参麦注射液对心肌缺血-再灌注大鼠一氧化氮合酶系统的影响

目的:探讨参麦注射液(SM)对大鼠心肌缺血-再灌注损伤的防治作用及机制。方法:结扎冠状动脉前降支复制大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型,描记标准肢体II导联,测定心肌组织中丙二醛含量及结构型、诱导型一氧化氮合酶(cNOS,iNOS)活性,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测其cNOSmRNA、iNOSmRNA表达。结果:SM组心律失常发生率明显低于其他各组;cNOS活性及其mRNA表达显著增高(P<0.01),iNOS活性及其mRNA表达显著降低(P<0.01)。结论:SM能减轻缺血-再灌注引发的损伤,其作用机制可能与增加cNOS活性,促进cNOSmRNA表达,抑制iNOS活性,降低iNOSmRNA表达有关。     

参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响

目的:观察参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的影响,并探讨其作用机制。方法:结扎冠状动脉左前降支10min再灌15min复制大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型,描记标准肢体Ⅱ导联心电图,测定心肌组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶活性及丙二醛(MDA)含量,电镜观察心肌线粒体改变。结果:参麦注射液使再灌注性心律失常的发生率低于模型组、持续时间较短,心肌组织匀浆中SOD、Na⁺,K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的活性高于模型组,MDA的含量低于模型组,心肌线粒体损伤轻于模型组。结论:参麦注射液对大鼠急性心肌缺血再灌注损伤有明显的防治作用,其机制与减轻氧自由基及钙超载损伤有关。     

甘氨酸对心肌缺血-再灌注小鼠一氧化氮系统和Bcl-2 mRNA表达的影响

目的:探讨甘氨酸(Gly)对心肌缺血-再灌注(MI/R)损伤的防治作用及机制,为临床缺血性心脏病的防治提供新的思路与方法。方法: 将小鼠随机分为5组,以Gly等药物定量灌胃处理。1周后,腹腔注射垂体后叶素和硝酸甘油复制MI/R模型,同时记录不同时点的肢体Ⅱ导联心电图。4 h后,分别用比色法和硝酸还原酶法检测小鼠心肌组织中一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶的活性(iNOS)和一氧化氮(NO)的含量;用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)测定各组小鼠心肌组织Bcl-2 mRNA的表达。结果: MI/R组小鼠心电图J点发生明显偏移。 Gly预处理组小鼠心肌组织总NOS活性、NO含量及Bcl-2 mRNA的表达显著升高,而iNOS的活性显著下降。结论: Gly能保护心脏,减轻MI/R引发的损伤。Gly的这一作用可能与其增加缺血再灌注心肌组织中NOS的活性及NO的生成,抑制iNOS的活性,以及促进Bcl-2 mRNA的表达有关。     

参麦注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护效应及其与热休克蛋白的关系

目的 :研究参麦注射液对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护效应以及与热休克蛋白 (HSP70 )的关系。方法 :用在体左冠状动脉前降支穿线结扎法制备心肌缺血再灌注模型。 60只SD大鼠分为三组 ,假手术组n =10只 ,缺血再灌注组n =2 5只 ,参麦注射液干预组n =2 5只。缺血 3 0min ,再灌注 12 0min。观察心肌梗死范围和心肌细胞超微结构变化 ,采用S P免疫组化法 ,检测HSP70 的表达。结果 :参麦注射液干预组与缺血再灌注组相比 ,缺血面积 ( % ) ( 3 8.3 6± 2 .62vs 42 .3 2±2 .2 8,P <0 .0 1) ;梗死面积 ( % ) ( 59.3 6± 2 .44vs 65.63± 1.68,P <0 .0 1)。HSP70 表达 ( 0 .13 8± 0 .0 2 2vs 0 .12 2± 0 .0 18,P <0 .0 1)。电镜下 ,缺血再灌注组 ,肌纤维挛缩 ,核固缩 ,线粒体嵴疏松 ,空泡形成。参麦注射液干预后 ,肌节清晰 ,线粒体嵴较密集 ,无明显空泡形成。结论 :参麦注射液能保护心肌超微结构 ,缩小缺血、梗死范围 ,其机制可能与HSP70 的表达增加有关     

家兔急性心肌缺血时脊神经节一氧化氮合酶的表达

目的　观察急性心肌缺血时家兔脊神经节一氧化氮合酶 (NOS)表达的情况。方法　结扎家兔冠状动脉左室支30min ,造成实验性急性心肌缺血。采用还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶 (NADPH d)法显示C5～T5脊神经节的NOS表达变化。结果　心肌缺血组左侧脊神经节的NOS表达比正常组增加。结论　心肌缺血可影响脊神经节NOS的表达 ,一氧化氮(NO)可能是内关与心脏相关联系的重要介质。     

葛根素预处理对大鼠脑缺血早期脑组织eNOS的影响

目的: 研究葛根素在脑缺血早期的脑保护作用是否与脑组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达有关。方法: 45只大鼠随机分为3个研究组:假手术组(S组)5只、脑缺血组(M组)20只和葛根素预处理组(P组)20只。其中,P组和M组又分别分为脑缺血0.5 h、1 h、2 h、4 h 4个亚组。除假手术组外其它大鼠制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,P组在手术前10 min腹腔注射葛根素(100 mg/kg),M组和S组在同样时点注射等量生理盐水。采用神经功能缺损评分、神经元尼氏体染色评价脑组织功能及形态变化;采用免疫组化和Western blotting方法检测脑组织eNOS,观察其分布和表达水平。结果: P组各亚组神经功能缺损评分较对应时点的M组减轻(P<0.05),神经元尼氏体溶解也较M组减少,其脑组织eNOS蛋白质的表达均明显高于对应时点的M组(P<0.05)。结论: 葛根素预处理对大鼠脑缺血早期的脑保护机制可能与其上调脑组织eNOS蛋白质表达有关。     

急性应激对大鼠纹状体nNOS表达及分布的影响

目的:研究应激对大鼠纹状体内神经型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,nNOS)表达和分布的影响。方法:建立大鼠运输应激模型(120 r/min,持续2 h),将24只大鼠随机分为对照组和应激组。应用Western Blot分别测定对照组和应激组大鼠脑内nNOS的表达量并结合免疫细胞化学染色探察应激前后纹状体nNOS神经元的分布及其形态学特征的变化。结果:Western Blot结果显示应激后nNOS在蛋白水平上显著提高(P0.05);免疫组化染色显示nNOS阳性神经元在纹状体呈散在分布,可见棕色免疫阳性物质主要位于细胞质中,细胞核着色浅,细胞轮廓清晰,突起明显;与对照组相比,应激组阳性细胞数显著增多(P0.05),且着色较深。结论:应激使大鼠纹状体内nNOS表达显著增多,nNOS的升高可能是引起运输焦虑的深层原因之一。     

β-内啡肽增强人外周血单个核细胞IL-1β、IL-6和iNOS mRNA表达

目的　研究β内啡肽（βｅｎｄｏｒｐｈｉｎ ，βＥＮＤ） 对人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ） 细胞因子ＩＬ１β、ＩＬ６ 和诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ） 的ｍ ＲＮＡ 表达， 探讨神经递质对免疫细胞产生细胞因子和ｉＮＯＳ 的调节作用。方法　以不同浓度βＥＮＤ 体外作用于人外周血单个核细胞，随后提取细胞ＲＮＡ。逆转录成ｃＤＮＡ，并分别和相应的上下游引物进行ＰＣＲ 扩增，扩增产物在含有溴化乙锭（ＥＢ）的琼脂糖凝胶上电泳，泳动带经激光密度扫描仪扫描进行定量。结果　βＥＮＤ 明显增强人外周血单个核细胞ＩＬ１β、ＩＬ６ 和ｉＮＯＳ的ｍ ＲＮＡ 表达。结论　神经肽对免疫功能的调节包括调节免疫细胞产生细胞因子和ｉＮＯＳ。     

脂多糖对人脐静脉内皮细胞ET-1、eNOS、iNOS mRNA表达的影响

目的：观察脂多糖（LPS）对人脐静脉内皮细胞ET-1、eNOS、iNOSmRNA表达的影响，在分子水平上进一步探讨LPS影响人脐静脉内皮细胞分泌ET-1、NO的机制。方法：选用体外培养的第3代人脐静脉内皮细胞，以100 μg/L浓度的LPS与之共孵育6 h。提取总RNA，运用半定量RT-RCR的方法，对ET-1、eNOS、iNOS mRNA的表达情况进行分析。结果：ET-1的灰度比值分别为：正常对照组0.82，LPS组1.32；eNOS的灰度比值分别为：正常对照组1.20，LPS组0.65；iNOS组的灰度比值分别为：正常对照组0.20，LPS组0.19。结论：低浓度的LPS对人脐静脉内皮细胞ET-1 mRNA的表达有促进作用，对eNOS mRNA的表达有抑制作用，对iNOS mRNA的表达则无显著作用。     

缺氧对高原藏族、汉族人脐静脉内皮细胞VEGF、iNOS和eNOS mRNA表达影响的比较

目的：比较缺氧对世居高原藏族人和移居高原汉族人脐静脉内皮细胞（UVECs）血管内皮生长因子（VEGF）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和内皮型一氧化氮合酶（eNOS） mRNA表达的影响。 方法： 分离脐静脉内皮细胞，体外原代培养，分为①世居高原藏族组和②移居高原汉族组两组，每组包括常氧对照和缺氧(0.5% O2)2 h、4 h、12 h和24 h时点。分离细胞总RNA，分别用RT-PCR检测VEGF、iNOS和eNOS mRNA表达。 结果： 缺氧可以诱导世居高原藏族人UVECs表达iNOS和VEGF mRNA表达增加，同时抑制eNOS mRNA表达。移居高原汉族人UVECs表达上述基因mRNA的特点与世居高原藏族人相似。 结论： 缺氧时世居高原藏族人UVECs VEGF、iNOS和eNOS mRNA表达特点与移居高原汉族人相似，提示上述基因表达的改变可能是缺氧反应机制的共同过程。     

Effect of focal cerebral ischemia on nitric oxide synthase expression in rats

Time- and cell-type-dependent immunohistochemical activity of nitric oxide synthase (NOS) was investigated in rat cerebral cortex following focal ischemia and the local concentration of nitric oxide (NO) was measured. NO concentration increased 2 min after the ischemia. Brain NOS-immunoreactive neurons increased in number 5 min after the ischemia. Endothelial cell NOS immunoreactivity was first detected in vascular endothelial cells and astrocytes 5 min after the ischemia, and it increased again during 60 min to 4 days after the ischemia in reactive astrocytes. Inducible NOS immunoreactivity was detected in astrocytes, vascular endothelium, and microglia/macrophages at the periphery of the ischemic core during 2–4 days after the ischemia.This study was presented at the 28th Annual Meeting of the Clinical Electron Microscopy Society of Japan, Osaka, October 17–19, 1996.     

S-甲基异硫脲对阿霉素致大鼠心肌组织超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性改变的影响

目的:探讨S-甲基异硫脲(SMT)对阿霉素(ADM)所致大鼠心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性改变的影响。 方法:给大鼠腹腔注射ADM(10.0 mg·kg^-1)1次，给ADM处理的大鼠静脉注射不同剂量的SMT(每天1次，共3次)进行干预。用分光光度法测定心肌组织丙二醛(MDA)含量、NO2-/NO3-含量、锰超氧化物歧化酶(MnSOD)活性、铜-锌超氧化物歧化酶（Cu-ZnSOD）活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性、一氧化氮合酶活性；用酶的速率法测定血清肌酸激酶(CK)的同功酶CK-MB活性；用逆转录-聚合酶链反应方法检测心肌组织MnSOD mRNA、Cu-ZnSOD mRNA、GPx mRNA、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达。 结果:SMT(5.0，10.0，20.0 mg· kg^-1)3个干预组心肌组织MDA含量、NO2-/NO3-含量、iNOS活性及血清CK-MB活性明显低于ADM组(P<0.01)，而其心肌组织MnSOD mRNA、Cu-ZnSOD mRNA、GPx mRNA表达水平及其酶活性明显高于ADM组(P<0.01)。 结论:SMT拮抗ADM抑制心肌组织MnSOD mRNA、Cu-ZnSOD mRNA、GPx mRNA表达而拮抗ADM抑制这些酶的活性。     

参麦对缺血再灌注性鼠肾小管细胞损伤的作用

目的 :参麦注射液对缺血再灌注小鼠肾小管细胞损伤作用的观察。方法 :采用离体培养的鼠肾小管细胞株 ,复制缺血再灌注损伤模型 ,用MTT法测定细胞增殖活性 ,酶组化法观察细胞膜和线粒体中ATP酶和LDH含量的变化 ,用生化法检测小管细胞内SOD活性和MDA含量 ,结果 :不同浓度的SMI对肾小管细胞有明显的促增殖作用 ,在SMI浓度为 5 0 μg·ml 1时 ,促增殖作用最强 ;SMI能显著提高IR后小管细胞的增殖活性和细胞存活率 ;缺血培养 4小时后 ,MDA含量明显增高 ,ATP酶、LDH含量明显降低 ,SMI降低IR培养的小管细胞MDA含量 ,增强SOD活性 ,ATP酶、LDH含量。结论 :SMI具有促进鼠肾小管细胞增殖和减轻肾小管细胞IR损伤的作用 ,其机制可能与增强SOD的活性、加速OFR的清除 ,增强细胞抗氧化的能力 ,减轻膜的脂质过氧化 ,抑制ATP酶含量的减少 ,进而维持生物膜的结构和功能的完整性有关。     

Effect of exercise on blood pressure in rats with chronic NOS inhibition

Regular training lowers blood pressure in hypertensive humans and other animals. We investigated the response to 4 weeks of treadmill exercise training in hypertensive male Wistar rats receiving the nitric oxide synthase inhibitor N ^ω-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME). The rats were on either a short- (4 weeks) or long-term (10 weeks) L-NAME treatment protocol and were subjected to running exercise that started concomitantly in the short-term group and in the 6th week in the long-term group. Four weeks of exercise training induced a fall in mean arterial pressure in both the short- [mean (SEM) 137.6 (4.0) mmHg] and long-term hypertensive groups [161.4 (2.3) mmHg] compared to their sedentary hypertensive controls [160.4 (3.3) mmHg and 176.8 (8.9) mmHg, respectively]. Exercise also increased muscle nitric oxide synthase activity in both of the trained hypertensive groups. Muscle nitrite levels were higher in the exercising short-term hypertensive group compared to both the sedentary control and the sedentary hypertensive groups, and were not different between the sedentary and exercising long-term hypertensive groups. Increased wall thickness of the aortic and mesenteric vessels was observed in the hypertensive groups, but was prevented in the exercising long-term hypertensive group. In rat, exercise reduces the elevated blood pressure in L-NAME-induced hypertension via increasing nitric oxide synthase activity. Changes in vessel structure with exercise training may also be involved in the blood-pressure-lowering effects. Electronic Publication     

心肌梗死大鼠缺血心肌中内皮抑素的表达

目的： 观察心肌梗死后大鼠不同时间缺血心肌中内皮抑素的表达及其与新生血管密度和血管内皮生长因子（VEGF）的关系。 方法： 32只心肌梗死SD大鼠随机分为心肌梗死后7、14、21、28 d 4个组，以假手术组作为正常对照组，每组8只。应用免疫组织化学染色方法，观察各组心肌梗死大鼠缺血心肌中内皮抑素、VEGF 的表达和新生血管密度。 结果： 心肌梗死大鼠缺血心肌中内皮抑素的表达明显增加，弥散分部于心肌细胞和组织间隙，第7 d表达量最高，至14、21、28 d表达量逐渐降低，28 d基本降至基础水平，与VEGF表达的变化趋势一致，并与新生血管密度相关。 结论： 内皮抑素在心肌梗死大鼠的缺血心肌中表达增加，与VEGF的动态变化一致，并与新生血管密度呈正相关，提示内皮抑素可能参与缺血心肌血管新生的调节。     

诱生型一氧化氮合酶的变化在高胆固醇血症大鼠肾损害中的作用

目的:探讨高胆固醇血症大鼠肾组织诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的变化与脂质肾损害的关系。方法:采用生化法检测血脂、尿蛋白、尿及肾皮质中一氧化氮含量,免疫组化法及逆转录—多聚酶链法检测肾组织中iNOS的表达强度及水平。TUNEL法检测肾组织中凋亡细胞。结果:8周时高脂组大鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、24h尿蛋白定量及尿一氧化氮量、肾皮质一氧化氮含量明显高于对照(P＜0.05)。肾皮质iNOSmRNA表达上调(P＜0.01)。肾皮质一氧化氮量与24h尿蛋白定量呈正相关(P＜0.05)。肾皮质iNOS积分光度与肾组织细胞凋亡指数呈正相关(P＜0.05)。肾组织细胞凋亡指数与24h尿蛋白含量呈正相关(P＜0.01)。结论:iNOS表达增强与脂质肾损害有关,可能通过引起细胞凋亡导致脂质肾损害。     

L-精氨酸、氨基胍和胍丁胺在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用

目的: 观察L-精氨酸 (L-Arg)、氨基胍 (AG) 和胍丁胺 (AGM) 对大鼠局灶性脑缺血组织中一氧化氮 (NO) 含量的影响,探讨3种药对脑缺血再灌注损伤大鼠是否具有保护作用和NO在脑缺血再灌注损伤的作用及机制。方法: 线栓法建立大鼠局灶性脑缺血 (MCAO) 模型,大鼠行为学改变用Longa评分标准来评价,血清NO浓度用酶标仪检测,脑内诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)用免疫组织化学方法测定。结果: 与假手术组相比,模型组、L-Arg组、AG组和AGM组在缺血再灌注12、24、72 h的NO含量均显著增加(P<0.05);与模型组相比,在缺血再灌注12 h,L-Arg组行为学评分显著降低(P<0.05),NO含量显著升高(P<0.05);在缺血再灌注24 h,AG组和AGM组行为学评分显著降低(P<0.05),NO含量也显著降低(P<0.05)。在缺血再灌注12、24、72 h,L-Arg组的iNOS阳性细胞数与模型组相比无显著差异(P>0.05);而AG组和AGM组则均显著低于模型组(P<0.05)和L-Arg组(P<0.05)。结论: 脑缺血再灌注损伤后血清NO和海马内iNOS的表达随时间有动态变化。L-Arg在术后12 h、AG和AGM在术后24h对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有保护作用。     

甘氨酸对小鼠心肌缺血性损伤的防治作用研究

目的:探讨甘氨酸(GLY)对心肌缺血性损伤的防治作用。方法:预先给予昆明种小鼠20%GLY0.025mL/g灌胃,每日2次,1周后腹腔注射垂体后叶素20U/kg诱导急性心肌缺血;观察心电图的变化及心肌组织一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)的含量。结果:①GLY明显减少缺血心脏的心电图J点的变化幅度;②GLY显著增加心肌组织NOS、SOD的活性,而使心肌组织MDA含量显著降低。结论:GLY有预防缺血性损伤,保护心脏的作用,其机制可能与增加NOS、SOD活性和减少MDA含量有关。