猴B病毒抗体及B病毒相关抗体ELISA检测结果比较

采用以人单纯疱病毒为抗原的ＥＬＩＳＡ法在国内外测得相同猕猴血清样本中的Ｂ病毒相关抗体阳性率分别为６５％和７０％。相同标本在则昨Ｂ病毒抗体阳性率为８５％。结果表明以ＨＳＶ－１为抗原不能检出全部Ｂ病毒感染动物。     

两种方法检测猕猴B病毒抗体的初步探讨

【摘要】用BV DIAdot Kit和BV EIA抗原片对本中心100份经HSV-1抗原片检测为阳性,150份HSV1抗体阴性的食蟹猴血清进行B病毒抗体检测。结果发现,BV DiAdot Kit对150份阴性血清的阳性检测出率为8．7％,而B、EIA的阳性检测率为18．o％,二者的符合率90．7%。后者阳性检测率明显高于前者。用上述两种方法对100份HSV-1抗体阳性血清（ - )进行检测发现,BV DLAdotKit和BV EIA的阳性检出率均为100％。后者价格低廉且对HSV-1抗体阴性血清的阳性检出率较高,值得在国内猕猴生产和出口单位大力推广。     

猕猴B病毒相关抗体调查

以人疱疹病毒Ⅰ型为抗原,用酶免疫法(EIA)比较了在不同生活环境中,猕猴B病毒相关抗体阳性率的差异:野外捕获猴组的阳性率为65.5％;自繁雌雄分笼群养猴组阳性率为26.7％;野外捕获后单只笼养组阳性率为33.1％。野外捕获组与其它两组之间的B病毒相关抗体阳性率差异极显著(P<0.01)。在野外捕获组中,B病毒相关抗体阳性率与动物年龄的增长成正相关(r=0.951,P<0.05)。在同一组标本上,用EIA技术检查确定的B病毒相关抗体阳性猴,与用DIA试剂盒检查确定的B病毒抗体阳性猴一致,表明用EIA检查的结果,可反映B病毒在猴群中的流行情况。作者还就建立无B病毒感染繁殖群提出初步意见。     

猕猴血清B病毒抗体三种检测方法的比较

目的对B病毒(B virus)抗体检测的3种方法进行比较,寻求准确、可靠、经济的检疫方法。方法对以HSV-1为抗原的玻片酶免疫法、B病毒为抗原的玻片酶法(EIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)的猕猴血清B病毒抗体检测结果进行比较。结果HSV-1为抗原的EIA与B病毒为抗原的EIA、ELISA检测结果符合率分别为97.7%和95.5%。结论HSV-1为抗原EIA的检测结果与B病毒抗原EIA和ELISA的检测结果一致性较好,可以做为初筛手段,且检测效果较好,投入资金相对最低,达到节约成本的目的。     

猿猴疱疹病毒B糖蛋白D的表达及抗原性的探讨

目的表达猴B病毒糖蛋白D(BVgD)并对其抗原性进行初步研究。方法应用体外原核表达BVgD,继而进行Ni离子亲和层析纯化。采用Western blotting对蛋白抗原性进行分析,评估其抗原潜力。结果完成了对BVgD的小量表达和纯化。Western blotting结果表明表达出的重组蛋白BVgD具有特异性结合猴B病毒抗体的能力。结论BVgD重组蛋白具有良好的抗原性,与HSV-1抗体无交叉反应。具有进一步开发的潜力,也为BVgD免疫原性等方面的进一步研究提供了条件。     

2003-2008年我国实验猴BV抗体检测结果及抗体水平变化规律的分析

目的 对近年来我国实验猴BV(猴疱疹病毒Ⅰ型)抗体检测结果进行比较分析,以了解我国实验猴BV感染情况及其抗体水平变化规律,为我国实验猴质量控制及标准化提供依据.方法 根据国标中ELISA方法,对2003～2008年我国11个单位送检的2个品种猴血清进行BV抗体检测,并对检测结果进行统计分析.结果 检测的4612份猴血清中,有1843份BV抗体呈阳性,阳性率为39.96%;6年中检测猴群BV抗体阳性率基本在30%～50%.幼年(≤2岁)、青年(2.1～4.0岁)、成年(4.1～6.5岁)、老年(≥6.5岁)4个不同年龄段猴BV感染率分别为26.28%、31.53%、53.74%、87.27%.不同年龄感染率差异显著(P＜0.01).雌猴BV感染率(35.91%)高于雄猴(34.93%),但两者差异不显著(P＞0.05).结论 不同年龄猴BV感染率不同,随着年龄的增长BV感染率升高.     

猴B病毒相关抗体及B病毒抗体检测的比较研究

本文比较了用ＨＳＶ－１（ＩＥＡ）和Ｂ病毒（ＩＦＡ）的方法检查猴Ｂ病毒相关抗体和Ｂ病毒抗体的结果：ＩＥＡ检查出的Ｂ病毒相关抗体阴性猴，经ＩＦＡ检查，全部为Ｂ病毒抗体阴性。用ＩＦＡ检查了Ｂ病毒相关抗体阴性的恒河猴，在单笼隔离饲养六个月后，有９８．３％的动物Ｂ病毒相关抗体仍为阴性，表明ＩＲＡ的阴性结果有较好的一致性。本文讨论了建立无Ｂ病毒感染猴群的可行性。     

猕猴SPF种群的建立及保持过程中B病毒抗体监测研究

目的 建立适合SPF猕猴种群建立与保持所需的B病毒抗体监测模式。方法 采用BV EIA及BVELISA等方法对本中心自繁自育仔猴从断奶开始进行BV感染情况跟踪。结果 从自繁自育猴中随机挑选218只断奶食蟹猴，92只断奶猕猴，经过近两年反复筛选得到25只SPF食蟹猴，9只SPF猕猴，此结果经美国BioReliatnce公司检测得到确认。结论 该模式能有效监测猕猴BV抗体变化，为本中心在国内建立猕猴SPF种群提供了有力的技术保障。     

B病毒抗原片在猕猴B病毒抗体检测中的应用

目的 建立8病毒玻片免疫酶法（BVEIA）。方法 与HSV－1玻片免疫酶法（HSV－1 EIA）及美国生产的B病毒DIA dot（BV DIA dot)试剂盒进行比较。结果 BV EIA法的阳性检出率比HSV－1 EIA法提高18．10％，比BV DIA dot法提高7．90％，达到国外同类产品的水平。结论 建议在临床上推广应用B病毒抗原片。     

两种HSV-1及猴B病毒相关抗体测定方法的比较

目的以人单纯疱疹病毒(HSV-1)做为抗原,利用空斑法和IFA法比较猴BV和人HSV-1阳性血清两种不同血清的中和能力的差异,建立一种实用、准确、可靠的病毒毒力的检测方法。方法首先,将HSV-1病毒悬液作连续的10倍稀释,取1 mL接种于已经长成单层的Vero-E6细胞上,用1%甲基纤维素覆盖,待其出现蚀斑后计数,算出病毒悬液中每毫升所含蚀斑单位,即滴定出HSV-1的TC ID50。同时,用免疫荧光方法(IFA)对猴和人疱疹阳性血清进行滴定,得到其血清的效价。其次,用滴定出的病毒液分别与两种阳性血清体外中和后,接种到单层的Vero-E6细胞上,用1%甲基纤维素覆盖,待其出现蚀斑后计数。最后,计算出其蚀斑减少率。结果用1%甲基纤维素作覆盖层的蚀斑数量平均为10-5PFU,能形成115~116个/mL蚀斑,形状呈黍米大小的规则圆形,其蚀斑边缘清晰。IFA滴定的人HSV-1阳性血清与猴BV阳性血清的中和抗体均为1∶80。人HSV-1和猴BV两种阳性血清的空斑减少率均为100%。结论确定了利用1%甲基纤维素做为覆盖层可得到清晰可靠的蚀斑,由此方法检测到用人HSV-1可以代替猴B病毒,筛查猴B病毒抗体。且为将来进行药物筛选和中和实验中利用病毒空斑法建立方便、可靠的方法。     

广州市机关人员乙肝病毒感染情况分析

目的 进一步了解广州市机关人员中HBV感染情况，为预防乙肝提供参考资料。方法对2003年1～10月广东省人民医院体检中心健康体检的4977名机关人员的血清HBV五项标记物HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc的结果进行统计分析。结果 本次受检人数4977人，HBsAg阳性率为9．52％，HBV感染率23．85％。男性HBsAg阳性率10．25％、HBV感染率25．12％；女性HBsAg阳性率8．48％、HBV感染率22．04％，男女之间差异有显性，男性高于女性。各年龄组之间HBsAg阳性率及HBV感染率差异有显性，以20～30岁、30～40岁、40～50岁3个年龄组为高，均高于50岁以上年龄组。结论 广州市机关体检人员HBsAg阳性率和HBV感染率仍然较高，故仍应重视加强乙肝防治工作，提高人们健康水平。     

河南省18岁以下人群甲型H1N1流感抗体水平调查分析

目的 了解河南省18岁以下人群甲型H1N1流感抗体水平,为甲流防控提供相关依据。方法 采用微量血凝抑制试验对国家卫生部“甲型H1N1流感血清学横断面调查”的2020人(≤18岁)进行甲型H1N1流感抗体水平检测。结果 河南省18岁以下人群血清抗体阳性率为29.60%,13~18岁、7~12岁、0~6岁阳性率分别为45.70%、25.67%、23.71%,各年龄组阳性率比较差异有统计学意义(χ2=80.07,P<0.01)。城乡有差异(郑州市35.47%、其他市36.00%、农村23.67%)。接种疫苗人群抗体水平(63.89%)显著高于未接种人群(25.91%),χ2=117.18,P<0.01;有无流感样症状者的抗体阳性率差异无统计学意义(χ2=0.75, P>0.01)。结论 18岁以下人群具有一定的甲型H1N1流感抗体,但抗体水平较低,人群普遍易感,建议提高甲型H1N1流感疫苗接种率,进一步加强甲型H1N1流感防控措施。     

广东顺德某企业员工乙肝病毒感染调查

目的了解乙型病毒肝炎在顺德某企业员工中的流行分布情况,为乙肝防治工作提供科学依据,并探讨企业员工乙肝预防的对策与措施。方法用ELISA法对该企业2004年1613名员工的血清进行乙肝病毒五种标志物检测,对结果作统计分析。结果顺德某企业员工HBsAg阳性率为17·36%(280/1613),其中男性为20·24%(216/1067),女性为11·72%(64/546),男性显著高于女性(χ2=18·285,P<0·05)。不同年龄组HBsAg阳性率也有差异显著性(χ2=10.754,P<0·05),60岁以上年龄组HBsAg阳性率最低为8·22%,20~29岁组的阳性率最高为21·34%,HB-sAg阳性者年龄主要集中在20~49岁。结论顺德某企业员工乙肝病毒感染率尚较高,对其防治工作不容忽视,乙肝的预防保健知识宣传需要加强,且应根据体检结果,对相应人群采取乙肝疫苗注射或临床观察治疗等措施。     

热休克蛋白B1抑制HBV复制的研究

目的 探讨热休克蛋白B1 (heat shock protein B1,HSPB1)对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响.方法 采用Western blot检测正常肝细胞系(HepRG)和HBV稳定复制细胞系(HepAD38和HepG2.2.15)中HSPB1的蛋白水平.在HBV稳定复制细胞系(HepAD38和HepG2.2.15)中转染pCMV6-HSPB1质粒及对照质粒,采用Western blot验证HSPB1过表达水平,实时荧光定量PCR和Southern blot检测HSPB1过表达对HBV复制中间体表达的影响;qRT-PCR检测HSPB1过表达对HBV3.5 kb mRNA表达的影响;ELISA检测HSPB1过表达对HBV s抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)分泌的影响.在肝癌细胞系Huh-7中共转染pCH9/3091和pCMV6-HSPB1质粒,采用Western blot验证HSPB1过表达水平,实时荧光定量PCR和Southern blot检测HSPB1过表达对瞬时转染的HBV复制中间体表达的影响.结果 HSBP1在HepAD38和HepG2.2.15中的表达明显低于HepRG.HSPB1在HepAD38和HepG2.2.15细胞中成功过表达,在过表达HSPB1的HepAD38和HepG2.2.15细胞中HBV复制中间体水平以及3.5 kb mRNA水平均降低,细胞培养上清中HBsAg和HBeAg的分泌水平也降低.HSPB1在转染pCH9/3091的Huh-7细胞中成功过表达,HSPB1过表达抑制了瞬时表达的HBV的复制水平.结论 HSPB1可以抑制HBV复制.     

乙肝病毒感染与膜增殖性肾炎的关系

在我国,膜增殖性肾炎(MPGN)患者的乙型肝炎病毒(HBV)携带率明显高于其它肾炎患者和普通人群。为了探讨HBV感染与MPGN的关系,作者对84例MPGN成人患者进行了系列性临床、病理与免疫病理研究。根据血清HBV-DNA斑点杂交和“二对半”的检查结果,全部患者被分为两组,即病毒血症组和非病毒血症组。结果发现,两组患者的表现有所不同。病毒血症组的特点是。①男性较多,常有肝脏病史、肝功能异常、低补体(C_3,C_4)血症和自身抗体阳性,临床经过相对较好,随访期间肾功能损害、高血压的发生率均低于非病毒血症组;②型MPGN(48.3%)较非病毒血症组(18.2%)多见,“白金耳”征常见,肾小球增生、分叶、双轨征不甚突出,肾小球硬化及小管间质病变相对较轻;③肾小球中HBV,尤其是HBsAg的检出率高于非病毒血症组。     

乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV血清标志物之间的相关性探讨

目的: 探讨乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV血清标志物(即"乙肝五项")之间的相关性。方法: 用EL ISA法检测457例HBsAg(+)血清,分析其"乙肝五项"与前S1抗原之间的关系。结果: 前S1抗原与"乙肝五项"有不同的相关性,其具有独立的检测价值。结论: 前S1抗原作为HBV感染、复制的指标较HBeAg更敏感,与乙型肝炎的活动性有关,对"乙肝五项"检测有重要的补充作用。     

乙肝病毒外膜大蛋白检测在诊断乙型病毒性肝炎中的临床意义

目的通过检测乙肝患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)、HBV、DNA、以及乙肝两对半(HBVM),探讨HBV-LP与HBVDNA浓度的相关性.方法共检测354例乙肝患者血清标本,HBV-LP、乙肝前S1蛋白(Pre-SlAg)以及乙肝两对半采用酶联免疫方法进行检测,采用实时荧光定量PCR方法检测HBV DNA.结果(1)在290份HBV DNA阳性标本中HBV-LP的阳性率(88.62%)明显高于乙肝病毒前S1的阳性率(48.97%),两者之间差异有显著性(P＜0.05);(2)HBV-LP吸光度值与HBV DNA拷贝数呈正相关性,相关系数r=0.939;(3)在HBeAg阳性和阴性标本中,Pre-SlAg的检出率则明显低于HBV-LP和HBV DNA.结论本研究结果显示HBV-LP与HBV DNA有良好的正相关性,HBV-LP检出与HBV DNA的符合率高于Pre-SlAg,HBV-LP检测可以用于反映乙肝患者病毒复制的血清免疫学指标.     

恒河猴B病毒阳性率随季节变化的研究

目的 研究恒河猴BV感染率随季节变化的增长规律。方法 采用BV全病毒为抗原的ELISA试剂盒对两批离乳后群养的54只恒河猴仔猴每月采血检测BV感染情况,连续检测13个月。结果 12月、1月、2月、3月、4月B病毒阳性猴数量相对增加较明显,其他月份BV阳性猴数量相对稳定。结论 BV的感染受季节影响,春季BV的感染率相对较高,可在高发季节加强有关的预防措施或调控可改变的环境因素,降低BV的感染,提高猴群质量。     

乙型肝炎病毒S1抗原检测及其与HBeAg的关系探讨

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原与HBeAg及HBV在体内复制和感染的存在关系。方法采用ELISA法对280例乙肝肝炎病毒感染者中HBeAg阳性患者血清进行前S1抗原检测。结果乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原在血清学表达上与HBeAg的阳性符合率高达91.43％。结论乙型肝炎病毒(HBV)前S1抗原与HBeAg平行存在,是乙型肝炎病毒在体内存在的复制和感染的可靠指标。     

单纯疱疹病毒1型糖蛋白B基因疫苗的构建

目的：构建用于治疗和预防单纯疱疹病毒性角膜炎的核酸疫苗,探讨单纯疱疹病毒1型糖蛋白B(HSV-1gpB)基因作为基因疫苗的可能性。方法：利用PCR技术从HSV-1 SM44毒株基因组中扩增出编码HSV-1gpB去除N端部分信号肽序列(39 bp)的基因片断（2 673 bp）,定向插入真核表达质粒pcDNA3载体中,构建出重组真核表达质粒pcDNA-gpB,并对其进行酶切分析、PCR鉴定及测序鉴定。 结果：双酶切重组质粒pcDNA-gpB,电泳可见两条带,分别为目的基因（2 700 bp）和线性质粒pcDNA3（5 400 bp）; 以重组质粒pcDNA-gpB为模板进行PCR扩增,在2 700 bp位置扩增出特异的产物;测序结果表明,克隆基因插入方向正确,与GenBank中登录的HSV-1 F株gpB基因序列比较,同源性达99.5%。 结论：利用PCR技术从HSV-1 SM44株基因组中扩增出编码HSV-1gpB去除N端部分信号肽序列（39 bp）的基因片断（2 673 bp）, 成功地构建了HSV-1基因疫苗pcDNA-gpB。