用于神经干细胞移植的大鼠脑梗死模型的建立

目的建立一种稳定的大鼠脑局灶性梗死模型,用于脑梗死后神经干细胞移植的长期观察。方法将48只清洁级Sprague-Daw ley大鼠,随机分为4组,每组12只大鼠。分别进行假手术(第1组)、单纯结扎左侧大脑中动脉(MCA)(第2组)、同时结扎左侧MCA和颈总动脉(第3组)、同时结扎左侧MCA和颈总动脉伴暂时性夹闭对侧颈总动脉(第4组)的方法制备大鼠脑梗死模型;结扎MCA采取经颞骨局部钻孔开颅,直接结扎MCA终段。通过对各组大鼠术后的神经功能评分、墨汁灌注、氯化三苯四唑氮(TTC)染色、MR成像结果对各组模型进行评价。结果4组大鼠神经功能评分经方差分析,P<0.01,其中第4组与前3组两两比较,差异均有显著性。第1、2组模型墨汁灌注、TTC染色及4周后MR I检查,均未见明显缺血性梗死灶;第3组结果显示梗死灶不稳定、体积较小[(18±10)mm3];第4组模型墨汁灌注、TTC染色观察梗死灶范围局限于大脑皮质,4周后进行MR I测量,大鼠梗死灶明显,体积相对稳定[(85±7)mm3]。第3、4组大鼠梗死体积差异有显著性(P<0.01)。结论通过结扎大鼠同侧MCA和颈总动脉伴暂时性夹闭对侧颈总动脉制作的大鼠脑梗死模型,对大鼠创伤小,梗死灶的位置和体积恒定,可以为脑梗死后神经干细胞移植的研究,提供一种理想的大鼠模型。     

弹簧圈置入法建立恒河猴可逆性大脑中动脉阻塞模型的初步研究

目的采用血管内弹簧圈置入法初步建立恒河猴可逆性大脑中动脉阻塞模型。方法选择4只成年健康恒河猴为实验动物,采用血管内介入技术,将1枚弹簧圈(2 mm×10 cm)置入大脑中动脉(MCA)起始部(不解脱弹簧圈),完全阻断MCA血流2 h,回收弹簧圈,恢复MCA血流灌注,初步建立恒河猴可逆性大脑中动脉阻塞模型。通过DSA、磁共振血管造影(MRA)、MRI及神经功能缺损情况评价动物模型是否成功。结果成功将弹簧圈置入4只恒河猴MCA起始部。弹簧圈释放后,MCA血流被完全阻断,远端血管不显影。阻断2 h,回收弹簧圈后MCA血流恢复。阻塞后2 h MRI检查显示,4只动物T1和T2加权相均未显示有梗死病灶,皮质和基底核区在弥散加权相(DWI)上出现异常高信号,MCA阻塞侧大脑半球肿胀。MRA检查显示MCA完全闭塞。动物苏醒后出现肢体偏瘫、口角歪斜等神经功能缺损症状。结论利用血管内弹簧圈栓塞技术制作恒河猴可逆性MCA阻塞模型具有可行性。     

恶性大脑中动脉梗死相关因素分析

恶性大脑中动脉梗死(m-MCAI)是指由于大脑中动脉(MCA)起始部或颈内动脉远端闭塞,且短期内未能通过脑底动脉环或软脑膜动脉网等建立有效侧支循环而引起的MCA供血区完全性梗死,病死率达80%,幸存者也常遗留严重神经功能缺损〔1〕。m-MCAI目前仍是缺血性脑卒中治疗中的难点,故研     

线拴法建立小鼠局灶性脑缺血再灌注模型的经验总结

目的建立小鼠局灶性脑缺血再灌注模型,并总结经验教训。方法从颈外动脉插入栓塞线至颈内动脉,选择性栓塞大脑中动脉,造成大脑中动脉闭塞的动物模型。通过控制再灌注时间,观察其对小鼠神经行为学、脑缺血程度及存活期的影响。结果除假手术组未制成脑缺血模型外,其他3组均于手术后24h出现神经行为学异常,脑切片TTC染色可见缺血病灶。结论小鼠局灶性脑缺血再灌注模型制造成功,小鼠术后的成活率、梗死体积、神经行为学表现与手术方法密切相关。     

颈内动脉和大脑中动脉重度狭窄和闭塞患者脑梗死模式与发病机制——回顾性队列研究

目的 探讨颈内动脉（internal carotid artery,ICA）和大脑中动脉(middle cerebral artery,MCA)重度狭窄（狭窄程度70％ ～ 99％）或闭塞患者脑梗死模式和机制,为个体化防治提供依据。方法回顾性分析76例急性脑梗死患者的弥散加权成像（diffusion-weighted imaging,DWI）显示的相应MCA供血区责任病灶,根据血管检查将患者分为ICA病变组、MCA病变组以及数字减影血管造影或CT血管造影检查结果阴性组（negative results,NR）。将梗死灶分为单发和多发,前者按部位分为穿支动脉梗死（perforating artery infarct,PAI）、皮质支梗死（pial infarct,PI）和分水岭区梗死（border-zone infarct,BZ）。结果 MCA供血区梗死灶形态分为9种;不同病变导致的梗死灶形态存在差异(x2=34.000,P=0.001)。多发性梗死病灶分布模式占所有患者的73.68％( 56/76)。ICA组PAI+ PI梗死模式显著多于NR组（17/42对1/16,x2 =6.837,P=0.009）。动脉狭窄程度与梗死灶形态亦存在一定的关联,重度ICA病变更多呈现为PAI伴PI（7/17对1／16,x2=5.475,P=0.019）,而重度MCA病变则多呈PAI伴BZ(3/8对1/17,x2 =4.046,P=0.040）。结论 ICA或MCA重度狭窄或闭塞的脑梗死患者大多呈现为多发梗死模式,提示卒中发病的不同机制,可能与动脉-动脉栓塞或低灌注有关。     

皮层下分水岭梗死的临床及影像学特征

分水岭梗死指两条主要动脉供血区边缘带之间的局限性梗死，分为两类：一是位于大脑中动脉与大脑前动脉或大脑后动脉的皮层支之间的梗死灶，称作称皮层分水岭梗死。二是大脑中动脉的深穿支及表浅穿支之间或大脑中动脉及大脑前动脉的表浅分支之间边缘带的梗死灶，称作皮层下分水岭梗死（IWI）。本研究应用弥散磁共振成像（DWI）来确定颈动脉系统的急性IWI病灶，并探讨其与相关血管病变及预后的关系。     

头低位预置诱导大鼠脑缺血耐受的研究

目的建立可重复性局灶大鼠脑缺血模型,研究头低位预置对大脑中动脉闭塞的影响。方法采用线栓法建立局灶性脑缺血模型。术后24h检测神经功能缺失评分;TTC染色测量梗死范围;HE染色对梗死周边区损伤神经元的半定量分析。结果术后24h,头低位(H)组、药物(D)组与对照(N)组相比,神经功能明显改善,梗死周边区脑组织的缺血性损伤明显减轻,脑梗死体积明显缩小,而H组和D组间差异无统计意义。结论头低位预置对随后的脑缺血产生了保护作用。     

硬脑膜外低温对家猪局部脑缺血后神经保护作用的组织学观察

目的 观察硬脑膜外脑低温对家猪MCA闭塞后缺血区的神经保护作用.方法 取成年健康雄性家猪12只,用随机数字法随机分为低温组和常温组,每组6只.均施行左侧MCA永久性闭塞.低温组于脑缺血1 h后,用4℃等渗盐水于头颅左侧顶部行硬脑膜外低温灌注,维持脑局部低温5 h,脑表面和深部组织分别维持深或中低温;常温组维持体温在正常范围(37～39 ℃)6 h.观察两组温度、脑梗死体积及病理组织学变化.结果 硬脑膜外低温法可在数分钟内达到脑组织表面的深低温或超深低温[平均(18.4±1.7)℃]及脑深部组织的中低温或深低温[平均(27.8±0.5)℃].低温组及常温组梗死体积占左侧脑体积的百分率分别为5.6%和13.7%,差异有统计学意义(P＜0.05).组织学观察与常温组比较,低温组缺血区梗死灶明显减小,神经细胞形态基本正常;常温组可见大片颜色变浅的梗死灶,梗死区脑组织结构紊乱,神经细胞数目减少,形态不规则,细胞核固缩、浓染.结论 硬脑膜外低温对猪MCA闭塞后脑缺血区有明显的神经保护作用,可明显减轻神经细胞损害,维持细胞正常形态.     

老年慢性大脑中动脉M1段闭塞患者的侧支循环及血流代偿研究

目的 探讨老年慢性大脑中动脉(MCA)M1段闭塞患者的侧支循环及血流代偿。方法 选择2019年12月～2021年12月在火箭军特色医学中心神经内科和全科医学科门诊及住院的老年慢性MCA M1段闭塞患者55例,收集血管影像学和经颅多普勒超声(TCD)检查结果,分析MCA M1段闭塞合并同侧脑动脉病变情况、侧支循环及血流代偿。结果 MCA M1段闭塞侧大脑前动脉(ACA)A1段/大脑后动脉(PCA)P1段发育良好、无重度狭窄,颈内动脉无重度狭窄/闭塞37例(67.3%);MCA M1段闭塞侧并发ACA A1段发育不良/重度狭窄或颈内动脉重度狭窄/闭塞5例(9.1%);MCA M1段闭塞侧并发PCA P1段发育不良/重度狭窄13例(23.6%)。血管影像学和TCD显示：ACA→MCA软脑膜侧支开放50例(90.9%),PCA→MCA软脑膜侧支开放42例(76.4%),脑膜中动脉→MCA侧支开放5例(9.1%),枕动脉→PCA→MCA侧支开放13例(23.6%),穿支动脉及新生血管血流代偿55例(100.0%)。结论 老年慢性MCA M1段闭塞时因合并同侧脑动脉病变情况不同,主要启动了大脑皮质...     

成人烟雾病16例临床和影像学特点研究

目的探讨成人烟雾病(MMD)的临床和影像学特征。方法回顾性总结2006年1—12月在山东大学齐鲁医院经脑血管造影证实的16例成人MMD患者的临床及影像学特征。结果 16例患者平均年龄为(40.8±9.8)岁;15例(93.75%)以缺血性脑血管病为首发症状;1例(6.25%)以非典型血管病为首发症状;无脑出血患者。颅内有梗死灶或出血性梗死灶者12例(85.7%);双侧颈内动脉(ICA)末端、大脑中动脉(MCA)和(或)大脑前动脉(ACA)起始部狭窄或闭塞、伴有脑底部异常血管网及侧支循环形成的13例(92.9%);仅表现为脑动脉硬化者1例(7.1%)。双侧ICA末端及ACA、MCA起始部不同程度狭窄或闭塞者10例(62.5%);单侧血管病变者6例(37.5%);可见不同程度的侧支循环形成者15例(93.8%);烟雾状血管形成者13例(81.2%)。结论成人MMD患者的临床表现以缺血性症状为主,发病年龄高峰在40岁左右。影像学特征为双侧ICA狭窄或闭塞,伴有MCA或ACA的狭窄或闭塞,颅底有不同程度异常增生的血管网。对于青壮年反复出现脑梗死者,应考虑MMD的可能并及早行MRA或DSA检查。     

大鼠局灶性脑缺血Activin A及其受体ActRⅡA表达变化及意义

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血激活素A(Act A)及其受体ⅡA(ActRⅡ)的表达变化规律及意义.方法 线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,采用光镜、免疫组化方法检测大鼠局灶性脑缺血后梗死体积、病理变化,免疫组化染色观察Act A、ActRⅡA免疫阳性表达. 结果正常组织有极低水平的Act A、ActRⅡA表达,免疫组化显示缺血3 h后在周边区Act A、ActRⅡA阳性细胞数量显著高于假手术组(P<0.05),并随缺血时间延长而逐渐增高,于24 h达高峰.结论 局灶脑缺血损伤可诱导内源性神经元Act A高表达,并可能通过特异性跨膜信号受体ActRⅡA发挥靶源性作用.     

VEGF用于急性脑梗死神经元保护及再生的实验研究

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）在急性脑梗死中神经元保护及再生作用。方法48只SD大鼠，随机分为4组，利用MCAO模型。A组（12只），缺血1h后再灌注24h＋生理盐水，对照组；B组（12只），缺血1h后再灌注1h＋VEGF；C组（12只），缺血1h后再灌注12h＋VEGF；D组（12只），缺血1h后再灌注24h＋VEGF。模型成功后侧脑室注射rrVEGF164，VEGF注射后连续3d分别腹膜下注射BrdU6mg/100g。术后第7天，取脑切脑片。分别TTC染色，HE染色。免疫组化观察。结果VEGF，Tunnel染色凋亡细胞阳性数，BrdU阳性细胞数，在缺血再灌注12h，24h组与对照组相比，阳性细胞数有统计学差异。结论VEGF在急性脑梗死后有抗细胞凋亡及神经元保护作用，并有促进缺血后神经元再生作用。     

复方丹参片对急性脑缺血大鼠药理作用的探讨

目的 观察复方丹参片对急性脑缺血大鼠的治疗效果,探讨其对急性脑缺血大鼠的保护作用和机制.方法 采用Longa改良栓线法制备大鼠大脑中动脉缺血模型.实验大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、血塞通胶囊组、复方丹参片组5组,术后后正常组、假手术组、模型组予蒸馏水灌胃.血塞通胶囊组予血塞通胶囊灌胃,复方丹参片组予复方丹参片灌胃.分别在24 h,3d,7d等时间点对以上5组进行神经功能缺损评分.断头取脑,TTC染色观察脑梗死面积,免疫组织化学方法及积分光密度值观察梗死周围区脑组织血管新生因子蛋白的表达.结果 复方丹参片可明显改善急性脑缺血大鼠的行为学评分,减少梗死面积百分率,显著增加大鼠脑内血管新生因子蛋白的表达,促进急性脑缺血大鼠脑缺血组织侧支循环的建立.结论 复方丹参片增强急性脑缺血大鼠梗死灶周围血管生长因子的表达,促进了梗死灶周围的血管新生.     

大鼠早期脑缺血的表观弥散系数变化的实验研究

目的利用MRI技术研究大鼠脑缺血模型的超急性期(6 h内)及急性期影像动态演变规律。方法 10只Wistar雄性大鼠,采用线栓法制作右侧大脑中动脉栓塞(MCAO)缺血模型,分别于MCAO后0.5、2、6、12和24 h行大鼠脑部冠状位磁共振T_1WI、T_2WI及弥散加权成像(DWI)扫描,分别测量T_2WI及表观弥散系数(ADC)图像上缺血区异常信号体积、ADC值和相对ADC值(rADC),并进行分析。结果随缺血时间延长,DWI及T_2WI异常高信号体积持续增大。0.5、2、6、12和24 h各时间点ADC图像显示的脑缺血体积明显大于T_2WI(P<0.01)。缺血中心区和边缘区的ADC值均较对侧脑组织明显减低(P<0.01)。随缺血时间延长,缺血中心区、边缘区和外周区的rADC值均呈不同程度减低。缺血中心区MCAO后2、6、12和24 h的rADC值明显低于0.5 h(P<0.01);缺血边缘区MCAO后2、6、12和24 h的rADC值明显低于0.5 h(P<0.01),6 h的rADC值明显低于2 h(P<0.05),12和24 h的rADC值明显低于2 h(P<0.01),24 h的rADC值明显低于6 h(P<0.05)。结论大鼠超急性期脑缺血病变进展迅速,急性期脑缺血进展减慢,DWI检查有助于早期诊断缺血半暗带。     

Pretreatment with melatonin reduces volume of cerebral infarction in a rat middle cerebral artery occlusion stroke model

Melatonin is a potent scavenger of free radicals and an indirect antioxidant. Recent studies have shown that melatonin possesses beneficial effects in experimental models of brain trauma and global cerebral ischemia. The effects of pretreatment with melatonin on volume of cerebral infarction were investigated in the present study. Adult male Sprague-Dawley rats were anesthetized with sodium pentobarbital to undergo right-sided endovascular middle cerebral artery occlusion (MCAO) for 3 hr. A single dose of melatonin (1.5, 5, 15, or 50 mg/kg in 1 mL normal saline) or its vehicle was given via an intraperitoneal injection at 0.5 hr before MCAO. Relative infarction volumes on day 3 after MCAO were significantly reduced in the groups treated with melatonin at 5 (mean +/- S.E.M., 15.7 +/- 2.5%) or 15 (21.4 +/- 3.1 %) mg/kg but not at 1.5 (30.6 +/- 3.5%) or 50 (26.7 +/- 2.8%) mg/ kg when compared with the vehicle group (33.9 +/- 3.5%). There was no significant difference in the arterial blood pressure (BP), heart rate (HR) and relative cerebral blood flow among the experimental groups. These results indicate that pretreatment with melatonin at a dose between 5 and 15 mg/kg protects against focal cerebral ischemia.     

浅谈小鼠MCAO模型制作的心得体会

采用线栓法阻断大脑中动脉制作的短暂性大脑中动脉阻塞（MCAO）模型是目前国内外研究局灶性脑缺血最常用的动物模型，其特点为可重复、方便操作，而且成功的模型具有与人类脑血管病相似的临床症状，故得到众多科研人员与临床工作者的亲睐，从而得到广泛利用。但其模型制作并不容易，对操作者的技术要求较高，且术后动物不易存活，死亡率高。本课题组拟从多个角度出发，结合多年来模型制作经验，对MCAO模型制作过程中多个细节进行探讨，以为广大科研人员提供参考。     

Melatonin reduces nitric oxide level during ischemia but not blood-brain barrier breakdown during reperfusion in a rat middle cerebral artery occlusion stroke model

Melatonin is a potent antioxidant and free radical scavenger. Previously, we showed that a single injection of melatonin before ischemia significantly reduced the infarct volume in both permanent and 3-hr middle cerebral artery occlusion (MCAO) rat stroke models. Nitric oxide (NO) and other free radicals play an important role in the pathogenesis of cerebral ischemia, and they have been postulated to mediate the breakdown of the blood-brain barrier (BBB) during ischemia. In this study, we evaluated the influence of melatonin, given at 30 min before MCAO, on brain NO concentration and BBB breakdown. Brain NO concentration was measured at 15 min of MCAO using electron paramagnetic resonance spectroscopy. BBB breakdown at 3 hr of reperfusion following 3 hr of MCAO was assessed using Evans blue extravasation. The relative brain NO concentration was increased to 141.69 +/- 9.71% (mean +/- S.E.M.; n = 9) at 15 min of MCAO. Treatment with melatonin at 1.5, 5, or 50 mg/kg significantly reduced the brain NO concentration to 104.20 +/- 11.20% (n = 8), 55.67 +/- 5.58% (n = 11), and 104.86 +/- 12.56% (n = 9), respectively. Melatonin at 5 mg/kg did not affect Evans blue extravasation. Our results suggest that a single injection of melatonin protects against focal cerebral ischemia partly via inhibition of ischemia-induced NO production and that this regimen does not prevent BBB breakdown following ischemia-reperfusion.     

脑室注射痛敏素/孤啡肽FQ对局灶性脑缺血大鼠梗死体积和体感诱发电位的影响

目的:观察痛敏素/孤啡肽(N/OFQ)对脑缺血大鼠梗死体积和体感诱发电位(SEP)的影响.方法:41只SD大鼠随机分为大脑中动脉闭塞(MCAO)假手术组(n=5)、缺血组(n=8)、N/OFQ 10μg 组(n=7)、N/OFQ 1 μg组(n=7)、N/OFQ0.1μg组(n=7)和人工脑脊液(ACSF)组(n=7).采用腔内线栓法制作大鼠MCAO模型,MCAO后2 h再灌注.N/OFQ 10μg组、N/OFQ μg组、N/OFQ0.1μg组和ACSF组分别在MCAO后1 h脑室内注射N/OFQ 10μg、N/OFQ 1μg、N/OFQ0.1 μg和体积相同ACSF.检测再灌注24 h后脑梗死体积体,并记录SEP.结果:假手术组SEP PI波幅降低,P1峰潜时间无显著变化.N/OFQ 0.1 μg组SEP波幅、P1峰潜时间和脑梗死体积与ACSF组无显著差异.N/OFQ μg组和N/OFQ10 μg组SEP波幅较ACSF组进一步降低,但P1峰潜时间无显著变化.ACSF组SEP波幅在再灌注后1 h基本恢复至缺血前水平,N/OFQ 1 μg组恢复减慢,N/OFQ10 μg组直到再灌注后3 h仍未恢复.N/OFQ剂量与SEP反应呈量效关系,剂量越大,SEP抑制越显著,恢复越慢.再灌注24 h时,假手术组、ACSF组、N/OFQ0.1 μg组、N/OFQ1 μg组和N/OFQ 10 μg组脑梗死体积分别为0 mm3、(24.180±4.088)mm3、(23.090±4.523)mm3、(35.304±6.824)mm3和(40.806±6.716)mm0.N/OFQ 0.1μg组与ACSF组无显著差异,N/OFQ μg组和N/OFQ 10 μg组与ACSF组均有显著差异(P均＜0.01).结论:脑缺血早期侧脑室注射N/OFQ町使SEP波幅降低、恢复时间延长,梗死体积增大,表明其可加重缺血性脑损伤.     

Focal cerebral infarction in cats in the presence of hyperglycemia and increased insulin

Although it has been well established that hyperglycemia increases cerebral damage following transient cerebral ischemia, its effect on permanent focal ischemia is controversial. We hypothesized that other factors associated with hyperglycemia, such as plasma insulin, may alter the brain's response to hyperglycemia. The objective of this study was to determine if hyperglycemia changes infarction size following 8 hr of middle cerebral artery occlusion in the anesthetized cat and to examine if changes in plasma insulin levels alter hyperglycemia's effects. Infarct size in hyperglycemic cats with increased plasma insulin (38.3±8.4%, mean±SE) or in hyperglycemic cats without increased plasma insulin (30.5±7.6%) was not significantly different from that of ischemic controls (33.8±2.8%). However, the variability in infarct size tended to be greater (P=0.0647) among all hyperglycemic cats compared to control animals. The source of the variability is unknown, but this observation combined with the findings of others suggests the possibility that the effect of hyperglycemia is dependent on the exact nature of the focal ischemic insult (i.e., degree of collateral blood supply) and that this effect may vary greatly from individual to individual within a population.     

大鼠脑梗死后神经前体细胞移行及电针作用的研究

目的研究成年大鼠脑梗死后电针作用对内源性神经前体细胞移行的影响。方法采用易卒中型肾性高血压大鼠(RHRSP),电凝法凝闭大脑中动脉(MCAO)。用Garcia评分、HE染色、免疫荧光等方法观察电针对脑梗死后1周、2周、3周、4周大鼠脑内梗死灶体积,行为学评分及5-溴脱氧尿核苷(Bromodeoxyuridine,Brdu)、Doublecortin(DCX)阳性细胞数的干预作用,并与脑梗死组和对照组比较。结果电针治疗后前3周梗死体积较脑梗死组缩小(P<0.05);电针后2d与3d大鼠行为学评分较梗死组高(P<0.05);MCAO后梗死灶边缘有Brdu阳性细胞和DCX阳性细胞分布。电针组Brdu阳性细胞较脑梗死组明显增加(P<0.05),电针组DCX阳性细胞数在1周末明显高于脑梗死组(P<0.05)。结论电针促进神经功能恢复,减小脑梗死体积,并使缺血灶周移行的神经前体细胞增多,可能与其改变脑内微环境密切相关。