抗人重组可溶性组织因子单克隆抗体的制备及鉴定

组织因子 (ＴＦ)作为血液凝血因子Ⅶ (ＦⅦ )和活化的血液凝血因子Ⅶ (ＦⅦａ)的受体和辅助因子 ,是生理性和病理性凝血过程的始动因子。可溶性组织因子 (ｓＴＦ)为ＴＦ的胞外区(1～ 2 19氨基酸 ) ,具备ＴＦ连接ＦⅦａ及催化ＦⅦａ所必需的全部结构。ｓＴＦ作为抗原较全长ＴＦ具有相对分子质量小、针对性强的特点。我们以重组人可溶性组织因子 (ｒｈｓＴＦ)为抗原 ,制备了抗ｒｈｓＴＦ单克隆抗体 (ＭｃＡｂ) ,并对抗体进行了鉴定。材料和方法1　材料　细胞和实验动物 :ＳＰ2 / 0细胞由中南大学湘雅医学院肿瘤免疫室提供。ＢＡＬＢ/ｃ小鼠购…     

Fas抗原—配体系统与肝脏疾病研究进展

Ｆａｓ抗原和Ｆａｓ配本是细胞表面的两种跨膜蛋白。当一个细胞的Ｆａｓ与另一细胞的ＦａｓＬ相结合时,可以导致表达Ｆａｓ的细胞凋亡;Ｔ淋巴细胞表达ＦａｓＬ可以使表达Ｆａｓ的肝细胞凋亡,Ｆａｓ诱导的肝细胞凋亡在某些肝脏疾病的发生发展中起重要作用。     

急性呼吸窘迫综合征患者肺组织Fas/FasL系统表达的变化及其意义

目的：探讨细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）发病中的作用及基因调控机制,为进一步阐明ＡＲＤＳ的发病机制和在细胞凋亡水平防治本病提供理论依据。方法：ＡＲＤＳ组９例,对照组５例,采用ＴＵＮＥＬ法以及免疫组化技术观察ＡＲＤＳ患者肺组织Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达及细胞凋亡的变化。结果：ＡＲＤＳ早期患者肺组织细胞凋亡率较对照组明显增加,且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加;Ｆａｓ抗原、ＦａｓＬ在ＡＲＤＳ早期患者肺组织表达明显上调,并且Ｆａｓ、ＦａｓＬ表达的增加与肺组织细胞凋亡增加呈平行关系。结论：肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统活化可能参与临床ＡＲＤＳ早期的发病。     

B细胞被动凋亡的研究进展

在细胞凋亡过程中，Ｆａｓ、Ｆａｓ配体之间的相互作用具有很重要的意义。Ｔ细胞的凋亡是通过Ｆａｓ－依赖途径，但Ｂ细胞进行激活诱导的凋亡过程却不依赖于Ｆａｓ，而是对Ｔ细胞介导的、ＦａｓＬ－诱导的死亡敏感。即在免疫反应，Ｔ细胞表现为主动凋亡，而Ｂ细胞却表现为被动凋亡．     

维甲酸、砷剂及柔红霉素对NB4细胞组织因子表达的影响

目的　探讨全反式维甲酸（ Ａ Ｔ Ｒ Ａ） 、三氧化二砷（ Ａｓ２ Ｏ３） 及柔红霉素（ Ｄ Ｎ Ｒ） 对急性早幼粒细胞白血病（ Ａ Ｐ Ｌ） 细胞株 Ｎ Ｂ４ 细胞组织因子（ Ｔ Ｆ） 表达的影响。方法　用复钙时间检测 Ｎ Ｂ４ 细胞的促凝活性（ Ｐ Ｃ Ａ） ;用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方法检测其 Ｔ Ｆ 抗原;用逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ） 检测 Ｔ Ｆｍ Ｒ Ｎ Ａ的转录水平。结果　 Ａ Ｔ Ｒ Ａ 和 Ａｓ２ Ｏ３ 均呈时间依赖的方式下调 Ｎ Ｂ４ 细胞的 Ｐ Ｃ Ａ、 Ｔ Ｆ 抗原水平以及 Ｔ Ｆ ｍ Ｒ Ｎ Ａ的转录;而 Ｄ Ｎ Ｒ 处理 Ｎ Ｂ４ 细胞的 Ｐ Ｃ Ａ及 Ｔ Ｆ 抗原在早期上调,至２４ ～４８ 小时达到最大值。对 Ｐ Ｃ Ｒ 产物测序,发现 Ａ Ｐ Ｌ 细胞 Ｔ Ｆ 第５ 个外显子缺失的转录本。结论　 Ａ Ｔ Ｒ Ａ 和 Ａｓ２ Ｏ３ 均可下调 Ａ Ｐ Ｌ 细胞 Ｔ Ｆ的表达并降低其 Ｐ Ｃ Ａ,改善 Ａ Ｐ Ｌ患者的弥散性血管内凝血（ Ｄ Ｉ Ｃ） 出血症状; Ａｓ２ Ｏ３ 和 Ｄ Ｎ Ｒ 对 Ａ Ｐ Ｌ凝血障碍不同效应的作用机制至少部分与药物对 Ａ Ｐ Ｌ细胞 Ｔ Ｆ 表达和 Ｐ Ｃ Ａ 的不同调节作用有关。     

再生障碍性贫血患者Fas抗原的表达及血浆可溶性Fas,FasL？…

目的 探讨Ｆａｓ（ＣＤ９５）／ＦａｓＬ（ＣＤ９５Ｌ）系统在再生障碍性贫血（再障）中的表达及临床意义。方法 用酶联免疫夹心法检测３２例再障患血浆可溶性Ｆａｓ,ＦａｓＬ（ｓＦａｓ,ｓＦａｓＬ）,用流式细胞术检测骨髓ＣＤ３４＾＋细胞,ＣＤ３４＾－细胞和外周血单个核细胞（ＰＢＭＮＣｓ）Ｆａｓ抗原的表达。结果 再障患骨髓ＣＤ３４＾＋细胞Ｆａｓ表达率显高于正常对照,且重型再障组较慢性再障组显增高,重型     

T细胞主动凋亡的研究进展

激活的Ｔ细胞、Ｂ细胞以及未成熟的淋巴细胞对细胞程度化死亡敏感。在此过程中，Ｆａｓ：Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）之间的相互作用尤为重要。Ｔ细胞可以通过Ｆａｓ－依赖途径杀伤自己本身，即在免凤反应的调节中，Ｔ细胞表现为主动凋亡。     

激活诱导的T细胞死亡研究进展

Ｔ细胞激活诱导的细胞死亡（ＡＩＣＤ）是Ｔ细胞被激活后再次受到ＴＣＲ／ＣＤ３刺激而发生的细胞凋亡，这一机制对于调节机体免疫反应具有重要意义。研究表明，Ｔ细胞受到ＴＣＲ／ＣＤ３刺激后通过一系列信号传导引发多种细胞因子的转录和合成，Ｔ细胞被激活。活化的Ｔ细胞表达Ｆａｓ／ＦａｓＬ增加，通过自身ＦａｓＬ的可溶性ＦａｓＬ对Ｆａｓ的作用启动凋亡信号传导，使激活的Ｔ细胞发生凋亡。但特殊的是，Ｔｈ２细胞激活后却仍具     

慢性乙肝患者PBMC的增殖反应,NK细胞活性及血清中TNF …

目的：了解ＨＢＶ感染后细胞免疫及ＴＮＦ－α，ｓＩＬ－２Ｒ在其中所起作用，探讨慢性乙肝患者的细胞免疫状态，方法：对７６例慢性乙肝患者及２７例健康献血员，以＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测ＰＢＭＣ对不同抗原的增殖反应和ＮＫ细胞活性及应用ＥＬＩＳＡ方法测定血清中ＴＮＦ－α，ｓＩＬ－２Ｒ结果：慢性乙肝患者ＰＢＭＣ对ＨＢｓＡｇ增殖反应阳性者，ＰＨＡ的增殖指数明显高于ＨＢｓＡｇ增殖反应阴性者（Ｐ〈０．０１），ＮＫ细胞     

T淋巴细胞识别自体慢性粒细胞白血病肿瘤细胞抗原的研究

目的：验证慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）患者体内是否存在细胞毒Ｔ淋巴细胞前体细胞，并鉴定其表型和功能特征。方法：用混合淋巴瘤细胞培养技术，用自体瘤细胞和细胞因子刺激扩增ＣＭＬ患者骨髓和外周血单个核细胞（ＭＮＣ）。结果：ＣＭＬ缓解期和慢性期均存在对自体和异体ＣＭＬ细胞杀伤活性的Ｔ淋巴细胞，这些细胞对自体和异体正常ＭＮＣ没有杀伤活性，对正常ＣＦＵ－ＧＭ无抑制作用。而ＬＡＫ细胞对自体ＣＭＬ细胞无杀伤活性（＜１０％），只对异体ＣＭＬ细胞有杀伤活性。上述Ｔ细胞包括ＣＤ３＋ＣＤ５６＋非主要组织相容性抗原（ＭＨＣ）限制性Ｔ细胞，和ＣＤ３＋ＣＤ６－ＭＨＣ限制性Ｔ细胞。用自体ＣＭＬ细胞刺激可增加Ｔ细胞激活抗原ＣＤ２５和ＨＬＡ－ＤＲ的表达。上述Ｔ细胞对自体ＣＭＬ细胞呈较弱的增殖反应，对异体ＣＭＬ细胞几乎无增殖反应，对载有ＢＣＲ－ＡＢＬ肽的自体缓解期ＥＢ病毒转染Ｂ细胞也无增殖反应。结论：ＣＭＬ细胞可能有共同的肿瘤抗原，后者可以被Ｔ细胞识别，但尚无证据表明是ｐ２１０的融合区序列。     

JAK／STAT途径研究进展及其与白血病的关系

细胞因子信号传导的ＪＡＫ酷氨酸蛋白激酶（Ｊａｎｕｓ ｋｉｎａｓｅ，ＪＡＫ）／信号转导子和转录活化子（ｓｉｇｎａｌ ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒｓ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｏｒｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ，ＳＴＡＴ）途径是当前研究的热点。本分析了在白血病细胞中ＪＡＫ／ＳＴＡＴ的活化及其机制，阐述了ＪＡＫ／ＳＴＡＴ的持续活化与白血病发生之间的关系，为白血病的治疗提供了新思路。     

儿童急性混合细胞性白血病胞浆抗原检测的意义

为分析儿童急性混合细胞性白血病（ＡＭＬＬ）免疫表型、胞浆抗原表达特点，用间接免疫荧光法对６７例儿童急性白血病（ＡＬ）进行免疫分型，发现ＡＭＬＬ７例，其中５例Ｔ／Ｂ ＡＭＬＬ，Ｔ／髓细胞（Ｍ）及Ｂ／Ｍ ＡＭＬＬ各１例。２例Ｔ／Ｂ ＡＭＬＬ结合膜抗原胞浆抗原表达诊断。结果表明免疫表型、胞浆抗原检测对儿童ＡＭＬＬ的诊断具有重要意义。     

恶性纤维组织细胞瘤的免疫组化研究

本文用１２种抗体对２５例恶性纤维组织细胞瘤（ＭＦＨ）作免疫组化标记，结果３种ＭＦＨ细胞ＰＣＮＡ，Ｖｉｍｅｎｔｉｎ均阳性，组织细胞样ＭＦＨ细胞和少数纤维母细胞样ＭＦＨ细胞并呈ＣＤ６８（ＫＰ－１和ＰＧ－Ｍ１）阳性，除３例外，ＭＦＨ细胞对肌源性标记，神经源性标记和上皮性标记均阴性。破骨细胞样巨细胞ＰＣＮＡ阴性，ＣＤ６８阳性，多顿氏巨细胞ＰＣＮＡ阴性，ＣＤ６８，Ｍａｃ３８７，ｌｙｓｏｚｙｍｅ，ａ－ＡＴ呈不     

什么是Fas/FasL系统?

答 :ＦａｓｒｙｍｎｄｒｉｔＦａｓ配体 (ＦａｓＬ)是细胞表面的两种跨膜蛋白。目前研究认为ＦａｓＬ是死亡因子 ,Ｆａｓ则是它的受体。当一个细胞的ＦａｓＬ与另一个细胞的Ｆａｓ结合时 ,可以导致表达Ｆａｓ的细胞凋亡。Ｆａｓ又称Ａｐｏ 1,即ＣＤ95分子。人Ｆａｓ基因定位于 10号染色体ｑ2 3,基因长度约 2 5Ｋｂ ,人ＦａｓｃＤＮＡ长度为 2 5 34ｂｐ。人ＦａｓＬ基因定位于 1号染色体ｑ2 3,基因长度约 8Ｋｂ。Ｆａｓ/ＦａｓＬ系统与自身免疫疾病、肿瘤发生、移植物耐受等均有密切关系。什么是Fas/FasL系统?@秦雪…     

Fas系统与疾病

Ｆａｓ和ＦａｓＬ分别属于ＴＮＦＲ／ＮＧＦＲ和ＴＮＦ超家族。Ｆａｓ表达于多种细胞表面，其中以活化淋巴细胞、淋巴系恶性肿瘤细胞表达最为丰富。ＦａｓＬ主要表达于活化Ｔ细胞。ＦａｓＬ与Ｆａｓ结合可介导Ｆａｓ细胞凋亡，也可协同刺激Ｔ细胞增殖，Ｆａｓ系统在机体维持自身稳定中起重要作用。该系统的缺损或功能紊乱将导致疾病。     

急性非淋巴细胞白血病与HLA—DR抗原表达关系的研究

应用免疫酶标染色法检测了５７例急性非淋巴细胞白血病患者的ＨＬＡ－ＤＲ和其它细胞免疫类型，其中３８例，表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原，表达ＨＬＡ－ＤＲ的的ＡＮＬＬ常伴有ＣＤ７的表达，而较成熟的髓系细胞表面标记ＣＤ１５则不表达，ＨＬＡ－ＤＲ＾＝的ＡＮＬＬ与ＦＡＢ亚型Ｍ１，Ｍ５ａ有密切关系。     

抗组织因子途径抑制物单克隆抗体的制备及鉴定

目的：制备抗组织因子途径抑制物（ＴＦＰＩ）单克隆抗体。方法：用微量ＴＦＰＩ脾内包埋免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｏ细胞融合，建立了２株稳定分泌抗ＴＦＰＩ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，分别命名为４Ｆ４和４Ｆ８。对其中的一株４Ｆ８进行研究，其杂交瘤细胞染色体众数为９３，分泌的抗体为ＩｇＧ１。以简易正辛酸法从腹水纯化ＭｃＡｂ４Ｆ８，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测其纯度，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ分析显示其可特异性地识别分子量为３４８００的抗原分子。对纯化的抗体以改良过碘酸钠氧化法用辣根过氧化物酶标记后，采用双夹心ＥＬＩＳＡ法检测正常人血浆ＴＦＰＩ含量。结果：稀释的凝血酶原时间（ＰＴ）测定，ＭｃＡｂ４Ｆ８可缩短其凝固时间，且呈量效关系，ＭｃＡｂ４Ｆ８还可使乏因子Ⅸ血浆稀释的ＰＴ明显缩短。正常人血浆ＴＦＰＩ含量为１０３．２±１１．５μｇ／Ｌ，结果与美国Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａ公司的ＴＦＰＩＥＬＩＳＡ试剂盒所测结果（９８．４±１０．３μｇ／Ｌ）相近（ｒ＝０．９２）。结论：ＭｃＡｂ４Ｆ８有潜在的药用价值，并可望为我国ＴＦＰＩ的研究提供精确的检测手段。     

T—PSA,F／T—PSA和PSAD测定对前列腺癌的诊断价值

目的 探讨总前列腺特异抗原（Ｔ－ＰＳＡ）、游离ＰＳＡ（Ｆ－ＰＳＡ）与Ｔ－ＰＳＡ比例（Ｆ／Ｔ－ＰＳＡ）、前列腺特异性抗原密度（ＰＳＡＤ）在前列腺癌鉴别诊断中的价值。方法 检测６４例良性前列腺增生（ＢＰＨ）和２１例前列腺癌（ＰＣＡ）病人血清的Ｔ－ＰＳＡ、Ｆ－ＰＳＡ和前列腺体积，对Ｆ／Ｔ－ＰＳＡ、ＰＳＡＤ进行统计比较和ＲＯＣ分析。结果 ＢＰＨ组和ＰＣＡ组病人的Ｔ－ＰＳＡ、Ｆ／Ｔ－ＰＳＡ、ＰＳＡＤ存在显著     

小鼠GM-CSF基因修饰瘤苗腹腔免疫对抗原提呈细胞数量和功能的促进效应

目的 观察小鼠粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｍＧＭ－ＣＳＦ）基因修饰的瘤苗体内免疫小鼠后的抗肿瘤效应以及对抗原提呈细胞数量和功能的影响。方法 应用腺病毒载体介导ｍＧＭ－ＣＳＦ基因修饰ＦＢＬ－３小鼠红白血病细胞,灭活后用作瘤苗腹腔免疫小鼠,检测免疫后体内诱导的细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）活性,观察小鼠存活期;计数免疫后腹腔中抗原提呈细胞（ＡＰＣｓ）的数量,流式细胞仪分析腹腔贴壁细胞中３３Ｄ１＾＋树突头细     

人CD34抗原基因在痘苗病毒系统中的表达

从ｐＵＣ１８－３４重组质粒双酶切分离得到编码人ＣＤ＿（３４）抗原的全长ｃＤＮＡ片段，将此基因插入痘苗病毒载体ＳｍａＩ位点，构建了重组质粒ＮＳＡ１１７５－３４。采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ方法，将质粒ｐＪＳＡ１１７５－３４导入已被野生痘苗病毒感染的ＴＫ￣－１４３细胞，用ＢｕｄＲ和ＬａｃＺ双筛选，获得带有人ＣＤ＿（３４）抗原基因的重组痘苗病毒。经活细胞免疫荧光（ＩＦＡ）和碱性磷酸酶－抗碱性磷酸酶（ＡＰＡＡＰ）检测表明，重组痘苗病毒能够特异地表达人ＣＤ＿（３４）抗原。人ＣＤ＿（３４）抗原基因的表达，为探讨ＣＤ＿（３４）抗原结构和功能以及研制ＣＤ＿（３４）单克隆抗体奠定了基础。