA 法检测大鼠脑组织及血清TNF-α、IL-6和IL-10的含量。结果：与模型组相比较,蒺藜皂苷治疗组可明显减轻脑缺血再灌注大鼠神经功能损伤和脑水肿程度,降低缺血脑组织和血清TNF-α和IL-6的含量、增加缺血脑组织和血清IL-10的含量。结论：蒺藜皂苷对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与其增强IL-10的表达,降低TNF-α和IL-6的表达,从而抑制炎症反应、减轻大脑神经功能损伤有关。     

芦荟大黄素对大鼠巨噬细胞[Ca2+]i和释放TNF-α的影响

目的研究芦荟大黄素对正常的和细菌脂多糖(LPS)刺激的大鼠腹腔巨噬细胞(PMφ)释放肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和细胞内自由Ca2 浓度([Ca2 ]i)的影响。方法应用MTT法检测TNF-α量和细胞钙离子成像系统检测单细胞内[Ca2 ]i的动态变化。结果芦荟大黄素可剂量依赖性活化正常PMφ释放TNF-α,同时诱发正常PMφ[Ca2 ]i呈波动式变化,[Ca2 ]i升高来源于胞外钙内流和胞内钙池释放钙。芦荟大黄素对LPS刺激PMφ升高[Ca2 ]i和释放TNF-α的影响有较复杂的剂量依赖性特征,即芦荟大黄素低浓度时对[Ca2 ]i升高有明确的抑制作用;其对TNF-α释放的抑制呈随浓度增高而减弱的趋势。大黄酸可增强芦荟大黄素对LPS升高[Ca2 ]i的抑制作用。结论芦荟大黄素对PMφ[Ca2 ]i和释放TNF-α表现出双向调节作用,其对[Ca2 ]i动力学的调制与其调节PMφ释放TNF-α间有明确的对应性。     

大鼠脑损伤后核因子-κB与肿瘤坏死因子-α的表达

目的探讨大鼠脑损伤后脑组织核因子-κ B(NF-κ B)活性和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达变化的规律和临床意义.方法将44只SD大鼠随机分成假手术对照组、创伤组和吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC)治疗组.采用自由落体致伤法制作脑外伤模型.每组分别在术后6、24和72h收取脑组织标本,采用凝胶电泳迁移率分析法测定脑组织NF-κB活性;RIA法测定脑组织TNF-α蛋白水平;并测量脑组织含水量.结果大鼠脑损伤后脑组织NF-κ B活性和TNF-α水平以及含水量均显著增高(均P<0.01);与创伤组比较,PDTC治疗组脑组织NF-κ B活性、TNF-α水平及含水量均显著降低(P<0.05或0.01).结论NF-κ B活化后可上调TNF-α的表达,参与脑损伤后继发性炎症反应过程,抑制NF-κ B活化可以减轻创伤性脑水肿.     

TNF-α在吸烟大鼠脑组织的表达及意义

目的：观察不同吸烟量大鼠脑组织TNF-α的表达,初步探讨吸烟导致脑缺血的发病机制。方法：建立吸烟动物模型,将60只健康Wistar大鼠随机分为A组（正常对照组）、B组（非吸烟对照组）、C组（短期吸烟组）、D组（长期小量吸烟组）、E组（长期大量吸烟组）、F组（戒烟组）,应用免疫组织化学方法观察各组大鼠脑组织TNF-α的表达。结果：TNF-α阳性细胞呈棕色,A组及B组大鼠脑组织中TNF-α阳性细胞表达极少,两组比异差较无显著性（P〉0.05）,C-E各组表达比其它各组明显增多,F组TNF-α表达下降,与其它各吸烟组相比差异有显著性（P〈0.05）。结论：吸烟导致大鼠脑组织TNF-α的表达升高,戒烟后表达下降,TNF-α表达升高可能是吸烟导致脑梗死的主要途径之一。     

大鼠颅脑损伤中肿瘤坏死因子-α及核转录因子-κB的变化及其意义

目的:通过观察肿瘤坏死因子(TNF-α)以及核转录因子κB(NF-κB)在颅脑损伤后脑组织中的表达变化,初步探讨两者在颅脑损伤后继发性脑损伤中的意义。方法:健康成年雄性SD大鼠64只,体重230-310g,随机分成对照组8只和颅脑损伤组56只,颅脑损伤组在外伤后1h、3h、6h、12h、24h、3d、7d处死,每组处死8只。取损伤灶周围的脑组织进行含水量以及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的测定,并进行病理切片观察其病理变化,最后用免疫组化法检测脑组织中TNF-α和NF-κB的含量。结果:1成功构建大鼠颅脑损伤的模型,颅脑损伤后的各时间点神经功能评分差异无统计学意义(P>0.05);2颅脑损伤组大鼠的脑组织含水量较对照组显著升高,并且在3d达到高峰,7d时逐渐下降,但仍高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);3大鼠颅脑损伤后切片表现为有大量的炎症细胞积聚,并有不同程度的脑细胞水肿,随着时间的推移逐渐加重,在第7d时,水肿较之前减轻,但仍有大量的炎性细胞浸润以及少量的纤维组织增生;4大鼠颅脑损伤后1h开始,损伤灶周围的脑组织中MDA的含量显著升高,且在之后的时间内持续升高,在3d时达到高峰,随后下降,7d时表达仍然高于对照组,而损伤组的SOD活性及GSH的活力明显降低,在7d时仍低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);5TNF-α以及NF-κB在颅脑损伤组中含量显著高于对照组,且在颅脑损伤后1h开始升高,在3d左右达到高峰,7d时稍有降低,但仍高于对照组,为高表达状态。结论:颅脑损伤后TNF-α以及NF-κB的变化趋势与继发性脑损伤的临床表现一致,参与了继发性脑损伤的病理过程。     

全身亚低温对新生鼠缺氧缺血性脑病脑组织Ca~(2 )及含水量的影响

目的　研究全身亚低温对缺氧缺血性脑病 (HIE)新生大鼠脑组织含水量与Ca2 含量的影响。方法　 35只新生大鼠随机分为 5组。吸入 8%O2 和 92 %N2 混合气体建立HIE模型 ,低温处理后 2 4h取海马脑组织 ,测定其水分和Ca2 含量 ,对各组结果进行比较。结果　HIE后立即实施亚低温脑水肿和组织内Ca2 含量明显低于HIE或HIE 3h后再实施亚低温。实验组与对照组相比 p <0 .0 5。结论　HIE后立即实施亚低温能明显减少脑组织的含水量并能降低脑组织内Ca2 的含量。HIE后 3h再实施亚低温对减轻脑水肿的效果比较差。     

麝香配伍冰片对颅脑损伤大鼠脑组织含水量及水通道蛋白-4表达的影响

【目的】探讨麝香配伍冰片对脑外伤模型大鼠脑组织含水量、水通道蛋白-4(AQP-4)表达的影响机制。【方法】雄性大鼠随机分为假手术组、模型组和麝香配伍冰片组,用Feeney法造成大鼠脑挫裂伤模型,干湿重法测定脑组织含水量,并采用免疫组化方法检测脑组织AQP-4蛋白的表达。【结果】模型组大鼠伤后2 d伤侧脑组织含水量、伤灶周围AQP-4蛋白表达水平均明显高于假手术组(P<0.05);麝香配伍冰片治疗组脑组织含水量、AQP-4表达水平均较模型组降低(P<0.05)。【结论】麝香配伍冰片可以明显减轻创伤后脑水肿,其作用可能与抑制AQP-4在损伤脑组织中的表达有关。     

积雪草酸对糖尿病心肌病心肌细胞VDAC的表达及Ca2+超载的影响

目的探讨积雪草酸(asiatic acid,AA)对高糖环境中心肌细胞线粒体电压依赖性阴离子通道(voltage-dependent anion channel, VDAC)的表达和Ca2+超载的影响.方法 将培养72小时的SD乳鼠心肌细胞随机分为三组:正常对照组(5mmol/L GS)、高糖培养组(25mmol/L GS)、高糖+AA组(25mmol/L GS+10、20、40、80nmol/L AA),继续培养24小时后,Western blot法检测VDAC表达变化;WST法测定心肌细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性,比色法测定细胞内丙二醛(MDA)含量;流式细胞仪检测心肌细胞内Ga2+含量.结果 与对照组相比,高糖培养组心肌细胞线粒体VDAC表达量及SOD活性明显降低(P<0.05);细胞内Ca2+及MDA含量显著升高(P<0.05).加入AA处理后,VDAC表达量及SOD活性明显上升(P<0.05);细胞内MDA含量及胞内Ca2+含量显著降低(P<0.05);SOD活性与VDAC表达量呈正相关而与细胞内Ca2+呈负相关;MDA含量与VDAC表达呈负相关而与细胞内Ca2+呈正相关.结论 AA可能通过减轻线粒体氧化应激而提高线粒体VDAC表达量进而减轻细胞内Ca2+超载.     

大鼠去骨瓣减压术后水孔蛋白-4表达变化的实验研究

目的：研究去骨瓣减压术对大鼠创伤性脑损伤后脑水肿、水孔蛋白-4（AQP-4）表达的影响。方法：应用改良Feeney’s自由落体脑损伤打击装置制成大鼠创伤性脑损伤模型,分为假手术组（SO组）、对照组（C组）及去骨瓣减压组（DC组）,各组在损伤后再分为6、12、24、72、120 h及168 h等6个时间点断头取脑损伤区组织。分别利用干湿重量法测量脑组织含水量和Western-Blot检测AQP-4蛋白的表达。结果：大鼠去骨瓣减压组脑组织含水量及AQP-4蛋白表达呈现先升高后降低的趋势,于伤后24 h达高峰后逐渐下降。与C组相比,上述指标含量均有所下降：脑组织含水量在24、120、168 h差异有统计学意义（P〈0.05）,72 h差异有高度统计学意义（P〈0.01）;AQP-4蛋白表达在12、120 h时间点有统计学意义（P〈0.05）,24、168 h时有高度统计学意义（P〈0.01）。结论：创伤后大鼠脑组织脑水肿与AQP-4表达上调密切相关;去骨瓣减压术可减轻脑水肿,减缓AQP-4表达。该手术对创伤性脑损伤的保护机制可能与减缓AQP-4蛋白表达,从而减轻脑水肿和继发性脑损伤,保护脑组织有关。     

siRNA沉默水通道蛋白-4表达及对脑出血后脑水肿损伤的影响

目的探讨siRNA沉默水通道蛋白-4（AQP-4）表达对颅脑损伤（TBI）后创伤性脑水肿的影响。方法90只雄性sD大鼠进行创伤性脑水肿模型制备,随机分为3组,TBI组大鼠不接受任何治疗;AQP-4siRNA组进行siRNA质粒干扰;空载质粒组处理方法同AQP-4siRNA组,但所转质粒不含AQP-4siRNA片段。而后观测大鼠神经功能缺损评分（NIHSS）、脑组织AQP-4mRNA的表达及脑组织含水量。结果治疗后第7、14、21、28天,3组NIHSS均有下降,AQP4siRNA组〈空载质粒组〈TBI组,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。治疗后第1、3、5、7天,TBI组、空载质粒组AQP-4mRNA的持续高表达,而AQP-4siRNA组则明显改善（P〈0．05）。造模后3组大鼠脑组织含水量逐渐增加,第3天达到高峰,而后逐渐下降,TBI组与空载质粒组无明显差异（P〉0．05）,而AQP-4siRNA组低于TBI组、空载质粒组（P〈0．05）。结论通过siRNA沉默AQP-4表达可明显改善TBI后创伤性脑水肿严重程度,缩短脑功能恢复时间。     

广州管圆线虫感染大小鼠后脑内水通道蛋白4表达水平研究

目的研究水通道蛋白4（AQP-4）在广州管圆线虫感染大小鼠脑组织中的表达水平及其与脑水肿的关系。方法在不同感染时期（0d、7d、14d、21d）,用ReahimePCR法检测大鼠感染不同时间组,及米诺环素给药＋感染组和单纯感染组小鼠脑组织中AQP-4的表达水平,测定各组小鼠脑组织含水量。结果大鼠感染广州管圆线虫后脑组织中AQP-4的表达水平在7d时有升高,而其他时间都无明显变化。小鼠感染广州管圆线虫后,脑组织中的AQP-4水平明显升高,且成持续升高状态。用米诺环素抑制小胶质细胞后,给药组小鼠脑内AQP-4的水平明显下降。脑组织含水量也低于单纯感染组。结论AQP-4与广州管圆线虫感染所致的小鼠脑水肿密切相关,小胶质细胞可能是参与调节这-过程的重要细胞。     

糖皮质激素对脑出血大鼠脑水肿的TNF-α影响研究

目的：探讨糖皮质激素地塞米松对大鼠脑出血后脑水肿的影响以及对TNF-α、TRADD、Caspase3、神经细胞凋亡的影响。方法：采用胶原酶注入法制作大鼠ICH模型;将制模成功的大鼠分为ICH组和地塞米松治疗组（治疗组）,另设假手术组（对照组）,每组36只;各组大鼠分别在造模后12h、1d、3d断头取脑组织检测脑水含量以及TNF-α、TRADD、Caspase3的蛋白表达,并进行TUNEL染色。结果：ICH组在12h、1d、3d脑水含量、TNF-α、TRADD、Caspase3蛋白表达以及凋亡指数均高于对照组（P〈0.05）;治疗组在上述时间点的各项指标均低于ICH组（P〈0.05）。结论：地塞米松可降低ICH模型大鼠脑组织TNF-α、TRADD、Caspase3表达及减少神经细胞凋亡。     

凝血酶预处理减轻凝血酶所致的脑水肿

目的:探讨凝血酶预处理对脑水肿的影响,检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在脑组织内的表达并分析其与凝血酶所致脑水肿的关系.方法:建立大脑皮质内血肿模型.选择健康成年SD大鼠40只,随机分为作为对照的未预处理组(ST组)和小剂量凝血酶(1 U)预处理组(TT组).观察不同时相脑组织含水量及钠含量的变化及TNF-α在脑组织内的表达.结果:ST组脑组织含水量和钠含量明显高于TT组,且第1天高于第3天.TT组与ST组脑组织内TNF-α阳性表达与含水量的变化相一致.结论:凝血酶预处理可以减轻凝血酶所致的脑水肿;TNF-α的表达与凝血酶所致的脑水肿有关.     

胆红素脑病NMDA受体的过度活化机制

目的　探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体水平胆红素脑病发生机制与防治措施。方法　制作胆红素脑病动物模型基础上,在体脑内微透析提取兴奋性氨基酸(EAA)神经递质,HPLC检测天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly),并给予模型动物NMDA受体拮抗剂GAPA干预,电镜检测脑组织超微结构,荧光检测脑组织ATP与细胞内Ca2+含量。结果　胆红素毒性脑组织ATP含量显著降低,细胞外Gly与细胞内Ca2+显著升高;GAPA不影响胆红素毒性脑组织ATP含量,但可显著降低细胞内Ca2+,减轻胆红素毒性脑水肿。结论　NMDA受体过度活化致细胞内Ca2+超载参与介导胆红素神经毒性,NMDA受体拮抗剂可望成为胆红素神经毒性防治的重要途径。     

大鼠创伤性脑水肿早期水通道蛋白 AQP-4的表达及意义

目的探讨水通道蛋白4（AQP-4）在大鼠创伤性脑水肿早期的表达及意义。方法按Feeney自由落体撞击法建立大鼠创伤性脑损伤（TBI）模型,用干／湿法测定大鼠TBI后不同时相脑组织含水量,并采用免疫组织化学方法检测脑组织AQP-4蛋白的表达．采用Western Blot方法对AQP-4蛋白进行半定量分析。结果TBI后48小时伤侧脑水肿达高峰,同时水通道蛋白AQP-4在大脑半球表达降低（P〈0．05）,损伤侧大脑半球伤后48小时降低最为明显（P〈0．01）。AQP-4的表达与脑组织水含量呈负相关。结论脑损伤后,AQP-4表达降低与脑水肿的形成密切相关。